DAS-ELISA和PAS-ELISA检测GFLV的技术研究

以中国农科院郑州果树研究所国家葡萄资源圃的葡萄品种为试材 ,对葡萄扇叶病毒(GFLV)进行了酶联免疫吸附测定 (ELISA)的检测技术研究。从操作步骤、灵敏度、检测时期以及检测部位等对双抗体夹心酶联免疫吸附测定法 (DAS -ELISA)和A蛋白夹心酶联免疫吸附测定法 (PAS -ELISA) 2种不同的检测方法进行了比较试验。发现 ,虽然DAS -ELISA在操作上较PAS -ELISA更为简便 ,但就结果而言 ,PAS -ELISA比DAS -ELISA的OD值高 ,更易进行结果的判断 ;且在病毒含量相对较低的情况下 ,PAS -ELISA显示出了较高的灵敏度。     

葡萄微茎尖培养及葡萄扇叶病毒的ELISA和探针检测

在建立‘藤稔’等５个葡萄品种离体培养快速繁殖体系的基础上，通过热处理和微茎尖脱毒培养获得了再生植株；并经过ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ和长臂光敏生物素标记ＧＦＬＶ－ＣＰ基因ｃＤＮＡ探针检测．结果表明白天３８℃夜晚３５℃处理脱除ＧＦＬＶ效果最佳；多次继代培养也有脱除ＧＦＬＶ的作用．从而首次获得了‘藤稔’、‘红地球’、‘９３０７’３个葡萄品种的脱除ＧＦＬＶ的试管苗．ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ与探针平行检测的结果还表明，ＰＡＳ－ＥＬＩＳＡ检测以Ｐ／Ｎ＜１作为阴性标准更为可靠     

贺兰山东麓葡萄品种卷叶病毒（GLRaV-3）携带状况研究

应用血清学的酶联免疫法(ELISA),对采自宁夏贺兰山东麓7个葡萄主产区内的8个主栽品种,共计50份样本进行了葡萄卷叶病毒病的检测和分析.在被检测的8个主栽品种中,3个品种的10份样本带有卷叶病毒(GLRaV-3),品种带毒率占所测品种的37.5%.     

宁夏玉泉营地区葡萄卷叶病田间自然发病调查及检测

对宁夏玉泉营地区葡萄圃内的50多个品种和砧木的卷叶病自然发病情况进行调查研究。结果表明：在美洲种群、东亚种群中没有发现卷叶病症状；欧亚种群的品种卷叶病症状比例最高，且程度严重；具有欧血统的欧美杂种、欧山山葡萄杂种均有表现卷叶病的品种，但发病率、严重度低于欧亚种。欧亚种中，以鲜食品种为主的东方品种比以酿酒品种为主的西欧和黑海品种卷叶病发病率低。检测结果表明不同酿酒品种带毒率有差异。     

ELISA法在植物检测中的应用研究及改进措施

酶联免疫吸附法(ELISA)目前是酶联免疫技术中应用最广的方法。详细分析了ELISA的基本原理,并对其基本类型及在植物病毒检测中的应用现状进行了研究。最后在理论分析的基础上结合工作经验,从提高ELISA的灵敏度、保持ELISA检测的稳定性、特异性、检测的标准曲线方法等方面提出改进策略,并对其发展前景进行展望。     

甘薯脱毒苗病毒嫁接检测技术研究

对脱毒茎尖苗嫁接检测方法进行了研究。结果表明 :以巴西牵牛作为砧木指示植物 ,其播种嫁接时间可在春秋两季进行 ,在砧木的 1～ 6片真叶期均可采用插接法和靠接法进行嫁接检测。     

ELISA技术检测马铃薯病毒的研究

应用ＤＡＳ ＥＬＩＳＡ方法对甘肃省种植的６个马铃薯品种老龄薯和幼龄薯及２个品种的茎尖组培苗进行了针对ＰＶＸ、ＰＶＹ及ＰＬＲＶ的病毒检测。结果表明,老龄薯块携带以上３种病毒,并以ＰＬＲＶ为主体的复合侵染为主,幼龄薯块仅带其中一种病毒,且带毒量少;茎尖剥离组培法可使陇薯３号和１６７ ４５脱毒率达２０％。以幼龄薯为脱毒基础材料可望进一步提高脱毒率。文中还对ＤＡＳ ＥＬＩＳＡ技术在马铃薯病毒检测中的优势进行了评价。     

宁夏玉泉营地区葡萄卷叶病田间自然发病调查及检测

对宁夏玉泉营地区葡萄圃内的50多个品种和砧木的卷叶病自然发病情况进行调查研究,结果表明在美洲种群、东亚种群中没有发现卷叶病症状;欧亚种群的品种卷叶病症状比例最高,且程度严重;具有欧亚血统的欧美杂种、欧山山葡萄杂种均有表现卷叶病的品种,但发病率、严重度低于欧亚种.欧亚种中,以鲜食品种为主的东方品种比以酿酒品种为主的西欧和黑海品种卷叶病发病率低.检测结果表明不同酿酒品种带毒率有差异.     

利用RT-PCR技术检测吊瓜病毒种类的研究

小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)、西瓜花叶病毒(Watermelon mosaicvirus,WMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、南瓜花叶病毒(Squash mosaic virus,SqMV)和番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是危害葫芦科作物最严重、最广泛的5种病毒。根据已知的5种病毒序列设计特异性引物,对感染病毒的吊瓜总RNA进行RT-PCR扩增。结果表明长兴吊瓜的病毒种类主要为PRSV,感染率为100%,无复合病毒感染。吊瓜植株不同取样部位(茎尖、卷须、嫩叶、茎、花、子房、老叶等)的RT-PCR表明老叶是较好的病毒检测取样部位,而嫩叶是吊瓜脱毒最佳的外植体取样部位。对茎尖的PRSV表达量高过幼叶的原因也进行了分析,认为可能是病毒的表达量与植株的代谢强度有关。     

葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ基因的克隆及序列分析

根据葡萄卷叶伴随病毒 美国分离物的 GLRa V- 3CP基因序列 ,设计并合成了 1对该病毒的 PCR引物 ,利用 IC- RT- PCR成功地检查到合适大小的 PCR产物 ;同时将PCR产物克隆到中间载体 PGEM- 3Zf上 ,转化大肠杆菌 DH5α菌株 ,筛选阳性克隆。通过双酶切以及序列分析表明 ,扩增样品与美国分离物的同源性为 94.1 %。     

大蒜素含量的测定方法研究

大蒜的食疗价值主要是大蒜素在起作用,如何对各种蒜制品中大蒜素的含量进行测定,需要一个具体、切实可行的方法.试验利用在一定温度及有大蒜素酶的作用下,大蒜素能够水解生成丙酮酸,然后通过测定丙酮酸含量的方法测定大蒜素的含量的原理,提出了一种测定大蒜素的方法.     

感染病毒的葡萄,辣椒,烟草叶片过氧化物酶的初步研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳,对分别感染ＧＦＶ、ＰＹＶ和ＣＭＶ病毒的葡萄、辣椒和烟草叶片组织内过氧化物酶的变化进行了研究。结果表明,感染病毒的叶片组织内过氧化物酶的活性较健株增强,但酶带数减少;病级间过氧经物同工酶的变化与植株外部表现的症状相反,病情越重,酶的活性和带数均越减少。     

机动车驾驶员驾驶疲劳测评方法的研究状况及发展趋势

据文献介绍,全世界每年因交通事故而导致的死亡人数达60万,直接经济损失约125亿美元,这些事故多与驾驶员疲劳驾驶有关。介绍了国内外对于机动车驾驶员驾驶疲劳程度的测评方法,对具代表性的几种方法进行了评述,认为美国公路安全管理局推荐的实时测量驾驶疲劳程度优先选择的PERCLOS法是目前较为有效的测评方法,提出我国有关驾驶疲劳程度测评方法的研究应着重于驾驶疲劳的机理和数学模型、检测和评价标准等方面,并应开展实时、非接触式预警装置的研制,实现其商品化。     

禽蛋检测与分级智能机器人系统的软件实现

禽蛋检测与分级智能机器人系统SIRDGE(systern of intelligent robot detecting and grading eggs)包括场景图像的采集和摄像机的标定,图像处理和特征值的提取,机器人运动控制和轨迹规划,真空吸盘的单片机控制,敲击声音的处理与破损检测,彩色图像处理与内部品质检测等子系统.笔者对各子系统软件的算法进行了研究,采用VC 编程实现了其软件功能,对SIRDGE进行调试结果表明,SIRDGE性能稳定,运行正常.     

环剥和赤霉素对藤稔葡萄果实生长发育和品质的影响

观测了环剥和 2 5mg/LGA3 对藤稔葡萄果实生长发育动态及果实品质的影响。试验结果表明 :环剥和GA3 促进了果实的生长发育 ,果肉细胞体积、果实鲜重、干重、纵径、横径均显著增加。环剥有增加果实糖酸比的作用 ,而GA3 处理降低果实糖酸比 ,且维生素C含量降低 ;另外经环剥和GA3 处理的果实中与成熟有关的赖氨酸、精氨酸、脯氨酸含量明显上升 ,表明这 2种措施都有提早果实成熟的作用     

亚硫酸氢钠在葡萄上的应用研究

不同浓度的NaHSO3在葡萄上的应用研究表明,以100ml/L效果最佳。于浆果膨大期处理3次,能获得增产、优质和早熟的效果,这与NaHSO3能增加叶绿素含量、提高光合效率和增加果穗重密切相关。     

外源GA3混合配方对巨峰葡萄果实生长前期内源激素的影响

[目的]为了研究外源GA3对巨峰葡萄果实生长前期内源激素的影响。[方法]采用不同浓度的外源GA3混合配方对巨峰葡萄二造果进行处理,了解花后10～30 d葡萄内源激素含量与果实无核率的关系。[结果]外源GA3混合配方处理可以促使巨峰葡萄产生无核果实,并且促进果实膨大,在果实生长前期果实内GA3、IAA、CTK、ABA含量均有不同程度的提高。其中,GA3与IAA含量大致呈现先升后降的变化趋势。CTK含量变化类似,但与CK差异不大。ABA含量与其他激素的变化趋势大致相反。[结论]巨峰葡萄无核化的较好处理为GA312.5 mg/L+SM 200 mg/L+CPPU 10 mg/L。     

采后GA_3和2,4-D处理对葡萄贮藏效果的影响

采后用GA3 和 2 ,4-D处理可显著提高葡萄的保鲜效果。用 3 / GA3 和 5 0 / 的 2 ,4-D处理黑奥林葡萄 ,在 0 - 1℃条件下贮藏 3个月 ,果实耐压力分别提高 1 6 1g和 396g ;果梗耐拉力分别提高 1 1 9g和 1 4 7g ;鲜梗率分别提高 41和 39个百分点 ;好果率分别提高 1 1和 1 3个百分点 ;果糖总酸比值分别提高 1 2和 1 0。     

基于卡尔曼滤波器的运动目标检测与跟踪

针对摄像机静止的情况,提出了一种可运用于实时监控中的运动目标检测与跟踪的方法．采用更新函数实现背景实时更新,通过差分算法检测运动目标．在跟踪模块中,提出建立帧间目标“关系矩阵”实现多个运动目标匹配,并采用卡尔曼滤波器预测目标参数,在运动目标相互遮挡的情况下,根据预测参数跟踪目标,获得目标轨迹．通过多个图像序列测试,算法具有良好的实时性和适应环境变化的能力．