如何对细管冻精进行解冻

在应用细管冻精进行绒山羊人工授精的过程中,保持精液解冻后良好的活力是人工授精成功的关键.在精液解冻过程中,造成精子死亡的主要原因是冰晶的形成造成精子物理性损伤和化学性伤害.-60～0℃是形成冰晶的温度区间,特别是从-0～-15℃,对精子的损害性更大.     

犬精液冷冻与解冻方法的研究报告

<正>犬的精液冷冻保存,是将采集的新鲜精液,经过品质评定、稀释和冻前处理,按特定的程序降温,最后在超低温(-79℃～-196℃)下的长期保存。精液冷冻的实质就是精液与其周围的冷源环境进行能量交换的过程。精液在冷冻过程中放出一定的能量后,使由液相变化到固相。在这个过程中,对精子最有害的温度区是-20℃～-70℃的冰晶化温度区。精液     

牛精液的贮存、解冻及品质检查

1冷冻精液的贮存和解冻方法牛的冷冻精液是以液氮做冷源进行贮存的,需要时可随时取出。为防止温度变化对精液品质的影响,取放动作要迅速,尽量减少在空气中停留的时间。从贮存容器中提取冷冻精液时,精液不应超过液氮容器的颈基部,避免因温度的回升造成精液解冻活率的下降。冷冻精液的解冻过程会影响精子的活力,要注意解冻的温度和操作方法。最初世界各国对解冻温度的要求不同,大体可分为高温40℃、室温15￣20℃和冷水10℃,当前认为40℃左右解冻效果最好。随着解冻温度的降低,精子活率有逐渐降低的趋势。颗粒精液解冻多采用将颗粒精液投入一定…     

牛冻精两次解冻效果观察

冻精解冻是家畜人工授精技术中的一项重要工作，其目的是使在低温条件下处于休眠状态的精子迅速越过冰晶温度而复苏，恢复受精能力。关于解冻的温度有多种报导，不同温度解冻的精液其活力和受胎效果不同。为了探求更佳的冻精解冻温度和方法，我们在1997年2月至1998年6月进行了对冻精采用两次不同温度解冻和一次解冻的对比试验，收到较好的效果。     

牛精子冷冻损伤及其改善方法

牛精液冷冻与人工授精技术相结合，在牛品种改良、保护优良种质资源中发挥着重要作用。尽管冷冻后部分牛精子活力高达60%以上，但是冷冻后精子受损现象却普遍存在，尤其是受精能力与鲜精相比显著降低。作者详细介绍了冷冻-解冻过程对牛精子造成的主要损伤，包括精子的形态完整性、活力及遗传物质的改变等；阐述了冷冻造成精子损伤的主要原因，即细胞内冰晶形成和氧化应激反应及其产生的可能机制；并且对目前常用的提高冷冻精子质量的方法，如添加冷冻保护剂、优化冷冻程序以及添加抗氧化剂等进行了详细地综述；提出了在冷冻精液研究方面值得探索的问题，以期为家畜精液冷冻保存技术的进一步优化提供理论依据。     

解冻温度和时间对牛精子活力的影响试验

[目的]为了找到较为理想的解冻温度与时间,为基层黄牛改良工作提供技术参考。在不同温度区、不同时间解冻牛细管冷冻精液,对解冻后的精子活力进行检测。[方法]采用50~90℃每隔10℃设一个温区解冻牛细管冻精,检测解冻后精液的活力。[结果]在50~90℃5个温度梯度下快速解冻不同时间后的精子活力均在0.35以上,其中90℃解冻3~4s,80℃解冻4~5s,70℃解冻4~6s,60℃解冻8~9s后的精子活力均大于0.4,显著高于其他时间解冻后的精子活力。[结论]不同温度、时间解冻后精子活力各异,其最佳解冻温度和时间为90℃解冻3~4s,80℃解冻4~5s,70℃解冻4~6s,60℃解冻8~9s。     

温度对犬精液冷冻保存的研究

本实验在以往研究的基础上进一步研究了冷冻起始温度(始冻温度)、解冻温度对精子活率的影响.实验结果表明:始冻温度为-70℃时冻后精液质量最好,冻后镜子活率达0.6284±0.0408,优于-65℃和-75℃时的冻后精子活率;解冻温度为70℃时对解冻后精液质量最好,达0.6810±0.0324,明显优于60℃和65℃的精子活率.     

解冻温度对精子活力的影响

[目的]为了获得较为理想的解冻效果.[方法]采用不同温度,不同解冻时间,通过镜检解冻后活力的方法.[结果]发现:不同解冻温度对牛冷冻精子复苏的影响,用39.5℃温水解冻30 s精子的活力最高,冷冻精液解冻后精子活力达O.53.用40.O℃温水解冻10s、39.0℃温水解冻30 s精子的活力也较高,冷冻精液解冻后精子活力...     

牛细管冻精解冻后常温保存对受胎率的影响试验

[目的]为测试牛细管冷冻精液解冻后在常温水中的保存时间对精子活力的影响,为非定点配种寻求有效简便的冻精携带方法,观察精子在不同解冻温度下的存活时间及受胎率。[方法]选择5个解冻温区及不同时间解冻肉牛细管冻精,解冻后置于常温水(17℃~19℃)中保存,观测解冻温度和精子存活时间对受胎率的影响。[结果]50℃、60℃、70℃、解冻后精子的保存时间差异不显著,保存至72h时精子活力均低于0.35;受胎率差异不显著;随保存时间延长,受胎率呈下降趋势,在48h以内情期受胎率和总受胎率分别维持在61.8%~67.1%和91.9~95.8。[结论]70℃各时间段解冻后保存效果最佳,60℃解冻组次之,二者在精子活力≥0.35时情期受胎率和总受胎率达到63.0%、92.5%,略高于当地黄牛两项受胎率的平均值61.1%、91.7%,解冻后细管精液置于常温水中携带到较远的区域输精对精子活力、母牛受胎率无影响。     

用精子异种穿卵方法检测牛冷冻精液精子的质量

牛冷冻精液要在液氮-79℃-196℃下保存,从理论上讲,冷冻可以使精子胞质不形成冰晶而处于玻璃化状态,停止了代谢活动,但是长期在-196℃下保存及在制作过程中,再加上输精前的解冻操作等,都能损伤精子的头部质膜和顶体外膜.经电镜研究解冻后发现精子头部,一部分解冻精子质膜膨胀破裂,甚至顶体外膜也发生部分泡状化,而将顶体内的酶类释放出去形成伪顶体反应.这种精子在显微镜下检查时非常活跃,但根本不可能与体内的成熟卵进行融合受精.     

冷冻精液颗粒的解冻温度与母牛受胎率的关系

近几年来,国外许多学者都在进行牛冷冻精液颗粒的解冻温度与受胎率关系的研究。理论根据是,随着解冻温度的提高(40、50、60、70℃),冷冻精液颗粒的解冻速度也随之加快(国内外多采用38—40℃的解冻温度)进而使冷冻颗粒快速通过形成冰晶的最危险的有害温度域(0—-60℃),以防止精子的原生质发生再结晶。据报道目前除少数的试验结果比40℃时解冻的受胎率有所提高外,大部分试验均无明显的差异。为了探求牛冷冻精液颗粒适宜的解冻温度,提高母牛受胎率,我们于1982—1984年进行了牛冷冻精液颗粒40和70℃的解冻温度与受胎率关系的试验,现报告如下:     

维生素B12解冻牛冷冻精液效果探析

用ＶＢ１２液在３５℃,４０℃,７０℃三种解冻温度下,解冻牛冷冻精液,并与Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠液作解冻效果比较。结果表明：三种解冻液解冻后精子的活力相近,经过保存后ＶＢ１２液显著高于２．９％柠檬酸钠液（Ｐ〈０．０５）。而与Ｔｒｉｓ－果糖液相近,不同解冻液解冻后的精液作精子上游法测定,在第２、第３段中所含精子数,Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠解冻液解冻的每段递减３０％￣９０％,而ＶＢ     

不同解冻方案对牛冷冻精液质量的影响

解冻是冷冻精子复苏的关键步骤,解冻方案的选择则是冷冻精子复苏的关键点。为筛选出适合目前我国规模化牧场冷冻精液的解冻方案,本研究分别采用6种解冻方案对冷冻精液进行解冻并观察其解冻活率。结果表明,随着解冻温度的升高和解冻时间的缩短,精子活率呈上升趋势,并且当解冻温度达到40℃,解冻时间为20s时,冷冻精子解冻后的活率达到最高。关于6种解冻方案对精液存活时间的影响研究结果表明,当采用38~39℃解冻30s方案时,精子存活6h的活率最好。     

提高牛冷冻精液配种受胎率的措施

1.解冻要迅速 牛的冷冻精液是在-196℃条件下以冻结形式长期保存的精液,在解冻过程中要通过危险的-40～-20℃的温度区域,解冻时间越短精子的死亡数就越少。因此,应进行快速溶解,时间不应超过15秒钟,解冻后精子活力要求达30％以上。 2.把握好输精时机 由于冷冻精液精子是经低温处理的,所以解冻后生命力较弱。而母牛排     

BMY牛冷冻精液质量控制及影响因素研究

[目的]为了加大BMY牛的推广应用力度和提高人工授精受胎率,开展了BMY牛冷冻精液质量控制研究,优选出冷冻稀释液及得出冷冻精液质量控制技术程序。[方法]采用不同的初始冷冻温度、不同种类的稀释液、不同的冷冻方法对BMY牛精液冷冻及解冻效果进行试验。[结果]不同的初始冷冻温度、不同种类的稀释液、不同的冷冻方法,BMY牛精液冷冻解冻效果各异。初始冷冻温度为-121--140℃时,TRIS液为基础稀释液添加糖类和氨基酸一步法稀释BMY牛精液冷冻6-10 min BMY牛冷冻精液解冻效果较好,用程控冷冻仪冷冻BMY牛精液,同样获得良好的解冻效果,解冻活力达到0.372±0.026。BMY牛冷冻精液平均解冻活力可达0.357±0.029以上,精子解冻复苏率达50%以上。精子畸形率平均为16.8%±4.26%,BMY牛采精成功率为75.3%。[结论]全放牧条件下BMY牛电刺激采精法获得很好效果,精液质量好,更有利于种质资源的保存和利用。     

不同解冻方法对猪冷冻精液品质的影响

为优化猪冷冻精液解冻方法、提高精液利用效率,试验采用两种不同的解冻方法解冻0.5 mL猪细管冷冻精液,一种在38℃水浴直接解冻30 s(1组),另一种在50℃水浴解冻16 s后再放到30℃水浴中静置40 s(2组)。对解冻后的精液分别进行精子活力、生存时间、顶体完整率的测定和顶体形态观察。结果表明：2组解冻精液的精子活力、顶体完整率极显著高于1组(P<0.01),但两组的生存时间差异不显著(P>0.05);精子顶体形态学观察发现,两组冻精的精子顶体膨胀、缺损情况都较严重。说明与38℃慢速解冻冷冻精液相比,50℃快速解冻的猪细管冷冻精液的精子活力好而且顶体完整率高。     

犬精液冷冻及解冻技术研究

犬冷冻精液质量的好坏直接影响受胎率 ,影响养犬户的经济效益。而冻精解冻后精子活动和生存时间 (解冻后 37℃保存 4ｈ精子活力 )又是冷冻精液质量中最重要的两个指标。我们进行了同一样品 ,采用不同温度解冻 ,对冻后精子活力及生存时间影响的对比试验。目的是寻找最佳的解冻温     

奶牛人工授精技术操作要点

1奶牛人工授精技术操作要点1.1精液品质的检查各种动物新鲜精液,活力一般要求是0.7-0.8为了保证较高的受胎率,通常输精用液态精液保存精子活力要求不低于0.5。冷冻精液解冻后的活力不低于0.3。在生产中,我们用的是美国的性控精液,其解冻后活力为0.5左右,具有严格质量安全。常用精液型号和使用情况如表1所示。     

黑丝羽乌骨鸡精液DMA颗粒冷冻技术研究

为研究不同稀释液与解冻装置对黑丝乌骨鸡N,N-二甲基甲酰胺（N,N-dimethylformamide,DMA）颗粒冻精解冻后精子质量的影响,试验首先采用不同稀释液对精液进行稀释并比较其解冻后精子活力与人工输精的受精率;其次,选取不同解冻管及冻精颗粒数进行恒温水浴解冻,比较其活力;最后,依据解冻后的精子活力,筛选恒温水浴、恒温漏斗、恒温板3种解冻装置各自的最佳解冻温度,并利用各自最佳解冻温度解冻后的精液进行人工输精,检测受精率。结果显示：①不同稀释液组的精子活力与受精率高低趋势一致,为LR > F > B > L组,且各组之间差异显著（P < 0.05）。②在60℃恒温水浴中,用薄壁大玻璃管解冻的精子活力最好。③不同解冻装置有各自最佳解冻活力的温度范围,恒温水浴为50~60℃（0.51~0.59）、恒温漏斗为40~45℃（0.42~0.46）、恒温板为50~55℃（0.61~0.63）,每种装置最佳温度段内的精子活力差异不显著（P > 0.05）。④3种解冻装置最佳解冻状态相比：在精子活力上,60℃恒温水浴与55℃恒温板分别显著高于40℃恒温漏斗（P < 0.05）,但60℃恒温水浴与55℃恒温板之间差异不显著（P > 0.05）;在受精率上,55℃恒温板最高（26.91%）,60℃恒温水浴次之（23.08%）、40℃恒温漏斗最低（20.93%）,三者之间差异不显著（P > 0.05）。因此,黑丝羽乌骨鸡精液应采用LR稀释液、DMA冷冻保护剂及颗粒冷冻技术,在54.9℃恒温板解冻可获得较高的受精率。     

解冻温度和保存时间对牛细管冻精精子活率的影响

本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃（3s）精子活率最高,为48．77％,20组（2（80s）精子活率最低,为30．02％,两者差异极显著（P〈0．01）。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率（P〈0．05）,80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30％。