甲萘威酶联免疫吸附分析技术研究

合成了两种不同结构的甲萘威半抗原并与载体蛋白质共价偶联制备人工抗原。以人工抗原免疫动物获得对甲萘威具特异性的高效价抗体 ,建立并优化了痕量甲萘威的竞争性酶联免疫吸附测定法。该法测定甲萘威的线性浓度范围为 10 1～ 10 -4 μg/ml,检测限低于 0 .0 1ng/ml。其他结构类似的氨基甲酸酯类杀虫剂对甲萘威的分析无干扰。     

酶联免疫吸附技术——Ⅲ酶联免疫吸附法在检测植物病毒上的应用

一、酶联免疫吸附法(ELISA)概述1966年 Nakane 等及 Avrameas等,分别报道用酶代替荧光素标记抗体,作生物组织中抗原的鉴定及定位。随后发展用于鉴定免疫扩散及免疫电泳板上的沉淀线。Miles(1968)等描述了如何在免疫测定中用酶代替同位素。Avrameas(1969,1971)试验使抗体与酶结合,并进行了检测抗原的基础试验。继而由     

酶联免疫吸附技术—Ⅰ酶联免疫吸附法(ELISA)实验技术

从植物检疫的任务着眼,为了防止传染性病害的传入和散布,早期准确诊断是十分重要的。由于这个原因,高度敏感和特异性强的血清学诊断方法已经得到广泛的应用。随着免疫学理论的进展,血清学实验技术也有很大发展,主要表现在抗原、抗体纯化,操作技术的微量化、自动化、标准化,以及荧光素、同位素、特别是酶标记抗体球     

溴氰菊酯酶联免疫吸附分析方法研究

建立了定量测定溴氰菊酯间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA)。合成了半抗原1-羧基-(3'-苯氧基苯基)甲基-3-(2',2'-二溴乙烯基)-2,2-二甲基环丙基羧酸酯(Med)和N-2-(羧基丙基)氨基甲酰基-(3'-苯氧基苯基)甲基-3-(2',2'-二溴乙烯基)-2,2-二甲基环丙基羧酸酯(Di)。分别采用碳二亚胺法和混合酸酐法将半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备了免疫原Di-BSA和包被原Di-OVA、Med-OVA。将制得的溴氰菊酯免疫原免疫动物获得多克隆抗体,经间接非竞争ELISA法测得其效价为2.5×105。通过对甲醇含量、离子强度、pH值等影响因素进行异源分析条件的优化,确立了溴氰菊酯间接竞争酶联免疫分析方法的最佳检测条件(30%甲醇、氯化钠0.4 mol/L、pH 7.5),并建立了标准竞争曲线。该方法的IC50值为0.55±0.05 mg/L,检测限(IC10)为3.76±0.35 μg/L,对大多数拟除虫菊酯无交叉反应。分别在自来水、河水和土壤样品中添加0.05 ~5.0 mg/L(或mg/kg)的溴氰菊酯,回收率分别为89.7% ~106.8%、82.4% ~101.7%、75.6% ~97.8%。     

酶联免疫吸附技术——Ⅱ酶联免疫吸附法(ELISA)实验中的几个问题

一、酶联免疫吸附法(ELISA)的实验材料及其影响因素 ELISA试验的理论比较简单,但是要成功地应用于常规诊断,需要做很多预试工作,以确定最适当的条件。ELISA的基本操作原则是:固相吸附(抗体或抗原)→洗     

快速检测大豆疫霉菌的酶联免疫吸附技术研究

利用已经制备的大豆疫霉菌的抗血清，对大豆疫霉菌的纯培养和大豆病组织进行检测。结果表明：间接法（Ｉ－ＥＬＩＳＡ）和夹心法（ＤＡＳ－ＥＬＩＳＡ）都能较好地检测纯培养的大豆疫霉菌，但在检测病组织时，夹心ＥＬＩＳＡ的特异性较强，能够可靠地检测到大豆病组织内的病原菌     

酶联免疫吸附技术在小麦丛矮病测报中的应用研究

小麦丛矮病是我国北方麦区的一种主要病害。七十年代,河北省发生普遍而严重,八十年代初,我省的部分地区发生较重。1983年聊城地区发病面积达60余万亩,近8万亩绝产,对小麦生产构成了严重威胁,自1982年我省将丛矮病列为主要测报对象之一。小麦丛矮病的病原为小麦丛矮病毒,该病毒寄主范围广,除侵染小麦外,还侵染多种禾本科杂草,它的传毒介体是灰飞虱[Laodelphex striafellus(Fallen)]。小麦丛矮病的测报主要依据灰飞虱的带毒率和丛矮病     

侵染番红花的芜菁花叶病毒

 从表现花叶症状的德国进口番红花上获得一线状病毒分离物SA,线状病毒粒子长度为700~800nm。其在人工接种的11科39种植物中能侵染6科14种植物,在克里芙兰烟上产生系统坏死,在小白菜、花椰菜等十字花科植物上产生系统花叶或为隐症,在昆诺藜等藜科植物上为局部侵染。在番红花病叶、球茎及克里芙兰烟病叶组织中观察到卷轴状和片层状聚集的风轮状内含体。免疫吸附和免疫修饰电镜观察结果显示,SA与芜菁花叶病毒((TuMV)具有紧密的血清学关系。根据这些特征将SA鉴定为TuMV的一个分离物。这是TuMV侵染番红花的首次报道。     

除草剂酶联免疫吸附测定研究进展

酶联免疫分析技术具有方便快速、特异性强、灵敏度高等优点,近年来广泛应用于农药残留检测.本文介绍了酶联免疫分析技术在除草剂残留检测中的应用研究进展,分别介绍了各类除草剂的半抗原合成方法以及抗体的灵敏度,探讨了酶联免疫吸附分析法存在的问题和应用前景.     

酶联免疫吸附试验方法的比较

应用白背飞虱单克隆抗体比较了３种酶联免疫吸附试验方法。结果表明：间接酶联免疫吸附试验的灵敏度高于直接酶联免疫吸附试验,分别为０．０３１２５μｇ蛋白／ｍｌ（相当于１／２５６头成虫）和０．０６２５μｇ蛋白／ｍｌ（相当于１／１２８头成虫）,而双抗夹心酶联免疫吸附试验无法使用。样品中非目标抗原（捕食者）浓度对检测结果有显著的影响,且对直接酶联免疫吸附试验的影响更大,检测时必须对样品做适当的稀释     

大白菜不同品种对芜菁花叶病毒病(TpMV)的抵抗性

1963—1965年间,自全国征集34个大白菜品种材料(包括异地同种6个)在新疆石河子地区对TpMV进行了抵抗能力的试验。据1964、1965两年观察结果未发现免疫品种,但不同品种对TpMV的抵抗性不同。在34个品种材料中,属于抗病的品种1个,高度感病的6～7个,其余大部属耐病或感病。大白菜抵抗TpMV能力随品种本身遗传基因的变异,各年气候环境的变化以及优势毒源种群的变异而变动。利用抗、耐类型品种,结合搞好栽培管理和防蚜措施,可以获得较好的防病效果。由于未见免疫品种,因而单纯利用品种防病将是困难的。试验证明在大白菜各生育期均可发病,随着大白菜的生长发育,发病呈上升趋势,因此在结球期前应加强防除虫媒传病及栽培管理。     

萝卜对芜菁花叶病毒的抗性和其叶内游离氨基酸含量的关系

 以6份抗感芜菁花叶病毒病的萝卜品种为材料,探讨了萝卜在不同叶龄期的抗病性以及不同品种的抗病性和叶内游离氨基酸含量的关系,分析了萝卜在幼苗期的抗病性和接种芜菁花叶病毒后20天时病叶和对照叶游离氨基酸含量比值的相关性,调查了接种芜菁花叶病毒后抗感病萝卜品种叶内游离氨基酸含量的变化情况。结果表明:抗病品种叶内含有较高的蛋氨酸,感病品种的含量较低;子叶期后,萝卜叶内天冬氨酸、蛋氨酸、脯氨酸及总游离氨基酸含量的迅速提高和抗病性的迅速增強呈平行关系;接种芜菁花叶病毒后,病叶蛋氨酸、酪氨酸含量和健叶差异不明显,其它各种氨基酸含量均有不同程度的上升。文中还对氨基酸作为抗性鉴定标准及鉴定的适宜时间进行了讨论。     

芥菜品种(系)对芜菁花叶病病毒(TuMV)抗病性鉴定初报

 四川芥菜(Brassica juncea Cosson)品种资源丰富,茎用芥菜加工成品“涪陵榨菜”以鲜、香、嫩、脆享誉国内外。病毒病是菜乡的主要病害,大流行年减产四、五成。     

馬鈴薯在溫度条件影响下对花叶病毒抵抗力的改变与种薯退化关系的証据

 马铃薯在高温地区的种薯退化,近代多数学者相信是因为蚜虫媒介的活动使马铃薯本体逐年增加病毒威染率^[18]。     

用单克隆抗体结合酶联免疫吸附试验检测棉铃虫幼虫体内的核多角体病毒

在常规ＥＬＩＳＡ间接法的基础上，应用单克隆抗体检测感染棉铃虫核型多角体病毒的棉铃虫幼虫体内病毒粒子。３龄幼虫饲喂表层涂有ＨａＮＰＶ人工饲料后９小时，即可在幼虫抽提液中检出病毒粒子抗原，而典型病虫显症需５～６天后才出现。因此本法是一种灵敏、快速、特异性强的检测昆虫杆状病毒的方法。利用单克隆抗体结合ＥＬＩＳＡ试验分别检测来自江苏和山东不同地区棉田自然死亡的棉铃虫幼虫，表明在江苏和山东不同棉区均可检测到ＨａＮＰＶ病毒粒子，但地区间棉铃虫核型多角体病毒检出频率有显著差异     

芜菁花叶病毒(白菜孤丁株系)对白菜生理的影响及其与桃蚜的关系

1962年飼养并系統观察桃蚜 Myzus persicae (Sulzer) 在感染蕪菁花叶病毒(TpMV)的和健康的大白菜上的发生結果表明,病株对桃蚜不利。接种后24天,健株上的蚜虫数量为病株的1.8倍;健株上有翅若蚜占总蚜量的9.8％,而病株上达16.3％。 1964年比較测定了健株与具有不同症状(初現明脉、明显花叶、叶片严重皺縮)白菜苗的(1)含糖量、(2)全氮(可溶性氮)及非蛋白氮,以此算出蛋白氮含量、(3)細胞渗透压、吸水压,并以此算出細胞膨压。結果表明,病株比健康植株含糖量增加36.59—41.95％;全氮量与非蛋白氮含量均下降,其中非蛋白氮減少更多:由初現明脉期降低5.0％至叶片严重皺縮期降低86.7％,而蛋白氮初期有下降,后期又逐渐回升。病株的細胞渗透压增加了2％—5％,吸水压增加14.3％—42.9％,細胞膨压則下降36.3％—500.7％。从結果分析和有关文献佐証,作者認为病株不利于桃蚜的发生是由于糖/氮比增高,細胞膨压下降的結果,前者影响蚜虫的营养,后者影响蚜虫的取食量。