枸杞炭疽病生防菌株筛选、生物功能测定及防治效果

为研发对枸杞炭疽病有良好防治效果的生防制剂,利用枸杞炭疽病菌Colletotrichum acutatum对实验室已分离保存的芽胞杆菌菌株进行室内筛选,并对拮抗效果较好的菌株进行形态学和分子生物学鉴定、病原菌孢子萌发抑制试验、生物学功能测定、稳定性测定、抑菌谱测定以及室内离体防治效果试验和田间防治效果试验。结果表明,菌株F3A对枸杞炭疽病菌有较好的拮抗作用,对枸杞炭疽病菌菌丝的抑制率为62.13%;结合形态学特征、16S rDNA以及gyrA基因序列分析,将菌株F3A鉴定为贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis;菌株F3A具有溶解有机磷和无机磷的能力,在含色氨酸和不含色氨酸的金氏培养液中产吲哚乙酸量分别为5.76 mg/L和5.74 mg/L;菌株F3A产蛋白酶和葡聚糖酶的活性较高;菌株F3A连续培养20代后,对枸杞炭疽病菌的抑制率为61.21%,该菌对棉花枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.vesinfectum、番茄早疫病菌Alternaria solani、黄瓜枯萎病菌F.oxysporum f.sp.cucumerinum、番茄灰霉病菌Botrytis cinerea、番茄叶霉病菌Cladosporium fulvum、茄子菌核病菌Sclerotinia sclerotiorum和黄芪根腐病菌F.solani的抑制率分别为40.71%、53.58%、32.00%、53.00%、79.27%、71.13%和66.08%;菌株F3A发酵液的保护作用明显优于治疗作用,菌株F3A发酵液1倍稀释液室内预防效果为90.32%;喷施菌株F3A发酵液1倍稀释液3 d和7 d后的田间防治效果分别为78.26%和63.19%。表明菌株F3A有作为开发枸杞炭疽病生物农药的潜力。     

玉米茎腐病菌毒素致病力初报

通过提取玉米茎腐病菌毒素粗提液,证实玉米茎腐病原菌(镰刀菌和腐霉菌为主)在镰刀菌毒素培养液、查氏培养液和普通培养液中,能产生和玉米小斑病菌毒素(简称HM毒素,下同)类似的致病毒素。该物质能抑制种子根的生长。接种在玉米叶片上能产生典型的萎蔫枯死斑;用上述3种培养液培养病原菌,产生的毒素致病力差异不显著;不同类型病原菌产生的毒素致病力和同一类型病原菌不同菌株产生的毒素致病力差异都极显著。玉米品系对茎腐病原菌产生的毒素抗病性差异也极显著。     

水稻白叶枯病菌毒素对水稻不育系珍汕97A的专化毒性

 采用乙酸乙酯法提取对珍汕97不育胞质具有专化毒性的白叶枯病菌AH28、GX50和非专化毒性的OS14菌株的毒素。以不同浓度的毒素处理珍汕97不育系和保持系的种子或幼苗,可引起水稻叶片褪绿和细胞坏死,产生与接种病菌相似的症状,在蚕豆叶片上形成过敏性坏死斑;毒素可导致水稻幼苗萎蔫、胚根胚芽生长受抑和根冠细胞死亡;毒素的毒性与毒素浓度和产毒素菌株的致病力成正比;专化性毒素AT对珍汕97不育系的毒害程度显著高于对保持系的毒害。     

水稻白叶枯病菌毒素对水稻不育系珍汕97A的专化毒性

采用乙酸乙酯法提取对珍汕９７不育胞质具有专化毒性的白叶枯病菌ＡＨ２８、ＧＸ５０和非专化毒性的ＯＳ１４菌株的毒素。以不同浓度的毒素处理珍汕９７不育系和保持系的种子或幼苗,可引起水稻叶片褪绿和细胞坏死,产生与接种病菌相似的症状,在蚕豆叶片上形成过敏性坏死斑;毒素可导致水稻幼苗萎蔫、胚根胚芽生长受抑和根冠细胞死亡;毒素的毒性与毒素浓度和产毒素菌株的致病力成正比;专化性毒素ＡＴ对珍汕９７不育系的毒害程度显著高于对保持系的毒害。     

大豆毛口壳叶斑病菌产毒素的研究

 针对目前生产上新发现的大豆毛口壳叶斑病菌（Aristastoma sp.）产生的毒素进行了研究。该病菌的Czapek培养液经乙酸乙酯萃取可获得毒素粗提物。通过对该菌产毒条件的研究表明,pH 7的改良Richard培养液产生毒素生物活性最强,培养温度25℃、黑暗条件下持续振荡培养20 d最有利于该病菌毒素的产生。毒素活性测定表明,毒素对大豆叶片产生与病菌作用相同的褪绿症状,对种子胚根生长有抑制作用,对幼苗有致萎作用,说明毒素是大豆毛口壳叶斑病病菌侵染过程中的主要致病因子。     

枯萎病菌毒素培养滤液对唐菖蒲幼苗毒性的初步研究

 对唐菖蒲枯萎病菌进行了产毒培养基的筛选,研究毒素培养滤液对胚根生长的抑制作用、对幼苗根系活力的影响及对幼苗的致萎作用。结果表明：唐菖蒲枯萎病菌在Czapek培养基中培养15 d所产生的培养滤液对唐菖蒲胚根的抑制作用最强,胚根生长抑制率高达99.79%;而菌丝干重在PD培养基中培养13 d达到最高值1 242.27 mg;毒素培养滤液经121℃灭菌20 min后对唐菖蒲胚根仍有很强的抑制作用,表现出较高的热稳定性;与对照相比,毒素培养滤液能够显著降低唐菖蒲幼苗根系活力,随处理时间的延长和处理浓度的增加,萎蔫级数逐渐增加。说明枯萎病菌毒素培养滤液是唐菖蒲枯萎病的致病因子,可以利用其筛选唐菖蒲抗枯萎病品种。     

薯蓣炭疽病的病原鉴定

通过对福建沙县洋坊薯蓣炭瘟病的病原分离培养和形态学观察,经鉴定其病原菌为辣椒炭疽病菌（Ｃｏｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍｃａｐｓｉｃｉ）,其菌丝和分生孢子经蒸馏水玻片培养能产生附着孢。     

温度对烟草黑胫病菌致病力及代谢表型的影响

为揭示温度对烟草黑胫病菌Phytophthora nicotianae致病力及代谢表型的影响,采用菌丝生长速率法和离体叶片法分别测定不同温度下烟草黑胫病菌的生长速率和致病力,同时采用Biolog代谢表型技术测定其在20、27、30和35℃下的渗透压和pH代谢表型。结果表明,烟草黑胫病菌在21~35℃范围内生长良好且具致病力,30℃时生长速率最快,为17.72 mm/d,30℃和35℃时致病力较强,叶片接种烟草黑胫病菌后24 h内便出现病斑,随温度升高病害的潜伏期缩短。温度影响烟草黑胫病菌的渗透压和pH适应性;27℃和30℃时烟草黑胫病菌的渗透压适应范围最广,其次为21℃,35℃时烟草黑胫病菌渗透压适应范围最窄;在20、27和30℃时,烟草黑胫病菌在pH 5.0~10.0范围内可正常代谢,在35℃时pH代谢范围为5.5~10.0。     

解淀粉芽胞杆菌TS-1203对苹果炭疽叶枯病菌的抗生作用

为明确解淀粉芽胞杆菌TS-1203对苹果炭疽叶枯病菌的抗生作用, 采用平板对峙法和菌丝生长速率法以及孢子萌发法测定了解淀粉芽胞杆菌TS-1203对苹果炭疽叶枯病菌菌落生长和孢子萌发的抑制作用?结果表明:菌株TS-1203对苹果炭疽叶枯病菌具有显著的抑制作用, 其菌液对病菌的抑制率高达70.4%; 其发酵液对苹果炭疽叶枯病菌的抑制率随着发酵液浓度的增加而升高, 尤其当发酵液浓度为15%时, 其抑菌率为 59.0%; 发酵液处理苹果炭疽叶枯病菌孢子24 h后, 其萌发抑制率与芽管生长抑制率分别为78.2%与64.3%, 且芽管出现畸形; 利用TS-1203发酵液处理苹果离体叶片后接种炭疽叶枯病菌, 其防效为70.1%?综合分析表明, 解淀粉芽胞杆菌TS-1203对苹果炭疽叶枯病菌具有良好的抑制作用?     

pHBA对菜心炭疽病的诱导抗性及植株生理特性的影响

 以菜心品种为材料,设置不同浓度对羟基苯甲酸(pHBA)处理,并通过人工接种炭疽病菌,研究pHBA对菜心炭疽病的诱导抗性作用机理。结果表明,在菜心生长发育过程中根系可以分泌出pHBA。pHBA对菜心的生长、产量形成和炭疽病的发生有明显的影响。适宜浓度的pHBA处理可促进菜心生长,提高植株对炭疽病的抗性,显著地降低病情指数(DI),提高菜薹产量,但当pHBA积累到一定浓度时,就对菜心植株产生自毒作用,提高DI和降低菜薹产量。炭疽病菌的感染破坏了植株细胞膜,增强细胞膜透性水平,诱导产生病程相关蛋白(几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶)和细胞壁物质(木质素、富含羟脯氨酸糖蛋白(HRGP))。适宜浓度的pHBA处理可抑制炭疽病菌对细胞膜透性的伤害,加强诱导提高几丁质酶活性、β-1,3-葡聚糖酶活性、木质素含量和HRGP含量,引起细胞壁木质化加强,增加了菜心植株对炭疽病的诱导抗病能力,从而阻止病原菌进一步侵入和扩散,抑制炭疽病菌对菜心产量造成的损失。     

红花酢浆草叶斑病病原菌生物学特性研究

引起红花酢浆草叶斑病的假尾孢属真菌红花酢浆草假尾孢(Pseudocercospora oxalidis Goh&;Hsieh)适合生长的培养基有红花酢浆草叶片煎汁+葡萄糖20 g、V₈汁和Richard培养基。pH3～12适合菌落生长,最适宜pH4～6,适宜温度为20～25℃。病原菌对麦芽糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖和对牛肉膏的利用好于其他碳源或氮源。分生孢子萌发的温度为20～25℃,pH4～6,分生孢子萌发的相对湿度为98%～100%,营养对孢子萌发有促进作用。     

布朗李叶枯病菌生物学特性研究

对布朗李叶枯病菌(Macrophoma kawatsukai Hara)生物学特性研究表明,该菌最适生长和产孢的培养基为布朗李果汁。菌丝生长和产孢的最佳碳源分别为蔗糖、麦芽糖和果糖;氮源分别为酪氨酸、谷氨酰胺、天门冬酰胺和半胱氨酸。菌丝生长最适温度25℃,最适pH5～7;分生孢子形成最适温度25～30℃,最适pH8,饱和湿度有利于产孢,阳光照射形成分生孢子器最多,紫外光照射对分生孢子器形成有一定的抑制作用。孢子萌发最适温度为20～30℃,最适pH6～9,相对湿度为90%～100%,以在水滴中萌发最好。布朗李杆煎汁和布朗李果汁对孢子萌发有促进作用。     

The influence of growth conditions on biomass, toxins and pathogenicity of Fusarium oxysporum f. sp. orthoceras, a potential agent for broomrape biocontrol

The influence of different combinations of illumination and shaking on the growth dynamics, pathogenicity and toxin production of the fungus Fusarium oxysporum f. sp. orthoceras, a biocontrol agent of Orobanche cumana, was studied. The fastest biomass accumulation was obtained under shaking, with or without illumination, with the highest biomass obtained after 3–4 weeks of growth. The biological activity of chloroform extracts of the culture filtrate was characterised: it contained at least two main toxic metabolites that caused necrosis and wilting of various plants and led to mortality of germinating seeds of O. cernua, O. aegyptiaca, O. ramosa and O. cumana. The highest toxic activity of the chloroform extract was obtained under illumination without shaking after 3–4 weeks of growth. The two toxic metabolites were purified and identified as fusaric acid (FA) and 9,10‐dehydrofusaric acid (DFA). Both FA and DFA production began in the first week of growth, increasing gradually to their maxima after 4 weeks. The highest level of pathogenic activity of the fungus was obtained after three or more weeks of fungal growth. It can be concluded that in order to produce high levels of toxin and pathogenic activity, the fungus should be grown under illumination without shaking for 4 weeks.     

Optimization of in vitro growth conditions of Pyrenophora teres for production of the phytotoxin aspergillomarasmine A

In liquid cultures of Pyrenophora teres, three phytotoxins may be found: L, L - N -(2-amino-2-carboxyethyl) aspartic acid (toxin A), anhydroaspergillomarasmine A (toxin B) and aspergillomarasmine A (toxin C). In particular, toxins A and C cause chlorotic and necrotic symptoms in detached barley leaves, toxin C being the most damaging, whereas toxin B is only weakly phytotoxic. When P. teres is grown in liquid modified Fries medium, toxin B is the main toxin accumulated, possibly due to a ring closure of toxin C at the low pH value of the medium. The amount of toxin B produced by 11 isolates of P. teres was compared in modified Fries medium. Generally, the most virulent isolates of P. teres produced higher amounts of toxin B than the less virulent isolates. During growth, the pH of the media decreased from 6.7 to about 3.0–3.5, followed by a slight increase to about 3.5–4.0. All isolates, except one, produced toxin B, whereas only two isolates produced toxin C and toxin A. Maintaining the pH at about 6.5 by sterile titration with 1 M NaOH resulted in a shift in toxin accumulation from toxin B to toxin C. The addition of tris or phosphate buffer to the media resulted in higher pH during the growth period, an increase in the total amount of toxins produced, and a shift in toxin accumulation from toxin B to toxin C. The higher pH value probably prevented the conversion of toxin C into toxin B. No toxins were produced in two routinely used media, potato glucose broth and grass broth. Toxin B and toxin C were purified by ion exchange chromatography and precipitation with HCl.     

枣缩果病主要病原菌生物学特性的初步研究

枣缩果病为多病原病害,本文对其中2种主要病原菌生物学特性的研究表明:盾壳霉菌丝生长温度范围为9～33℃,最适温度27℃;pH值范围为3～10,最适pH为7～8;碳素营养以果糖、蔗糖、葡萄糖为好,乳糖较差。细链格孢菌苗丝生长温度范围为6～36℃,最适温度为24℃;pH值范围为3～10,最适pH为7;碳源以果糖为佳,乳糖最差;分生孢子在3～39℃,pH值3～10范围内均可萌发,以温度27℃,pH 5～8为最适。不同光照处理对盾壳霉菌和细链格孢菌菌丝生长和后者孢子萌发率无明显影响。     

红海榄赤斑病病原菌鉴定及其生物学特性研究

 本文对来自红海榄(Rhizophora stylosa)赤斑病同一病斑上获得的2个菌株PⅠ-1和PⅡ-3进行了鉴定和生物学特性研究。结果表明,PⅡ-3菌株的致病力比PⅠ-1的稍强;2个菌株均具有一定的寄主专化性。经形态特征观察与rDNA-ITS序列分析,2个菌株均鉴定为异色拟盘多毛孢(Pestalotiopsis versicolor)。生物学特性测定结果表明,温度、pH值和光照对2个菌株菌丝生长及孢子萌发的影响差异不大,生长温度均为10~32℃(最适25℃),pH值为3.0~10.9(最适4.0);孢子萌发温度均为10~35℃(最适25~28℃),pH值为2.5~8.0(最适3.0);黑暗条件有利于2个菌株菌丝生长和孢子萌发。但2个菌株的产孢特性存在明显差异,其中PⅠ-1产孢的最适温度为28℃而PⅡ-3为20℃;PⅠ-1产孢的最适pH值为5.1而PⅡ-3为9.0;PⅠ-1产孢对光照不敏感,而PⅡ-3在黑暗条件下几乎不产孢。另外,在相似条件下,PⅠ-1产孢量比PⅡ-3大,而PⅡ-3菌丝生长速度比PⅠ-1快,孢子萌发率也比PⅠ-1高。由此可见,2个菌株PⅠ-1和PⅡ-3虽属于同一个种,但某些生物学特性存在一定的差异。     

甘薯青枯病菌毒素产生条件的研究

 用致病力不同的甘薯青枯菌株(Pseudomonas solanacearum)进行毒素产生条件研究。试验结果表明,不同pH值、培养天数、菌株浓度及不同致病力的菌株所制备的毒素毒力差异达显著和极显著,但不同培养温度所制备的毒素毒力差异不显著。用Lotus1-2-3电脑软件综合分析以上产毒条件对所制备的甘薯青枯菌毒素的毒力影响程度,计算出强、弱和混合菌株产生毒素的3个最优回归方程。分别用Basic和Fortran语言编写程序,求出强、弱和强弱混合的甘薯青枯病菌产生毒素的3个最优模式为:①强菌株:pH=7,菌株浓度10⁸菌细胞/m l,培养天数3 d。②弱菌株:pH=7,菌株浓度10¹²菌细胞/ml,培养天数2 d。③混合菌株:pH=7,菌株浓度10¹⁴菌细胞/ml,培养天数1 d。培养温度均为25~35℃。     

草莓褐色轮斑病病原鉴定及室内药效研究*

草莓褐色轮斑病近年越来越严重,尤其在草莓育苗阶段。从草莓发病叶片、匍匐茎上分离得到病原菌,对病原菌进行形态特征观察、生物学特性研究、ITS序列分析以及室内药效试验。结果表明：该病原菌为Sphaeronaemella fragariae。该菌菌丝生长最适温度范围是25～28 ℃;适宜pH为6;在供试的几种碳、氮源中,最适的碳源是蔗糖,最适的氮源是酵母浸出液。在供试的9种药剂中,以咪鲜胺1 000倍液对病菌的抑制作用最好。     

辣椒褐斑病菌生物学特性研究

本文对辣椒褐斑病病原菌Cercospora capsici Heald et Wolf的生物学特性进行了研究,结果表明,不同的营养、温度、pH等条件对菌丝生长和孢子萌发有显著影响。病菌菌丝的生长以PDA培养基为最适;适宜温度为20~25℃,最适温度为25℃;最适pH为8.0~9.0,光照对菌丝生长没有明显的促进作用,菌丝致死温度及时间为55℃ 10 min。分生孢子萌发适宜碳源为1%的蔗糖溶液,适宜氮源为1%的甘氨酸溶液;孢子萌发适宜温度为20~30℃,最适温度25℃;最适pH为5~6,光照对孢子萌发没有明显的促进作用,分生孢子致死温度及时间为52℃10 min。