新疆阿勒泰羊MSTN基因序列的多样性分析

为进一步探究新疆阿勒泰羊的遗传分化状况,根据普通绵羊的MSTN基因设计引物,用PCR的方法扩增并对新疆阿勒泰羊MSTN基因编码区进行测序,并与绵羊以及GenBank上5个物种相应基因编码区核苷酸序列进行比对分析.结果表明:在阿勒泰羊群体内部亲缘性较高,同时测得阿勒泰羊MSTN基因和绵羊、山羊、普通牛、猪、家鼠、鸡的同源性大小分别是99.9%,99.5%,96.4%,94.6%,89.5%,82.3%,依据序列构建的分子进化树显示表明MSTN基因具有很高的保守性,适合研究物种的进化分析,为新疆阿勒泰羊的遗传资源保护,开发与利用提供分子遗传学方面的基础.     

湖羊MSTN基因表达的发育性变化

实验以湖羊为研究对象,采用RT-PCR法对MSTN基因在湖羊不同生长阶段背最长肌中表达丰度,为湖羊肌肉生长性状的选育提供遗传学资料.研究表明,出生后随着月龄的增加,母羊MSTN在背最长肌的表达趋势为:除在3月龄略有下降外,2日龄到6月龄大体上处于一个上升的过程,并于6月龄到达最高点;公羊MSTN在背最长肌的表达趋势为:2日龄到3月龄处于一个上升的过程,于3月龄到达最高点,3月龄到4月龄相对表达下降,4月龄到6月龄又逐渐上升.MSTN在湖羊公母以及各月龄间大多存在显著或极显著差异.结果显示,性别和年龄对于MSTN在湖羊不同生长阶段的肌肉中的表达均没有出现随着日龄的增加而一直增加或下降的趋势.     

海南黑山羊MSTN基因的表达差异与发育性变化研究

采用SYBR Green实时荧光定量PCR技术检测了MSTN基因在2、3、4月龄和12月龄海南黑山羊腿肌、腰肌和背肌组织中mRNA表达发育性变换规律,为揭示MsTN基因的生物学功能及其对肉质的表达调控机理提供参考依据。结果表明,在海南黑山羊的四个生长阶段,MSTN基因均在背肌里的表达量最高,腿肌里的表达量较低,表达模式为：背肌〉腰肌〉腿肌;腿肌和腰肌在2月龄时,表达量较低,3月龄时极显著升高（P〈0．01）,4月龄时又极显著下降（P〈0．01）,12月龄时又极显著升高（P〈0．01）;表达模式为：12月龄〉3月龄〉4月龄〉2月龄;背肌在2月龄时表达量也较低,3月龄时极显著升高（P〈0．01）,达到最高水平,4月龄时又极显著下降（P〈0．01）,12月龄时有所上升,但差异不显著（P〉0．05）,表达模式为：3月龄〉12月龄〉4月龄〉2月龄。     

多浪羊和阿勒泰羊发情周期测定

本试验对多浪羊及阿勒泰羊的发情周期进行长达2个月的监测,获得较为准确的发情周期数据,其中阿勒泰羊平均情期为17.2±0.25 d,多浪羊平均情期为17.3±0.24 d,此结果为多浪羊和阿勒泰羊的胚胎移植等试验提供重要的参考依据。     

吐鲁番黑羊MSTN/Smad信号通路基因表达的发育性变化

为探讨MSTN/Smad信号通路基因对吐鲁番黑羊肌肉生长发育的影响,采用实时定量PCR法,分别对1～6月龄吐鲁番黑羊的腿肌和尾脂MSTN/Smad信号通路基因进行检测.结果表明：MSTN/Smad信号通路基因在腿肌和尾脂组织中均有表达,MSTN/Smad信号通路基因在吐鲁番黑羊不同生长阶段的腿肌和尾脂中的表达没有出现随月龄的增加而一直增加或下降的趋势.     

浅析阿勒泰羊多胎羔羊常见疾病及治疗措施

为了加快推进肉羊产业的繁荣发展,阿勒泰地区开展了阿勒泰羊多胎羔羊的杂交生产的技术,但由于母羊体弱以及护理能力差等因素,多胎羔羊极易患病。现分析了多胎羔羊的常见疾病,并针对这些情况提出相应的治疗措施,希望可以对促进阿勒泰羊的繁殖存活率以及肉羊产业的发展有所帮助。     

冷应激对新疆阿勒泰羊脂蛋白脂酶mRNA表达的影响

为研究冷应激对阿勒泰羊脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)mRNA表达的影响,试验分别采集冷应激前与冷应激后阿勒泰羊6个部位的组织,采用实时荧光定量PCR方法检测各组织中LPL mRNA的表达水平,分析其在不同部位中表达的变化.结果显示,阿勒泰羊LPL mRNA表达量在冷应激后显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01),其中颈部肌间脂肪和尾部脂肪冷应激后表达量最高.表明阿勒泰羊在低温下脂肪组织的动员能力较强,使机体产热增加,以抵抗冷应激.     

地方良种阿勒泰羊

阿勒泰羊是新疆的地方绵羊优良品种,经过上千年的独特地域自然条件长期驯化和选育,形成在放牧条件下生长发育快的特点,它以体型大、肉脂生产性能高,羔羊生长发育快且早熟突出,当年羔羊5-6月龄体重可达到40-50kg,屠宰率高,抗病抗逆性强,肉质鲜嫩可口无膻味,是大草原无污染的绿色产品。     

鸽MSTN基因mRNA表达的发育性变化及组织差异研究

通过研究公、母鸽肉质性状候选基因肌肉抑制素(Myostatin,MSTN)在不同组织、不同发育阶段的表达变化规律,为研究鸽肉质性状的遗传调控机理提供依据。采用荧光探针RT-PCR,定量分析MSTN mRNA在公、母鸽的多个组织、多个发育时间点的表达量。RT-PCR结果表明,MSTN mRNA表达量在3个生理时期表现出先降低后升高的变化趋势,母鸽峰值出现较早。公鸽MSTN mRNA表达量最高的组织为肾脏,睾丸中表达丰度最低,青年期肝脏、心肌MSTN mRNA表达量极显著高于其它时期的表达量,但在睾丸中没有检测到基因的表达。对不同生理时期母鸽MSTN mRNA的表达量比较后发现,青年期MSTN mRNA表达最高,显著高于其它时期。MSTN mRNA表达量受到组织、发育阶段和品种影响,该基因的表达在物种之间存在差异。     

阿勒泰羊病调查及防治对策

新疆博州地区主要是阿勒泰羊,主要针对阿勒泰地区羊病流行性特点,并对其发病原因进行分析,同时,总结阿勒泰地区羊病防治工作存在的主要问题,进而提出整改措施。     

贵州香羊MSTN基因的多态性

肌肉生长抑制素（Myostatin,MSTN）是一种在骨骼肌中广泛存在的糖蛋白,是骨骼肌生长的负调控因子,其基因的缺失、插入或突变会引起肌细胞增生与肌纤维肥大从而提高产肉力。采用PCR-RFLP方法对67只贵州香羊MSTN基因进行了多态性分析。结果显示,5′UTR和外显子1没有出现变异,内含子1和外显子2中存在BspLⅠ、XmnⅠ、BmrⅠ、Hpy188Ⅰ4个酶切多态位点。纯合野生型（AA、CC、EE、MM）为优势基因型,杂合型（AB、CD、EF、MN）和纯合突变型（BB、DD、FF、NN）为非优势基因型,A、C、E、M等位基因为优势基因。     

哺乳期藏羊羔羊复胃的发育性变化

为了研究羔羊复胃的发育性变化,试验以0-112日龄哺乳期藏羊羔羊为研究对象,采用大体解剖学方法测定了放牧条件下0、3、7、14、21、28、42、56、72、84、98和112日龄羔羊瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、前胃、总胃重量及各胃室容积的变化情况。结果表明：藏羊羔羊在0-112日龄的各胃室发育迅速,各胃室增重明显,容积显著增加,尤其瘤胃的增重明显;在藏羊生产实践中,70日龄断奶较适宜,56日龄是可接受的最早断奶日龄。     

新疆哈萨克羊和阿勒泰羊多脊椎性状分析

动物的脊椎变异尤其是多脊椎变异是一个与生产性能相关的重要性状。为给选育优质高产的新疆特色的多脊椎绵羊新品系做参考,本研究统计了屠宰后的569只哈萨克羊和218只阿勒泰羊的胸椎(T)和腰椎(L)的数量和比例。在哈萨克羊中共发现T13L7、T14L6、T14L5、T12L6、T12L7、T14L7这6种脊椎变异现象,在阿勒泰羊中发现T13L7、T14L6、T14L5、T12L6、T12L7这5种脊椎变异现象。其中T13L7、T14L6和T14L7为多脊椎性状,在哈萨克羊和阿勒泰羊中分别占26.01%和23.39%。对哈萨克羊的生产性能分析显示,胸椎或腰椎增加一个,胴体长度和胴体重量分别平均增加2.86 cm,1.94 kg或1.88 cm,1.56 kg,且多胸椎性状优于多腰椎性状。本研究表明,多脊椎现象广泛存在于新疆哈萨克羊和阿勒泰羊中,且相对于哈萨克羊而言,阿勒泰羊的多脊椎现象更倾向于多胸椎性状。本研究为高产优质的多脊椎的哈萨克羊和阿勒泰羊新品系的选育提供重要的科学参考。     

寒冷环境下阿勒泰羊血常规指标检测

为了探讨寒冷环境下对阿勒泰羊血常规指标的影响,本试验于冬季采集30只阿勒泰羊颈静脉血进行血常规检测。结果表明,阿勒泰羊在寒冷环境下白细胞、中间细胞、粒细胞数目上升;红细胞总数、血红蛋白含量有所下降。此结果说明寒冷环境会导致阿勒泰羊体内有炎症发生,还会导致阿勒泰羊出现贫血的情况,为冬季饲养阿勒泰羊提供技术支持.     

沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔生长性能和脂肪酶活性的影响

旨在研究不同脂肪含量的饲粮中添加沙棘黄酮对阿勒泰羊冬羔生长性能、屠宰性能和脂肪酶酶活的影响。选取健康的5月龄体重相近的阿勒泰羊冬公羔羊40只,随机分成4组,每组10只。Con1组、Con2组分别饲喂低脂饲粮、高脂饲粮,LSL组、HSL组为试验组,分别在Con1和Con2中添加质量分数为0.25%的沙棘黄酮。预试期10 d,正试期60 d。结果表明:①1～60 d,Con2显著提高日增重(P<0.05),Con2和HSL干物质采食量显著增加(P<0.01)。②与Con2组相比,HSL组屠宰率、肌肉/胴体显著提高(P<0.05);但脂肪/胴体显著降低(P<0.05)。③从背最长肌营养成分来看,LSL组脂肪含量显著低于Con1组(P<0.05);试验组黄酮含量极显著高于对照组(P<0.01);试验组饱和脂肪酸含量显著低于对照组(P<0.05)。④对照组PPAR-γ的含量显著高于LSL组(P<0.05);而p-AMPK正好相反,LSL组显著高于对照组(P<0.05)。结果显示:在低脂肪含量日粮中添加沙棘黄酮可以提高采食量。在高脂肪日粮中添加沙棘黄酮降低日增重。添加沙棘黄酮,降低脂肪,尤其是皮下脂肪在胴体中的比重,从而提高肌肉率,尤其是脂肪含量高的日粮效果更明显。沙棘黄酮通过调节p-AMPK-PPAR-γ信号通路发挥作用,从而降低肌肉中脂肪的含量。     

利用单碱基编辑系统定点编辑哈萨克羊MSTN基因的研究

肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）可负调控骨骼肌的发育。本研究利用胞嘧啶碱基编辑器（cytidine base editor,CBE）在哈萨克羊MSTN基因编码区提前引入终止密码子,以期达到敲除MSTN基因的目的。共设计2条靶向哈萨克羊MSTN基因不同外显子的sgRNAs,分别连接至pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin质粒,并与pCMV-AncBE4 max-P2A-GFP质粒共转染哈萨克羊胎儿成纤维细胞,经Cruiser^TM酶酶切检测、Sanger测序和TA克隆分析。结果显示,成功筛选出可以在哈萨克羊MSTN基因外显子提前引入终止密码子的2条sgRNAs,其中STOPsg-1靶位点编辑效率为26.7%,STOPsg-2靶位点的编辑效率为6.7%。本研究成功运用CBE（AncBE4 max）技术在哈萨克羊胎儿成纤维细胞MSTN基因编码区实现定点编辑,为培育精确编辑MSTN基因的哈萨克羊奠定基础。     

新疆巴什拜羊肌肉生长抑制素基因DNA甲基化与mRNA表达量分析

为了探究肌肉生长抑制素（myostatin,MSTN）基因在肌肉和脂肪中的DNA甲基化模式及mRNA表达水平,试验以5月龄巴什拜羊羔羊为研究对象,采用亚硫酸氢盐测序法（bisulfite sequencing PCR,BSP）检测MSTN基因启动子区和第1外显子甲基化模式,并通过实时荧光定量PCR检测MSTN基因在巴什拜羊股二头肌、股三头肌、半腱肌、半膜肌、背最长肌和尾脂中的mRNA表达水平。结果显示,肌肉组织甲基化概率高于脂肪组织,其中,股二头肌、股三头肌、半腱肌、半膜肌、背最长肌和尾脂的甲基化概率分别为74.2%、74.2%、83.2%、83.7%、82.1%和25.3%,MSTN基因在股二头肌、股三头肌、半腱肌、半膜肌、背最长肌中的表达水平显著低于尾脂（P < 0.05）,股二头肌、股三头肌、半腱肌、半膜肌和背最长肌之间差异不显著（P > 0.05）,巴什拜羊肌肉和脂肪MSTN基因DNA甲基化水平与MSTN基因表达量呈显著负相关（r=－0.886,P < 0.05）。     

新疆巴什拜羊MSTN mRNA在不同月龄发育性变化研究

运用荧光定量PCR技术对不同月龄(0日龄或初生、1月龄、2月龄、3月龄、4月龄、5月龄)新疆巴什拜羊肌肉和脂肪MSTN基因的表达量进行定量,2-ΔΔCT方法分析不同生长阶段MSTN基因表达量的差异,以期获取MSTN基因在不同月龄巴什拜羊的表达规律,同时丰富与肌肉生长相关基因的研究。结果表明:初生、3月龄新疆巴什拜羊肌肉中MSTN基因的表达量极显著低于1、2、4、5月龄(P0.01),1月龄的表达量又极显著高于其他各月龄(P0.01),2月龄显著低于5月龄(P0.05);初生时新疆巴什拜羊脂肪中MSTN基因的表达量极显著低于4月龄和5月龄(P0.01),1月龄MSTN基因的表达量极显著高于2月龄和3月龄(P0.01)、极显著低于4月龄和5月龄(P0.01),5月龄MSTN基因的表达量极显著高于4月龄(P0.01)。表明巴什拜羊肌肉生长发育在初生时较快,在1月龄和2月龄生长发育较慢,3月龄生长发育最快,随后生长发育趋于平稳;脂肪的生长发育在初生后略快于1月龄,2月龄和3月龄的生长发育较快,4月龄较慢,5月龄生长发育慢于其他各月龄。     

萨福克羊与阿勒泰羊杂交公羔产肉性能的研究

选择3月龄萨福克×阿勒泰杂交一代断奶公羔,经60 d舍饲方式育肥后,与4只同月龄、体重为组内均重的阿勒泰羊公羔一并进行屠宰试验,比较其产肉性能。结果表明:萨阿杂交一代公羔活重、胴体重、一级肉率、去尾脂屠宰率和净肉率等指标均高于阿勒泰羊公羔,且尾脂率由原来的15.75%下降到2.80%,杂交羔羊胴体外观评级达到一级标准。说明使用萨福克公羊杂交改良阿勒泰羊母羊,杂交后代的胴体品质得到了明显改善,符合人们对低脂肪、高蛋白的消费需求。