Ghrelin对莎能奶山羊垂体催乳素和生长激素mRNA表达的影响

垂体催乳素和生长激素对雌性哺乳动物泌乳的启动和维持以及乳腺的发育都发挥着重要的调节作用.为探讨ghrelin对奶畜泌乳的调节作用,10只泌乳期莎能奶山羊随机分为2组(试验组和对照组),每组5只.试验组羊静脉注射ghrelin(3.0μg/kg)3 h后检测垂体催乳素(Prolactin,PRL)和生长激素(Grouth hormone,GH)mRNA的表达,结果显示一定剂量的ghrelin对催乳素mRNA的表达具显著上调作用(P<0.01);对生长激素mRNA的表达也有显著促进作用(P<0.01).结果表明,ghrelin在垂体水平上对催乳素和生长激素mRNA的表达具有上调作用,提示ghrelin可能通过对这些激素的作用参与了对奶畜泌乳的调节.     

氟对体外培养绵羊成骨细胞RANKL mRNA基因表达影响

为了探讨氟对体外培养的绵羊成骨细胞中核因子кB受体活化因子配体(RANKL)mRNA基因表达的影响,进行了绵羊成骨细胞体外培养,分别加入含浓度为0、10-6、10-5、10-4、5×10-4mol/L氟化钠(NaF)的培养液,并于第6天提取细胞总mRNA,用半定量RT-PCR方法分析RANKL mRNA表达水平的改变.结果表明,10-6、10-5、10-4、5×10-4 mol/L NaF均能刺激体外培养成骨细胞RANKL mRNA表达,当氟化钠浓度为10-5及5×10-4 mol/L时,可以明显促进RANKL mRNA表达(与对照组相比P＜0.01).这说明氟呈剂量依赖性地刺激成骨细胞RANKLmRNA的表达.     

低VA摄入影响鼠乳中铁水平和铁在乳腺、肝脏中的运输

V A接近缺乏状况很普遍,通常可能导致铁缺乏。给泌乳妇女补充VA和铁而不是仅仅补铁,发现母体铁状况和乳中铁含量呈正相关,表明了V A对乳腺铁运输起作用。我们假定在泌乳期间低V A吸收能诱导乳腺和肝脏铁运输蛋白不同作用,这样乳铁浓度有影响而母体铁没有影响。我们给哺乳中期鼠     

日粮类型对猪肌肉组织HSL mRNA和Obese mRNA基因表达的影响

选用20 kg左右的"杜×长×大"外三元杂交仔猪20头,随机分为2组,分别饲喂豆粕型和杂粕(双低菜籽粕+豆粕)型2种不同类型的日粮,饲养猪至体重达到100 kg左右时屠宰测定瘦肉率,取背最长肌肌肉组织,采用RT-PCR技术检测分析HSL mRNA和Obese mRNA表达情况,以探索出日粮类型与基因表达的关系。结果显示,杂粕日粮较豆粕日粮可显著增加HSL mRNA表达量、减少Obese mRNA表达量(P<0.05),2种日粮类型虽对猪瘦肉率无显著性影响,但是从实际值来看,杂粕日粮表现出提高趋势,较豆粕日粮提高3.5%(P>0.05)。     

铁过量或缺乏对新生仔猪血清生化指标及肝脏hepcidin mRNA表达量的影响

本试验旨在研究铁过量或缺乏对新生仔猪血清生化指标及肝脏hepcidin mRNA表达量的影响.挑选新出生的“杜长大”三元杂交仔猪15头[平均体重为(1.22±0.13)kg],随机分为3组,即缺铁组、正常组和铁过量组,每组5个重复,每个重复1头猪.3和7日龄时,缺铁组分别注射1 mL生理盐水,正常组分别注射1 mL右旋糖酐铁(含铁150 mg),铁过量组分别注射3 mL右旋糖酐铁(含铁450 mg).7日龄时,将所有仔猪全部处死,采集血清,并分离肝脏和脾脏,以测定血清生化指标、机体铁含量和肝脏hepcidin mRNA表达量.结果表明:肝脏、脾脏和血清中铁的含量均随着注射铁量的增加而显著或极显著增加(P ＜0.05或P＜0.01).与正常组相比,铁过量组血清中血红蛋白、球蛋白、总蛋白、丙二醛含量以及谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化物酶活性显著或极显著升高(P＜0.05或P＜0.01),超氧化物歧化酶活性显著降低(P＜0.05);而缺铁组血清中血红蛋白、球蛋白、总蛋白、丙二醛含量以及谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、过氧化物酶活性则显著或极显著降低(P＜0.05或P＜0.01),超氧化物歧化酶活性显著升高(P＜0.05).与正常组相比,铁过量组仔猪肝脏中hepcidin mRNA表达量极显著升高(P＜0.01),而缺铁组则极显著降低(P＜0.01).由此得出,铁过量或缺乏均会影响新生仔猪机体的免疫功能和抗氧化功能;铁过量可提高新生仔猪机体铁含量和肝脏中hepcidin mRNA表达量,铁缺乏则会降低新生仔猪机体铁含量和肝脏中hepcidin mRNA表达量.     

不同能量摄入对围产期奶牛脂肪组织胰岛素受体mRNA丰度的影响

将年龄、胎次相同,年产奶量大于5000kg的围产期健康奶牛30头随机分为3组,每组10头。按照中国奶牛饲养标准(2000),低能组饲喂减少20%日粮(能量摄入80%组),对照组饲喂标准日粮(能量摄入100%组),高能组饲喂增加20%日粮(能量摄入120%组),试验从产前14天开始至产后28天结束,产后各组奶牛均饲喂标准日粮。采用半定量RTPCR方法检测了不同能量摄入对围产期奶牛脂肪组织胰岛素受体(InsR)mRNA丰度的影响。结果表明:各组脂肪InsRmRNA相对表达量从产前14天至产后28天均呈现先升高后降低的趋势,产后14天达到最大值,且产后高于产前;低能组产前InsRmRNA相对表达量低于高能组和正常组,产后1天至产后28天高于高能组和正常组,产后14天显著高于高能组(P<0.01)。可见,干乳期低能饲喂奶牛,产后脂肪InsRmRNA表达增加,提示产前适当降低能量摄入水平,有利于胰岛素抑制泌乳初期脂肪动员作用的发挥。     

母体铅暴露对仔鼠肝脏MMP-2和MMP-9 mRNA表达的影响

为探讨母体铅暴露对仔鼠肝脏MMP-2和MMP-9 mRNA表达的影响,采用自由饮水模式建立铅暴露动物模型,将40只雌性小鼠自妊娠第1天开始经饮水染铅(1.0,5.0,10.0g/L,对照组饮蒸馏水)至仔鼠出生后21d,随机分为低、中、高剂量染毒组和对照组,仔鼠21日龄,分别测其血液和肝脏中铅的含量,然后取其肝脏组织,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测各组仔鼠肝脏中MMP-2和MMP-9mRNA的表达情况。结果显示,21d后,铅暴露组仔鼠血液和肝脏中铅水平均明显高于对照组(P<0.05);与对照组相比,低、中和高剂量铅暴露组仔鼠肝脏内MMP-2mRNA的表达量明显增高,且差异具有统计学意义(P<0.05)。中、高剂量铅暴露组仔鼠肝脏组织中MMP-9mRNA的表达明显高于对照组(P<0.05),但低剂量铅暴露组仔鼠肝脏组织中MMP-9mRNA的表达与对照组相比差异不显著(P>0.05)。结果表明,母体铅暴露可能通过改变仔鼠肝脏中MMP-2 mRNA的表达进而造成肝脏损伤。母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,铅暴露可能通过增强仔鼠肝脏中MMP-9mRNA的表达进而造成肝脏损伤,从而引起组织发生病变。     

酮病、脂肪肝奶牛胰岛素受体mRNA丰度

选择自然发生的酮病奶牛、脂肪肝奶牛和正常围产期荷斯坦奶牛（对照）各5头，通过手术方法采取其肝脏样品，采用半定量RT—PCR方法检测了这3组奶牛肝胜样品胰岛素受体（InsR）mRNA丰度的变化。结果表明，酮痛奶牛InsRmRNA相对表达量低于正常对照奶牛，而高于脂肪肝奶牛；脂肪肝奶牛InsR mRNA相对表达量低于正常对照奶牛和酮病奶牛（P〈0．05）。可见，酮病奶牛InsR mRNA相对表达量下降，提示此有利于酮病奶牛糖异生和脂肪动员，从而缓解能量负平衡；脂肪肝奶牛InsR mRNA相对表达量降低，提示奶牛胰岛素应答显著减弱，此时奶牛可能发生了胰岛素抵抗。     

热应激对肉鸡血清内毒素含量和肝脏中TLR4 mRNA表达的影响

为探讨肉鸡热应激条件下血液内毒素对肝脏TLR4 mRNA表达的影响,我们复制肉鸡热应激模型。应用鲎试剂法和分子生物学等方法检测不同热应激时间段内毒素和TLR4 mRNA表达量的变化。试验结果显示,与对照组相比,热应激组肉鸡血清内毒素与TLR4 mRNA在肝脏中的表达差异均极显著(P0.01)。表明热应激条件下内毒素含量的升高可以对肉鸡肝脏造成损伤。     

铁对泌乳期小鼠乳腺中乳铁蛋白基因mRNA水平的影响

探讨铁对小鼠乳腺中乳铁蛋白(lactoferrin,LF)mRNA基因表达的影响。选取雌性昆明白小鼠40只,随机分成5组,按实验动物标准饲养,各处理组添加不同水平和来源的铁:硫酸亚铁(Fe0mg/kg)、硫酸亚铁(Fe60mg/kg)、硫酸亚铁(Fe120mg/kg)、甘氨酸铁(Fe120mg/kg)、甘氨酸铁 硫酸亚铁(Fe120mg/kg)。配种、产仔,于哺乳21d后处死取样,用相对定量RT-PCR方法,以β-actin作内标,测乳腺LFmRNA丰度。试验表明,不同来源和剂量的铁可不同程度影响LFmRNA的表达,甘氨酸铁(Fe120mg/kg)组较对照组差异达极显著水平(P<0.01)。因此,甘氨酸铁可显著提高乳腺中LFmRNA的表达量,作为有效铁补充剂的同时可能促进乳汁中LF的含量。     

一氧化氮合酶在猪早期胚胎发育中表达的初步研究

本研究运用分子生物学手段探究了一氧化氮(NO)在猪早期胚胎发育过程中的表达情况及其相关的规律。应用RT-PCR方法将猪各发育阶段的早期胚胎的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS）进行检测,然后对产物进行半定量分析。结果表明,iNOS在猪早期胚胎发育的整个过程中都有表达,其相对表达量随着胚胎发育进程呈现上升的趋势,在桑葚/囊胚阶段达到最高;eNOS仅仅是在2-细胞期和4-细胞期有表达,其相对表达量在2～4-细胞期间的差异不明显;在猪2～4-细胞胚胎发育过程中,iNOS的相对表达量高于eNOS的相对表达量。结果表明,在猪早期胚胎发育中NO的产量主要由iNOS调节。     

脂联素对体外培养新生牛脂肪细胞ADPN、HSL mRNA表达的影响

取单层生长状态良好的犊牛脂肪细胞,分别添加0、2.5、5、15、30、50、100 μg/mL外源牛重组脂联素（adiponectin,ADPN）,培养12 h后提取总RNA,采用荧光定量PCR方法检测外源脂联素对脂肪细胞ADPN mRNA和HSL mRNA表达水平的影响。结果显示,随着ADPN添加量的增多,ADPN mRNA相对表达量呈下降趋势;添加ADPN 15 μg/mL时,HSL mRNA的表达量达到峰值,之后呈下降趋势。结果表明体外培养的脂肪细胞中ADPN mRNA表达量受自身的负调节,而添加适量的ADPN可刺激脂肪细胞HSL mRNA的表达。     

利维爱(Livial)对动脉粥样硬化兔组织内雌激素受体和低密度脂蛋白受体的影响

以去势雌兔作为对照,用高胆固醇饮食法复制动脉粥样硬化(AS)模型,研究了利维爱(Livial)在防治兔动脉粥样硬化过程中对雌激素受体和低密度脂蛋白受体mRNA表达的影响。应用RT-PCR方法,β-actin做内参照,对各组去势雌兔心脏、肝脏组织内雌激素受体和低密度脂蛋白受体mRNA的表达进行了检测。结果,2种受体在兔心脏和肝脏内均有表达。对照组,雌激素受体在心脏、肝脏内的相对表达量分别为0.43±0.12、0.39±0.20;低密底脂蛋白受体在心脏、肝脏内的相对表达量分别为0.27±0.05、0.86±0.12,差异显著(P<0.001)。AS模型组,雌激素受体和低密度脂蛋白受体在心脏、肝脏内的相对表达量分别为0.29±0.03、0.27±0.06和0.04±0.01、0.17±0.02,2种受体的mRNA表达均比对照组降低,差异显著(P<0.001)。利维爱组(饲喂高胆固醇饲料同时给予利维爱),雌激素受体在心脏、肝脏内的相对表达量为0.41±0.09、0.36±0.06,与模型组相比表达量显著提高(P<0.001),与对照组表达量接近;低密度脂蛋白受体在心脏、肝脏内的相对表达量为0.04±0.02、0.18±0.04,与模型组比较未见显著变化。由此认为,组织内2种受体的mRNA表达量降低可促进动脉粥样硬化的发生;利维爱通过提高组织内雌激素受体mRNA的表达可防治AS的发生与发展,对低密度脂蛋白受体的mRNA表达影响较小。     

应用竞争PCR检测丙酸盐对体外培养牛肝细胞丙酮酸羧化酶mRNA水平的影响

根据牛肝细胞内PC(丙酮酸羧化酶)基因组与PCcDNA相比多含有一个内含子序列．在其中再插入一外源DNA序列．从而使最终构建的突变体片段的长度大于PCcDNA的长度，成功构建了PCcDNA的竞争DNA模板，然后应用竞争PCR方法研究了丙酸盐对体外培养新生牛单层肝细胞PCmRNA水平的影响。使单层肝细胞培养液中丙酸钠浓度分别为0、1．5、2．5、3．5、4．5、8．5、11．5mmol／L，处理24h，提取总RNA、逆转录，在同一体系中用相同引物扩增目的带和竞争模板带。结果表明．随着丙酸钠浓度的升高．PCmRNA水平呈上升趋势，提示肝细胞内PCmRNA的表达水平受培养液中丙酸钠浓度的影响。     

抑肌素基因mRNA在猪肌肉组织表达差异的研究

抑肌素基因(Myostatin，MSTN)是肌肉生长抑制素基因的简称，又称GDF-8(Growth and Differential Factor-8)基因，具有抑制骨骼肌生长的作用，是骨骼肌生长的负调控因子。该基因在动物分子水平定向育种、提高产肉性能上具有极大的应用前景。研究发现，在牛和绵羊的心肌、猪的乳腺及鱼类的多种组织中均发现有其表达。在调节脂肪积累、参与骨折愈合、调节排卵、心脏发育及心肌的组织修复、以及乳腺的发生和泌乳等过程中可能也具有重要作用。     

不同硒浓度日粮对小鼠肝脏和睾丸组织中部分硒蛋白mRNA水平的影响

选取80只7周龄雄性BALB/c小鼠,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,每组20只,使Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组基础日粮中硒含量达到0.045、0.1、0.4和0.8 mg/kg。结果表明:①Ⅰ组能显著降低小鼠肝脏中硒的沉积量(P<0.05);②Ⅰ组谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1,GPx1)的mRNA相对表达量明显低于Ⅱ、Ⅲ组(P<0.05),且Ⅱ、Ⅲ组在肝脏中差异显著(P<0.05),在睾丸中差异不显著(P>0.05);③Ⅰ、Ⅲ组肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPx4)的mRNA相对表达量差异不显著(P>0.05),但均显著低于Ⅱ组(P<0.05),而各试验组间在睾丸中差异均不显著(P>0.05);④随着日粮中硒添加量的增加,肝脏和睾丸中硫氧还蛋白还原酶2(thioredoxin reductase 2,TrxR2)的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。因此,在肝脏和睾丸组织中,饲喂低硒饲料能显著降低硒的沉积量和GPx1、GPx4、TrxR2的mRNA相对表达量(P<0.05);而饲喂高硒饲料能显著降低GPx1的mRNA相对表达量(P<0.05),同时显著增加TrxR2的mRNA相对表达量(P<0.05)。提示,硒对GPx1、GPx4和TrxR2 mRNA相对表达量的调节存在组织差异性。     

成年公猪睾丸及附睾中促卵泡素受体mRNA的表达

本试验采用FQ PCR技术, 进行了成年公猪睾丸及附睾中促卵泡素受体(FSHR) mRNA表达的研究。结果表明,FSHR mRNA不仅在睾丸内表达,附睾中也有表达。睾丸、附睾中FSHR mRNA的表达量分别为(1.66±0.14)×107和(3.54±0.25)×105个拷贝/ml,睾丸FSHR mRNA表达量极显著高于附睾组织（P<0.01）。     

Concentration of Serum Transferrin in Sick Horses and its Relationship to Serum Albumin Content

Studies of transferrin (Tf) concentration in sera of sick horses were carried out using Mancini’s immunodiffusion technique. Relative values against a chosen reference serum were determined for a total of 112 horses.Horses with acute infections had Tf values significantly below the normal. The lowest individual Tf value in this group (46%) was found in a six-months-old foal with temperature 41°C and watery diarrhoea.Horses suffering from acute laminitis also had decreased Tf values. The lowest value in the whole material (45%) was found in a horse belonging to this group.There was a positive correlation between the Tf value and the albumin content in serum.     

饲粮硒对种公鸡睾丸中硒含量和硒蛋白酶基因mRNA表达的影响

本试验旨在研究饲粮硒对海兰褐种公鸡睾丸中硒含量和硒蛋白酶基因mRNA表达的影响.选取224只48周龄海兰褐种公鸡,随机分为7个处理,每个处理4个重复,每个重复8只.将亚硒酸钠(SS)和酵母硒(SY)2种硒源分别以3个硒水平(0.2、0.5和0.8 mg/kg)添加到海兰褐种公鸡基础饲粮中,对照组饲喂基础饲粮,进行为期3...