香蕉胚性愈伤组织的诱导及胚性细胞悬浮系的建立

分别以3个香蕉品种的多芽体茎尖和5个香蕉品种的未成熟雄花为外植体,诱导产生胚性愈伤组织．结果分别从2个基因组类型为AAA的品种的多芽体茎尖和未成熟雄花获得了胚性愈伤组织,而未能从基因组类型为AAB或ABB的香蕉品种中获得胚性愈伤组织．胚性愈伤组织的诱导率受基因组类型、品种和培养条件等因素的影响．以上述4个品种的胚性愈伤组织为起始材料成功建立了胚性细胞悬浮系,不同香蕉品种,从其胚性愈伤组织建立胚性细胞悬浮系的难易程度有所不同．     

新疆长绒棉胚性细胞悬浮系的建立

通过对新疆长绒棉（Ｇ．ｂａｒｂａｄｅｎｓｅＬ．）胚性意伤不同生长时期、不同继代时间的比较与选择，确定了胚性愈伤进行悬浮培养的适宜生理状态；通过对悬浮液不同成分的选择、比较与改良，确定了悬浮液适宜的组成及悬浮条件；建立了新疆长绒棉新海３号、新海７号、２８２、Ｋ２５３、军海１号５个品种的胚性细胞悬浮系。     

大蒜胚性细胞悬浮系的建立

以中牟 5号大蒜根尖为外植体 ,在 1 1种固体培养基上诱导愈伤组织 ,筛选出最佳培养基MS + 2 ,4-D 0 .5mg/L和MS + 2 ,4-D 2 .0mg/L +KT 0 .5mg/L。愈伤组织形成后在上述1 1种培养基上继代 3～ 4次 ,获得胚性愈伤组织后再转至液体培养基中 ,经强化培养 3个月后获得胚性细胞悬浮系。试验结果表明 :缩短换液时间 (每隔 3～ 4天换液 1次 ) ,可加快胚性细胞悬浮系的建立     

刺槐胚性细胞悬浮体系的建立1）

以刺槐（ Robinia pseudoacacia L．）未成熟合子胚为外植体材料,通过对外植体取材时期、基本培养基营养物质质量浓度、细胞起始密度、2,4－二氯苯氧乙酸（2,4－D）质量浓度等影响悬浮培养的因素的研究,建立了良好的刺槐胚性细胞悬浮系。研究结果表明：授粉后55 d的未成熟合子胚是为刺槐细胞悬浮培养提供胚性愈伤组织的最佳起始材料;添加有2．5 mg· L－1 NAA和0．5 mg· L－16－BA的1／2MS培养基为刺槐细胞悬浮培养的最适培养基;建立悬浮系的最适pH值范围在5．0～5．7;起始质量为2．0 g的悬浮系统其生长量增速较快,且细胞保持持续增长;当起始质量为3．0 g时,培养16 d后细胞进入缓慢增长期,且生长量有回落的趋势,起始质量为1．0 g时,细胞增殖速度非常缓慢,且容易出现褐化死亡的现象。     

水稻香系103成熟胚培养及胚性悬浮细胞系的建立

[目的]为优质稻米种苗培育及种质资源保护提供参考。[方法]以曲阜香稻新品系103的成熟种子为材料,取其成熟胚接种在MS1培养基中诱导胚性愈伤组织,选取松脆性胚性愈伤组织建立悬浮细胞系。[结果]初始愈伤组织呈深黄色、瘤状、质地紧密、生长旺盛、易分化出芽,但难以进行细胞悬浮培养;在MS2培养基中继代培养120d后,愈伤组织呈浅黄色、颗粒状、松脆型胚性愈伤组织;松脆型胚性愈伤组织在悬浮培养基中继代培养2～3次后,不断释放出小细胞团和单细胞,用300目不锈钢网对培养液进行过滤,滤液培养120d可建立起浅黄色、澄清、均一的胚性悬浮细胞系。[结论]建立了分散性好、生长快的水稻胚性悬浮细胞系。     

粳型超级稻胚性细胞悬浮系的建立及植株再生

以北方粳型超级稻沈农265成熟胚为材料,对其胚性悬浮细胞系建立与植株再生进行了研究.结果表明,弱光下培养20 d,有利于成熟胚诱导出质量较好的愈伤组织,这些愈伤组织在添加2,4-D(3.0 mg/L)和脯氨酸(500 mg/L)的N<,6>固体培养基上进行状态调整后,可获得适于悬浮培养的胚性愈伤组织.悬浮培养时适宜的2,4-D浓度为2～3 mg/L;起始接种量以20 mg/mL的效果较好;最佳继代时间是7 d.悬浮细胞团先经固体继代培养获得愈伤组织小块,再将愈伤小块干燥处理2 h后进行分化,可显著提高植株再生率,愈伤组织绿点分化率和成苗率分别达58.6%和27.2%.     

快速建立胚性细胞悬浮系的培养程序初探

为了缩短建立胚性细胞悬浮系的进程，快速获得松脆胚性愈伤组织，以普通小麦，大麦和多花黑麦草为材料，采用能促进植株再生的高浓度铜离子作为毒害筛选因子，以MSD培养基为基本配方，2．5mg/L的2，4－D浓度，不同梯度浓度的铜离子处理愈伤组织。结果表明，0．1mmol/L的Cu^2 对愈伤组织具有较好的筛选作用，能使松脆胚性愈伤组织保存下来，而其它类型愈伤组织褐化死亡，产生的松脆性愈伤组织能很快适应悬浮培养，从而使快速建立胚性细胞悬浮系。用密实细胞体积及其斜面高度评价细胞悬浮系的特点，发现悬浮细胞不仅具有很强的生长势，提高了愈伤对营养缺乏的忍受度，而且保持了高分化潜能的胚性。     

玉米细胞悬浮系的建立与单细胞培养效果

以330、辽7352和丹340共3个玉米自交系的雄幼穗为外植体获取愈伤组织,建立悬浮细胞系,在改良MS、改良B5、改良1/2B5 培养基中进行细胞悬浮培养。试验中发现 ,基因型和培养基对细胞悬浮系有很大影响,其中供试材料330表现最好,圆形细胞率平均达16.5%,改良1/2B5 培养基有利于细胞悬浮培养,500mg·L-1的水解酪蛋白对悬浮细胞生长有促进作用。2,4 -D的浓度影响悬浮细胞的生长和细胞成活率,浓度为1.0～2.0mg·L-1时比较适宜。细胞悬浮培养5～7d继代1次。在悬浮培养1个月后 ,经400目镍网过滤筛选,获得单细胞。单细胞培养中,激素水平和培养方式影响单细胞的分裂率,其中2,4-D的浓度为0.5～1.0mg·L-1时比较适宜。浅层培养和看护培养有利于单细胞的生长。在单细胞培养过程中试验获得了愈伤组织。     

胡杨悬浮细胞系的建立

[目的]建立快速稳定生长的胡杨(Populus euphratica Oliver)细胞悬浮系,为进一步制备胡杨原生质体及林木抗旱耐盐体细胞杂交育种研究奠定基础.[方法]以胡杨胚性愈伤组织为材料,建立胡杨悬浮细胞系,利用正交试验法优化悬浮细胞系的培养条件,在优化培养条件下测定细胞的生长特性.[结果]以胡杨胚性愈伤组织成功地建立了胡杨悬浮细胞系,正交优化试验表明:MB+0.1 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+50 g/L蔗糖+300mg/L CH+146 mg/L Gln为最优培养基组合,接种量为30 g(FW)/L时,干重增长速率最高,达 2.44 g/(L·d).胡杨悬浮细胞系生长曲线基本呈S形,生长周期为10 d,其中3～7 d为对数生长期.在一个生长周期内,培养液pH变化趋势是先下降,后上升并逐渐趋于平稳.[结论]在上述优化培养条件下,胡杨悬浮细胞系干重增长速率最快,细胞生长状态最佳.     

栝楼细胞悬浮系的建立

[目的]为了解决栝楼悬浮细胞系在继代培养中容易退化,生长速度减慢的问题。[方法]以栝楼的茎为外植体诱导出愈伤组织,筛选出质地疏松、生长迅速、易于分散、可以长期进行继代培养的淡黄色半透明状愈伤组织系,将该愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡悬浮培养,建立起分散程度好的栝楼悬浮细胞系。同时对影响愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养的条件进行研究,确定适合愈伤组织生长的条件及影响细胞悬浮培养的主要因素。[结果]看护培养可以使栝楼悬浮培养细胞长势良好,并在低密度下获得由单细胞形成的细胞系。[结论]该悬浮系的建立为栝楼细胞大规模培养,进而实现有效药物成分的工业化生产奠定了理论基础。     

氮磷肥对岷山红三叶草产量和品质的影响

[目的]研究氮磷肥施用量对岷山红三叶草产量和品质的影响。[方法]以岷山红三叶为试材,采用裂区试验设计,施氮肥为主区,设4个水平(0、50、100、150 kg/hm2),施磷肥为副区,设4个水平(0、120、240、360 kg/hm2),分别测定不同氮磷肥料及其组合处理的红三叶草的分枝数、茎叶比(LSR)、干鲜比(DFR)、鲜草和干草的产量。[结果]A2B4(N50 kg/hm2、P2O5360 kg/hm2)处理的红三叶草分枝数最多。获得较高LSR和DFR的N、P肥最佳配比分别为A3B4(N100 kg/hm2、P2O5360 kg/hm2)和A3B1(N 100 kg/hm2、P2O50kg/hm2)。施肥量分别为A2B4(N50 kg/hm2、P2O5360 kg/hm2)和A2B2(N50 kg/hm2、P2O5120 kg/hm2)时,鲜草和干草的产量最高。[结论]P肥施用量对岷山红三叶的草产量和品质无显著影响,N肥施用量对岷山红三叶草产量和品质影响较大。     

扁穗雀麦对白三叶和红三叶的化感作用研究

以扁穗雀麦为供体,白三叶和红三叶为受体,采用培养皿滤纸法,研究扁穗雀麦茎叶和根提取液对受体种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,扁穗雀麦茎叶提取液对两种豆科牧草的发芽率有抑制作用,且随浓度的升高,抑制作用增强。25 g/L茎叶提取液的低浓度处理对两种三叶草的苗高有促进作用,且差异显著;所有提取液处理对其根长均表现为抑制作用。50 g/L根提取液对白三叶发芽率、苗高、根长均有较强的促进作用,但抑制红三叶的苗高和根长生长。各提取液对两豆科牧草幼苗鲜干重表现一致,均为抑制作用。同浓度处理下,白三叶对扁穗雀麦化感作用的敏感程度大于红三叶。     

三叶草对重金属镉的富集特性研究

研究了不同质量浓度镉胁迫下三叶草对重金属的富集特性.结果表明,在试验所设定的镉质量浓度范围内,三叶草的根、茎、叶各部均未出现明显的镉毒害症状,说明三叶草对镉胁迫有一定的耐受性.在不同质量浓度镉胁迫下,三叶草根、茎、叶各部的镉含量均出现了不同程度的变化,不论是地上部分或是地下部分,其富集系数均随着镉质量浓度的增加呈现下降...     

香蕉胚性悬浮细胞系建立过程中非胚性成分的去除

[目的]研究香蕉胚性悬浮细胞系建立过程中非胚性成分的去除方法。[方法]以巴西蕉的花蕾进行诱导培养后,运用孔径在250~500μm的不锈钢筛网进行过滤,并用倒置显微镜对培养物进行实时观测。[结果]运用孔径在250~500μm的不锈钢筛网能够有效去除悬浮细胞系中的褐化坏死组织和分生组织小球,但如果在悬浮细胞系诱导后3 d立即进行去除,则易使之后胚性细胞的增殖变得困难;如果在悬浮细胞系诱导后14 d左右去除,则褐化坏死组织释放的酚类物质很容易损伤并杀死正在增殖的胚性细胞。悬浮细胞系诱发后7 d是一个比较恰当的过滤去除时间点。[结论]在培养的过程中,将悬浮细胞系定期放置在倒置显微镜下进行观察,用移液器能将液泡化的细胞和胚去除。在操作前,需将倒置显微镜放置在超净工作台内,用紫外线长时间照射进行表面灭菌。这样即可以将悬浮细胞系中的非胚性成分过滤去除,又能预防感染。     

水稻胚性悬浮细胞系建立的细胞学研究

胚性悬浮细胞是禾谷类作物原生质体培养的理想材料。本文研究了水稻广亲和中粳品系02428胚性悬浮细胞系建立过程中的细胞学动态变化,结果表明:建成的胚性悬浮细胞系(后期悬浮细胞系)和前、中期悬浮细胞系相比较,细胞团内细胞结合紧凑,细胞壁簿,细胞质浓厚,颗粒状内含物丰富,细胞活力强,质膜凹陷较浅,较平整,质膜强度高。本研究结果从细胞学角度初步探讨了水稻胚性悬浮细胞系适应于原生质体培养的机理。     

梅花根际土壤栽培三叶草的丛枝菌根侵染研究

从北京、武汉、南京、重庆、昆明五个梅园和野梅主要分布区的云南嵩明、四川木里、贵州茂兰自然保护区,以及北京林业大学的梅圃中分别于春、夏、秋、冬四季,采集梅花根际土壤300份。以梅花根际土壤和蛭石体积为1∶1混合作为栽培基质,种植三叶草,培养4个月后,应用染色镜检法测定丛枝菌根真菌(AMF)侵染三叶草根系的状况。结果表明:所有梅花根际土壤栽培三叶草都有丛枝菌根侵染;野生梅花根际土壤栽培三叶草的丛枝菌根侵染率高于人工梅园;四季的梅花根际土壤栽培三叶草丛枝菌根侵染在季节间无明显差异。     

Study on Cell Suspension Culture of Floribunda Rose

Friable callus was induced when immature seeds of floribunda rose were inoculated on MS medium supplemented with 2,4-D 3.0 mg.L^-1. When transfered onto subculture media, friable callus developed into embryogenic callus, which was used to establish cell suspension lines. Cell suspensions had to be subcultured at a interval of 4-5 days at the first several culture cycles. The best subculturing cycle for the stable cell suspensions was 8-10 days. The best inoculum quantity was 1 mL PCV（Packed Cell Volume） per 40 mL culture fluid.