免疫预防猪传染性胸膜肺炎自家苗制备方法

<正>自家苗制备方法将纯化的分离菌接种于巧克力培养基上培养,然后用生理盐水洗脱,稀释为5.0×109个/mL的菌液,加入3%的福尔马林溶液,37℃灭活48h,经无菌     

蓝耳病阳性猪场的免疫技术

为了提供蓝耳病阳性场合理使用蓝耳病疫苗的理论依据,并为提高猪瘟、口蹄疫的抗体效价做出一定的探索,试验比较口蹄疫疫苗、猪瘟疫苗、蓝耳病疫苗及自家苗的联合使用的效果。拟定程序后,使用同一标准检测不同时期的抗体效价,并结合临床各项指标跟踪观察,发现在蓝耳病阳性场正确使用蓝耳病灭活苗可有效提高猪瘟、口蹄疫的抗体效价,同时减少猪呼吸道病综合征的发病率和死亡率。     

巴西彩龟对温和气单胞菌的免疫应答研究

选择对巴西彩龟强毒力的温和气单胞菌菌株(AB98043),扩大培养制成灭活福尔马林菌苗,分别对巴西彩龟进行注射和浸泡试验。经过对吞噬细胞吞噬活性、血清抗体效价的检测和攻毒试验,结果表明,受免组各项指标均明显高于对照组,免疫保护力达到82%以上,其中浸泡组各项指标略低于注射组。     

兔源绿脓杆菌的分离鉴定及致病性研究

利用临床诊断和实验室诊断方法,通过微生物分离培养技术,从病兔盲肠分离纯化病原菌,并利用分子生物学技术,扩增病原菌16S RNA基因序列,构建系统进化发育树,进行分子鉴定,同时,通过致病性和药敏试验检测,分析其病原特性。结果表明,分离到1株革兰氏阴性菌,通过序列比对发现其与绿脓杆菌同源性最高(99%),在系统进化树中也与其聚为一簇;致病性分析,发现其在24 h时对小鼠的致死率为100%;药物试验结果表明,其对头孢噻亏、舒巴坦、庆大霉素3种药物高度敏感,而对壮观霉素和氯霉素中度敏感。该研究为重庆地区兔绿脓杆菌病的防治提供了理论依据,也为其治病机理和新防治方法研究奠定了基础。     

小球藻锌结合类金属硫蛋白的结构表征及抗菌活性

小球藻经60μmol/L的锌胁迫培养5d后,离心收集藻泥,经超声波细胞破碎后,离心得到上清液即蛋白质粗提液,再经葡聚糖凝胶层析柱G-75及脱盐柱G-25分离、纯化后,收集的蛋白组分经真空冷冻干燥后获得小球藻锌结合蛋白。通过Tricine-SDS-PAGE电泳、氨基酸组成及紫外光谱等方法进行表征,测得该蛋白的分子量约为8.2ku,半胱氨酸含量为15.4%,具有金属硫蛋白典型的紫外光谱特征,称为类金属硫蛋白(Zn-MT-like proteins)。试验采用琼脂糖孔穴扩散法,研究了小球藻Zn-MT-like蛋白对3种细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽胞杆菌)和3种真菌(青霉菌、曲霉菌、酵母菌)的抗菌活性,并与兔肝Zn-MTs的抗菌能力进行比较。结果表明,小球藻Zn-MT-like蛋白对革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌)和霉菌(青霉、曲霉)具有显著的抗菌活性,1mg/mL的Zn-MT-like蛋白对金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、青霉和曲霉的抑菌圈直径分别为13.2、17.4、7.2和9.8mm;而对大肠杆菌、酵母菌则无抗菌活性。同样条件下,未加锌胁迫的小球藻蛋白质本身和兔肝Zn-MTs并不具有这些抗菌...     

家兔小肠上皮细胞LPS炎症细胞模型的构建

试验采用Ⅰ型胶原酶(collagenaseⅠ)消化法分离培养刚出生未哺乳仔兔原代IEC细胞,并进行纯化和鉴定,以及使用LPS诱导构建纯化后的F3代IEC炎症细胞模型。结果表明:采用胶原酶Ⅰ(0.2%)消化法可以成功分离培养原代IEC,经纯化和CK-18单克隆抗体鉴定纯度可达95%以上。终浓度1000ng/mL的LPS作用IEC培养体系24h,可使IL-1β、TNF-α的含量显著高于对照组(P0.01)。试验结论:1000ng/mL的LPS诱导家兔IEC细胞24h,可成功构建IEC炎症细胞模型,为研究肠道和IEC免疫调控机制,提供了合适的细胞模型。     

不同日粮能量水平对幼兔生长发育的影响

研究选择90只35日龄的加利福利亚健康幼兔为试验材料,随机分为D1、D2和D33个试验组,每组30只,公母各半。在其它营养水平相同的情况下,3个试验组的日粮能量水平分别设计为消化能11MJ/kg、10.5MJ/kg、10MJ/kg,研究不同能量水平日粮对幼兔日增重、料肉比、腹泻率、死亡率等指标的影响。结果表明,D3组的平均日增重最高(29.84g),D1次之(28.67g),D2最低(26.58g);3个试验组的料肉比分别为4.60:1、4.33:1和3.55:1,而生产1kg兔肉需要饲料成本最低的是D3组。D3组无死亡,腹泻率是3.3%。经济效益分析发现,并依据本研究结果,推荐幼兔饲养的日粮适宜能量需求水平为10.0MJ/kg。     

鸡(肾型)传染性支气管炎及大二联油乳剂灭活苗的研制和

用本地分离株及标准株筛选出4个IBV强毒株(呼吸型和肾型)及7个E.coli强毒菌株(血清型为O1、O2、O78)作为制苗基础毒株和菌株,并加入发病鸡场的自家分离株,作为制苗毒种和菌种,并将制成灭活的尿囊液和菌液以及油佐剂配成鸡(肾型)传染性支气管炎及大肠杆菌病二联灭活油乳剂苗.试验证明该油苗可使鸡产生坚强的免疫力,二免后10个月攻毒保护率达100%,IBV抗体的HI效价为1256,E.coli抗体直接凝集价为1128.该苗经多项检验,对鸡安全有效、免疫力强、免疫期长、性能稳定、易于存放.免疫鸡群健康状况稳定、死亡率下降、生产性能提高,对鸡(肾型)传染性支气管及大肠杆菌病具有较好的预防效果.     

自家苗对猪皮炎肾炎综合征的防制效果实验

在一发生猪皮炎肾炎综合征的猪场,随机挑选120头4周龄断奶仔猪分成3个处理组,即实验组、对照Ⅰ组和对照Ⅱ组。对照Ⅱ组为添加抗生素组、实验组为添加抗生素与注射自家苗组。实验结果表明:实验组的成活率比对照组提高30.00%～32.50%(P<0.05),日增重比对照组提高128.28～132.00g/d(P<0.05),出现呼吸症状的猪只头数减少30.00%～34.50%(P<0.05)。     

兔支气管败血波氏杆菌病的诊治及防控措施

通过对太谷某规模兔场出现的以呼吸道为主的病兔进行临床症状和剖检变化的观察以及对送检病兔病原分离鉴定并进行了致病性研究,诊断为兔支气管败血波氏杆菌病。对分离菌株进行了药敏试验,表明该菌对卡那霉素、氟苯尼考、环丙沙星等药物敏感,并介绍综合治疗措施。     

血鹦鹉鱼木糖葡萄球菌的分离鉴定和耐药性研究

自患病血鹦鹉鱼肾脏分离获得优势菌CVSX1,做分离纯化培养、生化与分子鉴定、人工感染试验和药敏试验,以期对该病有效预防和治疗。分离菌株血液培养菌落呈圆形,表面光滑,边缘整齐,颜色灰白色至略黄,周围有弱溶血环。经过涂片染色镜检,该菌株革兰氏染色为阳性圆形球菌,直径约为0.8~1.0μm,多数成堆,少数散在、成对或四联状排列。该菌株无荚膜或鞭毛,亦无芽孢,根据形态和生理、生化性状可初步鉴定为木糖葡萄球菌。菌株的16SrDNA序列比对表明,菌株CVSX1与已登录GenBank数据库的木糖葡萄球菌16SrDNA序列的相似性99%,聚类分析结果表明菌株CVSX1与葡萄球菌属的木糖葡萄球菌遗传距离最小。通过人工感染试验证明木糖葡萄球菌CVSX1对血鹦鹉幼鱼有较强的致病性。应用临床常用的抗生素对木糖葡萄球菌CVSX1进行药敏检测,菌体CVSX1对磺胺嘧啶、青霉素G、诺氟沙星、四环素高度耐药,对红霉素、丁胺卡那敏感,对环丙沙星、氧氟沙星表现为中介。     

中牟县家兔球虫病流行病学调查

为初步了解中牟县家兔球虫病流行情况,用饱和盐水漂浮法对来自中牟县大孟镇的30户农村养兔户共237份各年龄段家兔粪便样品进行了检查。结果145份粪便样品为球虫阳性,球虫总感染率为61.2%(145/237),其中30～35日龄兔球虫感染率为51.1%(24/47),平均OPG值为6.98×103;40～90日龄兔球虫感染率为71.1%(38/53),平均OPG值为4.23×103;4～6月龄兔球虫感染率为62.9%(39/62),平均OPG值为2.64×103;1～2年种兔球虫感染率为62.5%(25/40),平均0PG值为1.12×103;3～4年种兔球虫感染率为54.3%(19/35),平均OPG值为0.8×103。本次调查共发现5种兔艾美尔球虫,分别是:穿孔艾美尔球虫、中型艾美尔球虫、大型艾美尔球虫、小型艾美尔球虫、肠艾美尔球虫,其中以穿孔艾美尔球虫比例最高(31.7%)。     

法国伊普吕兔泌乳特性及其对仔兔生长的影响

选用法国伊普吕母兔12只,分为Ⅰ、Ⅱ组,Ⅰ、Ⅱ组每只母兔哺育仔兔各为7只和8只,观测泌乳特性及其对仔兔生长发育的影响,全期35d。结果表明:Ⅰ、Ⅱ组每只母兔泌乳量各为6202g和6296g(P>0.05),泌乳曲线相似,产后15～18d为泌乳高峰;Ⅰ组泌乳力和每只仔兔吮乳量比Ⅱ组分别高1.9%(P>0.05)和12.6%(P<0.01);仔兔随日龄增长,乳转化均降低,日增重则不断提高,35日龄Ⅰ组仔兔个体重比Ⅱ组高18%(P<0.01),表明伊普吕兔于28～30日龄断奶可行。     

鸡致病性大肠杆菌油乳剂灭活苗的制备

从太谷某鸡场分离到疑似鸡大肠杆菌2株,经分离培养鉴定确认为大肠杆菌,血清型分别是O2和O78,将分离菌株经过致病性试验、增菌培养,制备了大肠杆菌灭活苗,经试验证明,本疫苗安全、有效。每只鸡免疫接种0.6mL以上临床无不良反应,对地方性鸡大肠杆菌病有较好的预防作用。     

自拟中药复方对仔兔血清中T3、T4、HGH含量的影响

目的研究自拟中药复方对兔血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、生长激素(HGH)含量的影响。方法将36只健康仔兔随机分为空白组、中药复方高、中、低剂量组4组,每组8只,饲喂30 d。中药复方高、中、低剂量组分别按照1.0%、2.0%、3.0%剂量添加到饲料中,空白组正常饲喂,试验结束时,采血分离血清,检测血清中T3、T4、HGH的含量。结果中药复方各组仔兔血清中HGH、T3、T4的含量均升高。结论该中药复方可通过提高血液中HGH、T3和T4的含量以促进仔兔的生长性能。     

大鲵虹彩病毒β-丙内酯灭活方法的研究

为探讨β-丙内酯(β-propiolactone,BPL)灭活大鲵虹彩病毒(Giant salamander iridovirus,GSIV)的最适条件,研究了BPL对GSIV的灭活方法。采用终浓度分别为0.025%、0.05%、0.1%、0.2%的BPL灭活细胞培养的GSIV,4℃条件下分别灭活24 h、48 h、72 h、96 h,通过细菌培养、细胞培养、病毒核酸PCR扩增以及鱼体感染试验进行灭活病毒的安全性检验,确定最适灭活条件。试验结果表明,GSIV经终浓度为0.1%的BPL 4℃灭活处理72 h后可完全灭活病毒,灭活病毒无细菌污染,接种对GSIV敏感的鲤上皮瘤细胞系(EPC)细胞无细胞病变效应(CPE)出现,病毒主衣壳蛋白(MCP)基因特异性引物PCR反应未扩增出靶基因产物,灭活病毒对健康大鲵的感染试验未出现疾病症状。灭活效果检测结果表明,与未灭活GSIV相比较,最适灭活条件下的GSIV结构蛋白与抗原性未发生显著变化。结论显示BPL可用来灭活GSIV,本研究确立了BPL灭活GSIV的最适条件,为大鲵虹彩病毒细胞培养灭活疫苗研究奠定了重要基础。     

IBD地方流行株油乳剂灭活苗的制备及免疫效果研究

将分离于齐齐哈尔市郊区的传染性法氏囊病病毒野毒株(QJ08),接种适龄易感鸡和SPF鸡胚,分别收集法氏囊和鸡胚组织,经病毒检测灭活后制备油乳剂灭活苗,并对其进行试验室和临床免疫效果比较。结果表明:该疫苗可提供90%以上的免疫保护。抗体转阳90%以上,琼脂扩散试验(AGP)抗体效价平均可达2.5log2;制备的油乳剂灭疫苗对当地流行的法氏囊病有良好的防制效果。     

软包装即食醉鱼制品细菌学品质安全分析

对上海市场常见品牌的软包装即食醉鱼制品感官、理化、细菌学品质状况进行定性和定量研究,并对潜在病原菌安全性进行评价。结果表明,产品水分含量、水分活度、pH和盐分含量分别为43.50%~56.97%,0.93~0.97,6.07~6.73,2.41%~6.63%,差别较大;细菌菌落总数、耐热菌落总数分别是1.8×102~4.2×105cfu/g,38~3 800 cfu/g;厌氧菌落总数和金黄色葡萄球菌均低于10 cfu/g。由细菌总数计数平板分离256株细菌,鉴定残存主要细菌菌群为芽孢杆菌(34.0%)、葡萄球菌(27.3%)、玫瑰小球菌(14.0%),并出现少量的棒状杆菌(5.5%),表明热杀菌强度不足。产品中残存有一定数量的蜡样芽孢杆菌,对其潜在危害有待进一步研究。     

夏落来牛改良本地黄牛效果调查报告

本文报告了四川某实验兔场兔球虫感染状况。共检查兔124只，球虫总感染率为97.58%(121/124)，其中3月龄以下、3～6月龄的兔感染率均为100%，从粪样中共鉴定出8种球虫。成年兔、3～6月龄的兔、3月龄以下的兔，平均克粪卵囊数(OPG)分别为385个 、333062个 、119143个。文中对防治措施提出了建议。     

应用间接荧光抗体技术检测林蛙嗜水气单胞菌

以感染嗜水气单胞菌的林蛙各组织脏器为抗原,以热灭活的嗜水气单胞菌为免疫原,免疫家兔制备兔抗嗜水气单胞菌血清为第一抗体,用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗兔IgG作为二抗,建立了间接荧光抗体试验方法.分别采用2.5%戊二醛5 min、甲醇10 min、冷丙酮1 h 3种固定方法固定抗原,然后滴加不同稀释倍数的兔抗嗜水气单胞菌血清、羊抗兔IgG-FITC,于荧光显微镜下观察.结果表明,2.5%戊二醛固定腹水5 min,兔抗血清抗体效价为 1:80,荧光二抗的最佳稀释倍数为1:4000.