籼稻材料特性和激素配比对花药培养效率的影响

以5个籼稻杂交组合F。的花药为材料,探讨诱导培养基和分化培养基中不同植物激素配比等因素对花药培养效果的影响。结果表明,诱导培养基中,激素浓度处理对籼稻花药的愈伤诱导率的影响有显著差异,最佳的诱导培养基激素组合为：2,4-D2．0＋KT1．0＋NAA3．0;愈伤诱导率达21．21％;分化培养基中,激素6-BA浓度为0．5mg·L^-1KT浓度为2．0mg·L^-1时,籼稻花药的愈伤平均绿苗分化率达到最大,为28．80％;不同的材料其愈伤诱导率和绿苗分化率存在显著差异。     

影响水稻花药培养效率的几个因素

本试验通过对不同的基本培养基、激素配比及基因型材料进行试验。结果表明,不同的基本培养基对花药培养效率有明显差异。M8培养基的愈伤组织诱导率略高于N6培养基,绿苗分化率则明显高于N6培养基。不同的激素配比,其效率各异,M8培养基中添加了2,4－Dmg/L,KT4mg/L和NAA3mg/L的培养基,较适合于水稻花药培养。不同遗传差异的材料是影响愈伤组织诱导、分化的重要因素。不同组合的愈伤组织诱导率的绿苗分化率差异较大。其中零轮／温266、48－2／T984和48－2／零轮等组合的愈伤组织诱导率、绿苗分化率较高,10-35/pecos最低。     

麦芽糖对小麦花粉愈伤组织诱导和分化的影响

通过在小麦花药培养基中添加麦芽糖的试验，发现含有麦芽糖的诱导培养基对小麦花粉愈伤组织的诱导有明显的影响，这种影响不依赖于培养基中麦芽糖的绝对含量，而取决于培养基中蔗糖与麦芽糖的配比（Su/Ma)，麦芽糖9%蔗糖的最适配比浓度为1%-2%，诱导率比对照高126%-138%。诱导、分化培养基中同时附加一定量的麦芽糖，小麦花粉愈伤组织的绿苗分化率明显提高，在本研究的最优组合中，绿苗分化率比对照提高了22.5个百分点。     

低温对小麦花培愈伤组织绿苗分化率的影响

小麦花药培养的技术关键在于提高花粉植株诱导率。花粉植株诱导率由花药愈伤组织诱导率和愈伤组织绿苗分化率共同决定。本试验以12个不同小麦杂交组合的F2代为材料，研究了在转愈初期短期低温处理对小麦愈伤组织绿苗分化率的影响。结果表明，在转愈伤组织初期，采用了4℃和6℃低温培养1～3d能大幅度提高小麦花培愈伤组织绿苗分化率，提高育种效率。     

水稻体细胞培养与无性系变异——Ⅰ,不同基因型不同外植体的培养

对水稻5个品种的种胚和11个品种的幼穗在含不同激素浓度的MS培养基上培养,诱导愈伤组织并再生绿苗。品种间在愈伤组织诱导率、绿苗分化率和对激素的诱导效应表现了基因型差异。幼穗愈伤组织诱导率和绿苗分化率高于种胚。种胚的盾片愈伤组织分化能力高于胚轴,胚芽鞘的未分化得绿苗。去分化培养基添加2,4—D2mg/1+KT0.5mg/1,诱导愈伤组织的效果甚佳,并促进绿苗分化。选择胚性愈伤组织继代培养,种胚的培养270天,幼穗的培养210天,仍有部分品种保持较高的绿苗分化率。     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

采用磁场强度300，500，700mT预处理大部分花粉发育处于单核中期和单核靠边期的花蕾，以提高花椰菜花药培养的愈伤组织诱导率和绿苗分化率，结果表明，磁场预处理可以明显提高愈伤组织诱导率，以均匀磁场预处理30min、磁场强度为300mT的效果较好，提高诱导率28.87%；经过磁场预处理，两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比对照间差异明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低；在同一种诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13.2%-26.2%。     

磁场预处理对花椰菜花药培养的影响

本试验采用磁场预处理提高花椰菜花药培养诱导率，结果表明，磁场预处理可以明显提高诱导率，在均匀磁场中预处理30min，磁场强度以300mT效果较好，提高诱导率27．33％，经过磁场预处理后两种不同培养基的愈伤组织诱导率的差异比未预处理的对照明显缩小，即经磁场预处理的材料对培养基的选择性降低。在同一种诱导培养基上，经磁场预处理后产生的愈伤组织绿苗分化率比对照高4．1％－13．2％，在两种不同培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率的差异更明显，M2培养基上诱导出的愈伤组织绿苗分化率比M1培养基上的愈伤组织平均高13．4％－28．4％。     

粳稻花药培养几种培养基试验报告

我们在1990～1991年作了两年的诱导培养基和分化培养基的对比试验。结果表明,N_6基本培养基附加NAA的N_6-1诱导培养基和附加NAA和2,4-D的N_6-2诱导培养基的愈伤组织诱导率分别为30.3％和25.3％,它比附加2,4-D的常用的N_6。诱导培养基(愈伤组织诱导率为20.5％)高出47.8％和23.4％。NAA和2,4-D混用的N_6-2去分化培养基所诱导出的愈伤组织的器官分化率为最高,其绿苗分化率为57.4％,它比常用的N_5培养基(绿苗分化率为44.8％)高出28.0％。器官分化率最低的是单用NAA的N_6-1培养基,其绿苗分化率为36.4％,比N_6培养基低18.7％。附加NAA的N_6-1和N_6-2培养基的出愈速度和器官分化速度明显快于附加2,4-D的N_5培养基。N_6-1培养基和N_6-2培养基花药接种后18天就能看到愈伤组织,出愈速度要比N_5培养基提早3～5天。在N_6培养基上的形成的愈伤组织转移后10天只有部分绿苗出现,但N_4-1和N_6-2培养基上形成的愈伤组织转移后10天,可分化出1/3的绿苗,甚至转移后3天可以看到不少绿点分化。分化培养基来看,MS培养基的植物体分化效率明显高于N_6培养基,其绿苗率提高到2.5倍。     

提高籼稻恢复系花药培养绿苗分化率的研究

以MS培养基为对照,对比分析M8和N6两种培养基对籼稻恢复系花药培养出愈率的影响,并添加不同质量浓度的山梨醇、活性炭,研究其对愈伤组织绿苗分化率的影响。结果表明,4个籼稻恢复系在M8培养基中均具有最高的出愈率,介于20.97%~30.63%,极显著高于MS培养基;而在N6培养基上,出愈率介于10.77%~13.70%,仅盐恢559和盐恢888显著高于MS培养基。随着山梨醇质量浓度升高,4个籼稻恢复系在M8分化培养基上的花药愈伤组织绿苗分化率增加,以30 g/L山梨醇处理最高,介于30.57%~36.77%,其次为20 g/L山梨醇处理,两者均极显著高于不添加山梨醇处理。随着活性炭质量浓度升高,4个籼稻恢复系在M8分化培养基上的花药愈伤组织绿苗分化率先增加后降低,总体均以1 g/L处理最高,介于21.38%~27.82%,2 g/L处理次之,两者均极显著高于不添加活性炭处理。     

基因型对小麦花药培养的影响研究

为研究基因型如何影响小麦花药培养力,对几组单一亲本相同的组合F1基因型花药培养力进行了比较.结果表明:各组单一亲本相同的组合中,另一亲本的不同对愈伤诱导率、绿苗产率、绿苗分化率及白苗分化率均有很大影响.有的组配愈伤诱导率较低甚至为0,但相同亲本的其他组配却具有较高的愈伤诱导率;绿苗产率与愈伤诱导率基本具有相同的趋势,但有的组配愈伤诱导率较高,绿苗产率则相对较低,说明愈伤诱导率与绿苗产率之间没有显著的规律性.各组组合中,多数组合绿苗分化率高于白苗分化率,也有的组合具有较高的白苗分化率而绿苗分化能力很弱,说明不同组合分化绿苗和白苗的能力有所不同.因此,在花药培养时,应尽量选择绿苗分化率较高、白苗分化率较低的组配.     

内源激素对水稻不同外植体培养力的影响

利用HPLC法对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有差异的几个水稻品种的不同外植体(花药、幼穗、幼胚和成熟胚)及其愈伤组织的内源激素含量进行测定分析。结果表明,内源激素的含量和配比是影响愈伤组织诱导和绿苗分化的关键因素之一。不同外植体中的内源激素对愈伤组织诱导率的表现为:Z ZR呈负效应,IAA呈正效应,GA除成熟胚外呈负效应。愈伤组织中内源激素对绿苗分化率的影响表现为:IAA和GA呈负效应,ABA、Z ZR呈正效应。内源激素的配比对愈伤组织诱导率和绿苗分化率有一定作用,表现为:IAA/Z ZR对愈伤组织诱导率有一定的正效应,Z ZR/IAA、ABA/IAA对绿苗分化率呈显著正相关。     

籼稻花药培养出愈率,分化率和绿苗率的配合力分析

通过对５个籼稻品种（系）配成的５×５双列杂交后代的花药培养出愈率、分化率和绿苗率的分析表明：（１）出愈率、分化率和绿苗率是可遗传的特性，它们的遗传存在基因的加性效应和非加性效应，出愈率和绿苗率还具有明显的胞质效应；（２）一个具有交高出愈率的亲本或组合，其分化率和绿苗率并不一定高，愈伤组织的诱导过程和分化过程可能是由不同基因控制的；（３）在花培育种中，建议建立花培育种亲本圃，结合常规育种技术指导亲本     

‘扎西玛’与‘南粳46’籼粳杂交F_1花药培养及再生体系的建立

为探索籼粳杂交水稻花药培养再生体系,以籼稻‘扎西玛’和粳稻‘南粳46’籼粳杂交F1花药为外植体,分别从低温预处理时间、基本诱导培养基种类、蔗糖质量浓度及不同激素配比方面研究花药愈伤组织诱导,并将诱导出的愈伤组织进行分化成苗,以期构建籼粳地理远源杂交水稻花药培养再生体系。结果表明,4℃处理2~5d的花药,其愈伤组织诱导率较高,与未处理和低温处理6~10d相比达到显著水平;添加蔗糖质量浓度为60g·L-1,以N6或M8为基本培养基均可以获得较高的诱导率;以M8为基本培养基,添加2,4-D 2mg·L-1和KT 0.3mg·L-1诱导水稻愈伤组织出愈率可高达32.14%;以MS为基本培养基,激素组合为KT 2mg·L-1和ABA 3mg·L-1分化培养基,其愈伤组织成苗率可达50%,其中绿苗分化率达4.55%。     

不同小麦基因型及其不同外植体离体培养研究初探

以13个不同基因型、3种不同外植体为材料，选用5种不同培养基，研究了各因素对愈伤组织诱导、分化的影响，并在此基础上建立了一套可靠的小麦组培再生系统。结果表明，愈伤组织的诱导、根的分化和绿苗的再生虽然都具有显著的基因型效应，但不具备显著的相关关系；对于绿苗的再生分化，幼胚优于成熟胚，幼穗和幼胚之间不存在显著的差异；X和A培养基各自在愈僵组织的诱导和再生分化上都明显优于MSS AA／2和R培养基。成熟胚愈伤组织诱导率生根率和绿苗率平均分别可达88.9%、56.3%和8.7%；幼胚愈伤组织诱导率、生根率和绿苗率平均分别可达99.1%、53.2%和17.6%；幼穗愈伤组织诱导率、生根率和绿苗率平均达94.6%、84.8%和18.3%。     

籼稻花药培养出愈率、分化率和绿苗率的配合力分析

通过对５个籼稻品种（系）配成的５×５双列杂交后代的花药培养出愈率、分化率和绿苗率的分析表明：（１）出愈率、分化率和绿苗率是可遗传的特性，它们的遗传存在基因的加性效应和非加性效应，出愈率和绿苗率还具有明显的胞质效应；（２）一个具有较高出愈率的亲本或组合，其分化率和绿苗率并不一定高，愈伤组织的诱导过程和分化过程可能是由不同基因控制的；（３）在花培育种中，建议建立花培育种亲本圃，结合常规育种技术指导亲本选配．     

外源脯氨酸及水分胁迫对籼稻花药培养效率的影响

以5个籼稻杂交组合的F1为试材,详细研究了外源脯氨酸对籼稻花药诱导愈伤组织的影响.同时研究了水分胁迫处理对籼稻绿苗分化率的影响.结果表明,通过添加适量的外源脯氨酸及一定的水分胁迫处理,可以进一步提高花药培养力,降低花培成本,使花培育种更加经济、有效.     

麦芽糖对小麦花粉愈伤组织诱导和分化的影响

通过在小麦花药培养基中添加麦芽糖的试验,发现含有麦芽糖的诱导培养基对小麦花粉愈伤组织的诱导有明显的影响,这种影响不依赖于培养基中麦芽糖的绝对含量,而取决于培养基中蔗糖与麦芽糖的配比(Su/Ma),麦芽糖与9％蔗糖的最适配比浓度为1％～2％,诱导率比对照高126％～138％.诱导、分化培养基中同时附加一定量的麦芽糖,小麦花粉愈伤组织的绿苗分化率明显提高,在本研究的最优组合中,绿苗分化率比对照提高了22.5个百分点。     

不同碳源对小麦花粉愈伤组织诱导及分化的影响

通过蔗糖和麦芽糖两种碳源对小麦花粉愈伤组织诱导及分化影响的研究，在Ｗ１４诱导培养基中（含９％蔗糖）附加适量的麦芽糖对小麦花粉愈伤组织的诱导和分化均有一定促进作用，麦芽糖最适配比浓度为０．５％－１．５％，其愈伤组织诱导率和绿苗分化率分别为对照的１．２０—１．２７倍和２．５－５．６倍，但麦芽糖不能作为唯一碳源完全代替蔗糖的作用。     

基因型及外源因子对小麦花药培养一步成苗的影响

研究了不同基因型及几种外源因子在小麦花药培养一步成苗中的效应。结果表明 ,花药培养一步成苗的愈伤组织诱导率、绿苗分化率、白苗分化率及绿苗产量存在基因型间的差异。高蔗糖浓度有利于获得高频率的花药愈伤组织 ,但同时又提高了花药培养中白化苗频率。动力精 (KT)对花药愈伤组织诱导率影响的差异不大 ,但对绿苗分化率、绿苗产量及绿苗 /白苗 (G/ W)均有显著影响。在试验浓度范围内 ,随 KT浓度的增大 ,绿苗产量提高 ,绿苗分化率明显增加 ,而白苗分化率下降 ,因而 G/ W值明显增大。说明 KT主要是通过提高绿苗分化率和降低白苗分化率 ,增大 G/ W而提高花培一步成苗效率的。在与 KT的配合使用中 ,2 ,4 - D比 NAA更有利于提高小麦花药培养中的愈伤组织诱导率和苗分化频率     

籼稻两用不育系培矮64S再生体系的建立

培矮64S是全国第一个有使用价值的籼稻不育系，由于其具有很多优良性状，在育种工作中得到了广泛的应用，但其愈伤组织诱导困难，再生体系难以建立，不能用于遗传转化，通过对影响愈伤组织诱导的培养基及接种方式的探讨，确定了不育系培矮64S的愈僵组织诱导培养基，使愈伤组织平均诱导率达到56.48%；愈伤组织通过预分化，干燥处理等过程，分化率大大提高，可达到80%以上；同时建立了培矮64S稳定，高效的再生体系。