银杏花粉离体萌发培养基的优化

为优化银杏花粉萌发培养基,采用离体萌发法,通过单因素试验和正交试验分析培养基中不同营养成分对银杏花粉萌发的影响。结果表明:在单因素试验中,蔗糖、硼酸和氯化钙在适宜质量浓度范围内促进花粉萌发,过高质量浓度反而不同程度地抑制花粉萌发;在正交试验中,蔗糖、硼酸和氯化钙对银杏花粉在培养基上离体萌发的影响表现极显著,适宜质量浓度分别为100 g·L-1、10 mg·L~(-1)、40 mg·L~(-1)。     

大叶相思花粉离体萌发适宜条件及活力检测方法

【目的】对大叶相思花粉离体萌发适宜条件以及花粉活力不同检测方法进行研究,为今后进一步开展人工控制授粉、选育优良的马大杂交新品种提供基础。【方法】采回花穗的次日10:00之后,使用毛笔刷法收集大叶相思花粉;通过不同培养温度、不同蔗糖浓度和不同硼酸浓度处理后进行花粉离体萌发,筛选适宜大叶相思花粉离体萌发的条件;采用过氧化物酶法、I_2-KI法以及花粉管离体萌发法对大叶相思花粉进行活力测定,探讨大叶相思花粉有效的活力测定方法。【结果】大叶相思花粉在28℃下培养,其花粉平均萌发率为71.99%,花粉管平均长度为5.3 D(1 D=1倍的花粉粒长度),花粉管平均条数为6.2条,显著高于其他培养温度的处理。当培养基中含有200 g·L~(-1)蔗糖时,大叶相思花粉萌发率为84.96%,其花粉管平均长度为5.8 D,花粉管平均条数为6.2条,显著高于含有其他蔗糖浓度的处理。在含有300 mg·L~(-1)硼酸的培养基中培养大叶相思花粉,其平均萌发率为75.32%,花粉管平均长度可达4.8 D,平均花粉管条数为5.4条,显著高于在其他硼酸浓度下的处理。大叶相思花粉在培养温度30℃、200 g·L~(-1)蔗糖、300 mg·L~(-1)硼酸的培养基中萌发率为98.26%,花粉管长度均可达到10倍复合花粉粒的长度,最多可萌发出10条花粉管,显著高于其他处理。培养3 h的大叶相思花粉,萌发率为65.74%;培养6 h时,其萌发率为90.55%;培养24 h后,其萌发率趋于稳定,达到最高值98.26%。过氧化物酶法检测的花粉活力为99.67%,I_2-KI法检测的花粉活力为99.00%,花粉管离体培养法检测的花粉活力为98.15%,3种方法检测的花粉活力无显著差异。【结论】大叶相思花粉在不同的离体培养处理下,其萌发情况均不相同且差异显著,最佳离体萌发条件为200 g·L~(-1)蔗糖+300 mg·L~(-1)硼酸,培养温度为30℃,萌发率为98.26%。过氧化物酶法、I_2-KI法以及花粉管离体培养法检测的花粉活力无显著差异。研究结果可为今后开展大叶相思的花粉收集、贮藏及活力测定等研究,以及开展人工控制授粉选育优良马大杂种相思新品种等研究提供重要依据。     

3种槭属植物花粉离体萌发适宜条件及活力检测方法

该文以红花槭、元宝枫、糖槭为试验材料,蕾期采集花粉,通过不同培养温度、不同蔗糖和硼酸质量浓度处理后进行花粉离体萌发,筛选其最佳萌发条件。采用TTC法、I2-IK法、过氧化物酶法、亚甲基蓝法以及离体萌发法对3种槭属植物进行活力测定,探讨其有效的活力测定方法。结果表明:红花槭花粉在培养温度28℃,蔗糖75 g/L+硼酸150 mg/L的培养基中萌发率最高为81.95%;元宝枫花粉在培养温度25℃,蔗糖100 g/L+硼酸250 mg/L的培养基中萌发率最高为66.7%;糖槭花粉在培养温度28℃,蔗糖25 g/L+硼酸350 mg/L的培养基中萌发率最高为88.37%。过氧化物酶法与亚甲基蓝法活力测定效果较好,与离体萌发相比差异显著,其余2种染色剂不适合3种槭属植物花粉染色。     

杏和杏梅花粉生活力测定研究

以杏和杏梅的新鲜花粉为试材,采用离体培养法,研究了不同浓度蔗糖、不同浓度硼酸、不同培养时间对杏和杏梅花粉萌发、花粉管生长的影响。结果表明:杏和杏梅最适宜的花粉培养基为蔗糖10 g·L~(-1)+硼酸0.03 mg·L~(-1)+琼脂8 g·L~(-1);在25℃恒温下培养6 h,杏花粉的萌发率达到最高,发芽率为85%,而杏梅花粉的萌发率较低,发芽率为35%。     

西南桦花粉离体萌发的适宜条件与萌发特征

应用各种浓度蔗糖、蔗糖 硼酸培养基于系列温度下开展西南桦花粉萌发对比试验,研究了蔗糖、硼酸浓度对西南桦花粉离体萌发的影响,筛选出适合西南桦花粉萌发培养基的适宜组分和适宜培养温度,并应用4个单株的花粉对其萌发特征进行了初步研究.结果表明:蔗糖基本培养基上添加硼酸能够显著促进西南桦花粉萌发;西南桦花粉离体萌发的合适培养基为15%蔗糖 200 mg·kg-1硼酸,适宜培养温度为30℃;在此条件下培养3 h后花粉萌发率基本稳定,培养7 h后花粉管长度也趋于稳定.     

华中五味子的雄花特征与花粉特性

【目的】通过对华中五味子雄花特征及花粉特性的研究,旨在为华中五味子的传粉生物学研究、系统分类提供参考。【方法】采用体视显微镜和扫描电子显微镜(SEM)对华中五味子雄花不同发育时期(Ⅰ花蕾膨大期、Ⅱ花瓣松动期、Ⅲ花瓣开放期、Ⅳ完全开放期)的花部特征、花粉形态进行研究;利用生物光学显微镜,采用琼脂固体培养基法(培养基中琼脂浓度均为10 g·L~(-1),蔗糖浓度梯度设置为50,100,150,200 g·L~(-1),硼酸浓度梯度设置为0.10,0.15,0.30 g·L~(-1))对花粉离体萌发特性进行研究。【结果】华中五味子蔷薇花冠,成熟时花冠朝向地面,花瓣覆瓦状排列,花瓣内外侧均具不规则纹饰,具气孔,气孔不规则分布;花柄圆柱形,外壁不光滑,具气孔,气孔椭圆形;雄蕊螺旋向上着生于柱状花托上,花丝缩短呈肉质,花药着生于花丝上;雄蕊群呈伞状,雄蕊19~22(26)。花粉扁球形,辐射对称,极观面为6裂圆形,异极,随着花朵的发育,逐渐形成6萌发沟,3长沟在一极形成合沟,3短沟不到极面,长短沟相间排列;花粉外壁具网状雕纹,网眼大小和网脊宽度不一,少数网眼中具模糊颗粒,随着花粉的发育,网眼逐渐加深,网脊变薄,颗粒物被吸收;Ⅰ(花蕾膨大期)、Ⅱ(花瓣松动期)、Ⅲ(花瓣开放期)、Ⅳ(完全开放期)时期花粉直径依次为21.96,23.73,24.00,25.65μm。成熟华中五味子花粉在10 g·L~(-1)琼脂+100 g·L~(-1)蔗糖+0.10 g·L~(-1)硼酸的培养基中,萌发率最高,达到92.6%,花粉管长度最长,达454.30μm;蔗糖浓度对花粉萌发率和花粉管伸长生长存在极显著影响,硼酸浓度对花粉的萌发率影响显著,但对花粉管长度生长影响不显著。【结论】华中五味子花冠形态、花粉形态既具有虫媒传粉特征,亦具有风媒传粉的特点;研究结果认为华中五味子为风媒、虫媒同时传粉植物,主要传粉方式、传粉途径有待进一步研究;华中五味子花粉离体培养的最佳固体培养基为10 g·L~(-1)琼脂+100 g·L~(-1)蔗糖+0.10 g·L~(-1)硼酸,培养基成分对花粉萌发影响显著;花粉萌发率高,在传粉受精过程中,花粉竞争优势明显。     

小黑杨花粉离体萌发和细胞学分析

采用花粉离体培养法,研究不同的液体培养基组分、温度、pH值对小黑杨花粉萌发的影响。结果表明:在单因子试验中,蔗糖、H3BO3和CaCl2在一定的浓度范围内对小黑杨花粉萌发及花粉管生长起促进作用,但超过一定浓度时则起抑制作用,温度和pH值也是如此。在正交试验中,蔗糖、H3BO3、CaCl2、温度和pH值对小黑杨花粉萌发均有极显著的影响,小黑杨花粉萌发最适的培养基为150g·L-1蔗糖+20mg·L-1H3BO3+40mg·L-1CaCl2,在21℃和pH6.0条件下,花粉的萌发率可以达到46.23%,花粉管生长状态良好。细胞学观察结果表明:小黑杨成熟花粉为2-细胞型,随着培养时间的延长,花粉萌发率逐渐提高,花粉管不断伸长。     

4种植物生长调节剂对板栗离体花粉活力的影响

以萘乙酸、赤霉素、吲哚丁酸和硼酸作为影响板栗花粉活力的调节剂,研究其不同浓度下板栗离体花粉萌发的效果。结果表明:适宜浓度的调节剂对花粉萌发均能起到促进作用,但效果存在差异,其中硼酸较吲哚乙酸和萘乙酸的促进效果更显著,4种调节剂适宜浓度分别为150mg·L~(-1)硼酸、15mg·L~(-1)吲哚丁酸、75mg·L~(-1)赤霉素、15mg·L~(-1)萘乙酸。     

植物生长调节剂对核桃楸离体花粉萌发的影响

以萘乙酸、赤霉素、吲哚丁酸和硼酸作为调节剂,探索不同质量浓度对离体核桃楸花粉萌发的影响。结果表明:这4种植物生长调节剂对核桃楸花粉萌发均能起到促进作用,但作用效果与浓度相关,适宜浓度分别为:150 mg·L~(-1)硼酸、75 mg·L~(-1)赤霉素、15 mg·L~(-1)萘乙酸、20 mg·L~(-1)吲哚丁酸,其中硼酸的促进效果最佳。     

油松花粉离体萌发培养基及花粉贮藏条件研究

花粉生活力对油松杂交育种至关重要.为筛选油松花粉离体萌发培养基,探讨不同温度贮藏下花粉的生活力,采用正交试验设计,研究不同水平蔗糖、硼酸和pH值对油松花粉离体萌发的影响;测定不同温度贮藏下油松花粉萌发率随时间的动态变化.结果表明:油松新鲜花粉在蔗糖100 g·L-1、硼酸0.10 g·L-1、琼脂8 g·L-1、pH值...     

培养基类型及贮藏温度对文冠果花粉离体培养萌发效果的影响分析

在文冠果杂交育种的过程中,一个至关重要的因素即为花粉的萌发活力,为了对花粉活力的影响因素进行研究,特开展了不同培养基类型、贮藏温度对文冠果花粉离体培养萌发效果的探究,结果表明,蔗糖100 g·L^-1、硼酸0.1 g·L^-1、硝酸钙0.25 g·L^-1、pH值6.0的培养基处理下文冠果花粉萌发率为90.7%,效果最好,在贮藏7 d的情况下,贮藏温度-80℃下萌发率为87.3%,效果最佳。     

耐冬山茶花粉储藏条件及其活力的动态变化

以山东青岛耐冬山茶花粉为试验材料,采用离体培养基法研究了花粉的萌发特性,并探讨了不同贮藏温度与贮藏时间对花粉萌发率和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响.结果表明:耐冬山茶花粉萌发的最适宜培养基为:150 g·L-1蔗糖+0.05 g·L-1硼酸+100 mg·L-1GA3+ 900 g·L-1Ca(NO3)2;花粉最佳贮藏温度为-80℃;-80℃贮藏360 d后,花粉萌发率仍达到原来的58.19％,3种保护酶活性较高,花粉抗氧化、衰老能力较强;贮藏过程中,3种保护酶活性出现最高峰值前后花粉萌发率出现大幅度下降;不同贮藏温度下,3种保护酶的作用不同,室温下POD、CAT为敏感性保护酶,4℃下SOD为敏感性保护酶,-20℃、-80℃下CAT为敏感性保护酶;3种保护酶活性对花粉萌发率的影响依次为:SOD＞ POD＞ CAT.     

5种油桐花粉数量及花粉萌发率的测定

以LF96、LF62、S2、LF79和LF99油桐花粉为试验材料,研究了花药内花粉数量和花粉立体培养萌发率。结果表明:5种油桐单花花粉平均数量分别为9 070粒、6 120粒、10 600粒、16 203粒和12 870粒;5种油桐花粉萌发最适培养基条件为0.1 g·L~(-1)硼酸+100 g·L~(-1)蔗糖+10 g·L~(-1)琼脂,且LF79和LF99花粉萌发率最高,分别为86.75%和82.75%。     

培养基成分对平榛花粉离体萌发的影响

以平榛花粉为试验材料,采用花粉离体培养法研究了培养基组分蔗糖、硼酸、硝酸钙不同浓度对平榛花粉萌发和花粉管生长的影响,从而找到适合平榛花粉离体萌发的最佳培养基组分。结果表明:蔗糖、硼酸、硝酸钙在一定浓度范围内可促进平榛花粉的离体萌发,超过该范围则会抑制花粉的萌发,筛选出较适宜平榛花粉离体萌发的培养基成分为蔗糖15%+硼酸0.01%+硝酸钙0.015%。     

凤丹牡丹鳞芽离体培养与快繁技术

【目的】研究建立凤丹牡丹离体快繁技术体系,为油用牡丹优良单株无性快繁与新品种培育开拓新途径。【方法】早春从不同单株采集鳞芽外植体,置于WPM+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+GA_3 0.2 mg·L~(-1)培养基中离体培养,根据启动诱导率及增殖系数,筛选适宜离体培养的单株,并对最优单株展开深入研究;在增殖阶段,采用单因子和随机区组试验设计,研究WPM培养基中Ca(NO_3)_2浓度和植物生长调节剂(PGRs)(6-BA,GA_3,NAA,KT及TDZ)配比对增殖的影响,获得最佳增殖培养基及其PGRs组合;在诱导生根阶段,采用单因子试验设计,研究冷处理时间和IBA浓度对生根率及生根质量的影响,获得最佳生根培养方案;根据生根质量划分生根苗等级,并观察移栽成活率。【结果】1)凤丹牡丹启动培养存在基因型差别,供试的17个高结实单株中有7个诱导率≥50%、增殖系数≥2.50,适宜进行离体培养,其中单株FD10表现最佳(诱导率100%、增殖系数4.58),被用于研究建立离体快繁技术体系;2)对培养基中Ca_2+浓度与PGRs对增殖影响的研究结果表明,最佳增殖培养基及其PGRs组合为WPM[Ca(NO_3)21 544 mg·L~(-1)]+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+GA_3 0.2 mg·L~(-1),以40天为继代周期,增殖系数为3.87,共继代6次;3)对冷处理天数与IBA浓度对生根影响的研究表明,无根苗先在根诱导培养基(1/2 MS+IBA 2.0 mg·L~(-1)+腐胺1.0 mg·L~(-1))上培养30天(其中前8天进行4℃冷处理),再转入生根培养基[1/2 MS(CaCl_2加倍)+活性炭4.0 g·L-1]培养20天后生根率达56.67%;4)把生根苗按生根质量分为1～3级,其中1级苗占比84%,2级和3级苗占比分别为12.5%和3.5%,移栽至基质泥炭土+蛭石+珍珠岩(体积比1∶1∶1)中,60天后发现愈伤组织少的1级苗成活率达66.67%,而愈伤组织发达的2级和3级苗则死亡,表明生根质量对移栽成活至关重要。【结论】凤丹牡丹离体快繁技术必须建立在基因型选择的基础上,本研究初步建立优株FD10的离体快繁技术体系,确定其最佳增殖培养基为WPM[Ca(NO_3)_2 1544 mg·L~(-1)]+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+GA30.2 mg·L~(-1);最佳生根培养方案为1/2 MS+IBA 2.0 mg·L~(-1)+腐胺1.0 mg·L~(-1),诱导初期冷处理8天;1级生根苗移栽60天后成活率达66.67%。     

翠竹花粉的活力及储藏效果研究

[目的]以南京林业大学竹种园内开花的翠竹花粉为试验材料,研究在不同条件下花粉的活力和储藏效果,为翠竹杂交育种的生产实践提供基础理论数据。[方法]利用花粉离体培养法研究花粉在不同培养基组分、不同采样时间、不同温度及储藏条件下的萌发特性。[结果]翠竹花粉在不同浓度配比的培养基中萌发率差异显著,以10%蔗糖+0.01%H3BO3+0.06%CaCl_2·2H_2O培养基上培养2.5 h花粉萌发率最高;一天之中以上午9:00的花粉萌发率最高;翠竹花粉离体萌发适合的温度范围较宽,在26 30℃内花粉都有较高的萌发率。随着储藏时间的延长,翠竹花粉萌发率逐渐下降;不同储藏方式对花粉的萌发率有较大的影响,在储藏过程中未经干燥处理的花药的花粉萌发效果好于干燥后的,4℃低温保存下花粉萌发率相对较好,可延长花粉的储藏寿命,96.0 h后仍保有活力。[结论]翠竹花粉在10%蔗糖、0.01%H3BO3、0.06%CaCl_2·2H_2O的培养基中萌发效果最好,萌发适宜的温度范围是2630℃,在储藏过程中低温不干燥的环境有利于延长花粉寿命。     

水仙花粉离体萌发温度和培养液研究

采用花粉液体培养法研究温度和培养液(蔗糖浓度、B 、Ca2 )对3个栽培水仙品种花粉萌发的影响。结果表明,适宜水仙花粉萌发的温度为15~25℃;当蔗糖浓度为100~150g.L-1时,花粉具有较高的萌发率;外源B 浓度为10~20 mg.L-1时有利于花粉萌发;外源Ca2 作用不稳定。     

白花树花粉生活力检测方法与贮藏特性研究

以江西吉水种源的白花树花粉为研究材料,进行了扫描电子显微镜下的花粉形态结构观察以及采用离体培养基法、I2-KI和TTC染色等花粉生活力测定方法的比较研究,探讨了不同贮藏条件对花粉萌发的影响。研究结果表明：白花树花粉粒为长球型,具3孔沟,外壁面具细网状纹饰;花粉平均极轴长52.33±0.577 μm,平均赤道轴长26.89±0.502 μm;3种花粉生活力测定方法中以离体培养基法最有效,花粉萌发的最佳组合为：10%蔗糖+0.05 g·L-1硼酸+100 mg·L-1 GA3+3 h;花粉最佳贮藏条件为-80 ℃密封保存,贮藏180 d后花粉的萌发率仍可达40.97%。     

赤皮青冈离体花枝培养及花粉活力研究

赤皮青冈是重要的乡土珍贵树种,通过离体花枝培养获取花粉对其良种培育、储备林建设意义重大。以0.5%的蔗糖溶液、多元素营养液和自来水为培养液,在室内培养不同发育阶段的赤皮青冈离体花枝获得的花粉和野外自然散粉收集的花粉进行花粉活力测定。结果表明:用蔗糖溶液培养比野外自然散粉早15天采集的离体花枝,可收集到花粉;用多元素营养液和蔗糖溶液培养比野外自然散粉早10天采集的离体花枝,均可收集到花粉;用蔗糖溶液、多元素营养液和自来水培养比野外自然散粉早5天采集的离体花枝,均可获得花粉。室内培养收集的花粉与野外自然散粉收集的花粉活力无显著差异。室内离体花枝培养获得的花粉较野外自然散粉收集的花粉耐储藏,自然散粉花粉储藏10天萌发率为37.0%,离体花枝收集的花粉储藏10天萌发率为45.3%;两种花粉储藏2周萌发率均为0%。温度25℃、培养基中蔗糖浓度100 g/L和硼酸浓度300 mg/L是赤皮青冈花粉培养的适宜条件。提前采集赤皮青冈待散粉花枝,通过离体培养获得的花粉与自然散粉花粉的萌发率和花粉活力无显著差异,但离体花枝培养获得的花粉较耐贮藏。     

日本海棠花粉最佳离体萌发培养基筛选及萌发过程研究

为给观赏海棠杂交育种提供参考依据,采用单因素和正交试验方法,对日本海棠花粉离体萌发培养基进行了筛选,对其花粉活力展开了研究,探讨并观察了观赏海棠花粉离体萌发条件和花粉萌发过程。单因素试验结果表明:当蔗糖、硼酸、硝酸钙的处理浓度分别为10%、0.02%(其萌发率与0.04%浓度处理的无显著差异)、0.02%(其萌发率与0.01%浓度处理的无显著差异)时,日本海棠的平均花粉萌发率及花粉管长度最高值分别达到55.2%与853.11μm、54.4%与595.07μm、37.6%与713.74μm,显著高于同一试验因素下的其余各处理。正交试验结果表明:10%蔗糖+0.02%硼酸+0.04%硝酸钙的组合培养基为日本海棠离体萌发的最适培养基,以此培养基培养的日本海棠其平均花粉萌发率与花粉管长度分别达到70.1%和777.02μm,显著高于除以(10%蔗糖+0.01%硼酸+0.03%硝酸钙)组合培养基处理以外的其他组合培养基处理。在日本海棠花粉离体萌发过程中,培养第1个小时内花粉未萌发,培养2~4 h的花粉萌发率和花粉管生长速率均达到最高值,分别达23.4%/h及259.01μm/h,培养8 h后,其萌发速率趋于平稳,培养12 h后,其花粉管生长速度趋于平稳。研究结果表明,日本海棠离体萌发的最佳培养基为(10%蔗糖+0.02%硼酸+0.04%硝酸钙)组合培养基,以此组合培养基培养2~4 h其花粉萌发率与花粉管生长速率均最高。