红富士苹果果面酵母菌的分布及多样性分析

以红富士苹果为试验材料,在烟台、威海、临沂、泰安等山东苹果主产区采集成熟健康的红富士苹果,采用稀释分离法从苹果样品果面分离纯化得到酵母菌株;依据核糖体26S D1/D2区核苷酸序列的比较结果,并结合形态学特征,得出酵母菌的分类地位,并对红富士果实表面酵母菌的多样性进行系统进化分析。结果表明,红富士果实表面蕴含丰富的酵母菌资源,分离得到163株酵母菌菌株,经鉴定属于13属20种;在分离得到的菌株中,子囊菌占优势,共分离到95株子囊菌酵母,属于6属10种,占酵母总数的58.3%;共分离得到53株担子菌酵母,属于6属9种,占酵母总数的32.5%;其余15株酵母为普鲁兰短梗霉(Aureobasidium pullulans)等,占酵母总数的9.2%。由研究结果得出,红富士果实表面酵母菌的优势属为毕赤酵母属(Pichia)(3种)、假丝酵母属(Candida)(3种)、隐球酵母属(Cryptococcus)(3种),占总酵母种数的45%。     

稻茬烤烟主栽品种上部烟叶的烘烤特性研究

为了明确稻茬烤烟主栽品种上部烟叶烘烤特性,给稻茬烤烟制定烘烤工艺提供参考,采用暗箱方法和密集烤房“中温中湿”烘烤工艺,探索了湖南稻作烟区主栽品种K326、云烟87和湘烟7号上部烟叶变黄变褐特性、失水特性、叶绿素降解特性、多酚氧化酶活性及淀粉和还原糖含量的变化。结果表明：（1）暗箱试验中湘烟7号、云烟87和K326上部烟叶变黄时间均为40 h;湘烟7号与云烟87褐变时间均为60 h,K326为72 h;3个品种变黄速率差异不显著,K326变褐指数较小。（2）叶绿素降解率为K326＞湘烟7号＞云烟87,降解均匀度为K326＞湘烟7号＞云烟87。（3）上部烟叶失水速率为云烟87＞K326＞湘烟7号。（4）在烘烤变黄期（0 ~ 48 h）,叶绿素降解量为K326＞湘烟7号＞云烟87;烘烤末期,湘烟7号的类胡萝卜素降解量最大,K326与云烟87接近。（5）PPO活性的变化规律一致,湘烟7号上部烟叶第1个峰值与云烟87一致,较K326晚12 h;湘烟7号第2个峰值出现时间与K326一致,较云烟87晚12 h;K326、湘烟7号和云烟87的多酚氧化酶活性平均值分别为0.125、0.127和0.123 U。（6）淀粉降解率为湘烟7号＞K326＞云烟87;K326、湘烟7号和云烟87的还原糖含量变化类似。综上所述,湖南稻茬烤烟主栽品种上部烟叶烘烤特性存在差异,在制定烘烤工艺时要区别对待。     

烤烟新品种HN2146烘烤特性研究

【目的】明确烤烟品种HN2146的烘烤特性。【方法】以云烟87为对照,采用暗箱和电烤箱试验方法,研究HN2146中部和上部烟叶变黄变褐特性、失水特性、叶绿素降解特性及多酚氧化酶活性。【结果】(1) HN2146上部和中部烟叶暗箱变黄时间分别需48和84 h,上部和中部烟叶暗箱变褐时间分别需72和120 h,较云烟87变黄难、变褐易;(2) HN2146上部和中部烟叶失水均衡性分别为0.43和1.24,失水均衡性都较好;HN2146的中部烟叶失水均衡性要好于云烟87,HN2146的上部烟叶失水均衡性较云烟87差;(3) 72 h时,HN2146上部和中部烟叶的叶绿素降解速率分别为13.68和13.03 g/(kg·h),降解比例分别为98.55%和93.85%,叶绿素降解特性均较好,但与云烟87的叶绿素降解速率差异不显著;(4) HN2146上部和中部烟叶烘烤过程中的多酚氧化酶活性平均值分别为0.224和0.236 U,较云烟87分别高15.63%和13.98%。【结论】HN2146品种的易烤性较好,耐烤性较好,属于烘烤特性较好的品种。     

烤烟井窖式移栽下不同密度和留叶数对质体色素及其降解产物含量的影响

为探讨烤烟井窖式移栽下烟株的适宜群体结构,提高烟叶品质,以烤烟品种云烟87为材料,采用田间试验,研究了井窖式移栽下不同密度和留叶数对烤烟质体色素及其降解产物含量的影响。结果表明:烤烟井窖式移栽下,密度、留叶数、密度×留叶数互作对质体色素及其降解产物含量均有显著影响。随密度降低,烤后烟叶叶绿素含量呈"V"形变化趋势,新植二烯、类胡萝卜素及其降解产物含量均呈先增加后降低的趋势;不同留叶数处理比较,叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总量均表现为B3(24片/株)B1(18片/株)B2(22片/株),且B2处理叶绿素、类胡萝卜素降解产物含量均最高。不同密度与留叶数互作处理烤后烟叶叶绿素降解产物新植二烯含量和类胡卜素降解产物总量均以A2B2[密度16 675株/hm~2(行株距100 cm×60 cm)+留叶数22片/株]最高,分别为1 095.15μg/g和69.561 7μg/g,占挥发性香气物质总量的89.29%和5.67%。综合分析,井窖式移栽下,密度16 675株/hm~2(行株距100 cm×60 cm)+留叶数22片/株的群体结构有利于提高烟叶品质。     

烤烟新品系09011的烘烤特性

为09011的示范推广及烟叶烘烤提供科学依据,以09011为试材,云烟87为对照,采用暗箱烘烤方法,研究烤烟新品系09011的变黄性、失水速率、色素降解速度及多酚氧化酶活性等的变化。结果表明：成熟期上部、中部和下部烟叶总水分和束缚水含量均为09011＞云烟87,自由水均为云烟87＞09011,束缚水/自由水均为09011＞云烟87;暗箱烘烤各部位烟叶的失水速率、变黄速率及程度,09011均慢于、略快和略强于云烟87;变黄期2个品种各部位叶片的叶绿素及类胡萝卜素含量均呈下降趋势,但叶绿素降解速度明显快于类胡萝卜素;云烟87和09011中部叶的多酚氧化酶活性分别在12 h和36 h时达最高,09011高峰出现时间较云烟87晚24 h,不利于烟叶定色。与云烟87相比,烤烟新品系09011的叶片含水量较高、失水较慢、不易定色,其易烤性差,生产应采取针对性的栽培管理措施。     

生态、品种、栽培因子对特色烟叶风格特征的影响

为探索特色烟叶形成机制,以云烟87、K326、中烟100为材料,研究了生态因子、品种和栽培因子等对特色烟叶风格特征的影响。结果表明:1)在施纯氮量87.5～127.5 kg/hm2时,同一品种同一密度施肥量高的烟株长势好;不同品种,同一栽培模式的烟株,云烟87整体长势强于K326和中烟100。2)K326的抗病性较强,其次是云烟87,中烟100抗病性较差。3)同一栽培模式下,均价、上中等烟比率,云烟87最高,中烟100最低;产量K326最高,中烟100最低;产值云烟87和K326接近,云烟87略低,中烟100最低;相同品种,模式二在产量、产值方面均高于模式一。     

驻马店推广烤烟品种(系)烟叶致香物质和风格特色的差异

为了明确驻马店烟区推广种植的5个不同烤烟品种(系)致香物质含量和风格特色的差异,对其烤后烟叶的致香物质含量和风格特色进行分析比较。结果表明:不同烤烟品种(系)间烟叶类胡萝卜素降解产物、美拉德反应产物、类西柏烷降解产物、芳香族氨基酸降解产物含量均有差异。云烟87、中烟100烟叶类胡萝卜素降解产物、美拉德反应产物、芳香族氨基酸降解产物含量较高,NC89、秦烟96和优选1号烟叶类西柏烷降解产物含量较高。中烟100、云烟87和优选1号的总致香物质含量和风格特色程度得分较高,其次为NC89,秦烟96风格特色程度得分最低。中烟100、云烟87和优选1号可选作驻马店烟区今后的主推烤烟品种(系),比目前主栽品种NC89更有利于彰显烟叶风格特色。     

烤烟新品系09011的烘烤特性

为09011的示范推广及烟叶烘烤提供科学依据,以09011为试材,云烟87为对照,采用暗箱烘烤方法,研究烤烟新品系09011的变黄性、失水速率、色素降解速度及多酚氧化酶活性等的变化。结果表明:成熟期上部、中部和下部烟叶总水分和束缚水含量均为09011云烟87,自由水均为云烟8709011,束缚水/自由水均为09011云烟87;暗箱烘烤各部位烟叶的失水速率、变黄速率及程度,09011均慢于、略快和略强于云烟87;变黄期2个品种各部位叶片的叶绿素及类胡萝卜素含量均呈下降趋势,但叶绿素降解速度明显快于类胡萝卜素;云烟87和09011中部叶的多酚氧化酶活性分别在12h和36h时达最高,09011高峰出现时间较云烟87晚24h,不利于烟叶定色。与云烟87相比,烤烟新品系09011的叶片含水量较高、失水较慢、不易定色,其易烤性差,生产上应采取针对性的栽培管理措施。     

高效猪毛角蛋白降解菌株的分离与鉴定

为了筛选能高效降解猪毛角蛋白的微生物,从长期堆放废弃猪毛的土壤中取样,采用以猪毛粉为唯一碳氮源的培养基分离角蛋白降解菌,并对其产角蛋白酶条件进行了研究。通过驯化培养后,筛选到5株能够降解猪毛角蛋白的菌株,其中菌株E-2降解效果最佳。将E-2接种到以猪毛为唯一碳氮源的培养基中培养5 d后,猪毛降解率达58.6%,发酵液中角蛋白酶活为46.6 U·m L~(-1)。结合形态学观察、生理生化特征及ITS序列分析,鉴定该菌株为解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)。E-2产酶影响条件实验结果表明,培养108 h后酶活性最高,产角蛋白酶最适条件为p H值6.0~7.0,温度35~40℃,猪毛粉添加量15 g·L~(-1)。E-2能降解猪毛、鸡毛、羊毛,但降解活性及产酶活性均不同。该菌株的分离筛选为微生物降解猪毛角蛋白提供了新的菌种资源,至今未见解脂耶氏酵母在降解毛发角蛋白方面的相关报道。     

高温纤维素降解微生物的筛选、鉴定及其酶活力测定

【目的】筛选高温高效纤维素降解微生物,为畜禽粪便和农作物秸秆堆肥菌剂的研制奠定基础.【方法】在50℃培养条件下,对牛粪自然堆肥样品中的纤维素降解微生物进行富集、分离、纯化培养.又经刚果红纤维素培养基法、滤纸条崩解试验、纤维素酶活测定法进行纤维素降解活性的筛选.再提取菌株DNA,分别扩增16S rDNA或ITS片段进行鉴定.【结果】最终筛选得到具有良好纤维素降解性能的细菌(X-1)和真菌(Z-3)各1株.Z-3菌株在5 d内能将滤纸条完全崩解,X-1菌株则为7 d.X-1菌株在7 d内羧甲基纤维素酶(CMCase)、滤纸酶(FPA)和微晶纤维素酶(C1)最高活力分别为0.47、0.08、0.12 IU/mL;Z-3菌株则为0.32、0.14、0.07 IU/mL.分子生物学鉴定结果表明,X-1为伯氏短杆菌(Brevibacillus borstelensis),Z-3为枝孢菌属(Cladosporium).【结论】得到了2株高温降解微生物,50℃降解纤维素能力较强(培养基),可进一步用于堆肥菌剂的开发.     

K326和云烟87在湘南烟区农艺特性及产质量差异性研究

在相同栽培技术和烘烤措施等条件下,对烟叶品种K326和云烟87进行了对比栽培试验。结果表明:云烟87的株高、茎围、节距均大于K326,但有效叶片数少于后者;两个品种烟叶的外观质量都表现较好;主要化学成分含量之间无显著差异,且都合符安徽中烟"黄山"香烟对浓香型烟叶质量的指标要求;云烟87的中上等烟的比例比K326高4.4%;K326的平均产量为2 614.95kg/hm2,比云烟87高333.75 kg/hm2;平均产值为43 610.9 kg/hm2,比云烟87高1 024.1元/hm2。     

南阳烟区不同基因型烤烟烟叶年际间品质差异性分析

对南阳烟区2006～2008年间的8个不同基因型烤烟的化学成分和香气物质成分含量的差异性进行分析。结果表明:(1)不同基因型烤烟烟叶的化学成分及其比值均有差异,且部分达到了显著水平;云烟85、云烟87和NC89的钾含量较高、氯含量较低且其它化学指标均较适宜。(2)不同基因型烤烟烟叶之间中性致香成分的含量差异也较大,总体表现较好的有云烟85、NC89和云烟87。(3)综合分析认为,云烟85、云烟87和NC89 3个品种总体烟叶质量表现较好,适宜在南阳烟区推广种植。     

密度与云烟87上部烟叶性状及烟碱含量的关系

研究了种植密度对云烟87上部烟叶长度、宽度、厚度的影响．探讨了种植密度与上部烟叶烟碱吉量及糖碱比值的关系，并比较分析了不同种植密度下云烟87的上等烟百分率与产值．结果表明。种植密度与云烟87上部烟叶的宽度及厚度呈显著的负相关关系（P〈0．05），与长度及总烟碱含量星极显著的负相关关系（P〈0．01），而与糖碱比值量显著的正相关关系（P〈0．05）；在湖南省嘉禾县，云烟87的最佳种植密度为1212株／666．7m^2，在该密度下，云烟87上部烟叶中B2F等级烟叶的厚度为119．2μm、总烟碱含量为3．43％、糖碱比值为8．10，均符合优质上部烟叶的标准，适当提高种植密度，不但可以降低上部烟叶的厚度与烟碱含量、提高糖碱比值，而且能提高上部烟叶的可用性，并能提高上等烟的百分串与产值．     

蓝莓根际土壤真菌多样性及根腐病拮抗菌的筛选

为了解贵州栽培蓝莓根际土壤微生物多样性,筛选对蓝莓根腐病病原菌具有拮抗作用的微生物,采用平板稀释法和对峙培养法研究蓝莓根际土壤真菌多样性及其对蓝莓根腐病病原菌的拮抗作用。结果表明:80株菌株的菌落有明显差异,利用菌株r DNA–ITS序列进行BLAST比对,将80株菌株划分为11个属51个种,相似度为99%～100%。其中子囊菌门真菌共9个属、44个种、65株;接合菌门有2属,分别为孢球托霉属和毛霉属,7个种共15株。青霉属真菌为子囊菌门菌株的优势属,占子囊菌门菌株的33.85%;孢球托霉属真菌为接合菌门菌株的优势属,占接合菌门菌株86.67%。蓝莓根际土壤真菌数量为2.96×105 cfu/g,Shannon-Wiener多样性指数为2.046 1,Pielou均匀度指数为2.282 0,Margalef丰富度指数为0.853 3。在80株蓝莓根际土壤真菌中,对蓝莓根腐病病菌抑制率在50%以上的菌株有22株,抑制率在70%以上的有8株,其中日本曲霉、棘孢木霉和盖姆斯木霉菌株抑制效果最好,表现出良好的生防应用前景。     

绿肥压青量对烤烟根际土壤可培养微生物的影响

[目的]了解绿肥压青量对烤烟根际可培养微生物群落的影响。[方法]在贵州省福泉市进行了云烟87烟垄绿肥不同压青量田间试验,采用稀释平板法计数与分离不同处理可培养土壤微生物,应用ITS、16S rDNA测序比对方法,初步鉴定烤烟根际可培养微生物种类。[结果](1)微生物数量。经光叶紫花苕(Viciavillosa rothvar)压青后,烤烟根际可培养微生物数量显著高于非压青田,其中处理2(压青15.0 t·hm~(-2))可培养真菌、放线菌数量较多,处理3(压青22.5 t·hm~(-2))可培养的细菌数量较多。但随时间推移,压青田烤烟根际可培养微生物数量呈下降趋势。(2)微生物多样性。对移栽后30 d的真菌、细菌和放线菌进行了属种的初步鉴定,分离到可培养真菌427株,鉴定出6个属,优势属为曲霉属(Aspergillus);分离到可培养细菌404株,鉴定出6个属,优势属为芽孢杆菌属(Bacillus);分离到可培养放线菌141株,鉴定出3个属,优势属为链霉菌属(Streptomyces)。[结论]绿肥可促进烤烟根际微生物的生长和繁殖;从可培养微生物数量及种类来看,以处理2(压青15.0 t·hm~(-2))的烟田较为适宜。     

丝状石油降解真菌的筛选及其降解特性研究

[目的]筛选丝状石油降解真菌,并研究其降解特性。[方法]从宁波象山港及镇海炼化厂卸油区域受原油污染的海水和土壤中筛选目标菌株,并对其降解原油的速度、耐油性、接种量、氮磷营养需求等进行探讨。[结果]得到3种目标菌株,分别为丝壶菌属（Hy-phochytrium Zopf）,网囊霉属（Dictyuchus Leitgeb）和腐霉属（Pythium Pringsheim）,并命名为S-3、T-1和T-2。3种菌株均具有降解原油快速高效的特点,接种量在0.5%～1.0%（V/V）时,处理5d对原油的平均降解率达到57.00%～65.00%。S-3菌株耐油性强,适应寡氮磷营养环境;T-1和T-2菌株耐高氮磷营养环境,但高原油浓度不利于其对原油的生物转化。[结论]丝状石油降解真菌作为一种生物治理石油污染的新型微生物资源具有良好的应用前景。     

新品种云烟121、云烟301烤后烟叶质量比较分析

通过研究同一生态环境下烤烟新品种云烟121、云烟301与CK品种(云烟87)烤后烟叶外观质量、物理特性和常规化学成分,分析其对环境的适应性,稳定性和丰产性。结果表明:外观质量云烟87好于新品种云烟121和云烟301,与云烟121差异不明显、与云烟301差异较明显;化学成分云烟301较协调,内在质量较好,较符合优质卷烟的要求,但与云烟121和云烟87无明显差异,说明3个品种烟叶内在质量差别不大;烤后烟叶物理特性云烟121除平衡含水量低于云烟87和云烟301、拉力小于云烟87外,其余物理特性均优于云烟301和云烟87,说明云烟121烟叶质量明显好于云烟301和云烟87;3个品种烤后烟叶感官质量一致或差异不明显,说明3个品种烟叶吸食质量相当。综合表现,云烟121对曲靖富源生态环境适应性好,烤后烟叶质量相对较好,更能满足卷烟工业对优质原料的需求。     

烟叶中纤维素高效降解菌的筛选与作用效果研究

为有效降解烟叶中的纤维素,改善烟叶的整体品质,从不同产地原烟表面初步分离出具有降解纤维素能力的菌株;通过测定菌株所产纤维素酶活性,筛选高产纤维素酶菌株并进行16 S rDNA测序,结合生理生化试验对其进行鉴定;进一步采用正交试验优化菌株在烟叶中的发酵条件,考察烟叶中纤维素降解效果。结果表明:1)在分离得到的18株菌株中,XC-19-1产纤维素酶活性最高(6.6 U·mL~(-1));2)16 S rDNA测序以及生理生化试验推断,XC-19-1为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);3)根据正交试验的结果,将培养后的XC-19-1菌液按照3%的烟叶质量比例施加于抽梗后的烟叶表面,在温度为37℃、相对湿度为75%的条件下作用60 h后,烟叶中的纤维素降解率可达30.6%,总糖以及还原糖含量均有明显提高,有效提升烟叶整体质量。     

2个烤烟品种对根黑腐病菌的响应

本文选用云烟87和韭菜坪2号2个烤烟品种为试验品种,通过测定烟叶在根黑腐病发病中期丙二醛、总酚、类黄酮、游离氨基酸及可溶性总糖含量等主要生理生化指标,研究2个烤烟品种对根黑腐病的生理响应及其差异。结果表明:2个品种发病烟株烟叶的丙二醛含量均高于未发病烟株,且韭菜坪2号发病烟株烟叶丙二醛含量大于云烟87,但无显著性差异;韭菜坪2号发病烟株烟叶内的游离氨基酸含量显著高于未发病烟株,而云烟87发病烟株烟叶游离氨基酸含量则低于未发病烟株,但无显著性差异;2个品种发病烟株烟叶的类黄酮含量均显著高于未发病烟株;韭菜坪2号发病烟株烟叶总酚含量显著高于未发病烟株,而云烟87发病烟株总酚含量虽高于未发病烟株,但两者差异不显著;2个品种发病烟株可溶性总糖的含量均有升高,但与未发病烟株比较,均未达显著性差异。韭菜坪2号对根黑腐病菌发病的生理响应更为敏感,可能会更容易受根黑腐病的影响。     

施氮量对云烟87产量与品质的影响

随着施氮量的增加,云烟87的大田生育期有所推迟、烟叶单叶重、单位叶面积呈增加趋势;适量增加施氮量有利于烟叶开片度的增大,特别是顶叶开片度;云烟87烟叶总氮和烟碱含量受施氮量影响最大,二者随施氮量的增加呈增加趋势;烟叶糖碱比与施氮量呈显著负相关;合理施氮能提高烟叶的产质量。施氮量为105kg/hm2时,云烟87具有最佳产质量。