甘南州尖顶羊肚菌菌丝体液体发酵培养研究

对甘南藏族自治州尖顶羊肚菌进行液体发酵培养,以干菌丝体得率为指标,设计正交试验优化其液体发酵培养基和培养条件。实验结果表明最佳培养基组合为白砂糖30g·L^-1、豆粕粉15g·L^-1、KH2PO4 0．75g·L^-1、MgSO4·7H2O0．5g·L^-1、维生素Bt0．03g·L^-1。最优液体发酵条件为温度25℃,培养液初始pH7,接种量10mL,转速120r·min^-1,培养时间8d。     

黑皮鸡址从菌固体培养基及温度优化

为研究不同碳源、氮源、无机盐以及温度对黑皮鸡地从菌生长的影响,通过单因素分析筛选出最适合黑皮鸡地从菌生长的培养基及培养温度。以菌丝干重为指标,通过3因素3水平正交试验,得出最佳固体培养基配方为琼脂20 g·L^-1、果糖25 g·L^-1、酵母浸膏2.5 g·L^-1、硫酸钾0.7 g·L^-1,最适培养温度为25℃。     

大球盖菇1号的分离纯化及其液体培养基优化

为缩短大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)1号液体种生长周期,提高菌丝体产量,为大球盖菇液体种工业化生产提供参考和依据。试验以大球盖菇1号菌丝球干质量(Y)为指标,通过Plackett-Burman设计试验,得出玉米粉、MgSO4和VB1对大球盖菇的生物量有显著影响,通过最陡爬坡试验和Box-Behnken响应面分析法对大球盖菇液体培养基组成进行优化,得到大球盖菇1号最适液体培养基为蔗糖20 g·L^-1、蛋白胨6 g·L^-1、酵母膏2 g·L^-1、KH2PO43 g·L^-1、MgSO44.56 g·L^-1、玉米粉4.25 g·L^-1、VB12.43 g·L^-1,通过对模型进行验证试验,大球盖菇1号菌丝生物量为1.2154 g·150-1mL-1,较基础培养基相比生物量提高36.2%,且数学模型的预测值与试验观察值相符,相对误差约为1.9%,证明响应面法优化大球盖菇1号液体培养基可行。     

色素万寿菊雄性不育植株的快速繁殖

以色素万寿菊为试验材料,采用母本资源不育株叶片、带腋芽茎段和侧芽为外植体,对不同的培养基配方条件下的生长情况进行统计,研究了灭菌处理、生长调节剂组合、AgNO3对丛生芽诱导的影响,以期快速获得遗传稳定的万寿菊雄性不育植株,为杂交育种提供基础研究材料。结果表明:以带腋芽的茎段为最佳外植体,1 g·L^-1 HgCl2灭菌10~12 min的灭菌效果最好,B1-3较易诱导丛生芽,其最佳的诱导培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,诱导率高达93%,2.0 mg·L^-1 AgNO3有利于丛生芽增殖,使B1-3丛生芽增殖率达151.6%,丛生芽生根培养后移栽成活率达95%以上。发现万寿菊离体培养过程中,外植体不同,其丛生芽诱导率不同,最佳外植体为带腋芽茎段。不同的灭菌剂的灭菌效果不同,1 g·L^-1 HgCl2灭菌效果最好;丛生芽诱导时6-BA与NAA不同浓度组合优于6-BA与IAA组合;低浓度AgNO3能够促进丛生芽诱导,高浓度反而会降低。     

基于液态黑脉羊肚菌菌丝体培养基配方的研究

以菌丝体生物量为测量指标，筛选出黑脉羊肚菌液体培养基最佳碳源是可溶性淀粉，最佳氮源是酵母浸膏，采用正交试验方法筛选出黑脉羊肚菌液体最佳培养基配方为可溶性淀粉3％、酵母浸膏0．5％、MgSO4·7H2O 0．1％、KH2PO4 0．3％、VB110mg·L^-1。     

溆浦甜橙高效离体再生研究

本研究以溆浦甜橙实生苗为试材,对影响其离体再生的各种因素进行了研究,建立了一个高效离体再生系统。结果表明,30d龄溆浦甜橙实生苗上胚轴水平置于MT＋3mg·L^-16-BA分化培养基中,不定芽的诱导率可高达83-3％,该不定芽在MT＋0．5mg·L^-1,6-BA＋1．5g·L^-1,麦芽提取物的增殖培养基上生长良好,增殖率可达96．7％,增殖系数为3.79。生根培养基以1／2MT＋0．5mg·L^-1IBA比较适宜。这一系统再生频率高,操作简便,适合于溆浦甜橙的遗传转化。     

金樱子(Rosa laevigata Michx.)叶片直接再生不定芽体系的建立

以金樱子组培苗的划伤叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂配比组合、暗培养时间、添加物L-脯氨酸、叶片不同部位对不定芽直接再生的影响。结果表明:当TDZ浓度为1.5 mg·L^-1、NAA浓度为0.000 5 mg·L^-1时,不定芽直接发生率最高,为9.5%;不同暗培养时间对不定芽直接诱导具有一定影响,暗培养时间为10 d时不定芽的直接发生率最高,为10.5%;添加了不同浓度的L-脯氨酸后不定芽的诱导率不增反降,所以以不添加L-脯氨酸为宜;叶片不同部位的再生率比较中,仅带叶叶柄可直接诱导出不定芽。综上所述,叶片直接再生不定芽的诱导方法是,以金樱子带叶叶柄为外植体,在直接诱导培养基上1/2MS+TDA 1.5 mg·L^-1+NAA 0.000 5 mg·L^-1+CH 100 mg·L^-1+AgNO3 10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.5 g·L^-1,暗培养10 d后,转至正常光周期下培养3周左右,不定芽诱导率最高,为10.5%。所得不定芽在增殖培养基MS+NAA 0.1 mg·L^-1+6-BA 1.0 mg·L^-1生长3周后,增殖系数可达到3.5左右;将丛生芽切割成单芽后转入不含任何激素的MS培养基壮苗3周,幼苗可长高至3~5 cm;再转入MS+NAA 0.1 mg·L^-1培养基中生根,1个月后生根率达95%。     

西藏野生双孢蘑菇驯化

对采自西藏自治区日喀则市高海拔地区的野生双孢蘑菇(Agaricus bisporus)进行驯化。结果表明:试验范围内,西藏野生双孢蘑菇的最适母种固体培养基配方为200.0g去皮马铃薯、20.0g葡萄糖、3.0g蛋白胨、1.0g KH_2PO_4、0.5g MgSO4、20.0g琼脂、1.0L水、pH自然,菌丝生长速度最快为0.21cm/d。最适原种培养基配方为93%麦粒、5%牛粪粉、1%石膏、1%石灰,原种的生长周期是28d。在栽培试验中,子实体的单位面积产量是8.71kg/m~2及平均单菇重47.56g,子实体颜色以浅褐色为主。     

大肥菇母种培养基配方筛选试验

大肥菇是一种耐高温、抗病力强的双环蘑菇。笔者作了母种培养基配方筛选试验研究,现报道于后。 1.材料和培养基配方:大肥菇品系为B2/E,引自福建省轻工业研究所。试验在粗选的基础上,设七个培养基配方处理:A马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂18g,水1000ml,pH自然;B玉米粉40g,蔗糖10g,琼脂18g,水1000ml,pH自然;C蛋白胨20g,葡     

花毛茛组培快繁技术研究

以花毛茛初代培养无菌苗为试材,采用MS培养基,分别向培养基中添加不同配比的细胞分裂素6-BA和细胞生长素NAA,对花毛茛进行初代诱导、增殖培养,继代生根培养,并以不同比例泥炭、蛭石、珍珠岩、河沙为基质,对花毛茛进行炼苗移栽试验。结果表明:最佳初代诱芽培养基为MS+1.5 mg·L^-1 6-BA+0.2 mg·L^-1 NAA,诱导率达100%;增殖诱导愈伤组织培养基为MS+0.5 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,增殖系数为5.0;继代生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L^-1 NAA,生根率89.9%;移栽最适基质为泥炭∶河沙∶蛭石=6∶2∶2,成活率100%。     

北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_炉渣∶V_原土∶V_腐殖土=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。     

报春石斛组培快繁技术体系的建立

以报春石斛蒴果为外植体,通过对种子无菌萌发和原球茎诱导、原球茎增殖及丛生芽诱导、生根壮苗以及移栽驯化的研究,以期建立报春石斛的组培快繁技术体系。结果表明:培养基MS+6-BA 1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1最适报春石斛种子无菌萌发和原球茎的诱导;原球茎增殖及丛生芽诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg·L^-1+NAA 0.1mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖20g·L^-1,继代培养45d,增殖系数达8.2;最佳生根壮苗培养基为MS+6-BA 1.0mg·L^-1+KT 0.5mg·L^-1+NAA 0.2mg·L^-1+香蕉泥100g·L^-1+蔗糖30g·L^-1+活性碳1.0g·L^-1,培养3个月,生根率达100%,根系较长,苗壮;3—4月是桂林地区移栽报春石斛组培苗的最佳季节,生根苗在栽培基质Ⅰ(树皮∶水苔∶珍珠岩∶蛭石=10∶2∶1∶1,体积比)的长势好于栽培基质Ⅱ(树皮∶珍珠岩∶蛭石=10∶1∶1,体积比),成活率为92.3%。     

有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’的快速繁殖

以‘黄荷兰’试管苗为试材,采用组织培养快速繁殖方法,研究了影响有性三倍体杂交兰‘黄荷兰’根状茎诱导、增殖、分化、生根壮苗和试管苗移栽的因素,以期建立‘黄荷兰’种苗工厂化生产技术体系。结果表明:横切茎尖的起始脱分化时间早于纵切,诱导率高于纵切。切割长度、外源激素、光照强度和有机附加物对根状茎的增殖影响显著,将根状茎切割成长0.50 cm接种到MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+土豆80.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.30 g·L^-1培养基中培养40 d,根状茎增殖系数为3.18。外源激素对根状茎的分化影响显著,将根状茎掰成长1.00 cm接入MS+6-BA 1.00 mg·L^-1+NAA 0.20 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.02 g·L^-1培养基中培养40 d,芽分化率和苗分化率分别为60.00%和57.50%。将4 cm高的苗转入1/2MS+6-BA 0.10 mg·L^-1+NAA 0.50 mg·L^-1+蔗糖20.00 g·L^-1+卡拉粉7.00 g·L^-1+AC 0.50 g·L^-1中培养50 d,平均株高和根数分别为7.32 cm和3.56条。4月和10月用水草移栽,试管苗成活率分别为98.67%和99.67%。上述研究结果说明,利用组织培养快速繁殖技术工厂化生产‘黄荷兰’种苗是可行的。     

枸杞玻璃化组培苗恢复技术

以枸杞不同程度玻璃化组培苗为试材,采用组织培养法,研究了不同基本培养基、外源添加物、添加聚丙烯酰胺、改变培养条件及玻璃化苗脱水处理在玻璃化组培苗恢复中的作用,探索出最佳的枸杞玻璃化组培苗恢复方法。结果表明:1/2MS+6-BA 0.5mg·L^-1+活性炭0.5g·L^-1为枸杞轻度玻璃化苗恢复最佳培养基,适宜枸杞中度玻璃化苗恢复培养基为1/4MS+6-BA 0.5mg·L^-1+活性炭1.0g·L^-1。当添加聚丙烯酰胺8、16g·L^-1,枸杞轻度、中度玻璃化苗恢复率均达到最高,聚丙烯酰胺对枸杞玻璃化的组培苗有明显的逆转效果,逆转后的组培苗生长良好。经过脱水处理后,玻璃化苗明显得到恢复。脱水2d轻度玻璃化苗的恢复率可达77.61%。随着脱水的天数增加,枸杞中度玻璃化苗恢复率逐渐提高,当脱水天数达3d时,恢复率最高达71.24%。培养期间增强封口膜的透气性和光照强度能有效提高枸杞玻璃化苗恢复率。     

NaCl胁迫对黑果枸杞幼苗生理及生化指标的影响

以黑果枸杞幼苗为试验材料,将幼苗在0、50、100、200 mmol·L^-1 NaCl条件下处理10 d后,分析了主根伸长量、叶片花青素、游离脯氨酸、丙二醛、可溶性蛋白质含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化物酶(POD)活性及其同工酶等生理生化指标的变化,探究其适应盐生环境可能的机制,以期为合理开发利用黑果枸杞提供参考依据。结果表明:经0、50、100、200 mmol·L^-1NaCl处理后,黑果枸杞幼苗主根生长未受抑制,0～100 mmol·L^-1 NaCl处理时,叶片花青素含量变化不显著,200 mmol·L^-1 NaCl处理后,花青素含量显著升高;0～100 mmol·L^-1 NaCl处理时,幼苗中游离脯氨酸及丙二醛含量变化不显著,200 mmol·L^-1 NaCl处理后以上物质均显著升高;经0～200 mmol·L^-1 NaCl处理,黑果枸杞幼苗中SOD活性及其同工酶酶谱表达稳定,变化不显著;POD活性先升后降,100 mmol·L^-1 NaCl胁迫时活性最强,为1 065.9 U·g^-1·min^-1,且同工酶POD 1、POD 2与黑果枸杞幼苗响应盐胁迫紧密相关。     

百合鳞茎不定芽诱导与增殖配方优化

以百合‘辛普隆’(‘Simplon’)和‘黄色风暴’(Lilium‘Yelloween’)的鳞茎为材料,MS为基本培养基,在(25±2)℃,暗培养下,采用正交试验设计方法研究百合鳞茎不定芽的诱导与增殖。结果表明:①NAA 0.2 mg·L-1有利于‘辛普隆’鳞茎诱导,诱导率80.21%,平均诱导鳞茎2.86个;②NAA 0.4 mg·L-1有利于‘黄色风暴’鳞茎诱导,诱导率46.41%,平均诱导鳞茎2.40个;③蔗糖是影响‘辛普隆’鳞茎增殖主要因子,6-BA是影响‘黄色风暴’鳞茎增殖的主要因子;④MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ad 5 mg·L-1+蔗糖60 g·L-1组合有利于‘辛普隆’鳞茎增殖,增殖率2.22;MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ad 10.0 mg·L-1+蔗糖40 g·L-1有利于‘黄色风暴’鳞茎增殖,增殖率4.5。