富士苹果多酚氧化酶特性及褐变抑制研究

研究了富士苹果多酚氧化酶(PPO)的特性。结果表明,试验最大吸收波长为400 nm,在4℃的条件下贮存的富士苹果多酚氧化酶活性随着时间的延长逐渐降低。富士苹果多酚氧化酶的最适p H为6.5,最适温度为35℃,在80℃以上失活。不同抑制剂对富士苹果多酚氧化酶的抑制效果不同,抑制能力由高至低依次为抗坏血酸、柠檬酸、D-山梨醇、D-果糖、Na Cl、EDTA-2Na。当抗坏血酸的浓度为1 mmol/L时,富士苹果多酚氧化酶的相对活性仅为5.10%。     

烟草叶片多酚氧化酶的提取及其特性研究

影响烟叶颜色和香味的多酚氧化酶，自新鲜烟叶中提取后，经（ＮＨ４）２ＳＯ４沉淀透析酶活性增高到５．６倍，该酶催化且氧化邻位二元酚和三元酚化合物，但不氧化一元酚，在４０℃以下时，酶活性经２０ｍｉｎ才出现较弱的活性高峰，但持续时间较长；５５℃以上时，酶活性被迅速激活，出现强的活性高峰后迅速下降，持续时间很短，ＰＨ为６时，酶的活性最高，在偏碱条件下，酶活性下降快，增加Ｃｕ＾２＋浓度能增强酶活性，ＥＤＴＡ，     

莲藕中多酚氧化酶特性的研究

为解决带肉莲藕汁加工中褐变问题，采用分光光度法对莲藕组织中多酚化酶的特性进行了研究，分别求出该酶的最适温度为３０℃，最适ＰＨ为５．０为７．０，Ｖｍａｘ＝１．３２吸光度／ｍｉｎ，Ｋｍ＝２０ｍｍｏｌ／Ｌ。并探讨了该酶的热稳定性特征和抑制剂ＳＯ２，Ｖｃ对酶活力的影响。９５℃条件下１８ｓ可将酶灭活，抑制剂的有效抑制浓度分别为０．６％（ＮａＨＳＯ３计）和１．０ｍｏｌ／Ｌ（Ｖｃ）。     

生菜多酚氧化酶特性研究

为避免生菜褐变的发生,减缓其褐变进程,研究了生菜多酚氧化酶的酶学特性和部分抑制剂对该酶活性的影响。结果表明:生菜多酚氧化酶最适pH为8.0,最适底物浓度为0.3 mol·L-1,动力学方程为V=0.8859[S]/(0.0617+[S]),最适温度为25℃。抗坏血酸、亚硫酸氢钠对酶活性的抑制效果最明显。生菜内外部叶片的酶活性随着酶液存放时间的变化趋势不同。     

杨桃多酚氧化酶的提取研究

探讨了缓冲溶液pH值、添加表面活性剂和多酚吸附剂等因素对杨桃多酚氧化酶（PPO）提取效果的影响。结果表明：缓冲溶液pH值为7.0时,提取的杨桃PPO比活性最大;在提取缓冲溶液中添加吐温（Tween80）和特里顿（Triton X-100）时,提取的杨桃PPO比活性均有所下降,而添加交联聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）能明显提高杨桃PPO的总活性和比活性,PVPP的适宜添加量为3%。     

莲藕中多酚氧化酶特性的研究

为解决带肉莲藕汁加工中褐变问题，采用分光光度法对莲藕组织中多酚氧化酶的特性进行了研究，分别求出该酶的最适温度为３０℃，最适ｐＨ为５．０和７．０，Ｖ＿（ｍａｘ）＝１．３２吸光度／ｍｉｎ，Ｋ＿ｍ＝２０ｍｍｏｌ／Ｌ。并探讨了该酶的热稳定性特征和抑制剂ＳＯ＿２。Ｖｃ对酶活力的影响，９５℃条件下１８ｓ可将酶灭活，抑制剂的有效抑制浓度分别为０．６％（ＮａＨＳＯ＿３计）和１．０ｍｏｌ／Ｌ（Ｖｃ）。     

奉化水蜜桃多酚氧化酶提取纯化工艺研究

对奉化水蜜桃多酚氧化酶(PPO)的提取分离工艺进行了研究,结果表明,pH值对该酶的提取率影响最大,该酶的最佳提取条件为pH值8.0,提取时间40min,料液比1∶12(m∶V,g∶mL),离子强度0.2mol/L。硫酸铵分级沉淀研究表明,该酶主要在硫酸铵饱和度为50%～80%时发生沉析,故可利用这段浓度范围对该酶进行纯化,其纯化倍数为13.21。同时,水蜜桃PPO对儿茶素表现出很强的亲和性,其酶促反应米氏常数(Km)为0.22mmol/L,最大反应速度(vmax)为251.69U/min。     

马铃薯中多酚氧化酶特性的研究

用分光光度法以酪氨酸为其褐变底物,研究了马铃薯中多酚氧化酶(PPO)的特性,结果表明,PPO作用产物的最大吸收波长为480nm,最适温度为25℃,最适pH为6.5,在此条件下用0.15mmol·L-1浓度的PPO的非竞争性抑制剂就可以完全抑制PPO的酶活力。     

羊栖菜多酚氧化酶特性

对羊栖菜(Sargassumfusiforme)多酚氧化酶(PPO)进行浸提和硫酸铵分级盐析粗提,并测定了酶的特性.结果表明:在供试反应体系中,当邻苯二酚量为0.3-1.2mL时,酶活力呈直线增长,底物含量太高会产生抑制作用,当底物含量∶酶含量=2∶1时,酶活力表现最高;其酶活力的最适温度为40-45℃,在35-60℃范围内酶均能保持较高的活力,但超过60℃时,其活力则迅速下降;在50-100℃下水浴处理1h,酶活力丧失50%-75%;酶活力的适宜pH相对偏碱,在pH9.1时表现为一个活力高峰,在pH11.0和12.0时酶活力仍很高.提取的羊栖菜多酚氧化酶,存在不同特性的同功酶.5种供试抑制剂对该酶均有一定的抑制效果,其中NaHSO3和L-半胱氨酸的抑制作用最强,在浓度为50μmol·L-1时,抑制率达100%.     

苹果渣中多酚物质的提取工艺研究

本文研究了用乙醇为溶剂提取苹果渣中多酚物质的最佳工艺,考察醇提取时乙醇浓度、料液比、提取时间、提取温度对提取率的影响,正交试验结果表明最佳浸提条件为：乙醇浓度60％,提取温度60℃提取时间4h,料液比1：12;此条件下提取量为1072．615mg/kg。     

南美白对虾多酚氧化酶的提取及其性质研究

以南美白对虾为对象,研究了多酚氧化酶(PPO)分离提取工艺及其生化特性。在单因素试验基础上,采用响应面试验优化了料液比、提取液pH值和浸提时间等因素提取南美白对虾PPO的工艺,并对PPO的生化性质进行分析。结果表明:液料比为2∶1、提取液体系pH值为8.0、浸提时间为3 h等条件下,提取的PPO具有最大酶活力为94.8 A/min·mL,所得回归模型显著(P0.0001),方程拟合性好(R~2=0.9762),可用于预测南美白对虾中PPO的提取;PPO酶促反应动力学方程符合米氏方程,米氏常数K_m为30.322 mmol/L,V_(max)为0.281 A/min。PPO性质研究将为南美白对虾黑变抑制提供理论指导。     

牡丹多酚氧化酶的酶学特性

【目的】研究影响牡丹试管苗多酚氧化酶（PPO）酶学特性的因素,为牡丹的高效组培提供参考。【方法】以牡丹品种“乌龙捧盛”为供试材料,采用分光光度计比色法,研究温度、pH值、PPO提取液添加量及底物的类型和浓度对牡丹PPO活性的影响。【结果】以邻苯二酚为底物时,牡丹PPO的最适反应温度与最适pH分别为25 ℃和6.0,最适PPO提取液添加量为1 mL。牡丹PPO的最适作用底物为咖啡酸,其最适浓度为0.08 mol/L。【结论】通过选择合适的pH值和培养温度,同时结合化学抑制剂调控牡丹PPO活性,可以达到在牡丹组织培养中减少褐化现象、提高试管苗生根率的目的。     

木薯叶多酚氧化酶的提取及其酶学性质研究

以木薯叶为原料,研究木薯叶多酚氧化酶PPO的最佳提取条件与酶学性质。结果表明,木薯叶PPO 的 最佳提取条件为磷酸缓冲液PBS的pH 值6.8料液比4 mL/g提取时间6 h;木薯叶PPO 酶促反应产物在399 nm 处有最大吸收峰,以邻苯二酚为底物的酶促反应的米氏常数Km=0.8 mol/L动力学方程为V=2000[S]/0.8+[S]该酶最 适温度为37益,最适pH 值为7.0。     

苦瓜多酚氧化酶特性研究

采用分光光度法以邻苯二酚为底物研究了苦瓜多酚氧化酶的酶学特性及一些抗褐变剂对酶活性的影响。结果表明:苦瓜多酚氧化酶作用的最适温度为20℃和80℃,最适pH值为5,米氏常数Km=0.0519 mol/L,Vmax=74.0741U。Vc、L-半胱氨酸和亚硫酸氢钠对苦瓜多酚氧化酶有明显的抑制作用,硫代硫酸钠、柠檬酸有一定的抑制作用,而氯化钠的抑制作用比较弱。     

鸡腿菇多酚氧化酶动力学特性

以邻苯二酚(C6H6O2)为底物,采用分光光度法在波长398nm下测定鸡腿菇Coprinus comaus多酚氧化酶(PPO)活性,分析其pH值、温度及底物浓度等因素对PPO活性的影响.结果表明,鸡腿菇PPO活性的最适pH值4.0～5.0,最适温度20℃,在沸水浴30s后酶基本被钝化.鸡腿菇酶促褐变反应的动力学符合米氏方程,米氏常数Km为0.64mol·L-1,最大反应速度vmax为0.08U·min-1.对鸡腿菇不同部位的PPO活性分析表明,菌盖PPO活性＞菌柄(上)＞菌柄(下).     

富士苹果剖面CT值与pH值的关系研究

    探讨利用CT技术对苹果内部酸度进行无损检测的可行性.使用基于X射线源的CT机,对富士苹果进行扫描,获得苹果剖面CT图像.发现图像某点的CT值与该点的pH值之间存在显著的线性相关性,建立相关模型,其决定系数R2为0.9775,得到苹果内部酸度立体分布图,同时进行实验验证,结果表明模型的平均误差为0.11%.由此找到通过CT图像检测果蔬内部酸度分布的新途径.     

福云6号茶叶茶多酚氧化酶特性的研究

对红绿茶兼用品种福云6号的鲜叶多酚氧化酶(PPO)进行粗提,测定酶的活性并分析其特性。结果表明,在供试反应体系中,当邻苯二酚量为0.3~1.2 ml时,酶活性逐渐增长,底物含量太高会产生抑制作用。当底物含量∶酶含量=2∶1时,酶活性表现最高,保持较高酶活性的最适温度为35~40℃,在30~50℃范围内酶均能保持较高的活性,但超过50℃时,其活性则迅速下降;50~90℃水浴1 h,酶活性丧失32.33%~81.73%;维持较高酶活性的适宜pH值相对偏碱,在pH值8.6时表现为一个酶活性高峰,在pH值4.0~8.6时多酚氧化酶酶活性都上升。5种供试抑制剂对多酚氧化酶均有一定的抑制效果,其中NaHSO3的抑制作用最强,一定浓度下抑制率可达100%。     

姬松茸多酚氧化酶的动力学特性

测定了姬松茸不同部位的多酚氧化酶(PPO)活性,研究了不同pH、温度、底物浓度和抑制剂对PPO活性的影响,并建立酶促褐变反应动力学方程.结果表明:在邻苯二酚为底物的条件下,姬松茸PPO的最适pH为6.4,最适温度为30℃,米氏常数(Km)为6.23×10-3mol.L-1,最大反应速度(Vmax)为1.42 mol.L-1.min-1;柠檬酸对PPO的抑制效果不明显,NaHSO和异V-Na对PPO均有较强的抑制作用,且有效抑制的含量分别为0.18%和0.21%.     

菊苣根多酚氧化酶的酶学特性研究

【目的】研究菊苣根多酚氧化酶(PPO)酶学特性的影响因素,为菊苣根加工过程中酶促褐变的控制提供参考。【方法】以菊苣新鲜根为材料,从供试的3种三元酚、5种二元酚和4种单元酚底物中选出最佳反应底物,分析所选择底物的浓度、PPO提取液添加量、pH、温度及抑制剂对菊苣根PPO活性的影响,同时研究PPO的酶促动力学特征。【结果】菊苣根PPO的最适底物为焦性没食子酸,其最佳浓度为40mmol/L,菊苣根PPO的最适粗酶液添加量为0.4mL,最适pH和反应温度分别为7.0和35℃。PPO酶促反应动力学符合米氏方程,酶促反应的动力学米氏常数为0.39mmol/L,最大反应速率为217.39U/min。控制pH在4.8以下,采用0.4mmol/L柠檬酸和0.8mmol/L L-抗坏血酸复配,90℃处理10min或者100℃处理6min,均可基本抑制菊苣根PPO的活性。【结论】通过选择合适的pH和温度,同时结合化学抑制剂调控菊苣根PPO活性,可以减少菊苣根加工过程中的酶促褐变,从而提高加工产品的品质。     

烟草多酚氧化酶生物信息学分析

为对烟草多酚氧化酶进行生物信息学分析,利用ProtScale、PhyML和Meme工具读取烟草多酚氧化酶,进行疏水性、进化树和保守基序分析。结果表明,烟草多酚氧化酶各成员均为亲水性氨基酸;多酚氧化酶成员的进化树被划分为三类,其中烟草和番茄聚为一类,第二类中的成员最多;NtPPO1、NtPPO2和NtPPO3均含有相同的保守基序,NtPPO1和NtPPO2分布位置较为相似,而NtPPO3与其存在一定的差异。