丙烯酰胺对小鼠成体神经发生及增殖相关基因的影响

【目的】探讨丙烯酰胺对成年小鼠海马成体神经发生及增殖相关基因的影响,为了解丙烯酰胺的毒性机理提供参考。【方法】将20只10周龄雄性成年昆白小鼠(体质量(30±2)g/只),随机均分为丙烯酰胺染毒组和生理盐水对照组,丙烯酰胺染毒组通过腹腔注射丙烯酰胺进行染毒,注射剂量为50mg/kg,连续注射14d,第15天注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU,50mg/kg,2次/d,共3d),观察2组小鼠体质量及行为活动的变化。用BrdU标记和免疫组织化学染色方法分析丙烯酰胺染毒对小鼠齿状回神经干细胞数量的影响,用RT-PCR法研究丙烯酰胺对小鼠海马增殖相关基因JNK3、Akt1、Gsk-3β、RhoA和Rac1mRNA表达的影响。【结果】丙烯酰胺染毒组小鼠体质量极显著低于对照组,精神萎靡、后肢无力,走路时后肢偶成劈叉姿势;与对照组相比,丙烯酰胺染毒组小鼠齿状回亚颗粒细胞层中的BrdU阳性细胞数量极显著降低(P0.01),海马组织中JNK3和Rac1的mRNA表达量显著升高(P0.05),Akt1、Gsk-3β和RhoA的mRNA表达量极显著升高(P0.01)。【结论】丙烯酰胺中毒能显著抑制小鼠齿状回中成体神经干细胞增殖,可使海马组织中增殖相关基因JNK3、Akt1、Gsk-3β、Rac1和RhoA的表达量发生明显变化。     

白消安注射法建立昆明小鼠精原干细胞移植受体模型

【目的】通过对6周龄昆明小鼠腹腔内单次注射不同剂量的白消安来制作精原干细胞移植受体模型。【方法】将104只昆明小鼠随机分成4组,分别注射0(对照组,注射等量的白消安溶解液二甲基亚砜(DMSO)),10,20和30mg/kg白消安,于注射白消安后5,7,9,11和13周记录小鼠的死亡数、小鼠睾丸外观体积、小鼠睾丸质量和小鼠体质量,计算睾丸指数;通过组织学观察注射不同剂量白消安后小鼠曲细精管精子的恢复情况,并检测受体小鼠血液中红细胞和白细胞数量的变化。【结果】注射0(对照组),10,20和30mg/kg白消安13周后,小鼠死亡率分别为0(0/22),11.54%(3/26),17.86%(5/28)和89.29%(25/28)。10mg/kg白消安组小鼠的睾丸指数在注射后5,7和9周显著小于对照组(P0.05),而在注射后11和13周,与对照组差异不显著(P0.05);在注射后不同时间,对照组和10mg/kg白消安组的睾丸指数均显著高于20mg/kg白消安组(P0.05)。在注射白消安5,7,9,11和13周后,对照组曲细精管上皮无变化;10和20mg/kg白消安组有完整精子发生的曲细精管占总曲细精管的百分比分别为(49.56±8.23)%,(66.61±6.13)%,(80.24±10.42)%,(93.87±3.23)%,(92.49±4.58)%;(8.73±9.22)%,(9.89±6.39)%,(29.21±12.31)%,(49.64±3.59)%和(81.99±4.98)%。受体小鼠红细胞和白细胞数量均随着处理时间及白消安处理剂量的变化而变化。【结论】腹腔内注射20mg/kg白消安小鼠的死亡率、睾丸指数均较低,中空的曲细精管数量多,且恢复较慢,适于做精原干细胞移植的受体,合适的移植时间是白消安处理后5~7周。     

亚精胺诱导小鼠卵巢组织氧化损伤的作用

【目的】探讨亚精胺对小鼠卵巢组织形态、抗氧化功能和氧化损伤的影响.【方法】采用不同质量分数亚精胺(0.05、0.10、0.15 mg/g)腹腔注射6周龄昆明小鼠,分别于24、48 h后采集卵巢样品,研究亚精胺对小鼠卵巢组织形态,CAT活性和MDA含量,CAT、SOD、NQO1和HO-1基因表达的影响.【结果】0.05 mg/g亚精胺处理组与对照组小鼠卵巢形态无明显差异,0.10 mg/g亚精胺组小鼠卵巢组织中部分卵泡形态和颗粒细胞排列不规整;0.15 mg/g亚精胺处理24 h时,卵巢颗粒细胞排列紊乱,部分卵泡卵母细胞皱缩,小鼠卵巢CAT活性极显著低于对照组(P<0.01),而MDA水平极显著高于对照组(P<0.01);0.10、0.15 mg/g亚精胺处理48 h时,小鼠卵巢CAT活性显著低于对照组(P<0.05);0.15 mg/g亚精胺组小鼠卵巢组织CAT、SOD、NQO1和HO-1基因表达量均显著高于对照组(P<0.05).【结论】0.15 mg/g亚精胺可通过抑制CAT活性,降低卵巢抗氧化能力,诱导小鼠卵巢组织脂质过氧化,进而造成小鼠卵巢组织氧化损伤.     

染料木素对性成熟前小鼠卵巢卵泡发生动力学的影响

【目的】旨在探究染料木素对性成熟前小鼠卵巢卵泡发生动力学的影响，为畜牧生产尤其是种猪饲养过程豆粕型日粮的合理饲喂以及黄酮类替抗产品的科学应用提供参考。【方法】将40只21日龄昆明小鼠随机分为4组，其中对照组处以0.1 mL的溶剂（含5%DMSO的玉米油），试验组分别处以等体积不同浓度的染料木素（25 mg/kg、50 mg/kg和100 mg/kg），连续腹腔注射7 d。处理结束后，对部分小鼠进行PMSG-HCG促排并记录输卵管壶腹部的卵子数量，评估卵巢排卵潜能；剩余小鼠采集卵巢制成组织切片进行HE染色，统计分析卵巢内各级卵泡生长和闭锁状态。【结果】输卵管壶腹部成熟卵子数统计显示，染料木素处理组的卵子数量较对照组均显著增加（P<0.05），其中50 mg/kg染料木素组卵子排出数量最多，且显著高于25 mg/kg和100 mg/kg剂量组（P<0.05），而25 mg/kg和100 mg/kg剂量组之间差异不显著（P>0.05）。卵泡计数结果显示，染料木素处理组生长卵泡总数较对照组均无显著差异，但健康生长卵泡显著高于对照组（P<0.05），闭锁生长卵泡则反之（P...     

复方中药的健脾及减肥降脂作用研究

【目的】研究自制复方中药对肥胖模型小鼠的减肥、降脂和健脾作用。【方法】构建小鼠肥胖模型,成功后将其分为模型对照组(灌胃蒸馏水0.2 mL/(只.d))、阳性对照组(灌胃6.5 mg/mL西布曲名溶液0.2mL/(只.d))和药物组(灌胃复方中药浸膏0.3 mL/(只.d)),同时设立普通对照组(处理方法同模型对照组),20 d后检测分析其李氏指数、体质量增长率、脂肪系数和血脂水平等指标的变化情况,记录各组小鼠抗疲劳试验的游泳时间及其活力表现,并取肝脏组织提取总RNA,用RT-PCR方法检测脂肪酸合酶(FAS)基因的表达量。【结果】药物组李氏指数、体质量增长率、脂肪系数及血清甘油三酯、总胆固醇和高密度脂蛋白-胆固醇水平与模型对照组相比均显著降低(P<0.05),游泳时间明显长于3个对照组(P<0.05),脂肪酸合酶基因mRNA表达量高于模型对照组而低于普通对照组。【结论】供试复方中药具有显著的减肥降脂和健脾作用。     

中药催情散的急性和亚慢性毒性研究

【目的】研究中药催情散对小鼠的急性毒性和对大鼠的亚慢性毒性,为催情散在奶牛持久黄体治疗中的应用提供参考。【方法】制备1g/mL(以生药计)的催情散药液,选取60只小鼠,随机分为6组,其中5个急性毒性试验组分别按20 000,16 000,12 800,10 240和8 192mg/kg剂量一次性灌服催情散药液,对照组灌服等体积自来水,连续观察7d,记录中毒症状和死亡数并计算半数致死量(LD50);另取20只小鼠随机分为给药组和对照组2组,给药组于12h内分3次给小鼠灌胃1g/mL催情散药液,每次灌胃体积为每20g体质量0.8mL(最大灌胃体积),对照组灌服等体积自来水,连续观察7d,记录中毒症状、死亡数并确定最大耐受量;取40只大鼠,随机分为催情散高、中、低剂量给药组和对照组,给药组分别按10 000,5 000和2 500mg/kg剂量灌服给药,对照组灌服等体积自来水,连续灌服30d,灌药前和灌药第7,14,21,28和30天称量大鼠体质量、检测血常规和血液生化指标、测定脏器系数并观察组织病理学变化情况。【结果】急性毒性试验各剂量组均无小鼠死亡,故无法计算LD50;小鼠对催情散的最大耐受量为120g/kg,表明该受试药物无毒。亚慢性毒性试验中,各给药组大鼠体质量、血常规、血液生化指标和脏器系数与对照组相比差异不显著(P0.05);病理剖检和组织切片观察发现,除了由于心脏采血导致部分心肌纤维出现坏死和间质血管出血外,其他各器官组织未见明显异常变化。【结论】中药催情散实际无毒,临床按推荐剂量使用不会对奶牛产生毒害作用。     

泰山松花粉多糖对小鼠免疫增强作用的研究

【目的】研究泰山松花粉多糖对健康小鼠免疫功能的增强作用以及对免疫抑制小鼠的免疫恢复作用。【方法】用改进的水提醇沉法提取泰山松花粉粗多糖。取清洁级昆明小鼠(雌性)160只,随机分为8组,3个多糖组(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ),3个环磷酰胺(Cytoxan,CTX)-多糖组(Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ),另外2组为CTX对照组(Ⅶ)和正常对照组(Ⅷ)。Ⅰ、Ⅳ组多糖注射剂量为400mg·kg-1,Ⅱ、V组多糖注射剂量为200mg·kg-1,Ⅲ、Ⅵ组多糖注射剂量为100mg·kg-1,从第1天连续皮下注射7d;Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ组于第1天每只每次腹腔注射75mg·kg-1CTX,隔1天注射一次,共计3次;Ⅷ组皮下注射生理盐水。第8天,所有小鼠腹腔注射1头羽份的ND冻干苗,分别在免疫后3、10和15d采取血液、脾脏和小肠,用β微量法检测血清抗体、全自动血细胞分析仪测定外周血淋巴细胞比率、流式细胞术检测脾淋巴细胞转化率,ELISA法检测小肠IgA含量。【结果】Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组各指标均显著高于Ⅷ组(P0.05),其中Ⅰ、Ⅱ组与Ⅷ组相比差异极显著(P0.01)。Ⅳ、Ⅴ组极显著高于Ⅶ组(P0.01),Ⅵ组显著高于Ⅶ组(P0.05),Ⅳ组结果与Ⅷ组差异不显著。并且免疫后10d的各组显著高于免疫后3d的各对应组(P0.05),与免疫后15d的差异不显著。【结论】泰山松花粉多糖能提高正常小鼠和免疫抑制小鼠的抗体水平、血液淋巴细胞比率、脾脏淋巴细胞转化率以及小肠IgA含量,200mg·kg-1剂量的效果即非常显著,400mg·kg-1剂量能使CTX诱导的免疫抑制完全恢复到正常水平。     

龙胆苦苷抗急性肺损伤活性研究

【目的】在脂多糖(LPS)致小鼠急性肺损伤(ALI)模型上评价龙胆苦苷抗急性肺损伤的活性。【方法】健康雄性成年SPF级昆明小鼠40只,随机分为4组:假手术组、ALI模型组(气管滴入脂多糖LPS 5 mg/kg)、阳性药物对照组(腹腔注射氢化可的松3.3 mg/kg,每日1次,连续3 d,24 h后气管滴入LPS 5 mg/kg)、龙胆苦苷组(腹腔注射龙胆苦苷20 mg/kg,每日1次,连续3 d,24 h后气管滴入LPS 5 mg/kg)。在气管滴入LPS后24 h处死动物,检测肺系数、支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞计数和肺组织病理变化。【结果】阳性药物对照组和龙胆苦苷组小鼠肺系数明显低于ALI模型组(P0.05),阳性药物对照组和龙胆苦苷组比较差异无统计学意义。ALI模型组小鼠BALF中炎症细胞及中性粒细胞比例明显高于假手术组(P0.01),阳性药物对照组和龙胆苦苷组明显低于ALI模型组(P0.01),阳性药物对照组明显低于龙胆苦苷组(P0.05)。假手术组小鼠肺组织结构基本完整,肺泡腔内无渗出物和炎细胞,ALI模型组肺泡上皮细胞大量增生,肺泡壁增厚,肺间质、肺泡腔内可见大量炎细胞浸润,部分肺间质发生实变,阳性药物对照组和龙胆苦苷组肺组织炎症病理明显减轻。【结论】龙胆苦苷能够明显减轻脂多糖致ALI小鼠肺组织炎症反应程度,具有较好的抗急性肺损伤活性。     

姬松茸多糖对肾损伤小鼠血清中尿素氮和肌酐含量的影响

研究了姬松茸多糖对肾损伤小鼠血清中尿素氮和肝酐含量的影响。48只健康小鼠随机分为3组:健康对照组、病理模型组及多糖组。健康对照组不做任何处理;病理模型组及多糖组按0.15 mL/只,均腹腔注射庆大霉素,连续10 d,其中多糖组同时灌喂8%姬松茸多糖0.1 mL/只。在实验第10天,每只小鼠分别摘眼球取血并分离血清,测定小鼠血清中尿素氮和肌酐的含量。结果表明:病理模型组小鼠血清尿素氮和肌酐的含量与健康对照组相比,差异极显著(P0.01),说明肾病理模型制造成功。而多糖组与病理模型组相比,小鼠血清尿素氮和肌酐的含量显著低于模型组(P0.05)。本试验表明,连续10 d给小鼠腹腔注射0.15 mL的硫酸庆大霉素可以成功建立肾病理模型;而姬松茸多糖具有保护肾功能的作用。     

1,8-桉叶油素亚慢性中毒对小鼠血液生化指标的影响

【目的】研究1,8-桉叶油素亚慢性中毒对小鼠体质量、血常规及血液生化指标的影响。【方法】将160只体质量15~17g的小鼠随机分为4组,每组40只,分别灌胃剂量为192.45,64.15,21.38mg/kg的1,8-桉叶油素和体积分数0.5%吐温-80水溶液(对照组),每组按10g体质量0.2mL给药,1次/d,连续灌胃染毒90d,分别于给药第30,60,90天和停药后30d测定小鼠体质量、血常规和血液生化指标。【结果】与对照组相比,64.15和21.38mg/kg 1,8-桉叶油素在试验期间对小鼠的体质量、血常规及血液生化指标的影响均无统计学差异(P0.05);192.45mg/kg 1,8-桉叶油素在灌胃60和90d时,对小鼠的血常规和血液生化指标有不同程度的影响,多数指标与对照组差异显著(P0.05);停药后30d,1,8-桉叶油素各剂量组的血常规和血液生化指标与对照组差异不显著(P0.05)。【结论】1,8-桉叶油素对小鼠有亚慢性毒性作用,其有害作用剂量(NOAEL)为64.15mg/kg,损害作用最低剂量(LOAEL)为192.45mg/kg;1,8-桉叶油素对小鼠血液生化指标的影响在短期内是可逆的。