催乳素对内蒙古绒山羊毛囊体外培养影响的研究

【目的】 研究催乳素（PRL）对内蒙古绒山羊初级毛囊和次级毛囊体外生长及形态变化的影响。【方法】 机械法结合切割法分离内蒙古绒山羊的初级毛囊和次级毛囊,在初级毛囊培养液中分别添加0、5、10、50、100 ng/mL催乳素进行体外培养,每组24根,共培养5 d,每天在显微镜下观察其形态并拍照,统计其生长长度、生长速度和存活率,筛选出最适催乳素处理浓度。然后将初级毛囊与次级毛囊分别分为初级毛囊对照组（PF-K）、初级毛囊试验组（PF-PRL）、次级毛囊对照组（SF-K）、次级毛囊试验组（SF-PRL）,每组24根,对照组用基础培养液培养,试验组在基础培养液中添加最适浓度的催乳素,培养5 d,每天观察毛囊的形态并拍照,同时测量各组毛囊的生长长度。【结果】 10 ng/mL催乳素组毛囊的平均日生长长度均极显著高于其他浓度组（P<0.01）,最终生长长度和存活率均最高,因此,后续试验选择10 ng/mL催乳素处理毛囊。试验组和对照组初/次级毛囊的毛干与根鞘部位同时伸长,随着培养时间的增加均出现不同程度的弯曲。PF-PRL、SF-PRL组毛囊在2~5 d的总长度分别极显著高于PF-K、SF-K组（P<0.01）。PF-K组除第1天与第0天差异不显著外,1~5 d毛囊的总长度依次显著增加（P<0.05）;PF-PRL组0~5 d毛囊的总长度依次显著增加（P<0.05）。SF-K组毛囊第5天的总长度显著高于0~4 d （P<0.05）;SF-PRL组第4、5天毛囊的总长度均显著高于0~3 d （P<0.05）,第3天毛囊的总长度显著高于0~2 d （P<0.05）。PF-PRL、SF-PRL组毛囊在2~5 d的平均日生长长度分别极显著高于PF-K、SF-K组（P<0.01）。【结论】 10 ng/mL催乳素是体外促进毛囊生长的最适浓度,10 ng/mL催乳素对体外培养的内蒙古绒山羊的初级毛囊和次级毛囊均有极显著的促生长作用。     

不同培养条件对水貂毛囊体外培养的影响

旨在筛选较理想的水貂毛囊体外培养条件,建立水貂毛囊体外培养模型,从而为研究水貂毛囊生物学特性和生长调控机制奠定基础。在无菌条件下分离水貂初级毛囊,分别置于Williams E无血清培养基、Williams E血清+10%血清、DMEM无血清和DMEM血清+10%血清4种不同培养基中进行培养,观察毛囊最终长度及形态学变化,选出水貂毛囊体外培养的最适培养基;再将最适培养基中的毛囊置于6个不同的培养温度下进行培养,即29℃、31℃、33℃、35℃、37℃和39℃,选出最适温度。结果发现体外培养的水貂毛囊在Williams E无血清培养基中毛囊的最终生长长度显著高于其他处理组(P0.05),水貂毛囊生长速度随培养时间的增加显著减慢(P0.05);在31℃培养的毛囊生长速度显著高于其他组(P0.05),且毛囊形态较好。研究结果表明,水貂毛囊体外培养的适宜培养基为Williams E无血清培养基,适宜培养温度为31℃。     

表皮生长因子(EGF)对绵羊毛囊体外培养影响的研究

分别设100、20、2、0.2ng/ml浓度梯度和对照组,研究表皮生长因子（EGF）对绵羊毛囊形态影响及生长调控机理。结果表明：EGF促毛囊生长作用随浓度的增加而降低,促毛囊生长的最适浓度为20ng/ml,2～20ng/ml促生长作用明显,100ng/ml对毛囊生长有抑制作用,20ng/mlEGF和10ng/mlIGF-I联合作用促毛囊生长达到高峰。20ng/mlEGF及与10ng/mlIGF-I二者联合对体外培养毛囊生长长度与培养天数呈明显的正相关,以0.122和0.183的斜率较恒定地刺激毛囊的生长,直到第8天后毛囊的生长速度才明显降低。     

辽宁绒山羊皮肤毛囊细胞凋亡特点的研究

采用TUNEL法在一个生物年的周期内每隔两月对绒山羊体侧部的皮肤毛囊进行检测,观察毛囊细胞凋亡的周期性变化特点。结果表明,控制毛囊生长变化的凋亡细胞是成簇分布的,毛乳头的成纤维细胞很少有凋亡现象,细胞凋亡与毛囊周期性生长具有相关性,兴盛期毛囊凋亡细胞减少,退行期凋亡细胞显著增多。常年长绒型与季节长绒型品系在一年内的凋亡细胞变化情况基本一致,只是常年长绒型品系在兴盛前期的细胞凋亡明显低于季节长绒型品系。     

毛囊体外培养的研究现状及展望

文章综述了毛囊体外培养的主要模型及体外培养所需的条件和注意事项,以及毛囊体外培养在脱发、痤疮治疗中的应用状况,同时还对毛囊体外培养的研究价值和前景进行了展望.     

毛囊体外培养的研究现状及展望

文章综述了毛囊体外培养的主要模型及体外培养所需的条件和注意事项,以及毛囊体外培养在脱发、痤疮治疗中的应用状况,同时还对毛囊体外培养的研究价值和前景进行了展望.     

山羊毛囊干细胞的分离及体外培养

试验采用2．4U／mL Dispase酶消化和机械切割法分离毛囊隆突部,经胰酶（0．5mg／mL胰酶＋0．2mg／mL EDTA）消化从山羊耳部皮肤分离得到的毛囊干细胞,然后进行形态学观察、细胞生长曲线测定、克隆形成率及免疫组化染色检测,并对毛囊干细胞的基础培养基进行了筛选。结果表明：DMEM／F12是一种适合毛囊干细胞体外增殖培养的培养基;在以DMEM／F12为基础培养液的培养体系中细胞可传代至19代。     

IGF-1和EGF对辽宁绒山羊初级毛囊体外培养的影响

为研究不同剂量的IGF-1和EGF对辽宁绒山羊毛囊体外生长及毛囊形态的影响,采用显微分离法分离绒山羊初级毛囊,分别测定不同浓度IGF-1(0.1、1、10和100 ng/mL)、不同浓度EGF(0.2、2、20和100 ng/mL)、联合添加IGF-1和EGF(分别添加10 ng/mL和20 ng/mL)对毛囊生长和形态变化的影响.结果表明,IGF-1和EGF对毛囊体外生长均具有正向调节作用,作用大小与剂量有关,最适宜浓度IGF-1为10 ng/mL;EGF为20 ng/mL.IGF-1(10ng/mL)和EGF(20 ng/mL)联合添加对毛囊生长促进作用优于单独添加.IGF-1刺激毛乳头和毛母质细胞分裂增殖;EGF促进毛囊外根鞘细胞分化;联合添加刺激毛球部增大.     

北京鸭毛囊体外培养与动态观察

构建北京鸭游离毛囊体外培养模型,并对其进行形态学和组织学观察。取6周龄北京鸭在无菌条件下分离初级和次级毛囊。选取处于生长期毛囊并培养于无血清DMEM培养基中。动态观察毛囊的生长速度和形态学、组织学变化。结果表明:北京鸭次级毛囊具有不同程度的生长。前3d平均生长速度为0.156mm/d,4d后生长速度迅速下降,5d后毛囊形态开始发生改变。初级毛囊未生长即进入衰退期。北京鸭次级毛囊能够在DMEM培养基中生长。初级毛囊不能生长,原因可能是初级毛囊形态发生复杂,培养基中缺乏其必需的生长因子。     

内蒙古白绒山羊皮肤毛囊发生发育规律的研究

本文研究了内蒙古白绒山羊从胎儿期到生后期皮肤毛囊的发生发育规律。在胎儿期，从４５日龄开始，每隔１５ｄ，用剖腹产手术的方法取胎儿３～５只，分别在头顶、颈上　甲、背、荐、颈侧、肩、体侧、股和腹等１０个部位采取约１×１ｃｍ的皮肤样本；生后期分初生、１～９个月、１岁、１岁半、２岁和３岁等１４个阶段，每阶段在活羊体侧部采取约１×１ｃｍ的皮肤样本。用石蜡切片法制做皮肤切片。经显微观测，得到如下结果：初级毛囊在胎儿期４５日龄前发生，次级毛囊在７５日龄前发生，皮脂腺和汗腺在７５日龄时出现，竖毛肌在９０日龄出现，粗毛１０５日龄时在全身各部位长出，绒毛在１２０日龄时长出。表皮在６０～７５日龄时形成完整结构，真皮层在７５～９０日龄时分化出乳头层和网状层。初级毛囊的发育在胎儿期１３５日龄时已完成，而次级毛囊发育直至出生后６月龄。毛囊群结构主要为三毛型，少数其它毛型。初次级毛囊比例为１：７～１３。     

绵羊毛囊凋亡及抑制的原因初探

为探索在毛囊细胞凋亡中雌激素和褪黑素的作用,实验通过对不同浓度的雌激素和褪黑素水平下体外培养绵羊皮肤的免疫组化染色,发现0.01～0.5 μg/mL雌激素均导致了毛囊和皮脂腺的凋亡,10-4mol/L褪黑素显著抑制了0.01 μg/mL雌激素引起的凋亡,却不能抑制0.5 μg/mL雌激素引起的凋亡.说明雌激素和褪黑素是毛囊周期调控的两个重要激素,它们之间通过相反的作用方式,即通过促进和抑制凋亡来调节毛囊的周期性变化.     

成纤维细胞生长因子FGF11、13、18对小鼠毛囊第一生长周期作用的研究

为了探究成纤维生长因子家族(Fibroblast growth factor families,FGFs)中,FGF11、13、18对毛囊的生长发育的作用,本研究以3/5/8/13/16/18/20/23日龄小鼠背部皮肤为试验样本,利用免疫组织化学技术、实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测FGF11、FGF13、FGF18基因及蛋白在小鼠背部皮肤的分布和表达情况。定位结果显示:FGF11、FGF13、FGF18在皮肤真皮乳头、毛基质、内根鞘、外根鞘和皮脂腺表达,而FGF13在膨大部、基底层和表皮也表达,FGF18也表达在膨大部和表皮。定量结果均显示:FGF11的表达没有一定的规律;FGF13在13日龄表达量最低,从16日龄开始上升;FGF18从3日龄表达量开始降低,16日龄降到最低,18日龄开始上升。提示:FGF11对小鼠毛囊第一生长周期可能没有明显和特定的调节作用;FGF13可能对毛囊的自我更新有一定的作用,诱导毛囊从静止期向再生长期过渡,促进毛囊生长;而FGF18在毛囊生长周期中从静止期向生长期过度有一定的作用,可促使毛囊从静止期进入再生长期。     

辽宁绒山羊皮肤毛囊血管内皮生长因子基因的表达研究

采用反转录—聚合酶链式反应（RT-PCR）方法对血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在辽宁绒山羊常年长绒和季节长绒两个品系皮肤毛囊中的相对表达量进行测定。试验结果表明,VEGF基因mRNA在辽宁绒山羊常年长绒和季节长绒两个品系的皮肤毛囊组织中都有表达,并且两个品系在一年内同一月份VEGF基因mRNA的相对表达量差异不显著（P＞0.05）,但是一年内各个月份间VEGF基因mRNA的相对表达量2月份与其它月份差异显著（P＜0.05）。辽宁绒山羊常年长绒型新品系VEGF基因mRNA的相对表达量除2月份外,常年维持在一个较高的水平,这可能是其能够常年长绒的一个重要原因。     

哺乳动物毛囊发育及调控研究进展

毛囊具有高度自我更新能力,是哺乳动物特有的皮肤构造,且是唯一呈终生周期性生长的器官。毛囊的发生始于胚胎期,皮肤上皮层细胞和下胚层细胞间的一系列相互作用诱导形成毛囊,之后毛囊进入周期性循环,包括生长、退行和休止3个阶段。毛囊的发育过程中受到复杂的网络调控。近年来,关于哺乳动物毛囊发育及调控机制的研究取得了较大进展。已有研究表明,毛囊的发生及循环过程中受到多种因子的调控,不同信号通路及miRNA和lncRNA相关基因的参与,构成了一个庞大而又复杂的网络调控图谱,每种调控因子间的相互促进及制约为毛囊的发生及循环提供了必要的保障。文章简述了人、羊及小鼠等哺乳动物毛囊形态发生、周期性循环及相关调控因子的研究进展,为更加全面地了解哺乳动物毛囊发育过程及调控机制提供了参考,同时对人工控制毛绒的周期生长进而提高毛绒产量和质量提供了思路。     

绒山羊毛囊的周期性发育及其分子调控研究进展

 绒山羊皮肤毛囊的生长发育直接影响山羊绒的产量和品质,而毛囊发育周期性变化过程受一系列因子调控。论文综述了近年来绒山羊毛囊发育过程中的分子调控研究进展。     

绒山羊毛囊发育中非编码RNA的研究进展

非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)是指从基因组上转录而来,不编码蛋白质,但在RNA水平上能行使一定生物学功能的RNA。非编码RNA的种类较多,种类的不同造成功能的差异。毛囊是绒山羊皮肤特殊的附属物,位于皮肤的真皮层,发生于绒山羊胚胎期。由于真皮细胞和上皮细胞间的信号分子传递,使其发育呈周期性变化,历经生长期、退行期和休止期。近年来,有关ncRNA在绒山羊毛囊发育中作用报道较多。文章就其中的微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)及环状RNA(circRNA)的生物发生及其在绒山羊毛囊发育中的作用机制进行了归纳、总结。miRNA是真核生物中存在的一种长18～25 nt的ncRNA分子,可通过与靶信使核糖核酸mRNA特异结合,抑制转录后基因表达。在绒山羊毛囊发育中,miRNA通过抑制相关基因及相关信号通路中关键分子的表达而调控毛囊的发育周期以及毛囊的再生能力。lncRNA是长度超过200 nt的ncRNA,经过剪接,具有polyA尾巴与启动子结构,在绒山羊毛囊发育中能促进毛囊细胞增殖与分化,通过调控基因的靶向表达与多种信号通路互作调节毛囊发育及绒毛生...     

毛囊干细胞的研究进展

毛囊干细胞具有干细胞的一般特征,经研究将其定位于毛囊隆突部。毛囊干细胞具有自己特定的表面标志物,并经诱导可分化为各类细胞,笔者对毛囊干细胞在临床上的应用进行了阐述。     

哺乳动物腔前卵泡体外培养及研究进展

哺乳动物卵巢内的原始卵泡库是雌性生殖资源的储存库,但大部分卵泡在腔前阶段已退化闭锁了,这无疑是对这一资源的巨大浪费。因此,越来越多的学者致力于腔前卵泡的开发和利用,建立了一系列的培养体系,尤其在小鼠上做的比较成功,已经得到了少量后代。文章主要就卵泡的发生发育过程,腔前卵泡的分离方法,培养基的选择,不同直径腔前卵泡培养体系的建立,影响腔前卵泡发育的因素及研究进展进行了阐述,为进一步完善腔前卵泡培养体系,揭示其发育机理提供参考。     

山羊毛囊干细胞分离、培养及鉴定

采用2．4U／mLDispase酶消化和机械切割法分离毛囊隆突部,经胰酶（0．5mg／mL胰酶＋0．2mg／mLEDTA）消化从山羊耳部皮肤分离得到毛囊干细胞,用自制无血清培养基培养,并用形态学观察、细胞生长曲线、克隆形成率及免疫组化染色检测,探讨毛囊干细胞体外分离培养方法及生物学特性。结果表明,所分离细胞具备毛囊干细胞特征：体积较小、表面光滑、立体感强,呈现未分化细胞特征;K19、integrin-β1以及p63免疫组化染色阳性;第3、5、7代干细胞克隆形成率分别为25．6％&#177;2．6％、31．8％&#177;1．9％和27．0％&#177;3．9％,极显著高于对照组角质细胞克隆形成率（P〈0．01）。采用配制的无血清条件培养液可使山羊毛囊干细胞体外维持未分化状态并传代至19代。