川芎的组织培养技术研究

探索川芎的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。以川芎根、茎段和叶片作外植体进行组织培养,获得了大量的组培苗,建立了相应的植株再生系统。川芎根诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 1.2 mg/L;茎段及叶片诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L;根愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.2 mg/L+IAA 0.3 mg/L;茎段及叶片愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L。根外植体在愈伤组织、分化不定芽和生根方面的诱导率分别为84%、86%和87%;茎段和叶片愈伤组织的诱导率达到92%和96%,其不定芽分化率为98%,生根率为93%。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达98%。提出了优化激素搭配的培养基,得到了高效的诱导率、分化率和生根率。     

马铃薯叶片愈伤组织再生体系的建立

以8个马铃薯品种(系)为试材,进行叶片离体再生研究。结果表明,云薯501愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA310 mg/L,愈伤诱导率为100%,诱导不定芽分化的优化培养基为MS+6-BA 3 mg/L+GA310 mg/L,芽的分化率为86.3%;会-2的愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA310 mg/L,愈伤诱导率为95.7%,诱导不定芽分化的优化培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.02 mg/L+GA310 mg/L,芽的分化率为65.4%。上述2个品种适宜用作马铃薯转基因实验的载体,其他6个马铃薯品种(系)的愈伤诱导率很低,有的品种(系)没有愈伤组织产生,不能作为马铃薯基因转化的载体。     

黄芪愈伤组织的诱导及分化培养

通过对黄芪叶片和茎段愈伤组织进行诱导及分化培养,确定黄芪愈伤组织诱导和分化培养最佳培养基分别为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA和MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA+0.5 mg/L NAA,选择叶片作为外植体优于茎段,愈伤诱导率和直接分化出...     

彩色马铃薯叶片再生体系的研究

以云南省农科院马铃薯研究中心选育的4个彩色马铃薯品系为试验材料,进行了叶片离体再生的研究.结果表明,DE02-24-24的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;DE02-24-39的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;JC02-27-1的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;JC02-27-2的叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.15 mg/L.愈伤组织的诱导率均可达到100%.愈伤组织诱导不定芽分化的最佳培养基分别为DE02-24-24为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 3.0 mg/L;DE02-24-39为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.05 mg/L+GA3 2.0 mg/L;JC02-27-1为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+GA3 2.5 mg/L;JC02-27-2为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA32.0 mg/L.其不定芽分化率分别为83.3%、100%、93.3%、100%.     

二倍体马铃薯野生种高效再生体系的建立

以二倍体马铃薯野生种(Solanum cardiophyllum)的叶片和茎段为材料,进行离体再生体系的研究.结果表明,叶片和茎段愈伤组织最适诱导培养基分别为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,平均诱导率分别达93.75%和99.26%;来源于叶和茎段的愈伤组织不定芽分化的最适培养基分别为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA<,3> 2.5 mg/L和MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA<,3> 5.0 mg/L,不定芽平均分化率达96.43%和97.25%.生根培养基以MS+NAA 0.3 mg/L效果最好,平均生根率达100%.     

全粉加工兼早熟菜用马铃薯品种LK99再生体系的建立

以马铃薯品种LK99试管苗茎段为外植体,分别在6种培养基上进行愈伤组织的诱导,比较接种28 d时的出愈率及愈伤组织的形态,并将胚性愈伤接到8种不同分化培养基上进行再生苗的分化。结果表明,在接种28 d后,6种培养基均可诱导出大量的愈伤组织,以MS+2.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3 mg/L GA3+0.5 mg/L 2,4-D培养基上胚性愈伤诱导率最高,生长状态最好。胚性愈伤在MS+2.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L ZT+3.5 mg/L GA3培养基上分化率最高,并且分化苗键壮。     

婆婆纳组织培养再生体系的建立

以婆婆纳(Veronica didymaTenore)的叶片、茎节、茎段、顶芽为外植体,接种在附加2,4-D、6-BA、NAA等不同质量浓度和组合的培养基中进行离体培养,并比较了不同培养基上不同外植体的诱导率。结果表明,诱导愈伤组织的最佳外植体是叶片,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L,愈伤组织诱导率为100%。诱导愈伤组织分化的最适培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA0.75mg/L+NAA1.75 mg/L,分化率为90%。诱导生根的培养基为l/2MS+NAA0.2 mg/L,生根率为90%。     

马铃薯野生种Solanum pinnatisectum离体再生体系的建立

为给马铃薯野生种的开发利用和遗传转化提供参考,以二倍体马铃薯野生种Solanum pinnatisectum 的茎、叶为材料,进行了离体再生体系的研究.结果表明,叶片和茎段愈伤组织的最适诱导培养基分别为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+ 2,4-D 1.5 mg/L,诱导率分别达97.75%和100%;愈伤组织不定芽分化的最适培养基分别为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 2.5 mg/L 和MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA3 5.0 mg/L,不定芽分化率分别达75%和100%;生根培养基以MS+NAA 0.3 mg/L效果最好,生根率达100%.     

生长素和细胞分裂素在马铃薯愈伤组织分化中的作用

以晋薯7号马铃薯茎尖、茎段、叶圆片为外植体,通过愈伤组织的诱导和根、不定芽的分化,研究生长素和细胞分裂素不同配比在马铃薯愈伤组织分化中的作用。试验结果表明:6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂有利于茎段愈伤组织的生长,MS+6-BA 2.0 mg/L+ZT 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L+GA35.0 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂有利于茎尖不定芽的分化,MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5mg/L+GA35.0 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂对叶片根的分化效果较好。     

万寿菊雄性不育系离体快繁体系的建立

[目的]建立色素万寿菊雄性不育系离体快繁体系,为开展万寿菊育种研究和杂交制种打下基础.[方法]以4个色素万寿菊母本资源(B1-1、B1-3、B1-4和Bnm)雄性不育株的叶片和茎段为外植体,以不同生长调节剂组合对其进行愈伤组织诱导、不定芽分化及生根培养,建立适宜色素万寿菊离体快繁的技术体系.[结果]以叶片为外植体的各色素万寿菊雄性不育株再生能力均较以茎段为外植体的再生能力强,其愈伤组织诱导率和不定芽分化率排序均为B1-3>B1-1>Bnm>B1-4;适宜B1-3和B1-1叶片愈伤组织诱导的培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-苄氨基腺嘌呤(6-BA),诱导率分别为99.2%和95.3%;适宜茎段愈伤组织诱导的培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+2.0 mg/L 6-BA,其中B1-3和B1-1的诱导率较高,分别为81.4%和80.1%.萘乙酸(NAA)与玉米素(ZT)组合诱导4个不同色素万寿菊的愈伤组织不定芽分化率普遍高于NAA与6-BA组合,其中B1-3叶片和茎段的愈伤组织在MS+1.0 mg/L NAA+3.0 mg/L ZT中的不定芽分化效果较佳,分化率分别达72.5%和57.7%.适宜色素万寿菊不定芽生根的培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA,其中B1-3和Bnm的生根率均达100.0%;再生植株移栽成活率达95.0%.[结论]叶片是诱导色素万寿菊雄性不育系植株再生的良好材料,B1-3是获得色素万寿菊离体培养雄性不育植株最佳的母本资源;建立的色素万寿菊雄性不育系离体快繁体系可为其育种研究和杂交种种子生产提供资源保障.     

马铃薯品种茎段愈伤组织诱导和植株再生的研究

以2个马铃薯品种夏坡蒂和费乌瑞它茎段为外植体,研究了不同植物激素对马铃薯愈伤组织诱导及其不定芽分化的影响.结果表明,夏坡蒂和费乌瑞它的茎段最佳愈伤诱导组织培养基分别为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+GA30.5mg/L和MS+ZT 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L+GA30.5mg/L,愈伤率均可达到100%;夏坡蒂和费乌瑞它的不定芽最佳诱导培养基分别为MS+ZT 2.0 mg/L+NAA0.1mg/L+GA3 5mg/L和MS+6-BA 2.0mg/L+ZT 2.0mg/L+GA3 5mg/L,诱导率分别为52.38%和53.6%.结果为进一步转基因工作中高效植株的再生奠定了一定的基础.     

头花蓼愈伤组织诱导及分化

研究了2种外植体(叶片、茎段)、消毒方法、培养基种类、活性炭、植物生长调节剂等因素对头花蓼愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明,最佳消毒方法为以0.15%HgCl2消毒叶片6min和10%NaClO消毒茎段9min;不同培养基诱导愈伤组织发生率依次为MS1/2MSB5;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L有利于愈伤组织形成;MS+6-BA 4mg/L+NAA 0.2mg/L有利于愈伤组织增殖;MS+6-BA 8mg/L+IBA 0.1mg/L有利分化,分化率为83.33%,产生不定芽平均数为5.1个。培养基中附加100mg/L活性炭,褐化率仅为6.80%,愈伤组织生长和分化效果较好。     

野葛愈伤组织诱导及分化的研究

对野葛叶片和茎段愈伤组织的诱导及分化进行了研究,结果表明:6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L对叶片愈伤组织的诱导效果最好,6-BA 2 mg/L+NAA 1 mg/L对茎段愈伤组织的诱导效果最好,出愈率均达100%;6-BA 2 mg/L+NAA 1 mg/L有利于叶片形成的愈伤组织分化为芽,6-BA 2mg/L+NAA 0.5 mg/L则有利于茎段形成的愈伤组织分化为芽.     

不同品种软枣猕猴桃愈伤组织诱导及植株再生

以软枣猕猴桃(Actinidia arguta)品种"魁绿"和"佳绿"的无芽茎段、叶片、叶柄为外植体,研究外植体及生长调节剂组合对软枣猕猴桃愈伤组织诱导及植株再生的影响,从而建立"魁绿"和"佳绿"的离体再生体系。结果表明:6-BA对软枣猕猴桃愈伤组织的诱导效果好于KT,"魁绿"和"佳绿"叶片分别在MS+2,4-D0.5 mg/L+6-BA 2 mg/L和MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1 mg/L的培养基上愈伤诱导率最高,分别为93.3%和96.2%。在不定芽再生培养过程中,6-BA和TDZ不能诱导不定芽发生,而ZT对不定芽的分化具有较好的诱导作用;"魁绿""佳绿"均在培养基MS+NAA 0.05 mg/L+ZT 3 mg/L上不定芽分化率最高,分别为72.0%、37.8%。不同品种及不同外植体的愈伤组织诱导率和不定芽再生率均存在差异,"魁绿"的不定芽分化率明显高于"佳绿";无芽茎段和叶片的愈伤组织诱导率均90%;叶片的不定芽分化率最高,显著高于茎段和叶柄。再生苗在培养基1/2 MS+IBA 0.1 mg/L上的生根率为97%。     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

野葛(Pueraria lobata)愈伤组织诱导及组织培养

以野葛茎尖分生组织为外植体,通过不同激素与MS培养基配比试验,筛选出野葛茎尖分生组织愈伤组织诱导与植株再生的最适培养基,建立野葛植株再生体系.试验结果表明:茎尖分生组织在MS+2,4-D 0.5 mg/L培养基上启动诱导愈伤组织,再转移到MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L继续诱导,愈伤组织诱导率高,繁殖能力旺盛.在MS+6-BA 1 mg/L培养基上愈伤组织分化率100%,生长能力较强.在MS+NAA 0.1 mg/L培养基上,诱导生根率达到60%.     

杂交构树叶片组培快速繁殖体系的建立

为满足市场对杂交构树种苗的需求,以无菌苗叶片为外植体进行组织培养,优化其快速繁殖技术。结果表明:1)愈伤组织诱导及不定芽分化的适宜培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L,其愈伤组织诱导率达91.7%,不定芽分化率为88.3%。分化出的不定芽长势较好,叶片的颜色浓绿,且愈伤褐化、软化现象较少。2)继代增殖的适宜培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA30.5mg/L,增殖倍数可达5倍;3)生根适宜培养基为改良B5+6-BA 0.01mg/L+NAA 0.3mg/L+IBA0.5mg/L,生根率为60%。     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

马铃薯愈伤组织诱导中激素浓度配比优化研究

[目的]对马铃薯愈伤组织诱导中的激素浓度配比进行优化研究。[方法]以鲁引1号马铃薯的幼嫩茎段、叶片和叶柄为外植体,通过在基本培养基中添加不同浓度的6-BA和2,4-D,来筛选出马铃薯愈伤组织诱导的最适的培养基。[结果]叶柄和茎段的最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D,叶片的最佳培养基配方为MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L 2,4-D,愈伤组织的诱导率均可达95%以上。[结论]为鲁引1号马铃薯脱毒研究提供了技术支持。