山羊辅助生殖技术

辅助生殖技术(ART)在山羊的繁育中具有重要作用.因为操作简单和成本低,同期发情和人工输精是使用最广泛的辅助生殖技术.由于结果具有不可预见性,超数排卵和胚胎移植(MOET)使用的并不十分广泛.使用经内窥镜从有价值的母畜采集的卵母细胞有助于提高MOET的结果并扩大其应用范围.胞质内精子注射(ICSI)技术能够利用精子作为载体生产转基因动物,以及使用无运动能力的冻干精子.转基因和克隆技术可以显著影响今后的山羊繁育,但是需要提高技术的效率.     

From signals to patterns: space, time, and mathematics in developmental biology

We now have a wealth of information about the molecular signals that act on cells in embryos, but how do the control systems based on these signals generate pattern and govern the timing of developmental events? Here, I discuss four examples to show how mathematical modeling and quantitative experimentation can give some useful answers. The examples concern the Bicoid gradient in the early Drosophila embryo, the dorsoventral patterning of a frog embryo by bone morphogenetic protein signals, the auxin-mediated patterning of plant meristems, and the Notch-dependent somite segmentation clock.     

一株鹅副粘病毒分离株的增殖最佳条件及其致病性研究

为了探讨鹅副粘病毒在鸡胚中增殖的最佳条件及其致病性,将不同血凝滴度的鹅副粘病毒分别接种于9～11日龄鸡胚尿囊腔,收获孵化36、48、60、72和84 h的鸡胚尿囊液,测定血凝滴度。结果表明将血凝价为1∶64的鹅副粘病毒稀释50倍后,接种9日龄鸡胚,37℃培养48～72 h获得的尿囊液血凝价可达1∶256～1∶512,平均尿囊液量可达9.4 mL/胚。动物试验表明增殖获得的鸡胚尿囊液具有较强的致病性,将该尿囊液接种10日龄鸡胚和颈部皮下注射21日龄非免疫雏鹅,结果接种后鸡胚于30～48 h全部死亡。雏鹅平均死亡时间为62.6 h。特征性剖检病变为脾脏肿大,有灰白色坏死点;胰脏出血,有灰白色坏死点;肠道出血,溃疡;病料分离培养的病毒液HA价高达28,能凝集鸡红细胞,并出现解凝现象。     

透明质酸对绵羊卵母细胞体外成熟与早期胚胎发育的影响

[目的]探讨不同浓度透明质酸对绵羊卵母细胞的体外成熟和早期胚胎发育效果的影响。[方法]以绵羊卵母细胞为试验材料,分别在绵羊卵母细胞体外成熟和体外胚胎培养液中添加0、1.5、3.0、4.5 mg/ml的透明质酸（HA）,研究其对绵羊卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响。[结果]当HA浓度为1.5和3.0 mg/ml时,绵羊卵母细胞的成熟率分别为72.54%和62.17%,显著高于对照（P〈0.05）。当HA浓度介于1.5～3.0 mg/ml时,HA对绵羊卵母细胞体外成熟有促进作用。当HA浓度为1.5 mg/ml时,绵羊卵母细胞的卵裂率和囊胚率均显著高于对照组与其他组（P〈0.05）,囊胚细胞总数显著高于其他各组（P〈0.05）。这说明HA可以促进绵羊卵母细胞的早期胚胎发育。[结论]HA不仅可以促进绵羊卵母细胞成熟,而且在细胞分化中也会起作用。当HA浓度为1.5 mg/ml时,最有利于绵羊的早期胚胎发育。     

莪术油注射液鸡胚接种抗新城疫病毒的研究

[目的]探讨莪术油对新城疫病毒的抑制和杀灭作用。[方法]用鸡胚培养法和血凝试验,测定莪术油对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用。[结果]莪术油对鸡胚无毒性作用;莪术油与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。[结论]结果为莪术油在兽医临床上的应用提供了理论依据。     

栽培亚麻×野生亚麻种间杂交胚胎发育的研究

为探讨亚麻种间杂交不易亲和的原因并采取相应有效的克服措施,本试验以栽培亚麻和野生亚麻为材料,采用单次授粉、重复授粉和重复授粉+生长调节剂3种杂交技术,通过胚珠整体染色与透明法,结合微分干涉衬显微镜观察,对栽培亚麻×野生亚麻杂交授粉后胚乳及胚的发育进行了较为系统的研究。结果显示:单次授粉多数胚囊内未形成正常的胚乳及胚,重复授粉和重复授粉+生长调节剂处理后胚囊内可形成胚乳及胚,但发育进程比对照(栽培亚麻自交)较为滞后。用生长调节剂处理子房,能刺激子房膨大,延缓子房脱落,有利于形成杂交种子。由此可见,重复授粉+生长调节剂处理是克服亚麻种间杂交不亲和性的有效措施。     

玉米成熟胚和茎尖愈伤诱导及其植株再生能力比较

以3种不同基因型的成熟胚和茎尖两种不同外植体为材料，对它们的愈伤组织诱导，继代培养和分化进行了研究。结果表明：玉米的成熟胚和茎尖愈伤诱导率相关，但两种外植体诱导出的愈伤组织状态明显不同，茎尖诱导出的愈伤组织状态普遍比成熟胚的好；两种外植体的愈伤分化率差异明显，成熟胚愈伤组织最高分化率为2．13％，茎尖愈伤组织最高分化率可达21.2％。     

小麦胚愈伤组织的诱导和植株再生

对3个小麦品种的成熟胚及幼胚进行培养，研究不同基因型、培养基对愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明，不同培养基对小麦愈伤组织诱导有一定影响；不同基因型的小麦愈伤组织诱导、分化及生根的能力有一定差别。陕280愈伤组织诱导率及分化率最高。同一品种不同外植体经诱导后愈伤组织产生的能力有所不同，同一品种愈伤组织的诱导率幼胚比成熟胚愈伤组织的高。     

马尾松离体胚组织培养初报

本文首次报道了从马尾松离体胚诱导丛生芽苗的试验结果。试验结果发现丛生芽苗的形成必需有适当浓度比例的BA和NAA,二者缺一不可。离体胚在MS+BA0.5～1.0mg/l+NAA0.2mg/l的培养基中,从子叶上分化出的丛生芽生长状况最佳。离体胚在MS+BA0.6mg+GA0.2mg的培养基中,萌芽率最高,苗的长势最佳。     

莲瓣兰原生地萌发胚培养真菌污染的控制

以莲瓣兰杂交种子原生地共生萌发突破种皮后的胚为材料,研究氯化汞浓度、灭菌时间及超声波处理时间对莲瓣兰胚培养过程中真菌污染控制及胚成活情况的影响。结果表明,莲瓣兰杂交种子原生地共生萌发突破种皮后的胚灭菌过程中氯化汞浓度越高、灭菌时间和超声波处理时间越长,胚培养过程中真菌污染率越低,但是对胚造成的损伤程度高、胚成活率低。较适宜的灭菌方法是氯化汞浓度0.20%、灭菌时间10～15min、超声波处理时间4～6min,胚污染率控制在15.0%以内,胚成活率达到80.0%以上。     

不同层积条件下老山芹种子形态后熟的研究

以老山芹种子为试验材料,研究低温及变温层积处理对种子形态后熟过程影响,为揭示老山芹种子休眠机理,终止种子休眠提供依据。结果表明,两种层积处理种胚胚长、胚宽、胚剖面面积及胚率等指标均随层积时间延长不断增加,而胚附近胚乳空腔面积在层积过程中随着种胚逐渐增大而减小;变温层积处理效果优于低温层积处理。变温层积可加速老山芹种子后熟过程,缩短种子休眠时间。     

南方地区无核葡萄胚挽救及其取样时间研究

[目的]探讨无核葡萄品种离体培养的培养条件,并确定最佳取样时期.[方法]选取南方无核葡萄品种中5个自然授粉胚珠和4个杂交组合的胚珠为试材,通过形态学观察确定取样时间,探索适宜南方无核葡萄品种的胚挽救程序.[结果]适宜火焰无核×寒香蜜、碧香无核、火焰无核、奥迪亚无核等的胚挽救程序为授粉后30 ～40 d剥取胚珠接种在ER培养基,暗培养90d,取胚转入WPM培养基上成苗.[结论]该研究可为提高幼胚离体发育和萌发成苗率提供科学依据.     

NaCl胁迫对海滨木槿种子萌发及Na~+、K~+含量的影响

[目的]探索不同浓度NaCl处理对海滨木槿种子萌发及种皮和种胚中Na+、K+含量的影响。[方法]用NaCl浓度分别为0、50、100、150、200mmol/LNaCl的1/4Hoagland营养液培养材料,培养5、10d后以FP-640火焰分光光度计测定种皮和胚中的Na+、K+含量;培养15d后,将含有NaCl的营养液未萌发的种子分别转入1/4Hoagland培养液继续培养,测定解除盐胁迫后种子萌发的恢复率。[结果]随着培养液中NaCl浓度的升高,海滨木槿种子的萌发率逐渐降低,在NaCl浓度为200mmol/L时种子的萌发率最低。种皮和胚中Na+含量随着培养液中NaCl浓度的升高和处理天数的延长而增大;在相同的盐浓度下,胚中Na+含量明显低于种皮。随着培养液中NaCl浓度的升高,种皮中K+含量逐渐升高,胚中K+含量逐渐降低,但胚中K+含量明显高于种皮。种皮和胚中Na+/K+随着NaCl浓度的升高而增大,胚中Na+/K+明显低于种皮。[结论]海滨木槿的种皮是阻挡Na+进入种子的一道屏障;NaCl处理下胚保持较高含量的K+和较低的Na+/K+可能是海滨木槿种子耐盐的主要原因之一。     

鸡胚破骨细胞的分离培养与鉴定

从18日龄鸡胚长骨（股骨和胫骨）中机械分离破骨细胞于盖玻片和骨片上培养,以建立鸡胚破骨细胞体外培养方法。结合倒置相差显微镜、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色、甲苯胺蓝染色及透射电镜（TEM）和扫描电镜（SEM）对其形态和功能进行观察鉴定。结果表明,直接分离的细胞具有典型的破骨细胞的形态特点：属多核大细胞,TRAP染色阳性,能在骨片表面形成吸收陷窝。结论：鸡胚长骨机械分离法可获得一定数量并具有骨吸收活性的破骨细胞。     

油菜籽三种氨基酸含量的胚、细胞质和母体遗传效应分析

利用8个油菜品种进行完全双列杂交,采用包括胚、细胞质和母体植株遗传效应的二倍体种子数量性状遗传模型和统计分析方法,分析油菜(Brasstca napus L.)饼粕谷氨酸、甘氨酸和精氨酸含量的遗传效应、遗传率和遗传相关.结果表明,除了未发现精氨酸的细胞质效应外,油菜籽饼粕中谷氨酸、甘氨酸和精氨酸性状的表达均受到胚、细胞质和母体植株遗传效应的控制.谷氨酸和甘氨酸性状的表现是以母体遗传效应为主,但精氨酸性状的胚和母体遗传效应相近.3种氨基酸的母体遗传率大于胚遗传率或细胞质遗传率,且均以母体加性效应和细胞质效应为主,因此对这些性状进行选择可望取得较好的效果.3种氨基酸之间的相关性是以胚显性正相关(rp)为主,但母体加性(rAm)或显性(rDm)负相关也较为明显.     

红丁香引种栽培条件下种子败育的解剖学研究

为确定红丁香在北京城区引种栽培条件下种子败育发生的时期,对其有性生殖过程进行了形态和胚胎发育解剖观察。授粉试验显示,北京市植物园引种栽培的红丁香人工自花授粉及去雄套袋授粉均未坐果,人工异花授粉坐果率为31.86%,天然授粉坐果率为8.32%,表明栽培条件下红丁香自交不育,传粉媒介不足导致坐果率低,但是各种授粉方式均未获得种子。胚胎发育过程解剖观察显示:红丁香花药壁发育为基本型,腺质绒毡层,胞质分裂为同时型,2-细胞成熟花粉;倒生胚珠,单珠被,薄珠心,胚囊发育为蓼型,核型胚乳,胚发育类型为紫菀型,先后形成球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚;但后期子叶胚发育停滞,其细胞逐渐降解,随后胚乳细胞也出现降解。可见,栽培条件下红丁香大小孢子及雌雄配子体发育、传粉受精过程、胚胎发育初期均正常,但后期胚、胚乳均发育停止,是红丁香引种栽培条件下种子败育的关键环节,其原因有待进一步研究。      

The centrosome in cells and organisms

The centrosome acts as the main microtubule-nucleating organelle in animal cells and plays a critical role in mitotic spindle orientation and in genome stability. Yet, despite its central role in cell biology, the centrosome is not present in all multicellular organisms or in all cells of a given organism. The main outcome of centrosome reproduction is the transmission of polarity to daughter cells and, in most animal species, the sperm-donated centrosome defines embryo polarity. Here I will discuss the role of the centrosome in cell polarity, resulting from its ability to position the nucleus at the cell center, and discuss how centrosome innovation might have been critical during metazoan evolution.     

532 nm激光辐照对白菜幼苗维生素C含量的影响（摘要）

[目的]探讨532 nm激光选育高维生素C白菜的可行性。[方法]以白菜为实验材料,采用不同功率密度（2、6、10、14和20 mW/mm~2）和不同辐照时间（1、2、3、4和5 min）的Nd：YAG倍频激光对白菜种子胚进行辐照,研究激光作用方式对白菜幼苗功能叶片面积、叶绿素和维生素C含量的影响。功能叶片面积的测定：培养10 d时,取每颗白菜上最大的叶片,利用复印称重法对其面积进行测定,即将白菜叶片用激光复印机复印,沿叶片边缘剪下,准确称量其质量;用直径1.46cm的打孔器打50个纸圆片,算出单位面积纸张的质量（g/cm~2）,计算后得出叶面积。叶绿素含量的测定：每组取白菜叶片10 g,以2 ml磷酸缓冲溶液（50 mmol/L,pH≈6.8）将其研磨成均质。吸取上清液40μl,注入1.5 ml的Eppendorf管中,再加入960μl的无水乙醇,置于4℃黑暗条件下30 min,然后于4℃下以1 000 r/min离心15 min。以质量分数为95%的乙醇做空白对照,利用U-2800分光光度计（日立）分别测定待测液的A_（665）和A_（649）,由叶绿素总量=6.10×A_（665）＋20.04×A_（649）来计算其含量。Vc含量的测定：利用库仑滴定法测定Vc含量,即在预电解后的电解池中准确加入2.0 ml样品溶液,开动搅拌器,按下库仑仪工作键进行10 mA恒电流电解,滴定终点时指示灯亮,记录电解所消耗电量,通过法拉第定律计算Vc含量。[结果]激光辐照功率为2～20 mW/mm~2时,功能叶片面积和叶绿素含量与激光辐照功率、作用时间有关。适当辐照功率、短时间激光处理白菜种子对功能叶片面积表现为刺激效应,当较高功率密度激光辐照时间超过一定阈值（为4 min）时,激光处理表现出抑制效应。短时间激光处理白菜种子对叶绿素含量表现为刺激效应,当激光辐照时间超过一定阈值（5 min）时,激光处理表现出抑制效应,其中以14 mW/mm~2激光预处理白菜种子1 min的效果最佳。激光辐照功率密度为2～10 mW/mm~2时,白菜Vc含量随辐照时间增加而增加;辐照功率密度为14和20 mW/mm~2时,白菜Vc含量与辐照时间呈正态分布,白菜Vc含量与激光辐照能量呈正态分布。其中以2.8 J（20 mW/mm~2,3 min）激光预处理白菜种子效果最佳。当辐照剂量超过一定阈值即3.8 J（20 mW/mm~2,4 min）时,激光处理表现出抑制效应。[结论]适当辐照剂量的532 nm激光辐照白菜种子胚,可显著提高其幼苗维生素C含量。     

四种变温层积对老山芹种子胚发育及生理特性的影响

针对老山芹种子休眠特性及其生产上存在的种子发芽率低、出苗不整齐及育苗周期长等问题,设计四种变温层积处理,定期取样,观察种胚发育情况,测定种子形态及生理生化指标,分析两类指标动态变化规律及与种子后熟关系。结果表明,经变温层积处理后老山芹种胚逐渐生长发育,由心形胚后期经鱼雷形胚后进入子叶期胚时期,完成形态后熟。变温层积过程中4℃低温阶段持续时间对种胚发育进程影响最大,时间越长越利于种胚发育。四种变温层积处理相比较,处理三模式(20℃,10 d→4℃,90 d→20℃,5 d)更利于老山芹种胚形态后熟完成,胚长和胚率增长最快,最早进入子叶期胚,是有效的种子处理方法。老山芹种胚发育过程伴随营养物质变化,不同变温层积处理营养物质变化具体过程不同,但总体趋势基本一致,其中可溶性糖含量表现为先降后升再降趋势,可溶性蛋白质、淀粉和粗脂肪含量总体呈下降趋势。研究为揭示老山芹种子休眠机理、打破种子休眠、发展老山芹产业、调整林区经济结构提供理论依据和技术支撑。     

水稻愈伤组织体细胞胚胎发生的细胞学研究

从水稻的成熟胚诱导的愈伤组织,通过分化培养基的再诱导,产生体细胞胚胎(胚状体)。培养条件对胚状体的形成是很重要的。胚状体发生过程中,形成胚原细胞;原胚;球形胚;心形胚;以及不很明显的鱼雷胚(或梨形胚)等形态。胚原细胞可以单个发生,也可群体发生,因此可以形成胚胎群。