4种化合物对离体培养二色胡枝子组织分化的影响

以BADH基因为选择标记基因进行遗传转化最适宜的选择剂、抑菌剂种类和浓度,通过不同浓度NaCl、甜菜碱醛、PEG及甜菜碱醛和NaCl的不同组合等进行胡枝子子叶节分化,茎段增殖以及生根培养,发现NaCl和甜菜碱醛都能抑制二色胡枝子的子叶节分化、茎段增殖和生根,可作为遗传转化中的选择剂。培养基中添加0.8g/L NaCl就能完全抑制二色胡枝子子叶节和茎段增殖,可作为遗传转化过程中子叶节和茎段增殖阶段的选择剂浓度。培养基中添加0.5g/L NaCl能抑制生根,适合作为离体培养生根阶段的选择剂浓度。随着培养基中甜菜碱醛浓度的增加,子叶节分化能力下降,当甜菜碱醛达到1.5g/L时子叶节不再分化,这可作为以甜菜碱醛为选择剂时子叶节分化阶段的最佳筛选。培养基中同时添加NaCl和甜菜碱醛时,NaCl 0.7g/L+甜菜碱醛0.3g/L就抑制了离体培养过程中茎段增殖和生根,比较适合二色胡枝子离体培养时茎段增殖和生根的筛选浓度。对头孢霉素的研究发现:培养基中添加200~300mg/L头孢霉素对离体培养的二色胡枝子子叶节分化影响不大,培养基中添加100mg/L的头孢霉素对离体培养的二色胡枝子茎段增殖和生根无显著影响。     

4种化合物对离体培养二色胡枝子组织分化的影响(英文)

以BADH基因为选择标记基因进行遗传转化最适宜的选择剂、抑菌剂种类和浓度,通过不同浓度NaCl、甜菜碱醛、PEG及甜菜碱醛和NaCl的不同组合等进行胡枝子子叶节分化,茎段增殖以及生根培养,发现NaCl和甜菜碱醛都能抑制二色胡枝子的子叶节分化、茎段增殖和生根,可作为遗传转化中的选择剂。培养基中添加0.8 g/L NaCl就能完全抑制二色胡枝子子叶节和茎段增殖,可作为遗传转化过程中子叶节和茎段增殖阶段的选择剂浓度。培养基中添加0.5 g/L NaCl能抑制生根,适合作为离体培养生根阶段的选择剂浓度。随着培养基中甜菜碱醛浓度的增加,子叶节分化能力下降,当甜菜碱醛达到1.5 g/L时子叶节不再分化,这可作为以甜菜碱醛为选择剂时子叶节分化阶段的最佳筛选。培养基中同时添加NaCl和甜菜碱醛时,NaCl 0.7 g/L+甜菜碱醛0.3 g/L就抑制了离体培养过程中茎段增殖和生根,比较适合二色胡枝子离体培养时茎段增殖和生根的筛选浓度。对头孢霉素的研究发现:培养基中添加200~300 mg/L头孢霉素对离体培养的二色胡枝子子叶节分化影响不大,培养基中添加100mg/L的头孢霉素对离体培养的二色胡枝子茎段增殖和生根无显著影响。     

美丽胡枝子再生体系的研究

以美丽胡枝子为材料,研究了6-BA、2,4-D、NAA和苗龄等因素对其子叶节再生、节段扩繁和试管苗生根的影响,目的是要建立其高效再生体系.试验结果表明,6-BA、2,4-D对美丽胡枝子子叶节再生有显著作用,再生最佳培养基为MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;不同苗龄的子叶节再生能力差别不大,但随着苗龄延长,子叶节对6-BA的敏感性增强; 6-BA对美丽胡枝子节段不定芽的形成影响也很明显,MS+6-BA 1.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L为其最佳增殖培养基;6-BA对美丽胡枝子试管苗的生根作用不大,而NAA对生根的影响显著,最佳生根培养基为MS+6-BA 0.15 mg/L+NAA 0.5 mg/L.      

二色胡枝子遗传转化中抗生素浓度优化研究

探讨了卡那霉素、G418和头孢霉素3种抗生素对二色胡枝子不同培养阶段外植体生长、分化和生根的影响及对农杆菌的抑菌效果.确立了由农杆菌介导的二色胡枝子遗传转化研究中抗生素转化体的筛选浓度和头孢霉素对菌株的抑菌浓度.结果表明:在子叶节转化筛选阶段,卡那霉素和G418的适宜浓度分别为20 mg/L和7.5 mg/L;在抗性芽增殖培养阶段.卡那霉素和G418浓度分别为150 mg/L和15.0 mg/L;在生根阶段,卡那霉素和G418浓度分别为20 mg/L和5.0mg/L.而头孢霉素在各阶段适宜浓度为0～300 ms/L;头孢霉素对农杆菌LBA4404和C58抑制浓度为200～300 mg/L时效果理想.     

多花胡枝子再生体系初探

[目的]研究多花胡枝子（Lespedezafloribunda）组培再生体系。[方法]以子叶节为初代分化外植体,诱导不定芽,通过继代培养获得再生茎段,培养生根后获得再生植株。[结果]最佳种子消毒时间为0．1％HgCl2溶液消毒8min;初代分化选择子叶节为外植体时,最佳分化配方是1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．05mg／L＋IBA0．2mg／L：最佳茎段继代配方是WS＋6-BA0．7mg／L＋NAA0．1mg／L＋IBA0．1mg／L;最佳生根配方是WS＋IBA0．3mg／L,生根率为74．8％。6-苄基腺嘌呤（6-BA）对初代分化与继代分化的影响均达显著水平（n=O．05）。与萘乙酸（NAA）相比,吲哚丁酸（IBA）诱导多花胡枝子生根的能力更好。     

转BADH-反义4CL基因二色胡枝子的组培快繁技术

为探索建立转BADH-反义4CL基因胡枝子组培快繁体系和掌握试管苗移栽技术,以转基因和非转基因二色胡枝子组培苗为材料,对植株进行茎段增殖、茎段生根的快繁研究,同时进行基质、光照、苗质量对试管苗移栽成活率影响研究。结果表明,非转基因植株茎段增殖最佳培养基配方为：1/2MS＋0.5 mg/L 6-BA＋0.1 mg/L NAA＋0.2 mg/L IBA,增殖系数4.46;转基因植株茎段增殖最佳培养基为1/2MS＋1.0 mg/L 6-BA0.1 mg/LNAA0.3 mg/L IBA,增殖系数3.95。非转基因植株茎段生根最佳培养基为1/2MS＋0.4 mg/L IBA,生根率为100%;转基因植株茎段生根培养基：1/2MS＋0.2 mg/L NAA＋0.4 mg/L IBA,生根率为99%。非转基因植株和转基因植株的移栽基质为草炭∶蛭石∶珍珠岩（体积比1∶1∶1/4）、遮一层遮阴网、苗质量为正常苗时移栽成活率较高。     

二色胡枝子黄酮体外抗氧化活性

通过二色胡枝子黄酮(Lespedeza bicolor flavonoids ,LBF)清除羟自由基、超氧阴离子的效果及抑制猪油、菜油和亚油酸的自氧化来研究其体外抗氧化作用.结果表明:二色胡枝子黄酮对清除自由基有显著作用,且清除率随黄酮浓度的增加而增大;能够明显地抑制猪油、菜油、亚油酸的自氧化,抑制作用随浓度的增大而增强.作为天然的抗氧化剂,二色胡枝子黄酮具有一定开发利用价值.     

二色胡枝子黄酮抗氧化活性的研究

通过二色胡枝子黄酮(Lespedeza bicolor flavonoids,LBF)清除羟自由基、超氧阴离子的效果及抑制猪油、菜油、和亚油酸的自氧化来研究二色胡枝子黄酮的抗氧化活性.其研究结果表明,二色胡枝子黄酮对清除自由基有显著性作用,且清除率随黄酮浓度的增加而增大;能够极显著地抑制猪油、菜油、亚油酸的自氧化(P＜0.01),抑制作用随浓度的增大而增强.作为天然的抗氧化剂,二色胡枝子黄酮具有一定的开发利用价值.     

短梗胡枝子优良单株组培快繁技术研究

为实现短梗胡枝子良种的产业化生产,以优良短梗胡枝子单株为材料,研究其组培快繁技术。短梗胡枝子启动培养时,以茎段为外植体,用有效氯1%的次氯酸钠表面灭菌12~14min,成活率高,分化效果好。叶片、叶柄不适合作为组培外植体。茎段增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L,最佳生根培养基为1/2 MS+NAA 0.2mg/L+IBA 0.4mg/L,生根率达到了86.3%。试管苗出瓶时,在草炭∶蛭石(2∶1)的栽培基质上成活率最高。     

2个胡枝子新品种嫩枝扦插繁殖技术研究

以新选育的2个胡枝子新品种为材料,采用完全随机区组设计,研究植物生长调节剂种类、处理时间、生根粉浓度、扦插基质、插穗粗度对胡枝子嫩枝扦插生根的影响。结果表明:①采用ABT、IBA、NAA、NAA与IBA混合液处理插穗,可显著提高胡枝子嫩枝扦插生根率,也促进了根系的伸长生长,而2,4-D对扦插生根无效;②使用浓度从100 mg/L至500 mg/L的生根粉处理2个二色胡枝子品种,其生根效果并不存在显著性差异;③使用添加草炭土的混合基质有利于插穗生根;④胡枝子扦插生根适宜的插穗粗度为4～8 mm;⑤用200 mg/L的NAA和ABT分别处理插穗5,10,15,20 min,这2个胡枝子品种在生根率方面都显示出NAA与ABT处理之间、4种时间处理之间都不存在显著性差异,而且这2种植物生长调节剂种类及这4种时间处理之间也不存在显著性的交互效应。⑥2个胡枝子品种在生根率、根系数量及根系长度方面均存在显著性差异。     

黑芝麻愈伤组织的诱导及分化的初步研究

以黑芝麻(Sesamum indicum DC)成熟种子无菌苗的子叶、子叶节、下胚轴作为外植体,选用MS基本培养基,并设置4种蔗糖浓度作愈伤组织诱导培养基,以2,4-D、6-BA、IAA、KT组成16种生长调节剂浓度配伍的分化培养基,对愈伤组织的形成及分化进行了研究.结果表明,蔗糖浓度30 g/L时对子叶、子叶节愈伤组织诱导较为有利,蔗糖浓度40 g/L时对下胚轴愈伤组织诱导较为有利,分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 1.5 mg/L时,子叶愈伤组织的分化率达30.0%,其效果较好.     

抗生素对根癌农杆菌抑制作用及对大豆子叶节再生的影响分析

以周豆12大豆子叶节为材料,研究了头孢呋辛钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠和头孢唑林钠4种抑菌抗生素对农杆菌的抑制作用和对大豆子叶节再生的影响,以及卡那霉素对大豆子叶节再生的影响。结果表明:随着卡那霉素浓度的增加,子叶节分化率逐渐降低,当浓度达到45 mg/L时,分化芽的生长几乎完全受到抑制,植株出现白化现象;4种抑菌抗生素中,头孢曲松钠对农杆菌的抑制作用最好,头孢呋辛钠和噻肟钠抑菌效果次之,结合抑菌抗生素对子叶节再生的影响作用,确定在大豆子叶节的遗传转化中,使用头孢曲松钠或头孢噻肟钠作为抑菌抗生素,临界浓度分别为200 mg/L和300 mg/L。而卡那霉素使用的临界浓度为45 mg/L。     

茶树体细胞植株再生的光照效应

为了探寻光照对茶树体细胞植株再生的影响效果,以茶树全胚,具有子叶柄的子叶为材料,研究５００,１５００ｌｘ,黑暗３种光照条件对植株再生的影响。结果表明,胚状体主要发生在子叶柄了子叶片的隆起处,子叶片隆起发生率随光照度增加而降低,子叶发生隆起的子叶培养物在５００ｌｘ光照度下培养,子叶片的胚状体分化率较高,子叶柄的胚状体,不定芽分化随光照度下降而下降;连续在黑暗下培养,子叶片的畸形胚发生率高,且数量多。     

辣椒子叶培养及其植株再生的研究

在辣椒子叶组织培养中,外植体的幼嫩和部位影响形态发生,通常较嫩的子叶和子叶中部容易诱导愈伤组织和植株再生;辣椒品种的不同,其培养效果差异很大;不同激素配比的培养基,影响愈伤组织形态发生和分化,当有一定量的细胞分裂素时,促进芽的分化,而在细胞分裂素和生长素配合使用时,即使生长素含量很低,也易诱导根的发生.     

杂种枫香组织培养再生研究

目的枫香具有适应性强、生长速度快、观赏价值高等特点,既可以作为用材树种又可以作为优良的园林绿化树种。北美枫香能够与中国枫香杂交并可产生有杂种优势的后代,但是杂种枫香的快速繁殖技术和遗传转化体系还有待完善。方法本研究以北美枫香为母本,中国枫香为父本进行杂交,选用子一代杂种枫香的子叶、子叶节以及下胚轴为外植体材料建立高效的组培再生体系,并对3种外植体的分化能力进行比较。结果(1) 子叶和子叶节外植体最佳芽诱导培养基为0.2 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA的WPM培养基,而下胚轴外植体最佳芽诱导培养基为0.1 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA的WPM培养基。(2)3种外植体在0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.8 mg/L GA不加琼脂的WPM芽伸长液体培养基中获得最高的平均不定芽诱导数。(3)不定芽在2.0 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA的WPM培养基中生根,生根率达到100%。(4)不定芽生根培养2个月后长为完整植株,移栽成活率在90%以上。结论(1) 杂种枫香3种外植体的分化能力依次为:子叶节>子叶>下胚轴,其中子叶节的分化能力显著高于子叶和下胚轴。(2)TDZ能够有效促进不定芽的诱导,GA对不定芽的伸长具有显著的影响。(3)杂种枫香外植体在固体培养基中获得了最高的不定芽诱导率,在液体培养基中获得了最高不定芽平均数量,而且液体培养中未出现玻璃化。本研究为杂种枫香新品种的快速繁育以及遗传转化体系的建立奠定了良好的基础。      

黄瓜再生体系和遗传转化的建立

以黄瓜（Cucumis sativus L.）哈研3号为试验材料,采用组织培养技术系统探讨以子叶或子叶节为外植体时不定芽的诱导效率,最终确定以子叶节作为再生体系及遗传转化体系的试验材料;并系统探讨了不同PGRs浓度对不定芽诱导、不定芽伸长及生根阶段的影响;建立了哈研3号黄瓜的高频再生体系;并在子叶节根端膨大阶段进行了抗生素（Km）浓度的摸索,建立了较为适宜的遗传转化体系,为转基因工作打下坚实的基础。     

向日葵幼苗初生维管系统的解剖学研究

根据子叶节区理论对向日葵(Helianthus annuus)幼苗初生维管系统进行了解剖学研究。结果表明:向日葵幼苗的子叶节区类型为顶枝伸长型。在子叶节区下部存在子叶节区—根过渡区;子叶节区上部存在子叶节区—茎连接区。这一结果与已报道的有关菊科植物幼苗的研究结果完全不同,为菊科植物幼苗初生维管系统的解剖结构增添了一份新资料。     

看护培养和子叶部位对儿菜(Brassica juncea Coss. Var. Gemmifera Lee et Lin) 再生芽发生的影响

以‘种都1号儿菜’(BrassicajunceaCoss.var.gemmiferaLeeetLincv.Zhong-DouNo.1)无菌子叶为材料,对看护培养效果及子叶部位对再生芽发生的影响进行了研究。结果表明,子叶可以直接分化产生再生芽。在接种子叶的同时,接种已有芽点分化的子叶外植体,可以提早再生芽的发生,并能显著提高芽再生率,但对平均再生芽数无明显影响。带子叶柄的完整子叶,其芽再生率最高,并极显著高于不带子叶柄的子叶叶片,但平均再生芽数以不带子叶柄的完整子叶叶片最高;子叶柄培养未能获得再生芽。     

甘蓝型油菜‘南盐油1号’不同外植体再生体系的比较研究

以甘蓝型油菜‘南盐油1号’下胚轴和具柄子叶为材料,通过植物组织培养方法,探讨不同预培养和分化培养的交叉组合对油菜植株再生的影响。结果表明:不同浓度的2,4-D、6-BA和AgNO3组合对外植体的分化有不同程度的影响,但分化出的芽苗均能生根,并生长成为植株。下胚轴在预培养(MS+0.5 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-16-BA)和分化培养(MS+3.0 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1NAA+5.0 mg.L-1AgNO3)条件下的分化率最高,达到95.23%;具柄子叶在预培养(MS+0.5 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-16-BA)和分化培养(MS+4.5 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1NAA+5.0 mg.L-1AgNO3)下的分化率最高,达到89.52%。上述结果表明,下胚轴很可能更适合作为‘南盐油1号’油菜在组织培养研究中的外植体。     

荞麦子叶节再生体系的建立

实验以荞麦子叶节为研究对象,摸索其再生所需的最适条件,建立荞麦的再生体系,为荞麦的转基因研究奠定基础.实验结果表明：种子萌发条件为去掉外种皮的种子用0.1％升汞灭菌1min,30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉的固体培养基培养.子叶节诱导生芽最适培养基为MS＋2.5mg/L6-BA＋0.05mg/LNAA＋30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉,芽诱导生根的培养基为1/4MS ＋6-BA （2.0mg/L） ＋NAA （0.05mg/L） ＋30g/L蔗糖＋7.5g/L琼脂粉.