狼山鸡MHC多态性及血型与部分抗性性状关联的研究

为探究血型与抗病性状的关系,本研究利用微卫星标记技术对狼山鸡MHC-Ⅰ和MHC-Ⅳ区遗传多样性及血型进行研究;同时检测了部分抗性性状,并分析不同血型与抗性性状的相关性。结果表明:狼山鸡MHC-I位点期望杂合度为0.4891,多态信息含量平均为0.3695;MHC-IV位点期望杂合度为0.6357,多态信息含量平均为0.5628。狼山鸡中共发现6种常见血型,即纯合型B4、B21、B13及其杂合型B4/B21、B4/B13和B13/B21;免疫性状检测结果发现B21综合抗性指标显著好于其他血型(P<0.05)。实验提示,可利用MHC-Ⅰ和MHC-Ⅳ区进行血型判定,且血型与免疫性状存在关联性。     

小群保种方法的研究：狼山鸡（N系）血型基因种群结构分析

如何改进保存和管理畜禽遗传资源的方法,越来越得到国际的重视。联合国粮农组织曾于1980年6月在罗马召开《家畜遗传资源保存与管理的技术咨询会》,讨论、分析此问题。我国也已将畜禽品种资源的研究,正式列入“七五”期间重点攻关项目,     

狼山鸡核型参数与生产性能的关系研究

对狼山鸡核型参数与生产性能的关系进行研究，结果表明，狼山鸡No．1染色体相对长度水平与屠宰性状、产蛋性状存在较大的关联，当No．1染色体相对长度水平为4（22．00％〈RL≤23．00％）时，屠体重、半净膛重、全净膛重、腿肌重和胸肌重往往表现较低；当No．1染色体相对长度水平为3（21．00％〈RL≤22．00％）时，总产蛋量、开产蛋重往往表现较低，说明家鸡的No．1染色体的相对长度可用于辅助育种。     

SE感染对雏鸡空回肠组织中TLR4信号转导通路及pIgR的影响

为了研究肠炎沙门菌(SE)对TLR4信号通路调节雏鸡空肠和回肠组织中多聚免疫球蛋白受体(pIgR)的影响,本试验以7日龄海兰褐雏鸡的空肠和回肠组织为主要研究对象,通过口服SE的方式感染雏鸡,于感染后的1,3,7和14d,检测雏鸡的空肠和回肠组织中TLR4信号通路下游因子MyD88、TRAF6、NF-B和pIgR mRNA表达。结果表明:雏鸡感染SE后,TLR4信号通路被激活,且空肠、回肠组织中pIgR mRNA的表达量升高(P<0.01),同时上调空肠和回肠组织中pIgR的蛋白水平。证实SE能够激活空肠和回肠黏膜细胞表面的TLR4信号通路并上调pIgR的表达,进而增强雏鸡的肠黏膜免疫。     

基于RAD-seq测序的狼山鸡基因组选择信号分析

试验旨在分析狼山鸡基因组选择信号,发掘狼山鸡重要种质特性基因。采用简化基因组RAD-seq测序鉴定狼山鸡及其他18个地方鸡种基因组SNP标记,构建系统进化树阐明狼山鸡的遗传结构,采用ZHp选择信号检测方法鉴定狼山鸡基因组受选择区域（基因）。结果显示,在狼山鸡中鉴定出320 874个SNPs。19个地方鸡种总体上聚为五大类,与品种形成历史和区域分布基本一致。狼山鸡16个常染色体上的46个区域受到选择作用（ZHp<-3.5）,包含122个受选择基因,其中部分区域在遗传聚类同分支的安义瓦灰鸡（15个区域）、边鸡（14个区域）、大骨鸡（11个区域）和北京油鸡（13个区域）中也受到选择。GO分析结果显示,狼山鸡122个受选择基因显著富集在血细胞生成、转录调控、嗜酸性粒细胞趋化、骨化等生物学过程（P<0.05）。KEGG分析结果显示,狼山鸡122个受选择基因显著富集在心肌细胞肾上腺素能信号传导、Toll样受体信号通路、Ca²⁺信号通路、细胞质DNA传感通路、NOD样受体信号通路等（P<0.05）。选择作用主要体现在对狼山鸡刺激响应、先天免疫、代谢、神经系发育等方面的塑造。研究结果可为狼山鸡品种评价、保护及利用提供重要遗传信息。     

不同鸡种对肠炎沙门菌抗性的比较

为评价安卡、清远麻、仙居和白耳4个品种鸡对肠炎沙门菌的敏感性,将肠炎沙门菌经颈部皮下注射途径对各试验组鸡接种,测定半数致死量(LD50)。结果显示:4个品种鸡的LD50分别是白耳鸡为1.26×108cfu,仙居鸡为3.69×107cfu,安卡鸡为1.10×108cfu,清远麻鸡为5.01×107cfu。提示:中国地方鸡种对肠炎沙门菌的抗性存在着遗传多样性。     

狼山鸡生长性能及肉品质评价的研究

为研究狼山鸡生长性能和肉品质特性,采用非线性模型对狼山鸡生长曲线进行拟合分析,同时对狼山鸡的屠宰性能、肉品质指标进行了比较分析。结果表明,狼山公鸡生长曲线的最佳模型是Logistic,母鸡的最佳模型是Von Bertalanffy;狼山鸡的屠体重在1 145～1 217 g之间;屠宰率为82%～83%之间;胸肌率、腿肌率高于黄羽肉鸡一级标准;狼山鸡失水率、L*显著低于鹿苑鸡、文昌鸡,a*显著高于其他品种,b*显著高于鹿苑鸡,pH显著高于鹿苑鸡、文昌鸡;狼山鸡鸡汤香味显著低于鹿苑鸡、文昌鸡,胸肌粘结性显著低于其他品种,肌苷酸含量显著低于文昌鸡。狼山鸡肌纤维面积、直径显著低于鹿苑鸡、文昌鸡,肌纤维密度显著高于鹿苑鸡、文昌鸡。狼山鸡肉中挥发性有机物含量显著高于其他品种,其中癸醛、2-己醇、1-辛烯-3-醇、反-2-庚烯醛、反-2-辛烯醛、1-庚醇、2-乙基己醇、1-己醇、2-庚酮和2-正戊基呋喃等含量远高于其他3个品种（P<0.05）。由此可知,Logistic、Von Bertalanffy可用于预测狼山鸡的生长发育,狼山鸡肉系水力较高,肉色偏红,胸腿肌率较高,肌纤维特性较优,挥发性...     

LPS诱导牦牛成纤维细胞TLR4及其信号通路基因表达变化分析

采用PCR方法从牦牛成纤维细胞中扩增TLR4基因,并用5mg/L质量浓度的LPS诱导牦牛成纤维细胞,分别在0,12,24,36h用实时荧光定量PCR检测TLR4及其信号通路基因(IL-1β、IL-8)mRNA水平的相对表达量。结果显示,克隆得到TLR4基因序列长2 067bp(GenBank号:KU743904),与GenBank中野牦牛TLR4的相似性达99%。5mg/L质量浓度的LPS诱导处理后的各基因与0h相比,在12和24h均有上调,在36h均下调。诱导后24h,TLR4、IL-1β和IL-8基因的表达量均达到最大值,且都显著高于0和36h(P<0.05)。由此得出TLR4、IL-1β和IL-8均可在牦牛皮肤成纤维细胞中表达,并参与了对LPS的应答反应。     

TLR4及其通路在结核感染免疫中的作用

结核病是全球范围内严重感染性疾病之一,有关其防治以及致病机制的研究一直受到人们的广泛关注。TLR4作为TLRs受体家族中重要的一员,在机体识别结核分枝杆菌以及抗结核免疫中发挥重要的作用。现对TLR4及其信号通路在结核感染中的研究进展进行综述。     

鸭疫里默氏菌对鸭盲肠组织形态结构和TLR4信号通路相关基因表达的影响

为探讨鸭疫里默氏菌的可能致病机制,本试验采用显微镜观察鸭疫里默氏菌感染后鸭盲肠组织的形态结构变化,并对肠黏膜厚度、肠绒毛高度及隐窝深度进行测量和统计,采用实时荧光定量PCR法检测鸭疫里默氏菌感染后盲肠组织中TLR4信号通路相关基因的表达变化。病理学观察结果显示,鸭疫里默氏菌感染后肠道结构有明显的损伤,表现为肠绒毛脱落、淤血、出血、淋巴细胞浸润和淋巴细胞增生;统计结果表明,2 d时,鸭疫里默氏菌感染组的肠黏膜厚度（383.58 μm）显著低于对照组（643.39 μm）（P<0.05）;2和5 d时,感染组的肠绒毛高度（173.04和168.68 μm）均显著低于对照组（355.79和276.54 μm）（P<0.05）;9 d时,鸭疫里默氏菌感染组的绒毛高度/隐窝深度的比值（3.42）显著低于对照组（5.34）（P<0.05）。实时荧光定量PCR结果显示,鸭疫里默氏菌感染后2和5 d,TLR4信号通路相关基因TLR4、MD2、MyD88、TRAF6、NF-κB、IL-4和IL-8 mRNA的表达量上调。说明鸭疫里默氏菌感染可导致盲肠的肠黏膜组织物理损伤和炎性病变,且TLR4信号通路参与了该炎性反应过程。     

不同水平壳聚糖对黄羽肉鸡生产性能和免疫性能的影响

本试验旨在研究不同水平壳聚糖对黄羽肉鸡生产性能和免疫性能的影响。试验选用192只1日龄健康黄羽肉鸡,随机分为4个组,每组4个重复,每重复12只鸡。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别在基础日粮中添加200、600和1000 mg/kg壳聚糖。结果表明:(1)添加壳聚糖,对肉鸡平均日增重、平均日采食量和料重比无显著影响。(2)添加壳聚糖,可显著提高肉鸡胸腺指数和法氏囊指数,600和1000mg/kg壳聚糖组效果较好。     

鸡Toll样受体4信号通路及在鸡沙门菌抗病研究中的应用进展

Toll样受体作为一种模式识别受体,在先天免疫中通过识别病原体相关的分子模式,诱导炎症因子和细胞因子产生,在机体对抗感染过程中发挥重要作用.Toll样受体4(toll-1ike receptor 4,TLR4)是Toll样受体家族中识别细菌脂多糖最重要的模式受体.研究表明,TLR4及其信号通路的基因变异和表达调控与沙门菌的抗性有关.本文综述了TLR4/MyD88/NF-κB信号通路及其在鸡沙门菌抗病研究中的应用,并对其进行了展望.     

不同鸡种沙门菌感染率比较分析

试验采用血清平板凝集法,对江苏省某种鸡场中白耳鸡、仙居鸡、安卡鸡和清远麻鸡4个品种的沙门菌天然感染情况进行了评估。结果显示,公鸡中肉用型安卡鸡对2种沙门菌病的感染率最高,蛋用型品种居中;母鸡中蛋用型品种对2种沙门菌病的感染率最高,肉用型品种居中;不同品种、不同性别以肉蛋兼用型的清远麻鸡感染带菌率最低。     

发酵杜仲叶对肉鸡生产性能、抗氧化性能和免疫相关基因表达的影响

【目的】研究不同菌发酵杜仲叶对肉鸡生产性能、抗氧化性能、脏器及肠道免疫相关基因表达的影响,为新型替抗添加剂的研发提供科学依据。【方法】将基础饲粮(A组)及屎肠球菌发酵杜仲叶(B组)、植物乳杆菌发酵杜仲叶(C组)、屎肠球菌和植物乳杆菌混合发酵杜仲叶(D组)饲粮饲喂肉鸡,在第28和56天分别称重,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G);心脏采血检测血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)指标;采集肉鸡脾脏、肝脏、回肠组织,利用实时荧光定量PCR检测γ-干扰素(IFN-γ)、一氧化氮合成酶(iNOS)、白细胞介素6(IL-6)和IL-10基因表达量。【结果】(1)与A组相比,1～28和1～56 d, B、C、D组ADG显著提高,F/G显著降低(P<0.05);29～56 d, B、C组ADG显著提高,B、C、D组F/G显著降低(P<0.05)。(2)饲喂28、56 d, B、C组GSX-Px活性显著高于A组(P<0.05)。(3)与A组相比,饲喂28 d, B、C、D组脾脏以及D组回肠IFN-γ基因...     

马齿苋不同提取物对肠炎沙门菌的体外抑菌试验

采用牛津杯法和平板法观察马齿苋水提物、醇提物和水煮醇提物对肠炎沙门菌的抑制作用。结果表明,马齿苋水提物和醇提物浓度为1 g/m L时,肠炎沙门菌对其表现为极敏;对水煮醇提物表现为高敏。提取物浓度为0.5 g/m L时,肠炎沙门菌对水提物表现为极敏;对醇提物和水煮醇提物表现为高敏。浓度为0.25 g/m L时,肠炎沙门菌对马齿苋水提物和醇提物表现为高敏;对水煮醇提物表现为中敏。3种提取物对肠炎沙门菌的MIC和MBC分别为0.025、0.025 g/m L和0.050 g/m L     

LPS诱导条件下猪小肠上皮细胞TLR4及其信号通路基因表达变化分析

本试验通过0.1和1μg·mL-1浓度的LPS诱导处理猪小肠上皮细胞(IPEC-J2),分别在2、4、6h时利用实时荧光定量PCR方法检测TLR4及其信号通路相关基因(CD14、MyD88、TNF-α、IL-1β和IFN-α)mRNA水平相对表达量,初步探讨猪小肠上皮细胞受到产肠毒素大肠杆菌侵扰发生炎症反应的相关分子反应机理。结果发现,两种浓度的LPS均使得所检测的TLR4及其信号通路相关基因表达量上调,诱导后4~6h的表达量急速上升,且高浓度的LPS诱导处理后各基因表达量上调倍数明显高于低浓度LPS诱导时各基因表达量上调倍数,高浓度的LPS对机体肠道的刺激引起了更为强烈的免疫反应,使正常机体更快地产生炎症反应。由此推测,大肠杆菌侵染猪肠道后将释放LPS,TLR4作为LPS的受体,受LPS诱导其表达量上调,进而引起TLR4信号途径的信号传递,传递过程中由于MyD88的依赖机制,MyD88表达量上调相对稳定,再经过级联免疫放大效应,大量的促炎细胞因子释放,导致炎症及腹泻水肿病的产生。     

采用微阵列分析肠炎沙门菌在鸡体内的基因表达差异性

美国德克萨斯州农工大学的科学家们从肉鸡的遗传背景出发，对两个不同的品系（抗SE的品系A，对SE敏感的品系B）抵抗肠炎沙门菌（SE）感染的情况进行了研究。为了分析异嗜性和SE感染性之间的相互影响，采用大规模基因表达方法进行分析。结果发现，与同一品系内感染与非感染处理相比，     

肠炎沙门菌icdA基因缺失株的构建及重要特性分析

为研究肠炎沙门菌异柠檬酸脱氢酶(IDH)的功能,本研究利用λ-Red重组技术构建了肠炎沙门菌IDH编码基因icdA缺失突变株c50336ΔicdA,对其进行生长和生化特性检测,并通过体外模拟应激试验、药敏试验、生物被膜检测、抗蛋清杀伤、胞内存活和动物感染实验,分析icdA基因在肠炎沙门菌致病机制中的重要作用。研究结果显示,icdA基因缺失不影响肠炎沙门菌的生长特性和生化特性,在热应激(42℃)、酸应激(pH3.5)和高渗应激(NaCl2.4mol/L)条件下其存活率也未出现显著变化,但icdA基因缺失能够显著降低肠炎沙门菌对碱、低渗透压和过氧化氢应激的抵御能力,降低肠炎沙门菌对多粘菌素B的耐药性和生物被膜的形成能力;同时,该基因缺失能够降低肠炎沙门菌对蛋清杀伤的防御能力、在巨噬细胞内的存活能力和其对小鼠的毒力。研究结果表明icdA基因参与肠炎沙门菌的抗应激能力、耐药性、生物被膜形成和抗蛋清杀伤能力,从而影响细菌的毒力。本研究为肠炎沙门菌疫苗的研究奠定了重要基础。     

肠炎沙门菌iroB基因缺失株的构建及部分特性分析

为研究糖基转移酶IroB对沙门菌的重要作用,本研究利用λ-Red重组技术构建了肠炎沙门菌iroB基因缺失突变株c50336ΔiroB,通过应激试验、胞内存活试验和药物耐受试验检测缺失iroB基因后肠炎沙门菌生物特性的变化。结果显示,iroB基因缺失并未影响细菌的生长速度和生化特性,也不影响其对酸、碱和过氧化氢的抵抗能力,以及其在细胞内的存活能力,但使得细菌对热应激的敏感性增加,对蛋清抵抗能力下降,推测IroB参与沙门菌对铁的利用和对多溶菌酶的耐受;利用多粘菌素B进行最低抑菌浓度试验,结果显示其耐该药能力降低。本研究结果揭示IroB能够促进肠炎沙门菌的抗应激能力和耐药性,阐释了糖基转移酶IroB在沙门菌致病过程中的作用。     

孵化过程中受精蛋与非受精蛋抗肠炎沙门菌性的比较

为探明受精蛋在孵化过程中的抑菌机制,本研究对不同孵化阶段,受精蛋与非受精蛋抗肠炎沙门菌性进行了比较研究.利用1×10<'5> cfu/mL Salmonella Enteritidis(SE)菌悬液浸泡接种受精蛋与非受精蛋,测定蛋壳与壳膜、蛋清、蛋黄在不同孵化时间SE的侵染情况.结果表明:孵化第4天,受精蛋蛋壳与壳膜、蛋清比非受精蛋抗肠炎沙门菌活性强(P<0.05),两种鸡蛋蛋黄样本均未受到侵染;第8、12天,两种鸡蛋3个部位肠炎沙门菌的侵染情况没有显著性差异(P>0.05);第17天,受精蛋蛋壳与壳膜、蛋黄抗肠炎沙门菌活性显著高于非受精蛋(P<0.05),此时受精蛋鸡胚的漂洗物肠炎沙门菌阳性率为13.78%,非受精蛋蛋清肠炎沙门菌阳性率为45.16%.