新型试管花卉姬松高效再生体系的研究

 以新型试管花卉多肉类植物姬松（Crassula clavata N. E. Brown）为材料进行高效再生体系 的研究。结果表明：以姬松茎尖为外植体的初代培养中,MS 培养基添加IBA 并未诱导出根系生成,而是 直接诱导出丛生芽,在MS + IBA 0.3 mg · L-1 培养基上,由叶片表面诱导出的丛生芽质量最佳;在继代培 养中,最佳培养基为MS + NAA 0.1 mg · L-1 + 6-BA 0.5 mg · L-1,诱导产生大量胚性愈伤组织,且表面有 芽体分化;在彩色培养中,在1/2MS 中添加0.25 mg · L-1 的食用色素亮蓝,观赏效果佳且对植株生长无毒 害。     

西瓜高效再生体系的建立

以优质小果型西瓜品种西173和小麒麟为材料,系统研究了以子叶为外植体的西瓜组培高效再生体系。结果表明:2个西瓜品种在不定芽和愈伤组织诱导上存在着较大差异,在MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1的分化培养基上,西173不定芽诱导率最高达到92.6%,在MS+6-BA2.0mg·L-1+IAA0.2mg·L-1培养基上小麒麟不定芽诱导率最高达到89.7%;诱导出的不定芽丛伸长以MS+KT0.2mg·L-1培养基最佳;2个西瓜品种不定芽在MS+IBA0.2mg·L-1培养基上均获得了较好的生根效果。组培苗移栽后保持高温、高湿是移栽成活的重要条件。西瓜高效再生体系的建立为应用基因工程技术改良西瓜品质和提高其抗逆、抗病性奠定了基础。     

翠菊‘花束绯红’叶片的植株再生体系建立

以翠菊‘花束绯红’无菌苗为材料,研究了植物生长调节剂浓度及组合、光照条件、不同附加物对叶片及其愈伤组织再生植株的影响。结果表明:(1)在光照培养条件下,诱导翠菊叶片不定芽形成的最适培养基为MS+6-BA3.0mg·L-1+IBA1.0mg·L-1,诱导率为56.7%,平均不定芽数为3.3;(2)黑暗培养不利于叶片不定芽的分化,但促进叶片愈伤组织的形成;(3)培养基中分别添加脯氨酸、水解酪蛋白和NH4NO3等均能明显促进愈伤组织不定芽的诱导,最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+脯氨酸300mg·L-1,诱导率为82.8%,平均不定芽数为4.5;(4)不定芽移到幼苗生根培养基(1/2MS+IBA0.1mg·L-1)上,生根率为89.1%,移栽后成活率达89.3%。     

连香树离体快繁初步研究

 连香树为我国珍稀濒危树种, 具有较高的经济价值和观赏价值。本文研究了3年生连香树(Cercidiphyllum japonicum Sieb. et Zucc. ) 带芽茎段的离体培养。筛选出最佳培养基: (1) 腋芽诱导培养基: MS +NAA 0.01 mg·L ^{- 1} ; (2) 丛生芽诱导培养基: MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} ; (3) 丛生芽增殖培养基:MS +BA 2.0 mg·L ^{- 1} + 2,4-D 0.01 mg·L ^{- 1} ; (4) 生根培养基: 1 /2MS + IBA 1.0 mg·L ^{- 1}。     

长寿花组培快繁体系的建立

以长寿花愈伤组织为外植体,研究了不同激素(6-BA和IBA)浓度配比对长寿花丛生芽诱导以及添加不同浓度NAA对其生根培养的影响。结果表明:长寿花丛生芽诱导增殖的最适培养基为MS+6-BA 1.0mg·L-1+IBA 0.4mg·L-1,诱导率为288.7%;最适生根诱导培养基为1/2MS+NAA 0.3mg·L-1,生根率为63.3%;长寿花生根组培苗成活率较高为97%。     

红纹凤仙花离体快繁技术体系的建立

以红纹凤仙花(Impatiens rubrostriata Hook.f.)带芽茎段为试材,采用不同灭菌剂对外植体进行处理,通过添加不同种类植物生长调节剂及浓度的培养基对其进行初代培养、增殖及生根培养,从而筛选红纹凤仙花最佳灭菌方法、最佳诱导、增殖及生根培养基,以期为野生凤仙花属植物资源的引种驯化及开发利用奠定良好的技术基础.结果表明:红纹凤仙花带芽茎段的最适灭菌方法为75％酒精10 s+0.1％氯化汞6 min,成活率为68％;初代培养基中添加20 mg·L-1头孢噻肟钠时抑菌效果较好,成活率100％;最适初代培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.3 mg·L-1 NAA,苗壮且生长快;最适增殖培养基为MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.3 mg·L-1 NAA+0.010 mg·L-1 TDZ,增殖系数为6.65,苗生长快;最适生根培养基为MS+0.10 mg·L-1IBA,生根率100％.     

油点花的组织培养与快速繁殖

以油点花Ledebouria socialis(Baker)Jessop的叶片、叶柄和假鳞茎为外植体,经表面消毒处理,接种于不同激素配比的MS培养基中,探讨油点花外植体诱导愈伤组织、丛生芽、不定根培养的最适培养基和培养条件,以获得大量种苗,为其人工种植及商业化水平发展提供参考依据。结果表明:不同外植体均能诱导愈伤组织的产生,且叶片外植体最易诱导;适合油点花愈伤组织诱导的最适培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1,诱导率为96.3%~98.8%;而MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1适宜于芽诱导培养,诱导率为91.1%;培养基MS+NAA 0.2 mg·L-1适宜生根及壮苗培养,生根率89.5%;练苗移栽,其平均成活率达86.7%以上。     

燕子掌的组织培养与植株再生

以燕子掌叶片为外植体,在培养基中添加不同浓度的6-BA和IBA,研究燕子掌组培苗形成过程中6-BA和IBA浓度对各阶段的影响.结果表明:MS+IBA 5 mg/L+6-BA 5mg/L为愈伤组织诱导的最佳培养基,分化不明显,且诱导率为95.56％;MS+-IBA 2 mg/L+6-BA1 mg/L为外植体直接诱导不定芽的最佳培养基,平均可达12芽以上;MS+IBA5 mg/L+6-BA5 mg/L为愈伤组织增殖最佳培养基,增殖倍数为10.9;愈伤组织分化的最佳培养基为MS+ IBA1 mg/L+6-BA5 mg/L,单位面积茅数为32个以上,且芽明显;壮苗的最佳培养基为MS+ IBA2 mg/L,45 d后平均苗长为4.74 cm;诱根的最佳培养基为MS+IBA 0.5 mg/L,诱根率为100％.     

勋章菊组培快繁技术研究

以勋章菊无菌苗叶片为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度TDZ、2,4-D、IAA、IBA,研究不同浓度激素及组合对丛生芽诱导、试管苗生根的影响,并进行试管苗练苗和移栽.结果表明:最佳丛生芽诱导培养基为MS+TDZ 0.8mg/L+IBA(0.1～0.5)mg/L,诱导率达到90.0％以上.最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L+IBA 0.5 mg/L,生根率达到100.0％.勋章菊的叶片是外植体的较好选择,在短期内能获得大量组培苗,移栽成活率也达到95％以上.     

以叶片为外植体的多花黄精组织培养

以叶片为外植体建立多花黄精组织培养快速繁殖技术体系,通过添加不同浓度6-BA、NAA、2,4-D和蔗糖的MS培养基中培养,筛选愈伤组织诱导、愈伤组织增殖、丛生芽诱导、丛生芽生根诱导的最佳培养基。结果表明:愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA3.0mg·L~(-1)+NAA 4.0 mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),愈伤组织诱导率最高为53.89%,生长情况最好;愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA3.0mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),增殖倍数7.87,生长情况相对最好;丛生芽诱导培养的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 4.0mg·L~(-1),出芽率最高为86.11%,生长情况最好,芽高最大为1.70cm;丛生芽生根诱导的最佳培养基为MS+NAA 1.0mg·L~(-1),生根率最高为66.67%,根数、根长和根粗最好,分别为31.0条、0.46cm和1.100mm。以叶片为外殖体可短时间获得大量多花黄精组培苗,解决种植生产上的种苗短缺问题。     

金樱子(Rosa laevigata Michx.)叶片直接再生不定芽体系的建立

以金樱子组培苗的划伤叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂配比组合、暗培养时间、添加物L-脯氨酸、叶片不同部位对不定芽直接再生的影响。结果表明:当TDZ浓度为1.5 mg·L^-1、NAA浓度为0.000 5 mg·L^-1时,不定芽直接发生率最高,为9.5%;不同暗培养时间对不定芽直接诱导具有一定影响,暗培养时间为10 d时不定芽的直接发生率最高,为10.5%;添加了不同浓度的L-脯氨酸后不定芽的诱导率不增反降,所以以不添加L-脯氨酸为宜;叶片不同部位的再生率比较中,仅带叶叶柄可直接诱导出不定芽。综上所述,叶片直接再生不定芽的诱导方法是,以金樱子带叶叶柄为外植体,在直接诱导培养基上1/2MS+TDA 1.5 mg·L^-1+NAA 0.000 5 mg·L^-1+CH 100 mg·L^-1+AgNO3 10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.5 g·L^-1,暗培养10 d后,转至正常光周期下培养3周左右,不定芽诱导率最高,为10.5%。所得不定芽在增殖培养基MS+NAA 0.1 mg·L^-1+6-BA 1.0 mg·L^-1生长3周后,增殖系数可达到3.5左右;将丛生芽切割成单芽后转入不含任何激素的MS培养基壮苗3周,幼苗可长高至3~5 cm;再转入MS+NAA 0.1 mg·L^-1培养基中生根,1个月后生根率达95%。     

鸭梨叶片不定芽再生体系的建立

为建立鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.cv.Yali)叶片不定芽再生体系,采用正交试验设计研究了不同培养基、植物激素和植物生长调节剂的种类及其浓度、蔗糖含量对鸭梨叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基是影响叶片不定芽的诱导、继代和生根的关键因素,分别以NN69、MS和1/2MS为宜;IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为NN69+BA3.0mg·L-1+IAA0.5mg·L-1,再生频率和再生芽数分别为80.00%和1.77;最适增殖培养基为MS+BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1,增殖系数可达2.23;最适继代培养基为MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,平均苗高4.98cm;最适生根培养基为1/2MS+蔗糖30g·L-1+IBA0.5mg·L-1,生根率和平均根数分别为50.00%和2.04。该再生体系可为鸭梨遗传转化提供有效的受体系统。     

三倍体西瓜组培快繁研究

本文探索三倍体无籽西瓜种子消毒工作程序并培养无菌苗 ,采用顶芽诱导腋芽丛生和近轴端子叶诱导以器官型再生方式产生不定芽两种途径增殖 ,诱导培养基配方为改良MS +6 -BA2 (mg·L-1,下同 ) +NAA 0～0 1,筛选出增殖培养基配方为改良MS +6 -BA1～ 2 +IBA 0 2 ,生根培养基配方为改良MS +IBA 0 3～ 0 5。采用添加KT2～ 5和GA3 1～ 2培养导致瓶内开花现象     

蝴蝶兰离体培养条件的筛选

应用正交设计法考察了基本培养基、生长物质和蔗糖对蝴蝶兰丛生芽诱导、增殖和生根培养的影响。筛选出最佳基本培养基为 1/ 2 MS;最佳诱导培养基为 1/ 2 MS+BA5 .0 mg/ L +NAA0 .5 mg/ L;最佳增殖培养基为 :1/ 2 MS+BA3.0 mg/ L +NAA0 .5 mg/ L +蔗糖 30 g/ L ;最佳生根培养基为 :1/ 2 MS+NAA0 .2 mg/ L +IBA0 .1mg/ L +蔗糖 2 0 g/ L。     

山葵试管繁殖技术

将山葵带腋芽的叶柄基部接种于不同激素浓度的MS培养基上 ,在不同温度、不同pH值下培养。结果表明 :MS +6 BA 2 .0mg·L-1+NAA 0 .0 3mg·L-1对芽的分化、增殖效果最好 ;最佳的生根培养基为 1/ 2MS +NAA1.0mg·L-1+IBA 0 .0 5mg·L-1+AC 0 .3% ;最适的培养温度为 16℃ ;最佳的pH值为 6。     

三角梅两种植株再生途径丛生芽增殖比较研究

以紫花三角梅和紫红重瓣三角梅为外植体,进行丛生芽增殖比较研究,以期筛选出丛生芽诱导和增殖的最佳培养基。结果表明:愈伤组织丛生芽增殖最佳培养基为MS+BA2.0mg/L（2.5mg/L）+IBA 0.2mg/L+GA₃1.0mg/L,增殖系数达7.7以上;侧芽途径丛生芽的增殖最佳培养基为MS+BA 3.0mg/L+IBA 0.1mg/L,增殖系数达4.0以上。考虑生产成本和生产周期,侧芽途径优于愈伤组织途径。     

万寿菊雄性不育系离体保存及快繁体系的建立

以9个万寿菊雄性不育系植株的腋芽为外植体,进行诱导、继代和生根培养基配方的优化研究。结果表明:适合万寿菊雄性不育系腋芽诱导丛生芽的培养基最佳配方是:MS+6-BA 0.3mg/L+NAA 0.10mg/L;适合丛生芽继代增殖培养的培养基最佳配方是:MS+6-BA0.5mg/L+NAA 0.10mg/L;适合生根的培养基最佳配方是:1/2MS+IBA 0.10mg/L。初步建成了万寿菊雄性不育系离体保存体系。     

苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养及其叶片不定梢诱导

【目的】建立苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的组织培养快繁技术体系及其离体叶片不定梢再生技术体系,为工厂化生产优质苗木及利用生物技术手段改良品种奠定技术基础。【方法】以苹果抗寒矮化砧木‘BP-176’的半木质化新梢为试材,建立初代无菌试管苗。以试管苗为试材,研究了基本培养基、植物生长调节物质对试管苗继代生长及生根的影响。以离体叶片为外植体,研究了细胞分裂素种类和浓度及碳源对不定梢再生的影响。【结果】半木质化新梢在芽启动培养基上的腋芽萌发率达85%以上。在基本培养基MS和QL上,试管苗的增殖没有显著差异,但生长表现不同,QL培养基上的增殖苗表现出该品种田间生长的红色特征。当细胞分裂素为BA时,蔗糖比D-山梨醇易诱导出叶片不定梢;当细胞分裂素为TDZ并且浓度较高时,D-山梨醇比蔗糖易诱导出叶片不定梢。以添加3 mg·L-1BA和30 g·L-1蔗糖处理获得的不定梢再生率最高,为71.6%。生根诱导,基本培养基1/2MS比1/4MS有效,生长素IBA比NAA有利于提高生根率。【结论】苹果砧木‘BP-176’试管苗适宜的继代增殖培养基为添加1.0 mg·L-1BA和0.1 mg·L-1IBA的QL培养基;最佳不定梢再生培养基为:NM+3 mg·L-1BA+0.3 mg·L-1IBA+30 g·L-1蔗糖;最佳生根培养基为1/2MS+0.3 mg·L-1IBA+20 g·L-1蔗糖,最高生根率为69.8%。     

山杜英离体培养植株再生的研究

 研究了山杜英[Elaeocarpus sylvestris(Lour．)Poir．]带芽茎段的离体培养及植株再生。筛选出最佳培养基：(1)启动培养：Ms+BA 1.0～2.0 mg·L^-1 (单位下同)+NAA 0.05+蔗糖3%；(2)愈伤组织发生型丛生苗增殖培养：MS+BA 1.0+NAA 0.5+蔗糖3%；腋芽发生型丛生苗增殖培养：MS+BA2.0+IBA 0.1+蔗糖3%；(3)有效苗诱导培养：MS+BA 0.5+IBA 0.1+GA 1.0+蔗糖3%；(4)生根培养：1/2 MS+IBA 3.0+蔗糖2%。用透气膜封FI比用聚乙烯菌膜生根率明显提高，生根明显提前。     

东北百里香组培再生体系的建立

 以中国特有地被植物东北百里香为试材,研究了植物生长调节剂组合对腋芽萌发和茎段、叶片外植体愈伤诱导和不定芽分化的影响。结果表明：百里香茎段腋芽可直接诱导萌发,在MS + 6-BA 0.5 mg · L-1 + NAA 0.1 mg · L-1培养基上萌发率最高,达74%,在MS + 6-BA 0.5 mg · L-1 + NAA 0.1 mg · L-1的培养基上增殖倍数为36.43。由茎段萌发的组培苗在1/2MS + IBA 0.5 mg · L-1的培养基中20 d后生根率100%,移栽成活率76.7%。继代培养中叶片外植体可以诱导出愈伤组织,但是不能进一步分化成苗。茎段愈伤诱导的最适培养基为MS + 6-BA 0.5 mg · L-1 + 2,4-D 1.0 mg · L-1,再分化培养基为MS + 6-BA（0.1 ~ 1.0）mg · L-1 + GA3（0.1 ~ 0.5）mg · L-1,分化率为33.3%。