鹅细小病毒病的实验室诊断

鹅细小病毒病,在我国又称小鹅瘟,是由鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV)引起的一种高发病率和高死亡率的高度接触性传染病。该病主要感染1月龄以内雏鹅,雏番鸭。GPV是细小病毒科、细小病毒属、无囊膜的单链DNA病毒。     

小鹅瘟流行动态及综合防控

1小鹅瘟 小鹅瘟（GP）又称鹅细小病毒感染（Goose Parvovirus Infection）、雏鹅病毒性肠炎（GoslingViralEnteritis）,是由小鹅瘟病毒（goslingplaguevirus,GPV）引起的雏鹅和雏番鹅的一种急性或亚急性败血性传染病,主要侵害3～20日龄小鹅,     

2013年苏皖地区鹅细小病毒的分离鉴定及其VP3基因序列分析

鹅细小病毒(GPV)主要引起雏鹅和雏番鸭的高死亡率。本研究对2013年采集的苏皖地区疑似GPV感染的病鹅组织,通过鹅胚病毒分离以及PCR扩增,共分离鉴定出11株GPV病毒。这11株GPV病毒的鹅胚致死时间为43¹59h。与NCBI中检索到的21个VP3进行的序列分析发现,这些GPV的VP3氨基酸同源性为97.2%159h。与NCBI中检索到的21个VP3进行的序列分析发现,这些GPV的VP3氨基酸同源性为97.2%¹00%。进化树分析表明,新分离的GPV VP3与分离于1982年的台湾GPV毒株82-0308最接近。与其他分离株VP3比较,这11株中有3株VP3中存在N35D、V261L、Y293H共突变现象。这些苏皖地区GPV毒株的分离、鉴定以及序列特征,对进一步探究苏皖地区GPV病毒的分子演化特征以及流行病学提供了材料。     

抗鹅细小病毒NS1蛋白单链抗体的构建、表达及活性初步鉴定

鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)是小鹅瘟(Gosling plague,GP)的病原体,由于其感染雏鹅和雏番鸭且传播快、病死率高,引起国内外学者的广泛重视.     

霍尔多巴吉白鹅小鹅瘟病毒的分离与鉴定

小鹅瘟即鹅的细小病毒病(GPV),又称Derzsy's病,是雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性败血性传染病,主要侵害3～20日龄雏鹅和雏番鸭,以出血性、纤维素性、渗出性肠炎为主要特征.该病传染快,发病率和死亡率高,是严重危害养鹅业的重要传染病之一.     

抗小鹅瘟血清的制备和应用

小鹅瘟病是鹅细小病毒(GPV)引起的雏鹅急性或亚急性败血症性传染病,发病率和死亡率较高,在养鹅业尚未形成集约化、标准化之前,主要以农户分散饲养为主,种鹅一般不采取免疫,往往在鹅雏出壳后不久就感染发病.     

鸡抗小鹅瘟病毒卵黄抗体的研制与应用

小鹅瘟是由小鹅瘟病毒(GPV)感染引起的雏鹅的一种急性传染病。近年来,在养鹅生产中,采用抗血清或卵黄抗体给雏鹅注射进行被动免疫预防本病,取得了较好的防治效果。抗血清或鹅源卵黄抗体生产的成本高、产量低,尚不能满足养鹅业快速发展的需求。为此,试制鸡抗小鹅卵黄抗体(IgY)并进行了防治效果试验和现地应用效果观察。1材料与方法1.1材料海兰蛋鸡40只,由黑龙江省生物制品一厂监察室试验动物室提供;2日龄雏鹅40只,购于哈尔滨市道里区某孵化场,供试验用。GPV免疫用抗原、GPV琼扩抗原及阳性血清和抗小鹅瘟鹅源血清琼扩抗体(效价416),均由…     

GPV感染雏鹅的保护酶活性与同工酶变异性研究

酶是催化代谢途径的高效活性基因产物,应激环境和遗传基础的不同导致同工酶结构或活性差异,使不同组织和发育阶段的酶种类和活性表现特异性变化。采用生化分析实验技术和PAGE分析GPV感染雏鹅保护酶(POD、ES、SOD)的活性及同工酶特征变异,结果表明,GPV感染雏鹅的脑、心、脾组织新出现1条POD同工酶带,肺组织消减1条同工酶带;GPV感染雏鹅的肝、肺、心组织SOD同工酶谱带新增加2条,脑、脾组织新增加1条,脑、心、脾分别缺少慢区、中区、快区酶带;GPV感染雏鹅的心、脾组织ES同工酶分别出现2、3条新酶带,脑、肝、肺组织新出现1条酶带;POD、SOD、ES活性不同程度分别增强1.2~6倍、1~1.7倍、1~2倍,肝中最显著(6,1.7,2倍)。提示GPV感染应激与寄主保护酶基因表达的互作作用,引起酶的谱型、活性等生化特征变异,直接或间接调控代谢途径与病理生化性能,因此,保护酶是GPV感染应激的敏感酶,可作为GPV与宿主易感性互作致病机制研究的有效标记。     

小鹅瘟病毒荧光抗体的制备与应用

将小鹅瘟病毒(GPV)分离毒xw株接种健康兔获得兔抗GPV超免疫血清，由此制备兔抗GPV荧光抗体。采用直接荧光抗体试验对人工感染雏鹅、鹅胚及自然病例进行了检测。结果表明，该方法可栓出患病组织中的病毒抗原，且肠和肝的含毒量高于尿囊细胞。     

鸭源抗鹅细小病毒卵黄抗体的制备

利用GPV 98E株胚毒免疫产蛋鸭,收集高免鸭蛋,分离卵黄,经水稀释法去脂粗提,硫酸钠盐析获得纯化的鸭源抗鹅细小病毒卵黄抗体,测定其琼脂双扩散效价、含量和回收率;利用低日龄无母源抗体易感雏鹅检测其预防和治疗效果。结果表明:经GPV 98E株胚毒免疫的鸭可以很快产生高水平的特异性抗体,纯化的卵黄抗体琼扩效价为1∶32,含量为81.6%,总蛋白回收率为6.01mg/mL。在预防试验中,雏鹅的死亡率为0,在治疗试验中,使用一次预防试验用的剂量治疗发病雏鹅,其死亡率为59%,经二项分布显著性检验,鸭源抗GPV卵黄抗体对鹅细小病毒感染有极显著的预防和治疗效果。     

小鹅瘟的诊治

小鹅瘟(GP)又称鹅细小病毒病、雏鹅病毒性肠炎,是由小鹅瘟病毒(GPV)引起的雏鹅的一种急性或亚急性败血性传染病,对养鹅业造成严重威胁和损失。2012年5月,思南县胡家湾乡某鹅场的部分雏鹅发生精神委顿,严重下痢,头触地,两腿麻痹,抽搐而死。采样经实验室诊断为小鹅瘟,现将诊治情况介绍如下。     

鹅细小病毒VP3基因的克隆与表达

鹅细小病毒(Gooseparvovirus, GPV),主要引起雏鹅和雏番鸭感染发病,被感染禽的发病率和死亡率可高达70%～100%,是一种传播快、死亡率高的高度接触性传染病,亦称小鹅瘟.     

鹅细小病毒感染雏鹅血液的蛋白/酶活性及同工酶变异性研究

为了解鹅细小病毒(goose parvovirus,GPV)侵染的病理学致病机理,探究蛋白/酶的分子变异特征,本研究对GPV感染雏鹅血液中的蛋白质、保护酶、蛋白酶活性及其同工酶结构和功能等进行了生化—分子生物学分析.结果显示,GPV感染雏鹅的血液中(血浆和血细胞)蛋白酶活性和蛋白质含量、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)及酯酶(Est)活性分别是对照组的1.46和1.63、1.51和1.49、1.50和1.14、1.36和1.73、1.30和1.53倍.GPV感染雏鹅的血浆中,SOD同工酶增加了2条谱带(134和239);Est同工酶增加2条快区主带,减少了2条慢区谱带;酶蛋白减少1条慢区谱带(304);蛋白质新增加4条主带(131、86、43、33 ku).而血细胞新出现2条POD同工酶谱带(93和203),分别增加了1条(160)中区SOD同工酶谱带、1个快区Est同工酶谱带、2个慢区酶蛋白谱(223和330)和4个蛋白主带(144、104、58、53 ku).提示GPV感染应激与寄主基因表达的蛋白质、保护酶、蛋白酶及同工酶相互网络协作会引起酶的谱型、活性等生化特征变异,直接或间接调控代谢途径与病理生化性能,增强机体对入侵GPV的防御应激性能.因此,蛋白质、保护酶、蛋白酶及同工酶是GPV感染的应激靶标,可作为雏鹅易感GPV致病机制研究的有效标记.     

细胞传代致弱的鹅细小病毒YG毒株致病性变化的研究

旨在观察细胞传代致弱的鹅细小病毒YG毒株对易感雏鹅的致病性变化。将鹅细小病毒(GPV)YG株在鹅胚成纤维细胞(GEF)和鸭胚成纤维细胞(DEF)上进行交替传代培养,病毒在细胞上传至第12代时,开始出现细胞病变;间接免疫荧光试验(IFA)检测发现,随着病毒感染时间的延长,感染细胞数量呈现先增加随后减少的变化趋势,感染后96h阳性细胞数量最多;病毒的滴度随着传代次数的增加而逐渐升高;当病毒传至第50代时,细胞适应毒株毒价为106.5 TCID50·mL-1;雏鹅致病性试验结果显示,第50代病毒毒力明显减弱。细胞传代致弱的GPV YG株所感染雏鹅死亡和发病率降低,且死亡雏鹅无鹅细小病毒病的特征性病变及临床表现。     

小鹅瘟病毒实验室检测方法研究进展

小鹅瘟（Gosling plague,GP）又称为鹅细小病毒病,是由细小病毒科细小病毒属的鹅细小病毒（Goose parvovirus,GPV）引起的一种急性或亚急性、高度接触性、败血性传染病。该病主要以严重下痢、渗出性肠炎和肠道栓塞为特征。发病雏鹅常表现为出血性、纤维素性及渗出性肠炎,最后形成肠内栓塞。该病主要发生于1月龄以内雏鹅和雏番鸭,具有传播快、     

一株GPV的分离鉴定及致病性研究

为了确定导致吉林省某地区10日龄雏鹅发病的病原,从病死雏鹅的肝脏中分离到一株病毒,根据病毒的电镜照片,动物回归试验及PCR鉴定,确定为鹅细小病毒。PCR产物测序后经BLAST比对显示,分离毒株与NCBI收录的GPV VP3基因同源性均在92%以上,与GPV/CH/HLJ02/08VP3基因的同源性最高,达99%。致病性研究表明,分离株的ELD50为10-6.5/0.2mL,毒力较强,且该毒株能被GPV标准血清所中和。     

一例小鹅瘟的诊断与防治

小鹅瘟又称德舍氏病,是由鹅细小病毒(GPV)引起雏鹅和雏番鸭的1种急性或亚急性败血性传染病,主要侵害3~20日龄小鹅,以渗出性肠炎、肝、肾、心等实质器官炎症为主要特征。该病传染快、发病率和死亡率高,是严重危害养鹅业的传染病。     

检测鹅细小病毒的间接免疫酶组织化学法的建立

鹅细小病毒（Goose parvovirus，GPV）在自然传染情况下感染鹅和雏番鸭，根据其流行病学特征、临床症状和病理剖检可做出初步诊断，确诊还需要实验室诊断。目前用于实验室诊断和检测GPV的方法很多，如鹅胚或番鸭胚及相应的成纤维细胞分离培养病毒、琼脂扩散试验、ELISA、免疫荧光技术、核酸探针等。     

小鹅瘟实验室诊断技术研究进展

小鹅瘟(GP)是由小鹅瘟病毒(GPV)引起雏鹅的一种急性败血性传染病。多发生于3～25日龄雏鹅,成年鹅感染本病无症状,但病原可经卵传给下一代,导致孵化雏鹅感染。本病在雏鹅中传播快,发病率和死亡率均可达90％以上,不同品种、性别的雏鹅均易感,对养鹅业造成严重的威胁。目前,我国养鹅地区均有小鹅瘟的流行。 小鹅瘟在自然传染情况下只感染鹅,据其流行病原特征,临诊症状和剖检病变一般不难作出诊断,但确诊需借助实验室检查。     

鹅细小病毒VP3亚单位疫苗的制备及其免疫效果

为了研究鹅细小病毒(GPV) VP3亚单位疫苗的免疫效果,从ZJ-04分离株基因组DNA扩增VP1和VP3基因并克隆到pMD18-T载体,测定其核苷酸序列;将VP3基因亚克隆至质粒载体pET-32a(+),重组质粒pET-VP3用于转化E.coli BL-21(DE3)感受态细胞获得重组菌BL-VP3;以VP3重组蛋白和BL-VP3重组菌制备油乳剂疫苗免疫接种种鹅,用琼脂扩散试验检测血清GPV抗体,观察母源抗体对雏鹅GPV感染的免疫保护效果.结果表明,ZJ-04株VP1基因大小为2 199 bp,编码732个氨基酸,与Gen-Bank收录的GPV毒株的核苷酸序列同源性为95.3％～99.2％,氨基酸序列同源性为97.7％～99.3％;SDS-PAGE、Western blot检测结果表明,重组VP3分子质量约80 ku,能与GPV抗体发生特异性反应;VP3包涵体和BL-VP3重组菌均能诱导种鹅产生GPV抗体,新生雏鹅可获得良好的免疫保护.