DNA疫苗的特点及在不同动物中的应用

1特点 DNA疫苗又称核酸疫苗或基因疫苗，是编码免疫原或与免疫原相关的真核表达质粒DNA（或RNA）。可经一定途径进入动物体内，被宿主细胞摄取后转录和翻译，表达出抗原蛋白，此抗原蛋白能刺激机体产生非特异性和特异性免疫应答反应，从而起到免疫保护作用。     

核酸免疫与核酸疫苗研究进展

核酸免疫是利用重组DNA技术将保护性抗原蛋白基因克隆到真核表达载体,并将其直接导入体内,使抗原蛋白经过内源性表达递呈给免疫系统,诱发机体产生特异性的体液免疫和细胞免疫反应。核酸免疫也称DNA免疫或基因免疫。用于免疫注射的质粒DNA称为核酸疫苗(nucleicacidvaccine)或DNA疫苗(DNAvaccine)。核酸疫苗不同于传统的弱毒苗、灭活疫苗及蛋白亚单位苗,它是带有特异抗原基因的真核表达质粒。1　核酸免疫的发展核酸免疫是随着现代分子生物学和免疫学的发展而产生的。70年代末,Israel等将纯化的多瘤病毒DNA直接注射小鼠,证实裸DNA可被…     

核酸疫苗的研究和应用

90年代中期 ,研制了一种新的免疫防治制剂 -核酸疫苗。所谓核酸疫苗是指将含有编码某种抗原蛋白基因序列的质粒载体作为疫苗 ,直接导入动物细胞内 ,通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白 ,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答 ,从而使被接种动物获得相应的免疫保护。免疫应答包括了细胞激活、细胞毒淋巴细胞 ( CTL)产生、细胞因子分泌以及特异性抗体形成等。核酸疫苗又称为基因疫苗或裸 DNA疫苗。这种免疫称为核酸免疫、基因免疫 ,DNA介导的免疫以及遗传免疫等。核酸疫苗与传统疫苗相比有许多潜在的优势 ,从而被誉为疫苗领域的第三次革命…     

核酸疫苗的研究进展

核酸疫苗又称基因疫苗，包括DNA疫苗和RNA疫苗。目前研究最多的是DNA疫苗，由于其不需要任何化学载体，又称裸DNA疫苗，主要是利用基因重组技术直接将编码抗原蛋白的外源抗原基因导入动物体细胞内，在宿主细胞中表达外源抗原基因，诱导宿主产生对该抗原的免疫应答，从而使被接种动物获得免疫保护。     

第三代新型疫苗--核酸疫苗的研究概况

核酸疫苗(nucle ic acid vaccine)也称基因疫苗(genetic vaccine)或DNA疫苗(DNAbased immunization),是指将含有编码某种抗原蛋白的外源基因与质粒重组后直接导入动物细胞内,并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗。     

核酸疫苗研究进展

核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（ＤＮＡ）与质粒重组后,直接导入动物细胞内,并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。因此,核酸疫苗又称基因疫苗。由于其不需要任何化学载体,故又称裸ＤＮ...     

核酸疫苗的研究现状及展望

在20世纪90年代初,一系列关于注射外源基因在体内诱导免疫应答的报道揭开了核酸疫苗研究的序幕。核酸疫苗（nucleicacid vaccine）也称基因疫苗（genetic vaccine）,是指将含有编码的蛋白基因序列的质粒载体,经肌肉注射或微弹轰击等方法导人宿主体内,通过宿主细胞表达抗原蛋白,诱导宿主细胞产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。核酸疫苗是继灭活疫苗、减毒活疫苗和基因工程重组蛋白疫苗之后的第三代疫苗,是利用现代生物技术免疫学、生物化学、分子生物学等研制成的,     

应用免疫胶体金标记技术对狂犬病病毒形态发生学的抗原定位研究

利用包埋后免疫胶体金标记技术，通过透射电子显微镜，对感染ＢＨＫ２１细胞的鹿狂犬病病毒进行了形态发生的抗原定位。结果：感染细胞的细胞质内有５种包涵体，其中４种被免疫胶体金特异性标记，这些病毒抗原是多成分的，另一种未被免疫胶体金标记的包涵体可能是病毒核酸；感染细胞的细胞质内大量堆积的病毒前体物质包涵体，其中可能有病毒装配后多余的成分，表明病毒各组分并不是按比例需要而合成的。     

影响核酸疫苗免疫效果的因素及提高核酸疫苗免疫效果的方法

核酸疫苗(nucleic acid vaccines)是将编码某种抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)直接导入动物体细胞内,并通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的.     

基因免疫与基因疫苗

基因免疫是九十年代初发展起来的新兴免疫学技术，它是将编码目的抗原的基因以重组表达载体的形式经各种基因转移途径转入机体细胞，借用容量主细胞表达加工合成抗原分子，以MHC～I或（和）MHC～II类分子抗原处理和输送途径将抗原信息递呈给T细胞和B细胞。全过程模拟了病毒自然感染提呈过程，既产生了体液免疫，又启动了细胞免疫，使得免疫效果极大的改善。因此，基因疫苗也被誉为第三次疫苗革命，它将成为我们今后预防疾病的重要武器。基因免疫的优点是毋庸置疑的，其化学结构是比蛋白质稳定得多的DNA，便于保存和运输，很适合做疫苗…     

寄生虫核酸疫苗的研究概况

核酸疫苗是一种将某种保护性抗原的编码基因克隆到真核细胞表达调控序列的质粒中 ,制成 DNA的重组质粒 ,直接给动物注射后质粒 DNA在组织内扩散 ,被宿主细胞摄取 ,随后通过宿主细胞的转录翻译系统 ,表达保护性抗原蛋白 ,在抗原蛋白释放分泌的同时 ,诱导机体发生免疫应答 ,产生对该抗原的保护性免疫 ,以达到治疗和预防疾病的目的。因此核酸疫苗又称基因疫苗 [1]。其包括 DNA疫苗和 RNA疫苗 ,目前研究最多的是 DNA疫苗 ,由于其不需要任何化学载体 ,又称 DNA疫苗。本文就寄生虫核酸疫苗的研究作一综述。1　核酸疫苗的研究概况1 994年 5…     

一株I型犬腺病毒的分离与鉴定

为给I型犬腺病毒(CAV-I)后续研究提供基础材料,采集疑似犬传染性肝炎患犬粪便,用PCR方法进行CAV-I核酸检测,并运用犬肾传代细胞(MDCK)进行病毒分离培养,采用PCR和免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测病毒在细胞内的繁殖状态。结果显示:患犬粪便样品PCR检测为CAV-I核酸阳性,病料接种MDCK细胞培养24 h后出现明显的"葡萄串样"细胞病变效应(CPE);培养物血清学鉴定为CAV抗原阳性,不同代次病毒培养物均为CAV-I核酸强阳性;第9代病毒核酸序列与Gen Bank中CAV-I毒株核苷酸相似性在99.0%以上,与CAV-Ⅱ相似性仅为65.3%;该病毒与CAV-I毒株处于同一遗传分支;病毒接种MDCK后8 h内均无抗原检出,12 h后细胞核中分布大量的CAV抗原,24 h后细胞出现典型的"葡萄串样"病变,抗原在细胞中呈弥散分布。上述结果表明,分离到的毒株为CAV-I,命名为CAV-ZY180711。     

兽用免疫佐剂的研究现状及发展趋势

免疫佐剂具有调节免疫系统功能,使机体对抗原特异性免疫应答达到非特异性增强或改变,对免疫反应类型改变或使抗原免疫原性增强,但自身没有抗原性物质.佐剂对抗原及参与免疫应答细胞产生作用,通过对巨噬细胞活性的增强,T、B细胞反应促进来发挥自身作用.抗原表位可由佐剂突出,对免疫应答具有较强的诱导;一些会缓慢释放颗粒化抗原,而实现免疫应答的持续诱导.随着研究的深入,很多物质都被发现具有佐剂功能,主要有以下几类.     

猪圆环病毒2型遗传标记毒株的构建及生物学特性鉴定

以临床分离的猪圆环病毒2型（PCV2）为材料，利用PCR法扩增病毒基因组，将2个基因组顺式连接插入到质粒载体中构建感染性分子克隆。通过引物设计替换碱基，在病毒基因组内插入Sal Ⅰ限制性内切酶位点作为遗传标记，经重组质粒转染细胞获得带有遗传标记的新毒株。采用免疫过氧化物酶单层细胞试验、免疫电镜、核酸序列分析表明，在病毒感染细胞中检出病毒特异抗原，其抗原性、病毒形态学及基因序列与亲本毒株一致。鉴于新病毒基因组内插入一个SalⅠ酶切住点，用PCR与限制性片段长度多态性分析法可与野生型病毒相鉴别。新毒株经细胞连续传60代，体外培养增殖性能稳定，毒价可达10^6.6CID50/mL。取病毒培养物经静脉和滴鼻途径接种35日龄抗体阴性仔猪4头，接种后表现出体温升高、进行性消瘦、被毛粗糙及体表淋巴结肿胀症状，迫杀后多种脏器中均能检测到病毒抗原与核酸。研究表明，利用感染性分子克隆手段构建带有遗传标记的PCV2新毒株，为进一步开展该病毒的致病性、疫苗免疫、分子诊断等研究奠定了基础。     

核酸疫苗及其在禽病防治中的应用

核酸疫苗是最近几年从基因治疗研究领域发展起来的种全新的免疫防治剂,亦称基因疫苗或DNA疫苗,是将含编码某种抗原蛋白基因序列的质粒载体作为疫苗,直接导动物细胞内,通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,从而使被接种动物获相应的免疫保护。     

禽用DNA疫苗免疫效果增强的策略

对于人和动物的传染病来说,DNA疫苗免疫是一种很有希望的免疫方式。经过25年的发展,已经上市的核酸疫苗仍屈指可数。禽用核酸疫苗一直是禽类疫苗的研究热点,文中描述提高核酸疫苗免疫效果的方式：接种途径,疫苗剂量及首免时间,增加宿主细胞对质粒的摄入,添加免疫增强分子,优化质粒骨架和密码子,疫苗抗原的选择,异源性的首免-加强免疫策略。     

DNA疫苗在兽医学中的应用

DNA疫苗又称DNA免疫、核酸免疫和基因免疫等.它是指将编码抗原的基因以重组表达载体的形式经各种基因转移途径转入机体细胞,借用宿主细胞的表达加工机构合成抗原分子,以MHC-Ⅰ和/或MHC-Ⅱ类分子抗原处理和输送途径将抗原递呈给T淋巴细胞,从而激发体液免疫和细胞免疫.     

穴位接种IBD双价细胞苗鸡的抗原定位及免疫活性细胞监测

１５日龄滨白鸡后海穴接种鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）双价细胞苗，采用免疫荧光组化跟踪抗原定位和免疫活性细胞的免疫形态学监测，以评价其免疫效果，同时与口服和肌肉免疫途径进行了对比试验，结果表明，后海穴穴位免疫优于口服免疫和肌肉免疫，本文穴位免疫机制进行了探讨。     

猪小肠微血管内皮细胞的分离培养与纯化

旨在建立简单高效的获取猪小肠微血管内皮细胞(PIMVECs)的方法。将SPF新生仔猪麻醉处死后取空肠,经酶消化后用免疫磁珠分选获得纯化的PIMVECs,并对纯化后的细胞进行免疫荧光鉴定,采用WST-1法分析传代PIMVECs的增殖情况。分离纯化的PIMVECs呈短梭形或多角形,单层贴壁生长,汇合后呈铺路石样,血管内皮细胞特异性标志物VIII因子相关抗原表达阳性,且复苏后传代细胞增殖情况良好。采用免疫磁珠分选法可以快速直接获得纯化的猪小肠微血管内皮细胞,且细胞活性良好。     

新城疫热稳定性天然弱毒B95株核酸疫苗的构建

将含有新城疫热稳定性天然弱毒B95株F基因的重组克隆质粒pGEM—F用Not Ⅰ单酶切，电泳回收纯化目的片段，与同样用NotⅠ单酶切并经去磷酸化处理的真核表达载体pcDNA3．1连接，构建了新城疫核酸疫苗，并用所构建的新城疫核酸疫苗与载基因阳离子脂质体结合进行了免疫试验，通过ELISA、淋巴细胞转化试验检测了核酸疫苗在鸡体内的表达。结果显示，表达产物作为抗原物质刺激机体产生了特异性应答反应，引起了机体特异性的体液免疫和细胞免疫，对新城疫强毒攻击的保护率为75%。