西瓜同源四倍体的诱导与细胞学鉴定初报

1973年以来,探讨了秋水仙碱溶液(0.2％、0.4％)诱导西瓜同源四倍体的效果及细胞学鉴定方法。采用滴生长点法,羊毛脂乳涂法,胚芽倒置浸渍法对都三号、新太和、蜜玫、蜜宝、解放、红玫瑰、中非、台黑等八个二倍体西瓜品种(2n=22)进行多倍体人工诱变,除新太和与台黑两品种外,现已获得六个西瓜四倍体诱变株系(2n=44)。为了提高诱变效果,在诱变方法上进行了摸索,初步认为胚芽倒置浸渍法有一定特点。诱     

利用组织培养技术进行红千层多倍体诱导

利用组织培养技术培育红千层无菌苗,并运用秋水仙碱诱导多倍体.结果表明:利用0.2 %秋水仙碱处理无茵苗茎段15～20 d,从60个茎段中成功地诱导出了四倍体植株6株,其形态特征为叶色浓绿、叶片增厚、根系肥大等;据方差分析结果表明,四倍体与二倍体的叶长宽比差异显著;其体细胞染色体数目由2n=2x=22变为2n=4x=44.     

大白菜四倍体诱导方法的研究

采用不同药剂对植株不同部位组织进行诱变处理的方法 ,进行了大白菜四倍体诱导研究。结果表明 :用改良浸根法、秋水仙碱溶液点滴法、以及 0 0 5 %秋水仙碱和 4%二甲基亚砜混合溶液对大白菜进行诱导处理都能得到四倍体植株。诱变成功率以 0 2 %秋水仙碱溶液点滴处理最高 (最高可达 68 75 % ) ;改良浸根法浸泡 8h后 ,诱变成功率可达 68 0 0 %。     

西瓜多倍体育种简报

一、前言我室从1973年开始与本院遗传教研室协作进行西瓜多倍体育种工作,用0.2—0.4％的秋水仙碱溶液进行胚芽倒置浸渍和滴生长点的方法,先后诱变成红玫瑰、蜜宝、蜜玫、解放瓜、都三号、中非六个品种的四倍体(诱变方法和细胞学鉴定另文发表)。1976年从邵阳引进了邵阳402、邵阳403,从广东引进了小青皮四倍体,进行了单果选留。1978年对以上四倍体进行品比试验,对照品种为旭太和四倍体。     

利用组织培养技术进行红千层多倍体诱导

利用组织培养技术培育红千层无菌苗,并运用秋水仙碱诱导多倍体。结果表明：利用0．2％秋水仙碱处理无茵苗茎段15-20d,从60个茎段中成功地诱导出了四倍体植株6株,其形态特征为叶色浓绿、叶片增厚、根系肥大等;据方差分析蛄果表明,四倍体与二倍体的叶长宽比差异显著;其体细胞染色体数目由2n=2x=22变为2n=4x=44。     

秋水仙碱诱导番茄多倍体的研究

以巨宝金冠和毛粉802的种子和幼苗为试材,以秋水仙碱为诱变剂诱导多倍体。结果表明:处理番茄种子,以秋水仙碱浓度0.4%处理12 h效果最好,巨宝金冠和毛粉802的诱导率分别为26.7%和30%;处理番茄幼苗,以秋水仙碱浓度为0.03%处理8 h效果最好,巨宝金冠和毛粉802的诱导率分别为46.7%和50%。变异材料的细胞染色体(2n=4x=48)为2倍体材料的二倍。此外,四倍体变异材料均表现出叶长、叶宽、叶面积增大,叶形指数减少等特征。     

秋水仙素对罗汉果雄株多倍体的诱导

以罗汉果雄株组培苗为诱导材料,秋水仙素作为诱导剂,通过药剂浓度、处理时间2个因素,设计了9个处理,研究秋水仙素对罗汉果雄株多倍体的诱导。结果表明:用0.2%秋水仙素溶液处理顶芽36 h诱导率最佳,诱导变异率达到16%,所得变异植株经染色体检测为2n=4x=56,为四倍体。     

广西四倍体桑种质资源研究进展

在广西以秋水仙碱诱导、选育的四倍体桑种质达600多份,对大部分四倍体种质进行性状调查、产叶性能测定、叶质鉴定和杂交结实性试验等方面进行评选,获得一批高产型、优质型、高产优质型及结实性高、配合力好的优异四倍体桑种质。并以四倍体桑种质为亲本,采用2n×4n、4n×2n、4n×4n形式配成三倍体和四倍体组合共219个,育成了“桑特优1号”、“桑特优2号”、“桑特优3号”等一批高产优质的三倍体组合。今后对四倍体桑种质的深入研究,应继续诱导和充分利用现有人工四倍体资源,与优良二倍体杂交,组配三倍体杂优组合;继续选用优良杂种实生幼苗诱导人工四倍体,培育出优质高产四倍体品种;继续选用优良的四倍体桑作亲本,选配杂交组合,选育出优质高产的四倍体桑杂优组合;深入研究利用雄性或雌性配子二倍体化培育三倍体,是桑树三倍体育种的一条陕速、有效的途径。     

理化处理诱导合子染色体加倍选育青杨派杂种四倍体

利用四倍体与二倍体杂交是培育植物三倍体的最有效途径。为提高四倍体诱导效率,分别施加0.5%秋水仙碱和38～44℃高温对授粉后6～9d的‘哲引3号杨’花序进行处理,对理化处理诱导合子染色体加倍选育杨树四倍体的技术方法进行了初步探索,获得青杨派杂种四倍体8株。其中,施加0.5%秋水仙碱溶液浸泡处理授粉后7d的‘哲引3号杨’花序24h,获得四倍体3株;施加38、41和44℃高温处理授粉后7～8d的‘哲引3号杨’花序4h,获得四倍体5株。推测授粉后7～8d可能是‘哲引3号杨’受精后合子发生第一次有丝分裂较为集中的时期,适时施加理化处理可以获得一定比例的四倍体植株。     

秋水仙碱诱变绿玉树多倍体研究

采用培养基添加法、浸泡法以及先预培养后处理法对绿玉树丛生芽进行多倍体诱变. 结果表明: 在培养基中添加0.2%的秋水仙碱进行14 d培养以及先预培养3 d再用0.2%秋水仙碱进行24 h处理法可以获得较好的诱变效果. 其成活率和诱变率分别达到53.13%、60.00%和82.35%、72.22%. 茎、叶、气孔、保卫细胞、染色体以及过氧化物酶等形态生理指标的检测证明四倍体较二倍体发生了显著变化.     

秋水仙碱离体诱导薄皮甜瓜四倍体的研究初报

以甜瓜组培苗茎尖为材料,研究了秋水仙碱诱导染色体倍性变异的最佳浓度、最适处理时间以及离体茎尖的最佳苗龄。结果表明：以8d苗龄的茎尖,在含有0．1mg／L秋水仙碱和较低浓度细胞分裂素的液体培养基中处理24-48h的诱导方法最有利于四倍体的产生,诱导染色体加倍的频率达30％～40％。变异株在田间表现出生长缓慢、叶片变宽加厚、茎增粗、节间变短、果皮变厚、种子变大增重的现象,显微镜观察变异后代根尖的染色体数目为2n=4x=48条。     

西瓜幼苗多倍体诱导方法研究

[目的]获得西瓜多倍体,并提高西瓜多倍体的诱变率。[方法]对3个二倍体西瓜种质进行秋水仙素滴苗、不同苗态摘心、低温等综合处理诱变多倍体。[结果]结果表明:通过对各个单因素进行试验,初步确定了正交试验的3个水平。秋水仙素浓度为0.2%~0.4%,处理低温分别为12、15、18℃,苗态处理为1叶,2叶,3叶1心摘心处理,处理时间为4~6 d时,提高西瓜多倍体的诱变率效果较好。[结论]对西瓜幼苗进行摘心处理诱变能显著提高多倍体的诱变率。     

四倍体西瓜嫁接栽培试验

【目的】为解决广西四倍体西瓜生产连茬存在枯萎病危害的难题提供依据。【方法】以广西本地葫芦作砧木,与广西四倍体西瓜自交系402、403和四倍体西瓜杂交组合403×B15、403×JL、402×JL进行嫁接育苗和嫁接栽培试验,观察嫁接成活率及嫁接栽培对四倍体西瓜早熟性、枯萎病抗性、产量、果实品质的影响。【结果】5个嫁接组合的嫁接亲和性好,成活率高达97.14%~100.00%;第2雌花开花期比实生苗晚2~3d,节位升高1~2节;高抗枯萎病;平均单果重和产量均优于实生苗栽培,以402×JL增产效果最明显;果实中可溶性固形物含量、瓤色、质地、口感风味与实生苗栽培无明显差异。【结论】采用广西本地葫芦作砧木,与广西四倍体西瓜自交系402、403和四倍体西瓜杂交组合403×B15、403×JL、402×JL进行嫁接栽培是可行的,适宜在大田生产中推广应用。     

秋水仙素诱导厚皮甜瓜倍性研究

为了成功获得厚皮甜瓜四倍体,研究其倍性特征,本试验用二倍体厚皮甜瓜M01-3为试材,用0.1%、0.3%、0.5%和0.7%的秋水仙素溶液通过涂抹法对子叶期和一叶一心期幼苗进行处理,并通过染色体计数法和细胞学鉴定法分析倍性。结果表明,已获得同源四倍体甜瓜,0.3%和0.5%的诱导率最高;与二倍体相比,四倍体植株长势好,叶形指数小,茎增粗,花冠大,花色艳,果肉变厚,可溶性固形物含量增加,气孔变大,叶绿体数目增多。     

四倍体西瓜嫁接栽培试验

【目的】为解决广西四倍体西瓜生产连茬存在枯萎病危害的难题提供依据。【方法】以广西本地葫芦作砧木,与广西四倍体西瓜自交系402、403和四倍体西瓜杂交组合403×B15、403×JL、402×JL进行嫁接育苗和嫁接栽培试验,观察嫁接成活率及嫁接栽培对四倍体西瓜早熟性、枯萎病抗性、产量、果实品质的影响。【结果】5个嫁接组合的嫁接亲和性好,成活率高达97.14%~100.00%;第2雌花开花期比实生苗晚2~3 d,节位升高1~2节;高抗枯萎病;平均单果重和产量均优于实生苗栽培,以402×JL增产效果最明显;果实中可溶性固形物含量、瓤色、质地、口感风味与实生苗栽培无明显差异。【结论】采用广西本地葫芦作砧木,与广西四倍体西瓜自交系402、403和四倍体西瓜杂交组合403×B15、403×JL、402×JL进行嫁接栽培是可行的,适宜在大田生产中推广应用。     

四倍体少籽西瓜新品种兴桂六号的选育

【目的】选育适合露地爬地栽培和大棚立架栽培的四倍体西瓜新品种,提高广西西瓜产业竞争力。【方法】于2008年利用四倍体西瓜403作母本,四倍体西瓜JL作父本,配组选育四倍体一代杂交种兴桂六号,2009-2010年,连续两年进行露地爬地栽培品比试验,2011-2012年,连续两年进行大棚立架栽培品比试验。【结果】兴桂六号全生育期春造90-100 d,秋造65-80 d,果实发育期29-35 d。单果重3.5-4.5 kg,果实圆形,表皮深绿覆盖墨绿条带,有光泽,皮厚1.0-1.2 cm,耐贮运。果肉大红色,剖面光滑,纤维黄筋少,种籽少,汁多,质实、细密、清甜爽口,品质优,中心含糖11.5%。2009-2010年,连续两年露地爬地栽培品比试验,平均产量分别为38081.3和34602.8 kg/ha,分别比对照增产15.6%和13.7%。2011-2012年,连续两年大棚立架栽培品比试验平均产量分别为66577.5和63169.5 kg/ha,分别比对照增产18.1%和15.0%。2012年广西西瓜区域试验平均产量34182.0 kg/ha,比对照增产10.8%;2010-2012年,露地爬地生产栽培示范试验平均产量32550.0-36585.0 kg/ha,比对照增产10.6%-15.5%;大棚立架生产栽培试验平均产量60178.5-63168.0 kg/ha,比对照增产12.6%-15.2%。【结论】四倍体杂交西瓜新品种兴桂六号适宜露地栽培和大棚立体栽培,在广西西瓜种植区均可推广种植。     

蝴蝶兰类原球茎液体培养中用秋水仙素诱导多倍体

采用0.05%、0.10%和0.20%3种浓度的秋水仙素分别对液体培养过程中的蝴蝶兰类原球茎进行1、3和7 d的诱变处理,考察各处理蝴蝶兰类原球茎的生长状态、组织学特征及其分化成苗的状况,并对多倍体进行鉴定。结果表明:不同浓度秋水仙素对蝴蝶兰类原球茎的生长状况均产生一定影响,类原球茎相对膨大,表面粗糙,呈暗绿色,浓度越大、处理时间越长,影响越明显;不同浓度秋水仙素诱变时间长短与类原球茎细胞内部结构发生变化的程度关系密切;秋水仙素处理后的类原球茎分化苗周期增长,成苗率降低;不同处理的多倍体诱导频率不同,最高诱变率可达30.0%;多倍体在形态、细胞组织学上与二倍体差异明显,细胞核变大,染色体数目加倍。     

四倍体和二倍体西瓜离体组织诱导与耐盐筛选研究

通过离体组织加倍创造四倍体种质是一种快速产生多倍体的方法,为了确认获得的材料为四倍体变异,进行有效的倍性鉴定是不可缺少的。利用二倍体和四倍体西瓜的耐盐性差异,选取生长一致的二倍体和四倍体西瓜子叶再生的不定芽丛,接于含有0、8、10、12、14、16、18、20和22g/L NaCl的芽诱导培养基中,盐处理30d后,统计盐害情况和生长状况,并对四倍体西瓜子叶不定芽丛进行分离和筛选,筛选出西瓜离体组织培养过程中最适宜分离二倍体和四倍体西瓜不定芽的盐质量浓度。结果表明:当NaCl质量浓度在14~16g/L时,可以作为有效分离西瓜二倍体和四倍体,从而最终筛选出大量的能够正常生长发育的四倍体的最适盐质量浓度范围。该研究在西瓜离体组织加倍创造四倍体新种质的技术体系中,可以在早期简单有效地鉴定和筛选西瓜四倍体,加快多倍体西瓜的育种进程。     

NaCl胁迫下二倍体和同源四倍体西瓜幼苗DNA甲基化差异分析

【目的】研究二倍体和同源四倍体西瓜幼苗NaCl胁迫后形态学指标差异和DNA甲基化变化情况,分析不同倍性西瓜幼苗之间耐盐差异,结合形态学指标从表观遗传学角度解释二倍体和四倍体抗逆性差异机制。【方法】以3组不同倍性（二倍体、四倍体）西瓜幼苗为研究对象,待长至三叶一心时,用含有0、100、200、300和400 mmol·L^-1 NaCl的1/2 Hoagland营养液处理西瓜幼苗,NaCl处理8 d之后,鉴定西瓜幼苗受到的盐害指数,并运用甲基化敏感扩增多态性（methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP）技术,分析NaCl处理8 d之后二倍体和四倍体西瓜幼苗叶片基因组DNA甲基化水平和模式的变化。【结果】NaCl处理后,形态学指标比较发现,随着NaCl浓度的增加,三组西瓜幼苗的受伤害程度都随着增加,在不同的西瓜品种之间受伤害程度有差异,但是同一品种内同一NaCl浓度下,西瓜幼苗受伤害程度二倍体大于四倍体;从甲基化水平看,西瓜幼苗基因组DNA全甲基化率、半甲基化率、总甲基化率都随着NaCl浓度的增加而降低,同一NaCl浓度处理下甲基化率二倍体大于四倍体,二倍体和四倍体西瓜甲基化水平与其受伤害程度呈正相关;从甲基化模式来看,NaCl胁迫后DNA的去甲基化比率降低,超甲基化比率升高,并且其变化幅度是四倍体大于二倍体,不同倍性西瓜幼苗的甲基化模式与其受伤害程度呈负相关。【结论】NaCl胁迫后西瓜幼苗基因组DNA的甲基化状态发生了变化,并且这种变化与NaCl胁迫程度高度线性相关,西瓜幼苗通过降低甲基化率和降低去甲基化比率来应对NaCl胁迫,四倍体较二倍体有更低的甲基化比率和去甲基化比率,抗逆性四倍体强于二倍体。     

西瓜四倍体与二倍体正反交果实发育过程中内源激素的变化

为了探究西瓜四倍体与二倍体反交种子败育的原因,以蜜枚的二倍体和四倍体为材料,采用酶联免疫法(ELISA)对授粉后1~13 d果实内赤霉素(GA)、玉米素核苷(ZR)、脱落酸(ABA)和生长素(IAA)4种内源激素进行测定。结果表明:蜜枚二倍体与四倍体西瓜正交果实发育过程中,ZR和ABA呈现升高-降低-升高-降低的趋势,GA_3和IAA呈现降低-升高-降低-升高的趋势,蜜枚二倍体与四倍体西瓜反交授粉后3~4 d ABA含量较高,授粉后7 d GA和IAA含量较低,授粉后5 d GA_3平均水平低于正交。这样的差异可能就是反交种子败育的原因。