不同佐剂PRV灭活苗免疫奶牛及山羊抗体消长规律研究

用间接ELISA检测伪狂犬病病毒 (PRV闽A株 )自制的油乳剂灭活苗、氢氧化铝胶灭活苗免疫山羊和犊牛后的抗体效价 ,并以市场购买的基因缺失油乳剂灭活苗作对照 ,依据山羊抗体的ELISA效价找出抗体消长规律 .采集犊牛、山羊血清用中和试验测抗体 .试验结果表明 ,(1)首次免疫后抗体上升幅度低 ,仅 2～ 3个滴度 ,且维持时间短 ,仅为 2周 ;二免后抗体上升可高达 12个滴度 ,且维持时间长达 4个月 .(2 )试验组油乳剂灭活苗免疫效果优于氢氧化铝胶灭活苗 .(3)用同种疫苗免疫的犊牛与山羊具有相似的抗体水平和消长规律     

不同佐剂PRV灭活菌免疫奶牛及山羊抗体消长规律研究

用间接ELISA检测伪狂犬病毒（PRV闽A株）自制的油乳剂灭活菌、氢氧化铝胶灭活苗免疫山羊和犊牛的抗体效价，并以市场购买的基因缺失油乳剂灭活苗作对照，依据山羊抗体的ELISA效价找出抗体消长规律，采集犊牛、山羊血清用中和试验测抗体，试验结果表明，⑴首次免疫后抗体上升幅度低，仅2-3个滴度，且维持时间短，仅为2周；二免后抗体上升可高达12个滴度，且维持时间长达4个月。⑵试验组油乳剂灭活苗免疫效果优于氢氧化铝胶灭活苗。⑶用同种疫苗免疫的犊牛与山羊具有相似的抗体水平和消长规律。     

牛源分枝杆菌变应原对免疫豚鼠变态反应试验

本文采用牛结核PPD检出阳性牛分离的分枝杆菌(包括有牛分枝杆菌、瘰疬分枝杆菌、乌胞内分枝杆菌2型及9型、副结核分枝杆菌、偶发分枝杆菌以及草分枝杆菌等),制成灭活免疫原进行豚鼠接种,并以各种分枝杆菌PPD进行变态反应检查,以观察其发生交叉反应的情况。试验结果表明:各种分枝杆菌除发生主反应外,均表现出明显的相互交叉的变态反应,尤以瘰疬分枝杆菌、乌胞内分杆菌2型及9型、副结核分枝杆菌以及牛分枝杆菌等交叉严重。提示:在牛结核及副结核的检疫中出现其它分枝杆菌干扰的假阳性反应。     

山西省奶牛副结核病的血清学调查

为了了解山西地区奶牛副结核病的流行情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行了调查分析。结果表明,在784头奶牛血清样品中,有202头奶牛副结核抗体呈阳性,阳性率为25.77%。山西地区奶牛副结核病的感染率高,严重威胁着山西省奶牛业的发展,应该加强该病的防控。     

BA—Dot—ELISA检测牛结核血清抗体的研究

利用BA—Dot—ELISA检测72份结核变反阳性牛血清,阳性率为69.5％,比常规ELISA(44.4％)高。用该法检测布鲁氏菌病、粘膜病、传染性鼻气管炎、白血病病牛血清及堪萨斯分枝杆菌、偶发分枝杆菌高免牛血清均无交叉反应,但对50份副结核变反阳性牛血清出现了一定的交叉。该法重复性好,简便快速,结果判定不需特殊仪器。     

山羊痘弱毒疫苗（AV41株）接种途径和剂量对牛抗体反应的影响

为评估山羊痘弱毒疫苗（AV41株）经皮下和皮内接种牛体后的抗体产生规律,优化牛体免疫程序,选取25头健康成年肉牛分为5组,每组5头,标准单头份剂量为含量1.0×103.5TCID50 AV41株,分别以5倍和10倍羊用剂量进行皮下和皮内免疫,于接种后0、15、30、45和60 d,利用病毒中和试验（VNT）和ELISA试剂盒检测血清抗体水平。结果显示：鼻咽拭子和血液PCR结果均为阴性,未出现排毒;VNT与ELISA抗体检测结果相似,免疫后第30天,皮下接种5倍剂量组中有60%牛抗体转阳,中和抗体滴度最高达1∶640。同时,皮内和皮下10倍剂量组各有40%牛抗体转阳,皮内5倍剂量组有20%牛抗体转阳。VNT中和指数与ELISA的S/P值呈现显著正相关。上述结果表明,类似于国际上相关疫苗的接种途径和剂量,皮下注射5倍羊头份剂量山羊痘弱毒疫苗是安全和有效的,可作为临床预防牛结节皮肤病的免疫接种方案。     

牛场常用疫(菌)苗的使用方法

病名疫苗名称接种方法及剂量免疫期炭疽无毒炭疽芽孢苗1岁以上牛1mL/头;1岁以下0.5mL/头,均为皮下注射1年Ⅱ号炭疽芽孢苗1mL/头,皮下注射1年牛巴氏杆菌牛出血性败血症氢氧化铝菌苗体重100kg以下5mL/头;100~200kg,10mL/头;200kg以上20mL/头,均为皮下注射9个月布氏杆菌病布氏杆菌19号活菌苗6~8月龄,皮下注射5mL/头1年牛肺疫牛肺疫兔化弱毒菌苗(氢氧化铝菌苗)1岁以上牛2mL/头;6~12月龄1mL/头,臀肌注射1年气肿疽气肿疽甲醛菌苗5mL/头,皮下注射6个月牛瘟牛瘟兔化弱毒疫苗按瓶签规定方法稀释肌注1年以上口蹄疫口蹄疫弱毒疫苗按瓶签规定方法使…     

不同猪瘟疫苗类型及剂量的抗体反应特性研究

随机选择3个猪场, 从9头母猪生下的仔猪中挑选81头仔猪。随机分成9组,每组又分为3个小组,每小组3头,分别免疫猪瘟组织苗(A)、猪瘟细胞苗(B)和猪瘟脾淋苗(C),各疫苗分别采用1头份、2头份和3头份3个剂量。于25日龄首免疫前后不同时间点采血,分离血清。应用ELISA和IHA两种方法分别对采集的540份血清检测猪瘟抗体。不同类型的猪瘟疫苗免疫试验结果表明：猪瘟脾淋苗免疫效果较好,但不同疫苗之间的抗体水平差异不显著。不同免疫剂量的试验结果显示：3种疫苗以3头份的剂量免疫后抗体反应略高于1头份和2头份,二免后都能获得较高的抗体水平。     

副结核分枝杆菌McAb的某些特性鉴定

以超声波粉碎的副结核分枝杆菌地方株Ｃ２抗原免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，经与ＮＳ－１骨髓瘤细胞三次融合，获得了３株能稳定分泌抗副结核分枝ＭｃＡｂ的杂交瘤细胞系，其染色体数目为７８－１１０条，分别为ＩｇＭ和ＩｇＧ２。应用间接ＥＬＩＳＡ法测定细胞培养液，腹水和血清效价为１０＾－２～１０＾－７。交叉试验证明，ＭｃＡｂＯ１与受试的各株副结核分枝杆菌反应强烈，与牛分枝杆菌和草分枝杆菌有微弱特异性抗原之一。ＳＤＳ－Ｐ     

鸡新城疫Ⅰ系疫苗饮水和气雾免疫的研究与应用

研究了新城疫Ⅰ系疫苗对雏鸡、仔鸡、蛋鸡、肉鸡炊水和气雾免疫的安全性、免疫应答反应、免疫剂量和免疫效果等问题。试验结果证明,Ⅰ系疫苗用于雏鸡饮水免疫有良好的安全性,接种后呈现明显的免疫应答反应,免疫期为1.5～2个月。其效果优于Ⅱ系和Ⅳ系苗滴鼻。Ⅰ系苗饮水免疫用于蛋用仔鸡,免疫效果好,其血清HⅠ抗体比Ⅱ系Ⅳ系苗饮水免疫滴度高。免疫期达5～6个月。Ⅰ系苗对肉用雏鸡的饮水免疫也有良好的安全性。于15和45日龄分别进行一免和二免,可以保证肉用仔鸡整个生长期(2个多月)对本病的保护力。Ⅰ系苗饮水免疫使用的有效剂量,每毫升Ⅰ系苗250羽(4羽份/只)～500羽(2羽份/只)安全有效。使用DPS—1型手动气雾枪和JM—Ⅱ型电动气雾枪对中、成鸡进行Ⅰ系苗气雾免疫,效果优于肌肉注射免疫接种,且安全可靠,对产蛋没有影响。     

乳牛口服布氏猪型二号菌苗后体液免疫和细胞免疫状态的实验研究

作者发现,S_2菌苗,口服接种乳牛既未引起临床反应,又未导致流产和泌乳量减少。服苗后的SAT阳性反应,与文献上记载的19号菌苗在接种后维持阳性滴度1—2年相比较,它却在接种后6个月全部转为阴性,这对牛群布病检疫是有利的。应用淋巴细胞转化试验,作者发现,服苗组的淋巴细胞PHA转化率在1年内均比对照组高。     

接种传染性喉气管炎细胞弱毒菌鸡的免疫反应及体内的病毒分布

分别应用传染性喉气管炎(ILT)细胞苗(CA)和非细胞苗(CF)免疫接种鸡,在其血清中可检测到中和抗体、IgG和IgM—ELISA抗体,而在气管冲洗物中均未检测到任何抗体。经比较发现,接种CA苗的鸡比接种CF苗的鸡获得了较高的保护性免疫力,且前者比后者产生了较强的抗体应答反应,但抗体滴度的高低与保护力之间的相关性较差。无论经皮下接种CA苗还是CT苗,在接种后6天内,均可在肝、脾、胸腺、肺脏及其他器官中分离到ILT病毒。病毒分离率的高低与接种CA苗或CF苗没有直接关系。     

新疆巴州地区绵羊肺炎流行病学调查

为了解巴州地区绵羊肺炎病原的流行情况,抽检240只患肺炎羊的脏器、血清、眼结膜拭子、鼻腔拭子样品,对脏器和鼻腔拭子进行细菌的分离培养鉴定,采用ELISA方法检测血清中支原体抗体、呼吸道合胞体病毒抗体、副流感病毒抗体、结核分枝杆菌抗体,采用荧光PCR方法对眼结膜拭子进行小反刍兽疫病毒核酸检测。结果发现,溶血性曼氏杆菌检出率27.1%,链球菌检出率21.6%,多杀性巴氏杆菌检出率17.9%,支原体抗体检出率16.7%,呼吸道合胞体病毒抗体检出率40.0%,副流感病毒抗体检出率18.8%。溶血性曼氏杆菌检出率显著高于多杀性巴氏杆菌、支原体、结核分枝杆菌检出率,呼吸道合胞体病毒抗体检出率显著高于副流感3型病毒抗体检出率。表明巴州地区绵羊肺炎为多种细菌、病毒混合感染,呼吸道合胞体病毒、溶血性曼氏杆菌为其主要致病源。     

猪细小病毒病弱毒疫苗的保存期试验

将2批猪细小病毒病弱毒疫苗分别在2—8℃保存11个月、12个月、13个月,-20℃保存22个月、24个月、26个月,进行物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验、安全试验及免疫效力试验,探讨不同保存条件和保存期对疫苗的影响。结果表明:物理性状、无菌检验、支原体检验、外源病毒检验均符合《中国兽药典》的要求。安全试验每批次疫苗接种乳鼠全部健活;以10头份/头的剂量接种PPV HI抗体阴性猪,接种后定期采集血样和鼻肛分泌物进行病毒分离,结果均为阴性。疫苗在2—8℃保存至13个月,-20℃保存至26个月TCID_(50)均≥10~(6.25)笛/头份;接种PPV HI抗体阴性豚鼠抗体全部转为阳性;疫苗免疫PPV HI抗体阴性猪,免疫后1个月、7个月分别用PPV强毒攻击获得100%保护。     

昆虫细胞表达免出血症VP60蛋白间接ELISA方法建立及评价

采用Bac-to-Bac系统表达的兔出血症病毒(RHDV)结构蛋白VP60作为包被抗原,建立抗体检测间接ELISA方法,并对方法性能进行测定。试验以整合有VP60基因的重组杆状病毒接种Sf9昆虫细胞,感染细胞经裂解、离心初步纯化,作为包被抗原建立了检测RHD抗体的间接ELISA方法。经过对反应条件和试剂的优化选择,初步组装成间接ELISA试剂盒,并对其整体性能进行了评价。结果表明,含重组VP60蛋白的Sf9细胞裂解液最适包被稀释度为1:2000,换算为纯化VP60蛋白含量约为1.7μg·mL-1;待检血清最适稀释度为1:100;羊抗兔IgGHRP标记抗体最适使用浓度为1:30000。初步组装的ELISA试剂盒检测RHD阴性血清无假阳性反应,与其他常见兔病阳性血清无交叉反应,特异性良好;敏感性高于RHDV全病毒间接ELISA和血凝抑制试验,低于进口间接ELISA试剂盒;试剂盒批内和批间变异率在10%以内。37℃加速破坏试验和4℃保存期试验结果表明试剂盒保存期可以稳定在6个月。该方法可应用于兔出血症抗体水平监测及实验兔等级检测中。     

鸡新城疫V4克隆株疫苗研究与应用Ⅱ.疫苗安全性免疫效力、免疫持续期及保存期试验

用克隆株NDV4HB92接种鸡胚,制备5批活疫苗,经无菌检验合格后用于试验。安全试验表明:用10倍使用量含毒胚液,接种7日龄雏鸡,无不良反应;疫苗最小免疫量试验表明,用104EID500.1mL免疫18日龄易感雏鸡,14d后攻毒保护力达9/10以上;免疫持续期试验证明,用106EID50免疫18日龄易感雏鸡,有效抗体(HI≥1∶16)可持续4个月以上;保存期试验证明:湿苗-15℃保存有效期为18个月,4～8℃保存为4个月。     

鸡ND—EDS—76二联油乳剂灭活苗的研究及免疫效力、保存期观察

应用NDLasotaE株和EDS—76H912株，接种鸡胚和鸭胚，当血凝价上升到＞1：1280和1：10000时收获，经适当的灭活剂灭活后，按一定比例加吐温85、可苯85、硬脂酸铝和白油，制成ND—EDS—76二联灭活油苗。经免疫观察证明，该苗有良好的免疫力，两种病毒之间无干扰作用，被接种鸡无任何不良反应。该苗置4℃冰箱可保存12个月，15—30℃室温可保存6个月不破乳、不分层，颜色无改变。用该苗接种5000只父母代种鸡的追踪观察，接种后15天两种抗体呈明显的动态上升，25天可达到比较稳定的高峰水平，接种后10个月，ND和EDS—76抗体效价仍分别保持在6．5Log2和5．6tog2水平上。对18—20周龄产蛋母鸡，肌肉或皮下注射0．5ml／只，应用30万羽份的联苗证明，疫苗安全、效力确实，抗体维持时间长，保存期长，使用方便，效益显著。     

牛源非典型分枝杆菌的分离与鉴定

对我国东北和华北地区牛群中非典型分枝杆菌的感染情况进行了调查,从５２头结核（副结核）菌素变态反应阳性及可疑牛的１４２份巴结等材料和在屠宰场预备屠宰的２００头猪（肉）牛（其中８头结核菌素变态反应阳性或可疑）的５６９份淋巴结材料中分离出２０株分枝杆菌。经鉴定牛分枝杆菌３株,非典型分枝杆菌１７株。非典型分枝杆菌进一步被鉴定为：瘰疠分枝杆菌５株,偶发分枝杆菌４株,鸟－胞内分枝杆菌复合物４株,副结核分枝杆菌     

间接ELISA 与中和试验检测O 型FMDV 疫苗免疫猪血清抗体的比较研究

血清中和抗体滴度的高低,体现了血清对病毒感染的中和能力,是评价疫苗免疫效果的重要指标.对国内3个大型猪场共120头猪的血清样品分别进行O型口蹄疫病毒ELISA和病毒中和试验,并分别比较两种方法的符合率和阳性检出率.结果表明,两种方法的阳性符合率和阴性符合率分别为77.3％和72.2％,总符合率为75％,均能有效检测猪血清中的口蹄疫抗体水平,但是采用间接ELISA检测血清抗体,存在一定比例的假阳性或假阴性.病毒中和试验更适合进行口蹄疫血清学的检测.     

鸡ND—EDS—76二联油乳剂灭活苗的研究及免疫效力、保存期观察

应用NDLasotaE株和EDS－76H912株，接种鸡胚和鸭胚，当血凝价上升到大于等于1：1280和1：10000时收获，收适当的灭活剂灭活后，按一定比较加吐温85、可苯85，硬脂酸铝和白油，制成ND－EDS－76二联灭活油苗，经免疫观察证明，该苗有良好的免疫力，两种病毒之间无干扰作用，被接种鸡无任何不良反应。该苗置4℃冰箱可保存12个月，15－30℃室温可保存6个月不破乳，不分层，颜色无改变，用该苗接种5000只父母代种鸡的追踪观察，接种后15天两种抗体呈明显的动态上升，25天可达到比较稳定的高峰水平，接种后10个月，ND和EDS－76抗体效价仍分别保持在6．5Log2和5．6tog2水平上，，对18－20周龄产蛋母鸡，肌肉或皮下注射0．5ml/只，应用30万忌份的联苗证明，疫苗安全，效力确实，抗体维持时间长，保存期长，使用方便，效益显著。