肾型鸡传染性支气管炎病毒疫苗免疫机制初探：鸡抗肾型鸡传染性支…

采用肾型ＩＢＶ毒株抗原研制成渍佐剂灭活苗接种鸡群，结果表明，血清中抗体形成快，抗体水平较高，维持时间较长且较高的免疫保护力。为此我们进行本试验，经高度纯化的鸡抗肾型ＩＢＶＩｇＧ，采用免疫荧光试验，间接阻断Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和细胞中和试验对其特异和中和作用加以研究，结果表明，鸡抗肾型ＩＢＶ抗体成人主要是免疫球蛋白ＩｇＧ。本文阐明了肾型ＩＢＶ与支气管炎型ＩＢＶ疫苗免疫机制的不同，为肾型ＩＢＶ油佐灭活苗     

肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫抗体形成规律

以肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫１５日龄ＡＡ鸡，采用间接血凝试验分别检测免疫后第５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０天的病毒抗体绘制成免疫抗体制成曲线，采用１５日龄无母源抗体ＡＡ鸡对比试验，分别检测肾型鸡传染性支气管炎病毒强毒株攻毒后不同时间的病毒抗体，绘制成抗体形成曲线，比较两曲线可知肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫后第５天可检测到病毒抗体，抗体水平高峰期出现在免疫后第     

肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫抗体形成规律

以肾型鸡传染性支气管炎病毒油佐剂灭活苗免疫１５日龄ＡＡ鸡，采用间接血凝试验（ＰＨＡ）分别检测免疫后第５、１０、１５、２０。２５、３０、３５、４０天的病毒抗体绘制成免疫抗体形成曲线；采用１５日龄无母原抗体ＡＡ鸡对比试验，分别检测肾型鸡传染性支气管炎病毒强毒株攻毒后不同时间的病毒抗体，绘制成抗体形成曲线。比较两曲线可知肾型鸡传染性支气管炎病毒油性剂灭活苗免疫后第５天可检测到病毒抗体．抗体水平高峰期出现在免疫后第１０～２０天，免疫保护力至少可维持一个月以上、分析攻毒发病鸡群的抗体形成规律，可初步确定采用ＰＨＡ检测免疫鸡群的病毒抗体其免疫临界限为２－４～２－７。     

鸡传染性支气管炎腺胃型-肾型二价油乳剂苗的研究

腺胃型传支(GIB)JB9702株和肾型传支(KIB)SN9301株为制苗病毒株,分别经鸡胚繁殖后甲醛灭活,加入油佐剂中乳化制成GIB-KIB二价油乳剂灭活苗。对疫苗的安全性、稳定性和保存期等进行了测定,并进行了免疫试验。结果表明:疫苗安全稳定,易于保存;疫苗用于鸡群免疫,注射后15d产生免疫(HI抗体5.6Log2～6.8Log2),21d抗体达峰值(HI抗体9.0Log2～10.7Log2),40d对相应强毒攻击的保护率为93.3%～100%。     

鸡传染性支气管炎腺胃型—肾型二价油乳剂苗的研究

腺胃型传支（GIB）JB9702株和肾型传支（KIB）SN9301株为制苗病毒株，分别经鸡胚繁殖后甲醛灭活，加入油佐剂中乳化制成GIB-KIB二价油乳剂灭活苗。对疫苗的安全性、稳定性和保存期等进行了测定，并进行了免疫试验。结果表明：疫苗安全稳定，易于保存；疫苗用于鸡群免疫，注射后15d产生免疫（HI抗体5.6Log2-6.8Log2),21d抗体达峰值（HI抗体9.0Log2-10.7Log2),40d对相应强毒攻击的保护率为93.3%-100%).     

免疫器官中肾型鸡传染性支气管炎病毒的定位和动态分布

以鼠抗鸡肾型传染性支气管炎病毒（肾型IBV）的高免血清为一抗，辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗鼠IgG为二抗，建立了检测石蜡切片肾型IBV抗原的间接酶标抗体染色技术。应用该技术对人工感染肾型IBV C9001株鸡免疫器官中的病毒进行了检测，结果胸腺和法氏囊是病毒主要侵害的免疫器官，脾脏，盲肠扁桃体仅呈一过性感染，哈氏腺未检测到，法氏囊从感染后2－12天，胸腺从感染后3－8天均检测到病毒抗原，阳性染色主要集中于法氏囊淋巴滤泡髓质区和胸腺小叶髓质区淋巴细胞和网状细胞胞浆内。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒（IBV）免疫学特性的研究

为了揭示鸡肾型传染性支气管炎病毒（IBV）免疫学特性，为生产上防治该病服务，应用SDS－PAGE分析了IBV的结构蛋白，发现肾型IBV－X株与M41和H52的蛋白电泳图谱存在一定的的相似性，均具有分子量为90000、84000和43000的蛋白带，但X株病毒还具有一条分子量为61000的条带，而且它的相对含量很高。肾型传支上海野毒S株与X株相似，也具有这条61000的条带，应用抗IBV－X血清进行免疫转印，显示分子量61000的结构蛋白具有较强的免疫反应性。为了进一步揭示肾型IBV诱导免疫保护的特性，应用IBV－X毒株接种10日龄鸡胚尿囊腔，收集尿囊液，灭活后，制成油乳剂灭活苗免疫鸡，30d后，对IBV－S毒株攻击的保护率达100％，并呈现良好的体液免疫应答；疫苗在4℃保存7个月后用来免疫鸡，其保护率达95％。该疫苗安全、可靠，稳定性好。     

鸡减蛋综合征与传染性支气管炎二联油佐剂灭活苗的研究--二联苗的制备及其免疫试验

以EDS-76病毒、肾型IBV及IBV—M41为制苗毒株，研制出EDS-76与IB二联油佐剂灭活苗。二联苗剂型为油包水型，适宜注射并具有较高稳定性。二联苗对鸡安全；最小免疫剂量0．5ml／羽；疫苗免疫2周后产生免疫力，3周后免疫保护率90％。     

鸡新城疫、鸡传染性支气管炎（肾型）、鸡产蛋下降综合症三联灭活苗的研制

采用ND LaSota株、IB肾型株和EDS76株接种鸡胚、鸭胚、收集尿囊液，加甲醛溶液灭活后，按一定比例与油相混合，制成油包水型油乳剂灭活苗，用3-6周龄易感雏以久进行安全性试验，免疫效力试验，注射部位吸收良好，免疫3-4周后，ND和IB的保护率均可达到70%以上，鸡产蛋综合症的HI抗体可达顾7log2以上，并能维持较长时间。     

鸡传染性支气管炎病毒血凝抑制试验研究

用A型魏氏梭菌滤液处理鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株,使其产生血凝性,成功建立IBV血凝抑制试验方法(IBV-HI).血凝效价为1:256～1:1024.抗原在2～8℃的保存期至少为5个月.用该抗原对IBV标准阳性血清、SPF鸡血清、其它鸡病标准阳性血清以及含M41株病毒的灭活苗免疫的鸡血清进行检测,证明IBV-HI试验具有很好的特异性.结果表明,该方法简便、快速、特异性强,可用于疫苗质量控制和疫苗免疫效力测定.     

鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)免疫学特性的研究

为了揭示鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)免疫学特性,为生产上防治该病服务,应用SDS-PAGE分析了IBV的结构蛋白,发现肾型IBV-X株与M41和H52的蛋白电泳图谱存在一定的相似性,均具有分子量为90 000、84 000、67 000和43 000的蛋白带,但X株病毒还具有一条分子量为61 000的条带,而且它的相对含量很高.肾型传支上海野毒S株与X株相似,也具有这条61 000的条带,应用抗IBV-X血清进行免疫转印,显示分子量61 000的结构蛋白具有较强的免疫反应性.为了进一步揭示肾型IBV诱导免疫保护的特性,应用IBV-X毒株接种10日龄鸡胚尿囊腔,收集尿囊液,灭活后,制成油乳剂灭活苗免疫鸡,30 d后,对IBV-S毒株攻击的保护率达100%,并呈现良好的体液免疫应答;疫苗在4℃保存7个月后用来免疫鸡,其保护率达95%.该疫苗安全、可靠,稳定性好.     

鸡传染性支气管炎ELISA抗体检测试剂盒的研制

采用加蔗糖垫离心纯化鸡传染性支气管炎病毒(IBV)制备抗原，用提纯的IBV抗原包被微量板，建立了检测鸡传染性支气管炎(IB)抗体的ELISA试剂盒。抗原、被检血清和酶标结合物的最佳工作浓度分别为10ug／ml、1：200和1：3200。与IDEXX试剂盒相比，其敏感性、重复性、特异性均接近国外同类产品水平。对SPF鸡血清、实验免疫与攻毒的SPF鸡血清进行检测，结果表明所建立的ELISA特异性为95．6％，与IDEXX试剂盒符合率为95．6％。用于检测抗IBV特异性IgG抗体发现在免疫接种IB弱毒苗后，第4天即可检测到IgG抗体，峰值在第3周。试验鸡在通过滴鼻、点眼途径人工感染IBV强毒后，第5天抗体滴度明显上升。我们认为，该法是目前我国SPF鸡质量监测、养鸡生产中进行IB监测较好的方法。     

肾型鸡传染性支气管炎病毒新疆株的生物学特性研究

通过致病力试验和免疫原性检测对肾型鸡传染性支气管炎病毒新疆株(IBVXJ-2株)进行生物学特性的研究。致病力检测结果证实,IBVXJ-2株可以致SPF鸡胚卷缩、僵化,EID50达10-8.3/0.1 mL;鸡胚肾细胞在接毒后96 h出现皱缩、脱落等明显的细胞病变;对20日龄非免疫鸡攻毒后第2天,试验鸡出现甩鼻、伸颈张口呼吸等症状。将IBVXJ-2株抗原经乳化后接种1月龄非免疫鸡,在接种后22 d和44 d用ELISA和HI检测到了IBV特异性抗体。     

鸡传染性喉气管炎病毒和肾型支气管炎病毒同胚增殖的研究

将鸡传染性喉气管炎(ILT)病毒悬液和鸡传染性支气管炎(IB)病毒悬液,采取不同浓度,不同时间在同一个鸡胚上进行接种,可使两种病毒之间互不干扰,并能在同一鸡胚上共同增殖。取鸡胚绒毛尿囊膜检测传染性喉气管炎病毒(ILTV),其EID50为105.5/0.2ml,取尿囊液检测传染性支气管炎病毒(IBV),其EID50为106.3/0.2ml。与单项接种对照组相同;用同胚增殖的绒毛尿囊膜和尿囊液按一定比例混合,制造二联油乳剂灭活苗,免疫后30d和6个月后分别用ILT、IB强毒进行攻毒试验,结果免疫后30d,ILT和IB的保护率均为100%,免疫后6个月,ILT和IB的保护率分别为95.3%、86.7%。本试验结果表明,用此方法增殖病毒,既降低了成本,又保证了免疫效果,为今后制造二联苗提供了科学的依据。     

鸡新城疫-传染性支气管炎二联油乳剂苗的研制

以NDVLaSota株,IBV呼吸道型H120株和肾型SN9301株为制苗毒株,病毒经鸡胚繁殖后甲醛灭活,灭活毒液依毒价按比例混合加入油佐剂中,乳化制成ND-IB二联油乳剂疫苗。对该疫苗的安全性、稳定性和免疫效果等进行了测定。结果表明:疫苗安全稳定,物理性状良好;将该苗与相应弱毒苗配合用于雏鸡首免,可获得稳定的免疫保护;单用该苗给雏鸡首免,或用相应弱毒苗免疫雏鸡,免疫效果均较差。     

鸡新城疫-传染性支气管炎二联油乳剂苗的研制

以NDV La Sota株，IBV呼吸道型H120株和肾型SN9301株为制苗毒株，病毒经鸡胚繁殖后甲醛灭活，灭活毒液依毒价按比例混合加入油佐剂中，乳化制成ND—IB二联油乳剂疫苗。对该疫苗的安全性、稳定性和免疫效果等进行了测定。结果表明：疫苗安全稳定，物理性状良好；将该苗与相应弱毒苗配合用于雏鸡首免，可获得稳定的免疫保护；单用该苗给雏鸡首免，或用相应弱毒苗免疫雏鸡，免疫效果均较差。     

免疫鸡发生肾型传染性支气管炎

湖北某蛋鸡场曾用ＭＡ５（英特威）和肾型传支（华中农大）免疫过的鸡群发生了以肾脏肿大、尿酸盐沉积为主要特征的传染病 ,从中分离到一株肾型传染性支气管炎病毒株 ,命名为ＨＰ２。对其培养特性、血凝性、对新城疫病毒干扰性、动物回归等方面进行了初步研究。结果表明 :该毒株能很快适应于９～１１日龄鸡胚 ,并引起鸡胚特征性病变 ;该病毒对鸡红细胞无凝集作用 ,经１ %胰酶处理后表现血凝性 ;病毒能抑制鸡新城疫病毒ＬａＳｏｔａ株在９～１１日龄鸡胚上增殖 ;分离毒株在未免疫鸡群中有致病性 ;并应用自家组织灭活苗有效地控制了本病的流行…     

鸡传染性喉气管炎病毒和肾型支气管炎病毒同胚增殖的研究

将鸡传染性喉气管炎(ILT)病毒悬液和鸡传染性支气管炎(IB)病毒悬液，采取不同浓度，不同时间在同一个鸡胚上进行接种，可使两种病毒之间互不干扰，并能在同一鸡胚上共同增殖。取鸡胚绒毛尿囊膜检测传染性喉气管炎病毒(ILTV)，其EID50为10^55/0.2ml，取尿囊液检测传染性支气管炎病毒(IBV)，其EID50为10^63/0．2ml。与单项接种对照组相同；用同胚增殖的绒毛尿囊膜和尿囊液按一定比例混合，制造二联油乳剂灭活苗，免疫后30d和6个月后分别用ILT、IB强毒进行攻毒试验，结果免疫后30d，ILT和IB的保护率均为100％，免疫后6个月，ILT和IB的保护率分别为95.3％、86．7％。本试验结果表明，用此方法增殖病毒，既降低了成本，又保证了免疫效果，为今后制造二联苗提供了科学的依据。     

鸡腺胃型传染性支气管炎及大肠杆菌病二联灭活油乳剂苗的研制和应用

用本地分离株及标准株筛选出 4个IBV强毒株 (呼吸型和腺胃型 )及 7个E .coli强毒菌株 (血清型为O1 、O2 、O78) ,作为制苗基础毒株和菌株 ,并加入发病鸡场的自家分离株 ,作为制苗毒种和菌种 ,并将制成灭活的尿囊液和菌液以及油佐剂配成鸡腺胃型传染性支气管炎及大肠杆菌病二联灭活油乳剂苗。试验证明 :二免后 10个月攻毒保护率达 10 0 % ,IBV抗体的HI价为 1∶2 5 6 ,E .coli抗体直接凝集价为 1∶12 8。     

新城疫—肾型传染性支气管炎二联灭活苗的研制及免疫效果观察

用研制的新城疫－肾型传染性支气管炎（肾传支）二联油乳剂灭活苗对１０日龄鸡皮下注射，０．４ｍｌ／只，同时用ＮＤⅣ系苗点眼，免疫后不同时间采血测ＮＤＨＩ抗体效价和肾型传支强毒攻击试验。结果表明：二联苗免疫后２２，４２，７５天新城疫抗体平均值分别为６．６，６．９，９．９，与新城疫灭活苗免疫的同期，ＨＩ抗体值无统计学差异；肾传支强毒攻击的保护率均为１００％（５／５），非免疫对照肾传支死亡率分别为４３．３％