刺五加愈伤组织诱导的研究

研究了不同培养基、激素和外植体对刺五加愈伤组织诱导的影响,结果表明：在旺盛生长期获取的叶片可以在附加植物激素的BZ培养基上以较高频率诱导出愈伤组织,诱导率为41.58%。刺五加组织培养的适宜外植体为叶片和当年生根,适宜基本培养基为BZ(改良培养基),且适合刺五加愈伤组织诱导和继代培养的激素组合为ZT0.2+NAA2.0+GA31.5。     

中籼898成熟种子胚愈伤组织诱导及其再生体系的建立

本文以水稻成熟种子为材料,研究了影响其盾片诱导、愈伤组织诱导及其分化的主要因素,建立了籼稻愈伤组织及其再生体系.结果表明,2,4-D的浓度不仅影响愈伤组织的数量也影响愈伤组织的质量;不同浓度的NAA、6-BA影响成苗率;最适生根培养基为1/2MS IBA0.5.     

籼稻YTB成熟种子的预处理对愈伤组织诱导的影响

通过对籼稻YTB成熟胚种子储存时间、预处理温度、消毒等预处理措施的系统试验,优化了愈伤组织诱导的种子预处理方法.精选当年产的新种子,于50℃去休眠48 h,只采用1.5％的次氯酸钠溶液消毒3次,每次15 min的消毒方法,即可达到提高愈伤组织诱导率的目的.简化后的消毒步骤,避免了酒精对种子内部结构的损伤,减少了氯化汞对环境的污染.     

燕麦愈伤组织的诱导

以白燕2号为材料,研究了不同的外植体、培养基比例和外植体的放置方式对燕麦愈伤组织诱导的影响,以及最有效的消毒方法。试验结果表明,外植体最有效的消毒方法是采用75%酒精消毒1min后无菌水冲洗,再用30%的次氯酸钠溶液消毒40min(间隔20min换1次);诱导培养基中2,4-D最适浓度为3mg/L;燕麦种子是较理想的外植体,接种时将种子盾片朝下放置直接接触培养基,会得到更高更理想的出愈率。     

大麦成熟胚胚性愈伤组织的高频诱导和植株再生

大麦成熟胚的初代愈伤组织是水质、柔软的非胚性愈伤组织，在继代培养中能以一定频率出现胚性愈伤组织。本文研究了基因型、有机添加物和胚切割等因素对大麦胚性愈伤组织诱导频率的影响。结果表明：供试的１０个大麦品种在胚性愈伤组织诱导率和植株再生率上有显著差异；培养基中添加水解酷蛋白、Ｌ－脯氨酸以及提高维生素Ｂ１和肌醇的浓度可以促进胚性愈伤组织的形成；胚芽段比全胚或胚根段更易形成胚性愈伤组织。胚性愈伤组织转入无     

宁前胡愈伤组织诱导初探

以野生宁前胡根、茎、叶为外植体对其愈伤组织诱导进行了初步研究,以期为野生宁前胡高效快速繁殖和种质资源保护提供依据.结果表明:叶片愈伤组织诱导最佳条件为NAA 0.5 mg/L+TDZ 0.05 mg/L,最高诱导率为95.56％,黑暗或低光照度以及叶片远轴面接触培养基有利于叶片愈伤组织的形成,出愈最早时间为8d;茎段愈伤组织诱导最佳条件为NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,最高诱导率达80.00％;根愈伤组织诱导最佳条件为NAA0.5 mg/L+6-BA2.0mg/L或2,4-D 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L,最高诱导率达78.89％.     

八仙花花药培养诱导愈伤组织

建立花药离体培养再生体系是获得单倍体的重要途径之一.先以八仙花花蕾为试材,研究花粉发育时期与花蕾和花药形态特征的相关性;然后再以3个品种八仙花花药为外植体,研究花粉发育时期、基因型、不同激素种类及浓度配比对花药诱导愈伤组织的影响.结果 表明,尚未开放的可孕花花蕾为粉紫色且有深紫色痕迹时,不孕花花萼全部着色,花粉发育处于单核靠边期,以此时期花药为外植体,其愈伤组织诱导率最高,可达36.7％;最适宜的花药愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L,愈伤组织为黄绿色致密结构,培养50d左右时质量最优;3个品种之间有显著的基因型差异,品种'Lanarth'在6种培养基中的花药愈伤组织诱导率均低.本研究结果为获得单倍体及八仙花的新品种培育提供一种新的途径.     

韭菜愈伤组织诱导条件优化的研究

本试验利用韭菜种子胚根为外植体诱导愈伤组织并继代培养的方法，研究了激素配比对韭菜愈伤组织的培养和继代的影响。结果表明，MS＋NAA（1mg／L）＋6-BA（2mg／L）适宜胚根诱导愈伤组织并进行继代培养，生长激素的合理搭配有利于韭菜快速形成愈伤组织。     

大葱成熟胚愈伤组织诱导及植株再生

为了建立大葱组培高频再生体系,以‘铁杆大葱’的成熟胚为材料,探讨培养基种类、植物生长调节剂浓度等因素对大葱成熟胚愈伤组织诱导及再生的影响。结果表明,MS培养基适合大葱成熟胚愈伤组织诱导,大葱成熟胚愈伤组织诱导最适宜的培养基为MS+2,4-D (2~3 mg/L)。大葱成熟胚愈伤组织分化培养最适培养基为MS+6-BA (1.0 mg/L)+KT (1.0 mg/L)+NAA (0.1 mg/L),分化率达90%;对分化的再生苗移植于1/2 MS培养基上进行生根及壮苗培养,生根率达到100%,炼苗移栽后小苗的成活率达到90%以上。本研究为进一步优化大葱再生体系提供了依据,为后续大葱的遗传转化的研究起了推动作用。     

紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化研究

以紫花苜蓿SANDITI无菌苗下胚轴、茎、叶3种不同外植体,在附加不同激素浓度的MS培养基上诱导愈伤组织。结果表明,SANDIT最佳外植体为下胚轴,最佳下胚轴愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5mg/L。15 d继代1次,或适当降低2,4-D浓度,提高6-BA或KT浓度,可以降低愈伤组织褐化率。愈伤组织在6-BA0.5 mg/L,NAA 0.1 mg/L,GA31.0 mg/L,YE 250 mg/L,CH 250 mg/L的MS培养基上,可获得较高的分化率。     

比克氏棉及其杂种后代的RAPD分析

 将（亚洲棉×比克氏棉）F₁加倍,再与陆地棉、海岛棉、（陆地棉×夏威夷棉）、（陆地棉×黄褐棉）杂交,获得三种杂种与四种杂种。本研究用RAPD技术对种间杂种及其亲本进行了分析,结果表明：（1）15个引物对参试材料总共扩增出127条DNA带,其中有102条多态性带,占80.3 %;（2）在杂种中均检测到了亲本带与杂种的特异带;（3）利用SAS软件中的类平均法对试验材料进行聚类分析,结果表明,所有的参试材料聚为三大类。研究结果充分验证了杂种的真实性。     

大白菜胞质雄性不育线粒体基因特异分子RAPD标记及克隆

用随机引物对大白菜细胞质雄性不育系及其保持系线粒体DNA的RAPD分析,在不育系与保持系的线粒体基因组间存在明显的差异,用引物S259在不育系中扩增并克隆得到特异片断(mt)S259~600bp,序列分析表明该片断与油菜线粒体基因NADH脱氢酶第四亚基序列有部分相似性,片段与雄性不育的关系还需进一步研究。     

龙眼种质资源的RAPD分析

利用RAPD技术对龙眼的95份种质资源和一份荔枝种质资源进行研究。从200条随机引物中筛选出18条多态性引物,共扩增出197条带,DNA扩增带的多态性为100%,这表明96份材料的遗传多样性和遗传资源的丰富性。利用SPSS13.0统计软件对RAPD表型数据矩阵进行分析。根据欧氏距离（ED）法计算各样品间的遗传距离,采用UPGMA（类平均法）,进行分析,建立亲缘关系聚类树状图。结果表明,RAPD标记能在分子水平揭示龙眼的遗传背景与亲缘关系     

刺五加的无菌发芽研究

为了克服刺五加种子的深休眠特性,我们切开层积处理和未经层积处理的刺五加种子后,培养在添加了0、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mg/L BA的MS和1/2MS培养基中进行无菌发芽试验.结果表明,层积处理是刺五加种子萌发的必须条件,切去子叶端1/3后,使培养7、14、21 d的发芽率分别由5.0%、42.5%和72.5%提高到34.0%、69.1%和90.1%.BA显著促进了刺五加种子的萌发.10g/L蔗糖处理的发芽率显著高于0和30g/L处理的发芽率.MS和1/2MS培养基的发芽率间无显著差异.     

菊花芽变和相似品种的RAPD分析

本实验在形态学分析的基础上,采用5对中国传统菊花的芽变品种和2组形态相似品种,运用随机扩增DNA多态性（random amplified polymorphic DNA,RAPD）分子标记方法对其进行了品种鉴定。通过反复试验,建立了稳定的RAPD反应体系;从22个20碱基随机引物中筛选出4个高效引物,扩增出13条带,扩增的多态性片段多在501～1000bp之间,其中有2个引物（ch1．21和ch1．25）能将试验中的7组材料全部清楚地区分开。研究结果表明：4个高效引物的RAPD分析能够有效地将选定的样本区分开。因此作者提出RAPD分析方法可以应用到菊花芽变及相似品种鉴定中。这就为进一步开发更多RAPD随机引物,开展菊花的品种鉴定和保护工作提供了参考资料。     

RAPD技术在花卉育种中的应用

从品种鉴定、系统分类、种质资源研究、遗传多样性分析、亲缘关系分析、基因定位和遗传图谱构建等方面系统阐述了随机扩增多态性DNA(RAPD)在花卉育种研究中的应用,并对RAPD技术的优缺点和今后的应用进行了阐述与展望     

白魔芋种质资源的RAPD分析

白魔芋原产于中国,是魔芋属中品质最优的种,种内资源类型丰富,为进一步分析各类型或产地间的亲缘关系,应用RAPD分子标记技术,用40个随机引物（10-mer）对34份白魔芋种内资源基因组DNA进行PCR扩增,有11条引物能够在34份材料中扩增出112条稳定的带,其中有93呈多态性。用dps软件对扩增产物进行聚类分析,根据聚类结果将34份材料划分为5类,通过与叶柄斑纹比较分析,发现各类与叶柄斑纹关系不紧密,而有较为明显的地域相关性,该结果为深入了解白魔芋种内资源的亲缘关系,提供了分子水平的依据     

茯苓栽培菌株的RAPD分析

笔者应用RAPD分子标记技术对14个茯苓栽培菌株进行遗传多样性分析,以期探究茯苓栽培菌株间的亲缘关系,为茯苓菌株的鉴别及育种提供DNA依据。研究中应用9个RAPD引物对茯苓栽培菌株进行RAPD分析,筛选出4个RAPD引物,扩增出21条比较明显的条带。利用21条扩增带对14个菌株进行聚类分析,获得14个茯苓栽培菌株亲缘关系树状图。结果显示在53%的相似值时,14个茯苓栽培菌株可分为2大类群,而在93%相似值时可分为13个类群。     

外源DNA导入高粱及其后代的RAPD分子验证

研究发现高梁自花授粉后，利用其形成的花粉管通道，将热带高梁的DNA导入寒带高梁后，导入后代在许多方面表现出了明显变异，同时对导入后代进行了随机扩增多态性DNA（简称RAPD）分子验证，表明供体DNA片段已进入受体。从而说是了利用花粉管通道进行外源DNA直接导入高梁，进行种质创新和品质改良是可行的。     

十种栽培苦荞麦的随机扩增多态性DNA(RAPD)研究

采用RAPD方法对国内十种栽培苦荞麦的基因型进行分析，建立了它们的指纹图谱。从60个随机引物中筛选出的6个有效引物共产生44条DNA片段，大小分布在0．1-2．0Kb之间，其中18个条带具有遗传多态性，约占总数的40．90％，平均每个引物扩增的DNA带数为7．33条。十种栽培苦荞麦的遗传相似性分析表明，各基因型之间的J相似性系数分布在0．8525～0．9846之间，平均相似性系数为0．9185。应用NTSYS-pc软件进行聚类，将聚类结果转化为十种栽培苦荞麦基因型之间的遗传关系树型图。十种栽培苦荞麦基因型聚为A、B、C三类，A类包括六苦1号、六苦2号、定98-1、西农9909、黔威3号和九江苦荞6个栽培种，B类包括六盘水野生苦荞、昭苦1号和滇宁1号3个栽培种，C类仅为六苦3号1个栽培种。