高产脂肪酶菌株的分离鉴定及其酶学性质研究

本研究旨在筛选出一株高产脂肪酶的菌株并进行鉴定,同时评定所产脂肪酶的酶学性质,为饲用脂肪酶的开发提供理论依据和实用参考。通过平板法筛选产酶菌株,根据菌株形态、培养特征、生理生化试验和ITS-r DNA序列分析确定其属种,并对产酶菌株进行初步的酶学性质研究。从富含油污的土壤中筛选出一株高产脂肪酶菌株FZ-4,并鉴定为白地霉(Galactomyces geotrichum),其初步酶学性质研究表明,该菌株所产脂肪酶为胞外酶,在28℃、250 r/min条件下培养96 h所产脂肪酶活力达16.7 U/m L,该酶最适反应p H为7.5,最适反应温度为40℃,在p H为7.0~9.0和20~45℃具有较好的稳定性,且该酶对C16脂肪酸有较强的底物专一性。分离获得的Galactomyces geotrichum FZ-4是一株高效的产脂肪酶菌株,具有潜在的研究和开发价值。     

微生物脂肪酶的研究进展及其在饲料中的应用

脂肪酶作为一种重要的工业用酶,广泛应用于食品、制革、饲料、洗涤、油脂化工等传统的工业领域.从微生物脂肪酶的种类、结构、性质、产脂肪酶菌株的筛选鉴定、微生物脂肪酶的固定化以及微生物脂肪酶在饲料中的应用等方面对微生物脂肪酶相关研究进行了介绍与综述,以期为脂肪酶在饲料中的开发应用提供一些参考.     

一株高产脂肪酶菌株选育及其酶学性质的研究

本研究对不同地点采集的可能含产脂肪酶菌的土壤样本进行筛选和菌种鉴定,分离得到其中产脂肪酶的菌株,通过紫外-光复活诱变选育提高产量。选择稳定的菌株进行酶的分离纯化,并且对部分酶特性及载体进行研究。结果表明,从土壤中筛得脂肪酶产量为29.6U/ml的菌株,通过紫外-光复活诱变产量提高72%。酶学性质研究显示固化后酶的转脂率远高于工业用酶的转脂率。     

黑广肩步甲(Calosoma maximociczi)成虫肠道细菌的分离及产脂肪酶菌株的筛选与鉴定

以柞蚕害虫黑广肩步甲(Calosoma maximociczi Morawitz)的成虫为材料,分离其肠道细菌并从中筛选产脂肪酶的菌株,了解害虫肠道细菌菌群结构,寻找具有应用价值的高产脂肪酶的微生物资源。从黑广肩步甲成虫的肠道中共分离出21个好氧细菌分离株,进一步利用选择性培养基筛选产脂肪酶的菌株并检测酶活力,获得4株产脂肪酶的优势菌株。经过生理生化特性测试和16S r DNA序列分析,确定4株产脂肪酶的菌株分别属于变形杆菌属(Proteus sp.)、沙雷氏菌属(Serratia sp.)和芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。研究结果表明,黑广肩步甲成虫肠道内的细菌种类丰富,分离的4株产脂肪酶菌株的产酶活力较高,可进一步研究评价其利用价值。     

一株产脂肪酶菌株的分离筛选及鉴定

采用梯度稀释涂布法及平板筛选法从松树林下分离到12株产脂肪酶菌株.复筛到一株产脂肪酶性能较好的菌株TS-2,在30℃、180rpm条件下培养48h脂肪酶活为4.8U/mL.综合菌落形态、生长特性镜检形态及5.8S rDNA-ITS区序列系统进化分析证明所分离的菌株TS-2为解脂耶氏酵母酵母(Yarrowia lipol...     

高效脂肪酶产生真菌的筛选、鉴定及产酶条件优化

研究旨在筛选高产脂肪酶活性的菌株,并鉴定其菌属及确定其最佳产酶条件。采集富含油脂的土壤,通过溴甲酚紫平板法进行菌株分离筛选,并采用橄榄油乳化法测定脂肪酶活力。利用真菌ITS序列通用引物进行PCR扩增,将测序结果Blast比对,并建系统发育树。采用正交试验设计优化产酶条件。通过筛选得到1株产脂肪酶的真菌菌株GW-1,经鉴定为黑曲霉Aspergillus niger。经单因素试验和正交试验得到该菌的最佳产酶条件为:葡萄糖0.5%、黄豆粉2.0%、橄榄油1.0%、MgSO4.7H2O 0.1%、pH值9.0、接种量8%、装液量50 ml/250 ml、发酵4 d。在此发酵条件下,其产酶活力可达39.82 U/(ml.min)。试验结果显示,访菌株在产脂肪酶能力上具有显著优越性,且菌株GW-1产酶活力较优化前高出19.96 U/(ml.min),提高了100.50%。     

家蚕肠道产酶菌的分离与筛选

探明家蚕肠道菌在食物消化过程中的作用,有助于微生态饲用添加剂的开发研究。从家蚕肠道中分离出30株菌株,并研究了它们的胞外淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶的产酶能力。在家蚕肠道中存在着可以分泌蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纤维素酶的菌株。在分离到的30株肠道菌株中,产4种酶的有1株菌,产3种酶的有4株菌,产2种酶的有2株菌,产1种酶的有11株菌,不产酶的有12株菌。在产酶菌中,有9株菌株能分泌蛋白酶,能分泌脂肪酶和纤维素酶的各有7株菌,有8株菌株能分泌淀粉酶。家蚕肠道菌中的各种产酶菌高达60%,表明了肠道菌在家蚕食物消化过程中的重要性。     

耐酸性脂肪酶产生菌的筛选及酶学性质研究

从西安市周边及秦巴山区采集的165份土样中,分离筛选到200余株脂肪酶产生菌(包括细菌、霉菌及酵母等);通过酸性三丁酸甘油酯平板法筛选到10株耐酸性的脂肪酶菌株,对其中一株酶活较高的真菌FL002进行酶学性质初步研究;经18S rDNA的克隆与序列分析,初步鉴定FL002为地霉属(Galactomyces geotrichum)。结果表明,目前已经初步建立了具有陕西特色的微生物脂肪酶菌种库,建立了酸性脂肪酶产生菌的筛选模型;从FL002菌中获得的脂肪酶具有耐高温和耐酸特性,该菌及该菌产生的脂肪酶有望应用于饲料行业。     

几株芽孢杆菌产消化酶分析

为探索地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌N1、SH、TCP、B1、B2株产生消化酶(淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶)的能力,采用鉴别培养基进行筛选比较。结果显示,不同菌株产消化酶的能力相差很大,其中地衣芽孢杆菌产淀粉酶的能力最强,产蛋白酶的能力较弱,不产脂肪酶;B1株纳豆芽孢杆菌产蛋白酶的能力最强,产淀粉酶能力却最弱;除地衣芽孢杆菌,其他6株芽孢杆菌都产生脂肪酶。     

大理弥渡热泉耐热脂肪酶产生菌的筛选及其酶活性研究

从云南大理市弥渡县石夹泉热泉的43℃底泥中筛选到1株高温脂肪酶的高产菌,进行显微形态及生理生化特征、16S rRNA基因序列分析,将其初步鉴定为不动杆菌属(Acinetobacter sp.)的一株菌,命名为Acinetobacter sp.Lip-43。对其生长条件及酶学性质进行了研究,结果表明:该菌株耐高温性较好,菌株在55℃仍能生长,菌株最适生长温度为37℃。所产脂肪酶最适酶活温度为45℃,最适反应pH为5.0。在37℃以下,能保持良好的稳定性,Zn^2+和Ca^2+对该酶有一定的抑制作用,Mn^2+、K^+、Mg^2+、Fe^2+、Cu^2+均对该酶活力起到促进作用,其中Mn2+的促进效果最为明显。     

洞庭青鲫肠道细菌分离及分泌胞外酶的能力分析

为了解湖南澧县北民湖(原产地)健康洞庭青鲫鱼(431.11～439.17 g/尾)肠道菌群的组成,2021年1月通过分离、纯化、培养,从健康洞庭青鲫肠道中获得24个细菌菌株,对其菌体形态、染色反应、培养性状、生理生化反应、分泌胞外酶(蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶)能力等进行了系统研究。结果表明,22株分泌胞外蛋白酶,占菌株总数的91.67%;18株分泌胞外脂肪酶,占菌株总数的75.00%;10株分泌胞外淀粉酶,占菌株总数的41.67%;13株分泌胞外纤维素酶,占菌株总数的54.17%。4株菌分泌4种胞外酶,12株菌分泌3种胞外酶,5株菌分泌2种胞外酶,1株菌分泌1种胞外酶,2株菌不分泌胞外酶。洞庭青鲫肠道菌中各种产酶菌高达91.67%,说明肠道菌在洞庭青鲫食物消化过程中具有重要作用。     

益生菌在畜牧生产中的开发与应用

根据菌株的组成可分为单一菌株和复合菌株。现生产上常用的多为复合菌株。目前最常用的菌种为乳酸杆菌属、粪链球菌属、芽孢杆菌属和酵母菌属。其中乳酸杆菌属、粪链球菌属为正常存在的微生物，而芽孢杆菌属和酵母菌属仅零星存在于肠道中。芽孢杆菌具有较高的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性，可明显提高畜禽生长速度和饲料利用率。     

斑点叉尾(鮰)肠道中产酶细菌的研究

本文检测了从斑点叉尾(鮰)肠道中分离出的139株需氧或兼性厌氧细菌的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的分泌能力.结果表明,42株细菌(30.22%)能分泌蛋白酶;36株(25.90%)能分泌淀粉酶;44株(31.65%)能产脂肪酶.产3种酶的细菌有33株,产2种酶的细菌9株,产1种酶的细菌5株,产酶菌株的比例为47:139.中肠产酶菌株的数量极显著高于前肠和后肠(P＜0.01),前肠和后肠产酶菌株的数量差异不显著(P＞0.05).     

降解赤霉烯酮芽孢杆菌的筛选、鉴定及性质研究

为了获得一株饲用的高效降解赤霉烯酮(ZEN)的芽孢杆菌菌株,试验通过平板扩散法和酶联免疫法进行筛选,并对降解率较高的菌株进行种属鉴定、性质和产酶情况研究。结果表明:通过筛选共得到7株功能菌,其中菌株Y-1d的降解率最高,经菌落菌体形态、16S rDNA序列分析和生理生化鉴定确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);该菌株在p H值为4.5~6.5、温度为27~47℃的范围内生长良好,对胆盐有一定的耐受性,能够产生淀粉酶、纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶。说明试验获得一株性质优良的可用于饲用的赤霉烯酮降解菌株。     

根霉脂肪酶产生菌筛选及发酵培养基研究

从实验室保藏菌种中筛选得到一株产脂肪酶能力较强的根霉菌种MHL4.07,对MHL4.07菌摇瓶发酵产酶培养基组成进行了试验,结果表明,种子培养时间为84h,最佳发酵培养基(g/l):玉米浆40.0、橄榄油12.5、豆饼粉20.0、NH4Cl20.0、MgSO4·7H2O0.5、K2HPO41.0、KCl0.5。用最佳培养基发酵产生的脂肪酶活力为41.91U/ml,该产量比初始菌株的酶活提高了408%。     

饲用复合酶制剂酶学特性研究

饲用复合酶制剂的主要酶种包括纤维素酶、蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶。利用高产菌株S6-5、Y7-6和B5-12混合发酵生产复合酶制剂,发现纤维素酶催化反应最适宜的酸碱度在pH=5.0,反应体系温度为60℃时,纤维素酶活力达到14293U/g;蛋白酶酶活在pH=6.0时酶催化能力最强;而脂肪酶和淀粉酶在50℃时催化能力最强,在60℃催化能力下降,但不明显。     

饲料用脂肪酶产生菌——黑曲霉G55高产菌株的选育

本研究以饲料用脂肪酶产生菌——黑曲霉(Aspergillus niger)G55为出发菌株,通过紫外线(UV)和亚硝基胍(NTG)诱变,结合自然分离纯化,选育出了遗传稳定的高产菌株uan370(s)和uan783(s),其产酶量分别为2410 U/mL和2486 U/mL,相比出发菌株G55提高32.1%和36.3%。通过斜面连续传5代,证明两菌株的遗传稳定性良好。     

藏鸡源产酶芽胞杆菌的分离、鉴定与筛选

为筛选具有潜在开发价值的畜禽饲料添加剂益生菌,采用传统方法从藏鸡消化道分离芽胞杆菌并对其进行初步鉴定;检测分离菌株的产纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和植酸酶活性,测定分离菌株对常见致病菌的抑菌性能;对筛选到的具有优良胞外酶分泌活性和抑菌活性的菌株进行分子生物学鉴定。结果表明,从藏鸡消化道中共分离到72株芽胞杆菌;不同菌株的产酶活性差异较大,部分菌株都具有产纤维素酶、蛋白酶和淀粉酶活性,有8株菌能够同时产生5种胞外酶;菌株CB-11不仅具有较强的产酶活性,而且可以同时抑制大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌和金黄色葡萄球菌,抑菌谱较广;结合表型特征和16S r DNA序列分析结果,将CB-11确定为枯草芽胞杆菌。研究结果为天然益生菌资源的发掘利用及畜禽微生态饲料添加剂的开发应用提供了参考。     

饲用脂肪酶的研究与应用

脂肪酶作为重要的工业用酶,已广泛应用于食品、医药、皮革、能源、纺织、化工等工业领域,但在饲料中的应用研究还处于起步阶段。本文综述了饲用脂肪酶的来源和性质、饲粮中添加脂肪酶的必要性、脂肪酶在畜禽中的应用效果、脂肪酶研究开发和应用中存在的问题,并指出了脂肪酶研究应用需进行的一些创新性工作。     

鸽乳中产纤维素酶和脂肪酶微生物的分离鉴定

旨在研究鸽乳中产纤维素酶及脂肪酶微生物的种类。通过筛选培养基分离出产酶菌株,观察其菌落形态,测定羧甲基纤维素酶、滤纸酶和脂肪酶活力,提取基因组DNA,扩增16S rDNA序列,测序结果经BLAST比对和相似性分析,构建系统发育树。结果:分离出产纤维素酶菌种4个,分别为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、大肠杆菌(Escherichia coli)、吉氏库特氏菌(Kurthia gibsonii)和肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae);产脂肪酶菌种1个,为变栖克雷伯氏菌(Klebsiella variicola)。除吉氏库特氏菌外其他均为条件致病性菌。本试验结果将为鸽子消化道微生物多样性和产酶微生物的研究及应用奠定基础。