新型试管花卉姬松高效再生体系的研究

 以新型试管花卉多肉类植物姬松（Crassula clavata N. E. Brown）为材料进行高效再生体系 的研究。结果表明：以姬松茎尖为外植体的初代培养中,MS 培养基添加IBA 并未诱导出根系生成,而是 直接诱导出丛生芽,在MS + IBA 0.3 mg · L-1 培养基上,由叶片表面诱导出的丛生芽质量最佳;在继代培 养中,最佳培养基为MS + NAA 0.1 mg · L-1 + 6-BA 0.5 mg · L-1,诱导产生大量胚性愈伤组织,且表面有 芽体分化;在彩色培养中,在1/2MS 中添加0.25 mg · L-1 的食用色素亮蓝,观赏效果佳且对植株生长无毒 害。     

花青苷生物合成转录调控研究进展

花青苷生物合成由一系列结构基因编码的酶催化完成,而结构基因的表达受 MYB、bHLH和 WD40 这 3 类转录因子组成的 MBW（MYB-bHLH-WD40）转录复合体的协同调控。花青苷合成的转录调控研究最先在 30 多年前见于玉米、拟南芥和矮牵牛等模式植物,近年来在肉质果实上也取得了重要进展。在介绍果实花青苷的种类、分布与功能的基础上,回顾了 MYB、bHLH、WD40 这 3 类转录因子的基本特性及其在花青苷合成调控中的作用,进而就 MBW 转录复合体协同调控果实花青苷生物合成的机制研究的近年进展进行了综述。     

石榴新品种‘玛瑙红’

利石榴新品种‘玛瑙红’是‘大笨子’的优良芽变,成熟期比‘大笨子’晚 10 d 左右,平均单果质量 357.6 g,比‘大笨子’提高 50 g ;果实近圆形,果皮底色为黄白色,表面着美丽红霞,果面光洁鲜艳,外观品质优良,综合品质上等。成枝力、萌芽力较强,丰产、稳产;抗早期落叶病及干腐病能力较强,抗逆性较好。     

连香树再生体系的建立

对连香树进行无菌苗萌发和植株再生进行了研究.结果表明:以5～6月为最适取材季节;最佳外植体为当年生枝条顶芽下第3～4腋芽;腋芽诱导的适宜培养基为MS+BA1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L;适宜无菌播种的培养基为1/2MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L;适宜增殖培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;适宜诱导愈伤的培养基为MS+BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L;诱导分化的适宜培养基为MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L.     

黄瓜 CsFT 基因的克隆及其功能分析

利用同源克隆的方法得到黄瓜的 FT 同源基因 CsFT,通过表达分析、进化树分析以及遗传转化拟南芥等方法初步验证了 CsFT 在黄瓜花发育过程中的作用。不同于之前的研究结果,CsFT 主要在雄花与雌花中表达,而在叶中基本不表达。异源过表达 CsFT 导致拟南芥提前开花,并且茎顶部出现顶端花,说明黄瓜的 CsFT 基因与拟南芥 AtFT 基因在开花调控上存在保守性。     

鸡冠花的离体快繁及试管开花研究

以鸡冠花种子培育的试管苗带腋芽的茎段为试材,探讨不同外源激素(6-BA、NAA、KT、PP333)对鸡冠花快速繁殖及试管成花的影响。结果表明:MS+1.0mg/L 6-BA+0.05mg/LNAA为最佳的鸡冠花不定芽诱导培养基,MS培养基中添加1.0mg/L KT和0.2mg/L NAA时诱导试管开花的效果最好,基本培养基中(MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L)添加0.5mg/LPP333开花情况最好。     

葡萄 SNP 标记的 CAPS 和 TSP 分析

为了建立起葡萄 SNP 标记分析的一般方法和探索 EST-SNP 标记在葡萄中的应用,对前期开发的葡萄 EST-SNP 位点进行了筛选,设计了 28 对 CAPS（cleaved amplified polymorphic sequences,酶切扩增多态性序列）标记引物和 22 对 TSP（Temperature-switch PCR,温度转变 PCR）标记引物,并在 31份葡萄材料中进行了分析,其中 20 对 CAPS 引物和 10 对 TSP 引物电泳条带较清晰,多态性较好。基因分型统计显示：所有的 SNP 位点均含有 2 个等位基因,平均多态性信息含量（PIC）为 0.336,平均Shannon’s 信息指数为 0.511。基因分型和葡萄材料聚类结果均显示这两种方法所获结果提供的信息量大且结果可靠。本方法简便、成本低,可作为 SNP 分型有效方法用于葡萄品种鉴定、基因分型和遗传多样性分析等。     

基因枪介导红叶石楠遗传转化因素分析

以红叶石楠（Photinia fraseri）的胚性愈伤组织为受体材料,利用基因枪法导入外源抗寒基因 rd29A,以期建立基因枪转化红叶石楠的技术体系。结果表明,基因枪转化红叶石楠的最佳组合条件为：胚性愈伤组织在诱导培养基 MS + 6-BA 2.0 mg ·L-1+ NAA 5.0 mg ·L-1+ 2,4-D 0.5 mg ·L-1+ 琼脂 5.0g ·L-1+ 蔗糖 20 g ·L-1里,用 0.3 mol ·L-1甘露醇处理 15 ~ 16 h;基因枪轰击时添加 12.5 mol ·L-1氯化钙50 μL+0.1 mol ·L-1亚精胺 50 μL,每枪含金粉 300 μg + 质粒 DNA3.0 μg,轰击距离 9 cm,轰击压力 1 100psi,轰击次数 1 次。经多次筛选获得了 6 株转基因植株,转化植株经 PCR 检测和 Southern 分析,证实了rd29A 已经整合到红叶石楠基因组中。     

抗青枯病番茄新品种‘益丰 2 号’

‘益丰 2 号’番茄是以 g-8 为母本,g-4 为父本配制而成的番茄一代杂种。植株无限生长型,生长势强。幼果无绿肩,果面有光泽,果实圆形,成熟果鲜红色,着色均匀,硬实,耐裂,耐贮运。抗青枯病,适应性强,单果质量 110 g 左右,产量 50 ~ 60 t ·hm-2,适宜在华南地区春、秋露地种植。     

脱皮榆山西天然居群叶性状表型多样性研究

采用巢式方差分析、主成分分析、聚类分析等方法,对山西脱皮榆（Ulmus lamellosa）6 个天然居群 150 个个体的叶片 14 个表型性状进行多样性分析。结果表明：（1）脱皮榆 14 个表型性状在居群内和居群间均呈显著或极显著差异,说明不同居群表型性状存在着丰富的变异;（2）脱皮榆叶脉、最宽处锯齿、叶片、叶柄 4 个形态指标的变异系数（CV）分别为 15.425%、23.731%、25.446%和 45.168%,叶脉性状较其他性状稳定性高,叶柄性状稳定性较低;（3）居群间表型分化系数 VST均值为 28.104%,远远小于居群内变异（71.896%）,居群内变异是其主要的变异来源;（4）脱皮榆居群表型变异呈纬度梯度规律性,随着纬度的增加,叶片逐渐变小,叶柄宽和叶厚也呈现递减的趋势;（5）利用居群间欧式距离进行聚类分析,将 6 个脱皮榆居群分为 3 大类。     

杧果新品种‘桂热杧 3 号’

‘桂热杧 3 号’是从‘黄象牙杧’的实生后代选出的杧果新品种,果实外观美、平均单果质量 305 g,肉质细滑、汁多、味蜜甜、芳香,表现质优,结实早,丰产稳产。     

新疆雪莲叶片高效再生植株体系的建立

以新疆雪莲快繁无菌苗为试材,研究了新疆雪莲高效植株再生的条件。结果表明:长势健壮的无菌苗叶片切段可以通过2种途径高效再生不定芽;直接器官再生途径:长3~5mm的叶切段在MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 2.0mg/L的培养基上先后暗诱导3周和光诱导4周,分化率达(73.3±3.8)%,平均出芽量(5.0±0.3)个芽/块;间接器官再生途径:叶切段在MS+NAA0.2mg/L+TDZ 0.5mg/L培养基上暗诱导3周,愈伤组织诱导率100%,愈伤组织在MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 2.0mg/L的培养基上光诱导4周,分化率达(88.9±5.9)%,平均(5.5±0.4)个芽/块;不定芽在MS+NAA 0.05mg/L+6-BA 0.3mg/L培养基中壮苗和增殖培养后,在MS+IBA 0.5mg/L+0.1%活性碳的培养基中生根率达100%;2种植株再生途径均可用于新疆雪莲的诱变育种和转基因育种研究。     

利用百合花器官诱导试管苗快繁技术研究

以百合的花器官为外植体,以MS为基本培养基,对其组培快繁技术进行了研究。结果表明:最佳的不定芽诱导培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA+90g/L蔗糖;最佳的生根培养基为1/2MS+0.2mg/L NAA。花托具有较强的诱导能力,而花丝和花柱则没有明显的分化能力。该研究结果可为百合优良品种的生产提供重要的技术支撑和资源保证。     

栝楼组织培养及非试管苗快繁技术研究

对栝楼茎尖组织培养的研究结果表明,不同激素浓度对其芽丛的形成、分化及根的形成有不同的影响,栝楼茎尖组织培养的最佳诱导、增殖和生根培养基分别是MS+6-BA1.5mg/L+IBA0.3mg/L+NAA0.05mg/L、MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.3mg/L+NAA0.05mg/L和1/2MS+IBA0.5mg/L。利用栝楼组培苗在隔离网棚中抽出的匍匐茎进行非试管快繁育苗,可低成本、快速繁育出栝楼优质种苗,其中以9-10月份繁出的种苗在当年假植中形成的地下块茎最大,定植当年坐果率、经济产量最高。     

地被月季‘Royal Bassino’高频再生体系的建立

 以地被月季‘RoyalBassino’为试材, 进行了组培快繁和外植体再生条件的研究。结果表明,以带有腋芽的茎段为外植体, MS中添加6-BA 1.5 mg/L和IBA 0.1 mg/L 为最适诱导培养基, 诱导出芽率100%; MS中添加6-BA 0.5 mg/L和IBA 0.05 mg/L可以获得最高增殖倍数(6.3) ; 而添加IBA 0.01 mg/L的1/2MS为最佳生根培养基, 生根率92%。试管苗经7 d驯化后, 移栽成活率在99%以上。分别以叶柄、叶盘和茎段为外植体进行再生培养, 以MS为基本培养基, 叶柄在添加噻苯隆(TDZ) 7μmol /L的诱导培养基中暗培养10 d后, 转接到添加6-BA 0.5 mg/L的再生培养基中光照培养约20 d, 可以获得57.1%的芽再生率。     

夏蜡梅与美国蜡梅属间杂交障碍的组织学机理

以夏蜡梅属夏蜡梅（Sinocalycanthus chinensis）和美国蜡梅属美国蜡梅变种光叶红蜡梅（Calycanthus floridus var. oblongifolius）为试验材料进行属间杂交,通过荧光镜检观察花粉在柱头上的附着和萌发以及利用石蜡切片观察杂种胚发育情况,探讨其杂交障碍机制。结果表明：不论正反交,花粉均能在柱头上粘附、萌发并生长到达胚囊;以夏蜡梅为母本时父本花粉管生长进程较以光叶红蜡梅为母本时更加一致,大部分花粉管在授粉后 36 h 到达胚囊,表明花粉萌发和花粉管生长阶段不存在杂交障碍。杂种胚发育观察结果表明,无论正反交均可以实现双受精,但结实率极低,说明属间杂交存在受精后障碍,且正反交杂交障碍机制有所不同：当以夏蜡梅为母本时,杂交障碍主要由受精后杂种胚早期的不正常解体造成;而当以光叶红蜡梅为母本时,杂交障碍主要由母本雌蕊较高比例的发育异常和杂种胚的早期败育共同引起。     

辣椒高效再生体系研究

以辣椒为试验材料,研究不同外植体对辣椒愈伤组织诱导的影响,以及6-BA和IAA不同浓度组合对辣椒子叶不定芽分化的影响。结果表明,取自于子叶中部的外植体愈伤组织诱导率最高,可达到100%,且长势最好,其不定芽的最佳诱导培养基为：MS基本培养基＋6-BA5.0mg/L＋IAA1.0mg/L。     

兰属植物目标起始密码子（SCoT）遗传多样性分析

应用 SCoT 分子标记技术对兰属 14 个种的 24 个样品进行遗传多样性分析,27 条引物共扩增出 259 条 DNA 条带,其中多态性条带 224 条,多态性百分比达 86.49%,条带大小为 100 ~ 2 000 bp,多数条带分布在 500 ~ 1 300 bp 之间。根据 SCoT 标记计算的遗传距离系数得到的聚类结果可知,24 种兰属植物可以分为 5 类：A类：春兰、建兰、蕙兰、莲瓣兰;B 类：墨兰、寒兰;C 类：春剑;D 类：兔耳兰;E 类：多花兰、文山红柱兰、虎头兰、象牙白、碧玉兰、黄蝉兰,这与传统兰属分类有所区别。     

结球甘蓝花粉蛋白延伸因子基因的克隆及其序列分析

以结球甘蓝（Brassica oleracea L. var. capitata L.）E1 花粉为试材,对萌发前后的花粉总蛋白进行双向电泳及差异蛋白质谱分析,发现延伸因子 BoEF-Tu 蛋白在花粉萌发后较萌发前表达上调。利用同源克隆得到甘蓝 BoEF-Tu 基因的全长 cDNA 序列,其长度为 1 728 bp,具有一个完整开放阅读框（ORF）,位于 112 ~ 1 473 bp 处,编码 453 个氨基酸残基,预测分子量为 49.17 kD,等电点为 6.52。生物信息学分析表明：BoEF-Tu 蛋白含有 9 个 α–螺旋结构,18 个 β–折叠结构,不含信号肽和跨膜区,在106 ~ 121 位氨基酸残基处有 1 个 GTP 结合区域（DKAPEEKKRGITIATA）。氨基酸同源性分析表明,BoEF-Tu 与拟南芥 EF-TuM 同源性较高,达到 93%;系统进化分析表明,BoEF-Tu 与拟南芥 EF-Tu 的亲缘关系最近。     

葡萄侧芽再生体系研究

分别以京亚、京秀、杂交品系22号3种葡萄单芽茎段为外植体,通过对消毒方法、取材季节及培养基等因素的试验研究,分别得出3种葡萄的最适离体快繁培养条件。