蛹虫草无性型—蛹草拟青霉的确证

从野外采集的鲜蛹虫草标本上分离到一假定无性型菌株LFRGU88-821L，经人工培养获得了与天然蛹虫草特征相同的成熟子实体，从而确证了LFRGU88-821L是蛹虫草真正的无性型，基于形态学特征的鉴定表明，此无性型是拟青霉属中的一个新种-蛹草拟青霉（Paecilomyces militaris Liang sp.nov.)。本文简述了蛹虫草无性型地位研究的历史，讨论了作者确定其当前分类地位的合理性，研究标本（LFRGU）保存于贵州大学真菌资源研究室。     

滇中蛹草拟青霉活性成分分析

试验对来自于云南和辽宁8个不同居群的蛹虫草进行菌种分离,共获得72株蛹草拟青霉菌株,对其在人工栽培条件下菌丝体的虫草多糖和虫草酸含量进行测定分析,以野生蛹虫草及冬虫夏草的虫草多糖和虫草酸含量为对比,比较其差异性。分析和统计表明:云南蛹虫草居群菌丝体虫草多糖和虫草酸平均含量,普遍高于我国东北蛹虫草居群菌丝体的;云南嵩明居群菌丝体虫草多糖和虫草酸平均含量最高,与其他居群菌丝体相比差异显著,其中云南嵩明居群cmilSM5号菌株菌丝体虫草多糖和虫草酸含量在所有菌株菌丝体中最高,与其他菌株相比差异显著。     

蛹虫草固体发酵生产虫草素的条件优化

用直径6 cm,高10 cm聚乙烯培养罐固体发酵蛹虫草(Cordyceps militaris),以固体发酵产物中虫草素含量为指标,从16个蛹虫草菌株中筛选出虫草素含量最高的菌株,考察固体发酵该菌株的培养基组成、培养时间、培养基装量、料液比、培养温度、接种量和添加物对虫草素含量的影响,得到了有利于蛹虫草固体发酵产虫草素的培养条件:培养罐装20 g小麦,按小麦干重6％的量分别加入玉米粉和黄豆粉,按料液比1∶1.4(w∶v,以小麦干重为基准)加入营养液(g/L:2.0 K2HPO4·3H2O,0.5 MgSO4·7H2O,16甘氨酸),培养温度为26℃,时间46 d,接种量10％.     

基于响应面的蛹虫草菌质固体发酵工艺条件优化

优化蛹虫草固体发酵菌质工艺以缩短发酵周期,提高有效成分含量,有效节约成本。通过单因素筛选和响应面优化法对碳源、氮源、料液比、小麦装料量、接种量、培养时间和腺苷浓度等培养条件进行优化。结果显示,蛹虫草固体发酵菌质最佳培养方案的小麦装料量为15 g,料液比为1.0∶1.3,接种量为2 mL,培养时间为17 d,营养液碳源为可溶性淀粉、氮源为黄豆粉,腺苷的质量浓度为76 g·L^-1。此条件下虫草素含量为3.718mg·g^-1,与初始配方相比,含量提高了4.47倍。工艺优化后的蛹虫草菌质固体发酵周期短,有效成分含量提高,研究结果为后期发酵菌质的开发利用奠定了基础。     

药食兼用真菌蛹虫草的液体发酵培养条件优化

对蛹虫草二级菌种液体发酵培养的菌丝体干重为重要指标,从温度、装液量、pH、培养基成分及用量比例方面对蛹虫草液体发酵条件进行优化研究,筛选出其最适培养条件.通过正交试验确定液体发酵培养基各组分最佳用量为:蔗糖30 g·L-1、蛋白胨2.5 g·L-1、K2HPO41 g·L-1、MgSO40.1 g·L-1.该结果为后续...     

蝙蝠拟拟青霉菌丝体最适发酵条件研究

试验研究了冬虫夏草蝙蝠蛾拟青霉菌丝体的发酵条件,其适宜接种量为２．５％－５．０％最佳菌株为３ｄ,适宜的初始ＰＨ为５．０－７．５,发酵周期５ｄ,发酵过程中对通气量的要求较高。     

蝙蝠蛾拟青霉菌丝体最适发酵条件研究

试验研究了冬虫夏草(Cordyceps sinensis)蝙蝠蛾拟青霉(Paecilomyces hepiali Chen et Dai)菌丝体的发酵条件,其适宜接种量为2.5％～5.0％(v/v),最佳菌龄为3d,适宜的初始pH为5.0～7.5,发酵周期5d,发酵过程中对通气量的要求较高。以20m~3发酵罐培养,菌丝体收率为2.5％,其D-甘露醇含量8.3％,腺苷含量0.24％。     

液体发酵培养富硒蛹虫草菌丝体优化条件的试验

以四因素三水平的正交试验设计培养条件,在24℃±1℃,180 r/min条件下,对蛹虫草菌进行液体培养,测定菌丝体干重,得到了最佳菌株是川草SC0341,而最佳液体培养基是麦芽粉培养基、最适pH 6.8、增稠剂羧甲基纤维素的最佳用量为0.45％.并且确定麸皮粒型种可作为试验使用的良好试管菌种.用试验测得的最优条件下所得液体发酵培养基,在培养液中加入6 μ.g/mL的Na2SeO3,蛹虫草菌丝体硒吸收率达39.22％,菌丝体干重(1.00±0.05) g/100 mL.试验收获的蛹虫草菌丝体营养价值高、成本低,为中小食品企业研发功能型保健品添加剂提供了一实验模型.     

蛹虫草鲁山株C0511菌丝液体培养条件

液体培养蛹虫草(Cordyceps militaris)鲁山株C0511,以菌丝体产量为指标,对培养时间、接种量、温度和培养基起始pH进行单因素试验,结果表明,最佳培养时间为96h,接种量为10%,适宜温度为22～26℃,pH为5.8。正交试验结果表明,影响蛹虫草菌丝液体培养的主次因素依次为培养温度、培养时间、接种量和pH。鲁山菌株C0511液体菌种按10%的接种量接入起始pH为7.0的液体培养基中,25℃培养96h菌丝产量为30.13g/L。     

响应面法优化蛹虫草液体发酵配方及条件的研究

蛹虫草是一种珍稀的药食两用真菌,为提高其菌丝体的液体发酵效率,首先通过单因素试验确定了蛹虫草液体发酵的最优碳源、氮源及适宜培养的pH、温度、装液量和转速6个因素。然后采用Plackett-Burman试验设计,确定葡萄糖、牛肉膏、温度是影响蛹虫草液体发酵菌丝体生物量的关键因素。利用响应面法设计三因素三水平试验,最终获得蛹虫草菌丝体液体发酵的最佳配方及条件为：牛肉膏13.34g/L、葡萄糖20.00g/L、MgSO₄ 1.5 g/L、KH₂PO₄ 1.5 g/L,pH 6.5,摇床转速150 r/min,温度27℃。验证试验表明,优化后条件培养的菌丝生物量可达1.489 g/105 mL,是优化前的2倍,与模型预测值基本一致,优化效果较好,可为蛹虫草液体深层发酵培养及后续工厂化生产提供技术参考。     

蛹虫草液体深层发酵的研究

以蛹虫草菌丝体生物量为指标,运用单因素对比试验和正交实验,对蛹虫草液体培养基的碳、氮营养源以及最佳配方和培养条件进行了优化研究。结果表明:筛选出蛹虫草液体培养基最佳碳源为蔗糖,其次为麦芽糖;最佳氮源为酵母膏,其次为蛋白胨。筛选出蛹虫草液体培养基适宜配方为:蔗糖3%、酵母膏3%、KH2PO40.1%、MgSO40.15%;液体培养适宜条件的温度为24℃,pH 5.5,接种量为15%,摇瓶转速为140 r/min,发酵罐通气量为1∶1.2~1∶1.6V/(V.min)。     

北冬虫夏草人工培养固体培养基优化研究

对北冬虫夏草人工培养固体培养基进行了优化.结果表明:北冬虫夏草能够利用的固体培养基的种类较多,在单一的固体培养基质中,以大米为固体基质菌丝长势最好,出草率最高;但在大米中加入10％～15％麦麸,其菌丝长势和出草率都优于单一大米的基质;对营养液进行对比试验及L9 (34)的正交实验,确定营养液的适宜配方为蔗糖2.0％,酵母膏1.5％,MgSO40.l0％,KH2PO4 0.10％;北冬虫夏草固体培养基质的适宜配方为大米85％、麦麸15％,500mL的装量为60 g,pH值5.5～6.5,料水比(固体基质∶营养液)1:1.5.     

JM-3菌株抗菌物质发酵条件优化及对苹果腐烂病的防效

以从剑麻中筛选出的1株对苹果腐烂病有较强拮抗作用的菌株JM-3为研究对象,采用单因子试验和正交实验对菌株JM-3的最适发酵培养基成分及发酵条件进行优化,并测定了其对苹果离体枝条腐烂病的防治效果,以期为该菌株的工业化生产提供参考依据。结果表明:菌株JM-3培养基各组分最佳配比为葡萄糖30g·L~(-1),蛋白胨20g·L~(-1),K_2HPO_4 1.0g·L~(-1),最佳发酵条件为初始pH 7,装液量150mL或100mL/250mL三角瓶,培养温度33℃,培养时间120h。在最佳发酵培养基和培养条件下,菌株JM-3抑菌能力提高32.4%。JM-3发酵液不能对苹果离体枝条腐烂病起到治疗作用,但能够显著预防腐烂病斑扩展,提前24~48h接种JM-3发酵液的预防保护效果最好,与对照农药苯醚甲环唑相比无显著差异。     

抗番茄灰霉病菌的内生短短芽孢杆菌W4菌株发酵条件优化

为提高内生短短芽孢杆菌（Brevibacillus brevis）W4 菌株发酵液对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）的抑菌活性,采用单因素试验与正交试验设计相结合,优化发酵培养基及发酵条件。结果表明,最佳发酵培养基为蛋白胨 2.0%、果糖 1.0%、NaCl 0.25%;最佳发酵条件为初始pH 8.0、接种种龄20 h、接种量5%、装液量50 mL（250 mL 三角瓶）、发酵温度35 ℃、摇床转速150 r·min^-1、发酵时间24 h。产生的发酵液稀释25 倍对番茄灰霉病菌的抑制率达92.8%,比未经优化得到的发酵液提高26.9 个百分点。通过培养基和发酵条件优化,显著提高了短短芽孢杆菌W4 发酵液活性,为进一步提取分离抗番茄灰霉病菌的活性成分奠定了基础。     

茶树菇液体发酵条件研究

以茶树菇为试材,采用液体摇瓶培养法,通过单因素试验、正交实验,以菌丝体生物量为主要指标,对茶树菇液体发酵培养基配方及培养条件进行优化。结果表明:最适宜的培养基配方为葡萄糖3.0%、豆饼粉1.0%、酵母膏0.2%、MgSO_4·7H_2O 0.10%、KH_2PO_40.10%。适宜的茶树菇液体培养条件为起始pH 6.0~7.0、培养温度25~28℃、摇床转速150~180r·min~(-1)。     

北虫草变异性研究

研究北虫草真菌在人工栽培生长过程中,由于基因发生突变而表现的真菌生物变异性.结果表明,在温度18℃～25℃,湿度45%～60%,每日光照培养10 h的情况下,获得了稳定传代的白色虫草子实体.北虫草真菌在人工培养的条件下,基因发生自然突变,并能够稳定地遗传,北虫草真菌与其它生物物种同样在生长过程中具有变异性.     

大马勃菌种液体发酵培养条件的研究

以菌丝体的生物量和多糖为指标,对大马勃液体发酵培养基及培养条件进行优化筛选。结果表明,最佳培养基配方为蔗糖3.0%、酵母膏0.75%、磷酸二氢钾0.15%、硫酸镁0.1%;最佳培养条件为pH值为6.5,温度为28℃,接种量为10%,摇瓶装量为100 mL。     

蛹虫草液体发酵过程中虫草素含量的分析

以2个蛹虫草菌株2014072503-1和2014072301-1为试材,采用高效液相色谱(HPLC)法,分析蛹虫草40d液体发酵过程中其发酵液中的虫草素产量,研究了蛹虫草发酵时间对虫草素产量的影响,旨在确定虫草素开始产生、产量迅速升高、产量最高的3个关键时间点,为下一步对以上时间节点的菌丝样品进行转录组测序分析,进而挖掘与虫草素产量密切相关的候选基因奠定基础。结果表明:2个蛹虫草菌株发酵过程中产虫草素的起始时间点为发酵后3d,迅速升高的时间点是12d,虫草素产量最高的时间点2014072503-1号菌株为发酵后37d,而2014072301-1号菌株为发酵后34d。2014072301-1号菌株发酵产生的虫草素含量高(382.43μg·mL~(-1)),时间短(34d),更适于作为生产虫草素的菌株。     

响应面优化虎杖固态发酵工艺条件的研究

应用产β-葡萄糖苷酶的黑曲霉固态发酵酶解虎杖中的虎杖苷,以提高虎杖中白藜芦醇的含量。采用均匀实验设计和响应面分析方法对影响虎杖中白藜芦醇含量的固态堆积发酵工艺条件(温度、湿度、菌龄和接种量)进行优化。结果表明:最佳的固态发酵工艺条件为:温度42℃,湿度1.85∶1、菌龄42h、接种量1.8%,在此条件下,发酵48h后,白藜芦醇含量提高为1.52%,是未进行固态发酵虎杖中白藜芦醇含量的4.47倍。优化固态发酵工艺条件能较大程度的提高从虎杖中获取白藜芦醇的得率。