纯种柯乐猪与巴×柯杂交猪肠道菌群结构的研究

本试验对纯种柯乐猪与巴×柯杂交猪肠道菌群结构特性及差异性进行了研究,旨在从猪肠道微生物的角度揭示纯种柯乐猪耐粗饲特性及巴×柯杂交猪对青绿饲料的适应能力,为后期微生物添加剂的设计、柯乐猪杂交利用及标准化养殖提供依据。纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪在同等条件下养殖,达屠宰体重后(100 kg左右),随机各选3头屠宰,取十二指肠、空肠、回肠、结肠内容物,进行高通量测序和生物学信息分析。结果显示:纯种柯乐猪与巴×柯杂交猪各肠段Alpha多样性指数差异不显著(P0.05);Beta多样性分析显示,2个品种猪大部分样品交叉聚集到一起;肠道菌群结构分析显示,纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪小肠阶段以厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteria)为优势菌门,到了结肠阶段则是以拟杆菌门(Bacteroidetes)和厚壁菌门为优势菌门;纯种柯乐猪与巴×柯杂交猪结肠中有大量的纤维分解菌属,巴×柯杂交猪结肠中月形单胞菌属(Selenomonas)和脱硫弧菌属(Desulfovibrio)的相对丰度显著或极显著高于纯种柯乐猪(P0.05或P0.01),而消化球菌属(Peptococcus)、聚乙酸菌属(Acetitomaculum)、Leeia的相对丰度则显著低于纯种柯乐猪(P0.05);LEfSe分析后发现纯种柯乐猪结肠中富集着大量的产短链脂肪酸菌,其中纤维降解菌有聚乙酸菌属、瘤胃球菌科的不可培养瘤胃细菌4C0d_17(uncultured_rumen_bacterium_4C0d_17)、Leeia、拟杆菌纲、拟杆菌目,与纤维降解菌起协同作用的菌群有考拉杆菌属(Phascolarctobacterium)、考拉杆菌属的uncultured_Veillonellaceae_bacterium;巴×柯杂交猪结肠中富集的纤维降解菌有月形单胞菌属、柔嫩梭菌(Clostridium leptum)。上述结果表明,在整个肠道菌群结构上,纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪的优势菌在类别上非常接近,体现了环境相同效应,纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪的肠道菌群结构相对稳定且相似度高;在属水平上,纯种柯乐猪和巴×柯杂交猪的结肠中纤维降解菌表现出差异,纯种柯乐猪结肠内纤维降解菌的比例较高,说明引入外源血对肠道菌群结构有一定的影响,巴×柯杂交猪对粗纤维的消化能力较弱于柯乐猪。     

5个猪品种3个拷贝数变异区的多态性分析

为了探究拷贝数变异(copy number variation,CNV)在不同猪品种间的多态性,本试验根据猪SNP60芯片检测结果,以大白猪、香猪、柯乐猪、糯谷猪、荣昌猪为主要研究对象,采用实时荧光定量PCR方法,对5个猪品种基因组中3个CNV区域(CNVR91、CNVR92和CNVR143)的拷贝数进行测定。结果显示,香猪的CNVR91以拷贝数缺失为主,其他4个猪品种的拷贝数以正常为主;香猪、大白猪、柯乐猪、荣昌猪的CNVR92以拷贝数缺失为主,糯谷猪以拷贝数正常为主;香猪和糯谷猪的CNVR143以拷贝数增加为主,其他3个猪品种以拷贝数正常为主。表明3个拷贝数变异区在5个猪品种之间具有多态性,可能通过剂量效应影响香猪、糯谷猪和柯乐猪等相关基因的表达和生理功能。     

三个贵州地方猪品种SERPINA3基因拷贝数变异的多态性研究

为了研究地方猪品种SERPINA3基因拷贝数变异(Copy Number Variation,CNV)的多态性变化,采用实时荧光定量PCR方法,对香猪、糯谷猪和柯乐猪3个贵州地方猪品种的SERPINA3基因的拷贝数进行了分析,并与大白猪相比较。结果显示,在4个猪品种中,SERPINA3基因的拷贝数均以增加为主,香猪的SERPINA3基因的拷贝数最少,为10.45±0.37,大白猪的拷贝数最多,达18.02±0.92,糯谷猪与柯乐猪分别为14.40±0.94、14.05±0.91。其中香猪、糯谷猪和柯乐猪3个贵州地方猪品种的SERPINA3基因拷贝数与大白猪相比差异极显著(P0.01),糯谷猪与柯乐猪之间的差异不显著(P0.05),糯谷猪和柯乐猪与香猪相比差异极显著(P0.01)。结果提示:SERPINA3基因的拷贝数在猪品种之间存在丰富的多态性变化。     

柯乐猪的肉品质和风味指标测定及相关性分析

为进一步了解贵州地方猪品种柯乐猪的肉质风味特性,试验选取健康去势的公猪及母猪各25头进行屠宰,测定肉品质和风味指标,并分析柯乐猪肉质、风味及各性状间的相关性.结果:(1)柯乐猪屠宰率为(78.15±2.63)％,背膘厚(51.50±13.08)mm,眼肌面积(26.41±4.73)cm2;肌肉滴水损失为(1.96±0....     

柯乐猪与大白猪胴体性状、肉质性状研究及相关性分析

为探究地方品种柯乐猪与引进品种大白猪的种质特性,试验从2个品种中分别选择19头和12头进行胴体及肉质性状等相关指标的测定,并进行性状间相关性分析。相关性分析表明,柯乐猪和大白猪的宰前活重与胴体重均极显著正相关(P<0.01),瘦肉率与宰前活重均显著负相关(P<0.05);柯乐猪眼肌的L_45min*与b_45min*呈极显著正相关(r=0.701,P <0.01),大白猪眼肌的L_45min*与b_45min*呈显著正相关(r=0.671,P <0.05)。结果表明,在相同饲养环境条件下,大白猪的胴体性能优于柯乐猪,但柯乐猪肉质优于大白猪,性状间也存在一定的相关性。     

不同屠宰期柯乐猪肉品质的差异研究

为进一步探究柯乐猪的最佳屠宰期,试验选取体重和日龄相近、健康、发育良好的柯乐猪12头,在相同条件下饲养,于不同体重阶段(90,100,110 kg)屠宰,分别对其屠宰性能及肉品质指标进行测定,并结合日增重及料重比进一步分析确定柯乐猪的最佳屠宰期。结果表明:100 kg体重阶段柯乐猪平均背膘厚低于90 kg和110 kg体重阶段,但差异不显著(P0. 05);90 kg体重阶段熟肉率显著低于100 kg和110 kg体重阶段(P0. 05);90 kg体重阶段滴水损失显著高于100 kg和110 kg体重阶段(P0. 05);其他指标各体重阶段均差异不显著(P0. 05)。说明100 kg体重阶段的肉品质更优,经济效益更佳,可作为柯乐猪的最佳屠宰期。     

柯乐猪PAEP基因多态性及其与繁殖性状的关联分析

【目的】研究孕激素相关子宫内膜蛋白(progestogen associated endometrial protein, PAEP)基因多态性对柯乐猪繁殖性状的影响,以挖掘柯乐猪的高繁殖力基因,用于提升柯乐猪的繁殖力。【方法】以189头经产柯乐猪为试验动物,采用PCR产物测序和序列比对鉴定单核苷酸多态性(SNP)位点,利用SHEsis在线软件分析SNP位点的群体遗传特性,通过RNAfold、SOPMA、SWISS-MODEL和SWISS-PdbViewer程序对SNP位点进行生物信息学分析,利用SPSS 22.0软件分析PAEP基因SNP位点与柯乐猪繁殖性状的相关性。【结果】在柯乐猪PAEP基因中共鉴定到3个SNPs位点：外显子4的g.1884992 T>C位点,为错义突变,导致第135位缬氨酸(V)变成丙氨酸(A);内含子4的g.1885152 G>C和g.1887834 G>A位点。3个突变位点均检测到3种基因型;g.1884992 T>C位点属于低度多态(PIC<0.25),g.1885152 G>C、g.1887834 G>A位点属于...     

5个猪种HSD17B12基因结构变异SV225的多态性研究

基于香猪基因组重测序结果,发现HSD17B12基因内含子3中存在一个254 bp的结构变异位点,命名为SV225。为探索SV225在不同猪群体间多态性分布以及基因型与香猪产仔数的关系,选取4个贵州地方猪种(香猪、柯乐猪、江口萝卜猪、黔北黑猪)和1个欧洲猪种(大白猪)为动物样本,利用PCR检测5个猪种中结构变异SV225的分布频率。结果显示,4个贵州地方猪种中均检测到3种基因型:插入型Ⅱ,杂合型DI与缺失型DD,SV225多态性丰富,大白猪仅检测到Ⅱ型。4个贵州地方猪群相比,香猪和柯乐猪的D等位基因占优势,江口萝卜猪和黔北黑猪中Ⅰ等位基因比例更高。经卡方检验,香猪、柯乐猪的D等位基因频率显著高于江口萝卜猪和黔北黑猪(P0.01),且4个贵州地方猪种的D等位基因均显著高于大白猪(P0.01)。分析3种基因型与香猪产仔数的关系,发现Ⅱ型个体的第三胎平均产仔数比DI型多2.25头(P0.01)。本研究结果提示HSD17B12基因中的结构变异SV225与地方猪的产仔数可能存在一定的联系。     

6个猪品种PODXL基因中ALGA0105966位点多态性与体尺指标的关联分析

采用等位基因特异性PCR方法,对香猪、黔北黑猪、柯乐猪、糯谷猪、荣昌猪、大白猪6个中外猪品种足细胞标记蛋白(podocalyxin,PODXL)中的1个单核苷酸多态性位点ALGA0105966进行基因分型,研究该位点的多态性与猪的体尺指标之间的关联。从6个猪品种的PODXL基因中检测到ALGA0105966位点的基因频率存在多态性变化,香猪、柯乐猪和荣昌猪中以AA纯合型为优势基因型,A等位基因的频率明显高于G(P0.01);黔北黑猪、糯谷猪、大白猪以杂合的AG为优势基因型,A与G等位基因频率间的差异不明显(P0.05);关联分析结果表明:ALGA0105966位点的基因型与香猪的管围、柯乐猪的体高、体长、胸围、腹围、体重以及黔北黑猪的胸围、体重存在弱的正相关关系,与荣昌猪的体宽呈中度正相关。推测PODXL基因中ALGA0105966位点可能与地方猪的体尺和体重变化有关。     

柯乐猪与国外品种猪精子活力的比较分析

人工授精技术在猪繁殖育种上广为使用,种公猪精液质量是繁殖生产的关键因素,精液质量直接影响着养殖业的效益。试验针对贵州地方猪种柯乐猪和国外常见品种种公猪精液质量对比分析,结果表明,柯乐猪12h及72 h精子活力优于杜洛克猪和长白猪,72 h后保持良好活力,活力高于70%。这显示了柯乐猪种较强的精液活力,也为进一步研究与开发该猪种精液潜在价值以促进猪产业发展提供基础。     

日粮粗纤维水平对杜梅肉猪日增重和背膘厚度的影响

实验旨在探究不同粗纤维水平的日粮(同一能量水平)对杜梅肉猪(杜洛克与梅山猪杂交的二元商品肉猪)的生长性能和屠宰指标的影响.选取48头90日龄的健康杜梅肉猪仔猪为研究对象,随机分为4组,实验A组、B组、C组饲喂粗纤维质量分数分别为3.5％、5.5％和7.5％日粮,对照组饲喂常规日粮(粗纤维质量分数为2.5％),测定育服猪...     

酸化发酵复合蛋白饲料对生长肥育猪生长性能的影响

研究旨在通过饲养试验评价酸化发酵复合蛋白饲料等量替代玉米和豆粕饲喂生长肥育猪的效果。选用120头体质量相近(51.5±1.5)和品种相同的三元杂交(杜×长×大)生长猪,采用单因素完全随机区组设计,随机分为2组,每组设4个重复,每重复15头(1栏),对照组饲喂基础日粮B(玉米-豆粕型),试验组饲喂10.00%酸化发酵复合蛋白料替代基础日粮B中5个百分点玉米和5个百分点豆粕试验日粮;试验期130 d。结果表明,饲喂酸化发酵复合蛋白饲粮的试验组的肥育猪平均日增质量比对照组提高8.32%(P0.01),平均日采食量提高6.82%(P0.05),料重比略有改善(P0.05)。结果显示,用酸化发酵复合蛋白饲料替代玉米-豆粕型生长肥育猪日粮中5个百分点玉米和5个百分点豆粕能提高猪的生长性能,增加养猪收益。     

云南、贵州地方品种猪血液蛋白遗传多样性研究

采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶技术,研究了4个品种240头猪8个基因座位的蛋白多态性。结果表明,4个品种中Alb和Pi-Ⅱ均呈单态;在香猪中,Pi-Ⅰ座位呈单态;对于Po-Ⅰ座位,除柯乐猪外,其余品种均呈现单态。在4个品种中CA、Cp、Po-Ⅱ和Amy-Ⅰ均表现出多态性。群体遗传变异指标计算结果显示,4个品种蛋白座位的平均杂合度为0.34210(小耳猪),0.3229(大河猪),0.3030(香猪),0.3479(柯乐猪)(以8个座位计算)。根据基因频率计算奈式遗传距离,并用UPGMA法进行聚类分析,得出4个品种的聚类结果稍有差别。     

不同饲喂模式对肥育猪生长性能和经济效益的研究

试验旨在研究不同饲喂模式对肥育猪生长性能和经济效益的影响。试验选择150头体重42.0 kg左右的健康杜长大三元杂种肉猪,按体重随机将其分为3组,即自由采食组、限制饲喂10%组、限制饲喂15%组,每组5个重复,每个重复10头猪,公母各半,试验期85 d。试验结果表明:生产性能方面,1)不同饲喂模式下,肥育猪日增重差异显著(P0.05),自由采食组(891.50 g)显著高于限制饲喂10%组(858.50 g)和限制饲喂15%组(821.75 g);2)不同饲喂模式下,自由采食组料重比(2.79)显著高于限制饲喂10%组(2.61)和限制饲喂15%组(2.58);3)不同饲喂模式下,肥育猪背膘厚和腹围指标,限制饲喂15%组均有降低趋势,且低于自由采食组和限制饲喂10%组。经济效益方面,在当时饲料原料价格和猪价行情下,肥育猪每千克增重饲料成本:自由采食组最高(6.22元),限制饲喂15%组最低(5.75元),且限制饲喂15%组与限制饲喂10%组接近。单头获利:限制饲喂10%组最高,限制饲喂15%组最低。综上所述,该试验条件下:1)42~110 kg肥育猪阶段采用限制饲喂模式(限制饲喂10%组和限制饲喂15%组)可显著降低料重比和每千克增重饲料成本,但上市体重受一定影响,限制饲喂10%组头均盈利最高;2)在自由采食基础上限制饲喂15%组可较好地改善肥育猪"吊肚"和肥膘现象。     

七个贵州地方猪种RYR1基因突变的分布

兰尼定受体1(Ryanodine Receptor1,RYR1)基因中的单个氨基酸(R615C)是导致猪应激综合征、影响肉质的重要原因。采用RFLP方法,以大白猪、二个杂交猪群(杜洛克×长白猪×大白猪和长白猪×大白猪)为对照,研究了糯谷猪、萝卜猪、柯乐猪、宗地花猪、香猪、关岭猪和黔南黑猪7个贵州地方猪种RYR1基因突变的分布类型。结果表明,从柯乐猪中检测到一例杂合基因型RYR1Nn,杂合基因型的发生频率为2.08%,其余6个贵州地方猪种糯谷猪、萝卜猪、宗地花猪、香猪、关岭猪和黔南黑猪均为正常的基因型RYR1NN,对照组中,外三元、外二元杂交猪和大白猪中均检测到RYR1Nn基因型,杂合基因型的发生频率分别为11.11%、12.12%和5.77%,说明贵州地方猪种中RYR1基因的突变频率低于商品猪,但也存在一定的比例,应加强对地方猪种的利用和保护。     

生物发酵饲料在规模化猪场应用试验研究

为研究生物发酵蛋白饲料的应用效果,试验选择体况良好,体重相近的长大二元猪为试验对象,其中保育仔猪200头(试验1组),随机分为2组,每组5个重复,每个重复20头;生长育成猪(50~75 kg)100头(试验2组),随机分为2组,每组5个重复,每个重复10头。对照组饲喂基础日粮,试验组饲喂基础日粮+5%的发酵饲料。结果表明,试验1组、试验2组仔猪和生长育成猪的试验组的日增重均极显著高于对照组(P0.01),料重比、腹泻数均显著低于对照组(P0.05)。试验结果表明,生物发酵蛋白饲料在仔猪和生长育成猪的应用效果良好。     

牛初乳免疫球蛋白对仔猪血清IgG含量和增重的影响

试验选用120头大白仔猪,随机分为3组。A组为对照组,饲喂生理盐水,其余各组均于出生后24 h之内饲喂不同剂量的牛初乳免疫球蛋白制剂,观察对仔猪5、10日龄血清中牛IgG和猪IgG含量以及断奶时增重的影响。结果表明,饲喂牛初乳免疫球蛋白制剂4 g的仔猪,其5、10日龄血清中牛IgG和猪IgG含量显著高于对照组(P<0.05),断奶时增重显著高于对照组(P<0.05)。     

曲霉发酵豆粕对育成猪磷代谢的影响

选用8周龄的二元杂交育成猪15头(平均体重23.6 kg),随机分为3组,每组5头,采用全收粪法比较了饲喂曲霉(Aspergillus usami)发酵豆粕和普通豆粕对育成猪磷及其他营养成分的消化率。结果表明,发酵豆粕组育成猪磷消化率显著高于普通豆粕组,同时,粗蛋白质消化率也得到明显改善。试验结果提示,饲喂曲霉(Aspergillus usami)发酵的豆粕不仅可以提高育成猪磷和蛋白质的消化率,而且可以降低磷和氮的排泄量。     

饲喂颗粒料和粉料对育肥猪生长性能、胃形态和胴体品质的影响

试验选取2100头猪(PIC 327×1050;初始重为31.5±0.13 kg),用来评估饲喂颗粒料和粉料对育肥猪生长性能、胃形态和胴体品质的影响,试验期为118 d。试验分为6个处理组,猪只根据初始重随机分到6个处理组中(每个处理组有14个栏位,每个栏位25头猪)。每个处理组中有7个阉公猪栏和7个母猪栏。所有处理组均采用含15%DDGS的玉米-豆粕型日粮饲喂。试验分5个阶段饲喂,分别为0-28 d、28-56 d、56-84 d、84-98 d和98-118 d。6个处理组分别为0-118 d全部饲喂粉料、0-118 d全部饲喂颗粒料、0-70 d饲喂粉料而70-118 d饲喂颗粒料、0-70 d饲喂颗粒料而70-118 d饲喂粉料、或颗粒料和粉料每两周轮换一次,以粉料开始以颗粒料结束或者以颗粒料开始以粉料结束。在第110天时,每栏里随机挑选4头猪进行屠宰并收集胃,然后对胃进行溃疡和角质化评分。结果表明,饲喂粉料和饲喂颗粒料的猪的平均日增重没有差异。全期饲喂粉料的猪平均日采食量最大(P<0.05),全期饲喂颗粒料的猪平均日采食量最低(P<0.05),其他的处理组处于中间水平(P<0.05)。全期饲喂颗粒料的猪料重比最好(P<0.05),全期饲喂粉料的猪料重比最差(P<0.05),其他的处理组处于中间水平(P<0.05)。当在试验最后48 d饲喂颗粒料或在整个试验期饲喂颗粒料,与最后48 d饲喂粉料相比,胃溃疡指数评分增加(P<0.05),其他处理组评分处于中间水平。与其他处理组相比较,全期饲喂颗粒料的猪每栏被淘汰的数量增加(P<0.05)。当试验猪因体重较轻、健康或动物福利问题而面临风险,需要隔离时,由现场管理者决定是否将猪移走。各处理组对胴体重、胴体产量、背膘厚、眼肌厚度和瘦肉率无影响。总之,饲喂颗粒料改善了料重比,但是增加了胃溃疡发生率和淘汰猪数量。另外,与只饲喂颗粒料猪相比,颗粒料和粉料之间的轮换饲喂模式有较合适的料重比,并且减少了胃溃疡的发生。     

香猪SNP位点rs80894395的多态性及其与体尺指标之间的关联研究

为了探究影响香猪生长发育的功能基因,本试验利用Illumina Porcine SNP60K芯片筛选出N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferase 2,GALNT2)基因内含子10中一个与腹围呈弱相关的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点rs80894395。在此基础上应用等位基因特异性PCR(allele-specific PCR,AS-PCR)技术检测520头雌性香猪群体中该位点的基因型,并与43头大白猪、36头柯乐猪相比较。结果表明,从3个猪群体中检测到rs80894395位点的CC、CT和TT3种基因型;其中香猪群体以CT为优势基因型,且基因型与香猪的体重、体长和腹围呈弱的正相关;大白猪群体以CC基因型为主,T等位基因频率较香猪极显著减少(P<0.01);柯乐猪群体中CC与CT基因型频率相等,与香猪和大白猪的基因频率间的差异不显著(P>0.05)。生物信息学分析表明,rs80894395位点可能影响GALNT2基因的剪接过程。rs80894395与香猪的生长发育可能有一定的联系。