杧果细菌性角斑病菌细胞壁降解酶的致病作用

【目的】从细胞壁降解酶的角度开展其致病机制的研究,探讨杧果细菌性角斑病在发病过程中产生细胞壁降解酶的种类及其在致病过程中的作用,以期为对该病害的有效监测和研发防控新技术提供理论依据。【方法】采用活体外诱导培养和病原菌接种处理,利用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)和紫外分光光度计法检测病原菌侵染过程中细胞壁降解酶活性变化,DDS-ⅡA型电导率仪测定叶片组织浸出液的电导率,并观测细胞壁降解酶对杧果叶片的致病作用。【结果】病原菌在改良的Marcus培养液和罹病组织中均能产生6种主要细胞壁降解酶,其中羧甲基纤维素酶(Cx)活性较高,多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)和β-葡萄糖苷酶次之,果胶甲基反式消除酶(PMTE)和多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)较低。病原菌接种杧果叶片后,6种酶活性显著升高,在病菌侵染前期(0~4 d),PMG接种后2 d达到最大活性高峰,酶活值为8.470 U?mg-1,以未含致病菌株的培养基接种杧果叶片作为对照,此时接种处理酶活值是对照的3.805倍;β-葡萄糖苷酶接种后4 d酶活性值最大,为15.190 U?mg-1,是对照的4.388倍。在病菌侵染后期(4~14 d),Cx、PG、PMTE和PGTE均在接种后的10 d达到最高峰,酶活性值分别为25.941、14.605、0.009、0.014 U?mg-1,是对照的2.672、14.634、12.571和4.121倍,在整个测定过程中,对照始终处于较低水平。此外,细胞壁降解酶对杧果叶片具有浸解作用,且浸解损伤程度与酶浓度成正比。【结论】细胞壁降解酶在病原菌的入侵和致病过程中起重要作用。果胶酶在病原菌侵染初期最早分泌并起作用,纤维素酶主要降解次生壁,致病作用发生在后期,并且果胶酶比纤维素酶对杧果叶片的致病作用明显。     

细胞壁降解酶在辣椒尾孢霉致病过程中的作用

以辣椒尾孢霉(Cercospora capsici Heald. et Wolf.)为供试菌,采用分光光度计测定辣椒尾孢霉产生的细胞壁降解酶种类;通过电导率测定及透射电镜观察以探索细胞壁降解酶的致病作用。结果表明,辣椒尾孢霉在活体内外均可产生多聚半乳糖醛酸酶(PG)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)、果胶甲基反式消除酶(PMTE)和羧甲基纤维素酶(Cx)等细胞壁降解酶,而β-葡萄糖苷酶只在活体外产生,且该菌在活体内和活体外产生的细胞壁降解酶活性差异较大。透射电镜观察结果表明,细胞壁降解酶对叶片的超微结构有破坏作用,病菌细胞壁降解酶在致病过程中能够损伤寄主的细胞膜,从而影响其透性;就细胞膜损伤率而言,混合酶的作用显著高于单一酶,果胶酶对细胞膜的损伤明显强于纤维素酶。     

可可球二孢（Botryodiplodia theobromae）细胞壁降解酶对木亡果果实致病作用

为明确可可球二孢（Botryodiplodia theobromae Pat.）产细胞壁降解酶在侵染杧果果实过程中的作用,研究了可可球二孢在离体培养和接种条件下分泌的5种细胞壁降解酶活性变化特点,以及可可球二孢（B.theobromae）、胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides Pen...     

黄瓜根际促生菌的促生效应与防病作用

对黄瓜植物根际促生菌(PGPR)菌株的分离筛选、分类鉴定以及人们对其促生防病作用的应用和防病机制的研究现状进行了综述,以期为新型PGPR制剂的进一步研制、开发和应用提供参考.     

脱落酸诱导黄瓜对霜霉病的抗性研究

以"新泰密刺"黄瓜为试材,选用5、10、20、30、40mg/L的脱落酸(ABA)处理黄瓜幼苗,研究外源ABA对黄瓜抗霜霉病的影响。结果表明:适当浓度ABA处理可诱导黄瓜抗霜霉病,降低病情指数,诱导叶片防御酶POD、SOD、PAL、PPO活性升高。其中10mg/L浓度处理表现效果最好;诱导抗性可持续8d以上,第4天防御酶活性均高于第8天。     

霜霉病菌侵染的黄瓜叶片cDNA文库的构建及抗病相关基因筛选

以接种黄瓜霜霉病菌的抗病黄瓜品种‘649’的叶片为材料,使用改良SDS法提取总RNA,构建黄瓜叶片全长cDNA文库,得到的原始文库滴度为5.5 × 106 pfu • mL-1,扩增后的文库滴度达6.5 × 109 pfu • mL-1,重组率约为99%,插入片段在0.5 ~ 2.0 kb之间,大多在1.0 kb左右。随机选取3 360个克隆进行测序,共拼接出2 507个unigenes,其中包括211个重叠群（Contigs）和2 296个单拷贝EST（Singlets）。生物信息学分析显示：这些unigenes中存在427条与植物防御/抗病相关的基因,其中包括两类抗病基因和细胞程序性死亡相关基因,这些基因的发现为下一步研究黄瓜抗病机理,克隆抗霜霉病相关基因提供了重要的参考。     

不同抗性的黄瓜幼苗对接种霜霉病菌的生理响应

以黄瓜抗病品种"津春4号"和感病品种"长春密刺"为试材,在接种黄瓜霜霉病菌后0.5、1、2、4、7d对叶片的丙二醛(MDA)、可溶性糖、可溶性蛋白含量和乙烯释放量进行了检测,并分析了这些生理变化与黄瓜霜霉病抗性之间的关系。结果表明:抗病品种黄瓜叶片中MDA含量、乙烯释放量低于感病品种,而可溶性糖、可溶性蛋白含量则高于感病品种。表明抗病品种比感病品种具有更强的防御能力和抗膜脂过氧化能力。     

黄瓜霜霉病抗性相关基因的初步研究

 以黄瓜高抗霜霉病自交系为材料,构建了两个抑制差减文库,经反向Northern杂交筛选、测序和序列比对,筛选到3个未知功能抗病相关基因。荧光实时定量RT-PCR分析结果表明,未知功能抗病相关基因2I15（GD254229）、3C19（GD254243）和1O08（GD254207）在抗病自交系接种霜霉病病原菌后,可早期高丰度特异上调表达,而在感病自交系中特异上调表达丰度较低或被特异抑制表达。水杨酸（SA）可诱导1O08特异上调表达,抑制2I15和3C19的表达;茉莉酸（JA）处理可诱导1O08特异上调表达,而抑制2I15的表达。ABA处理可显著诱导3C19和1O08特异上调表达,而抑制2I15的表达。机械伤害、高盐、冷害和热激等其它非生物胁迫可显著抑制或诱导这些基因的表达,因此推测,所筛选到的功能未知基因可能具有参与生物和非生物胁迫反应的作用     

黄瓜枯萎病、白粉病、霜霉病和黑星病苗期多抗性鉴定方法的评价

随着黄瓜病害种类逐渐增多,病害程度日趋严重,黄瓜的多抗性鉴定筛选工作便成为抗病育种的重要环节和手段。前人已做过3种病害的多抗性鉴定技术研究(枯萎病—霜霉病—炭疽病、枯萎病—炭疽病—疫病、枯萎病—霜霉病—角斑病、霜霉病—角斑病—黑星病)〔1-3〕,但随着育种目标的不断提高,生产上要求兼抗4种甚至5种病害的黄瓜品种,这就对育种工作者提出了更高的要求。在黄瓜主要病害抗病性鉴定的基础上,笔者初步进行了黄瓜枯萎病—白粉病—霜霉病—黑星病苗期多抗性鉴定方法的探索,并与各病害的单抗性鉴定相比较,以期确定一套适合这4种病害的多…     

黄瓜单性结实果实发育与碳氮变化的关系

对黄瓜单性结实品系P 116 8和非单性结实品系UP 3315进行授粉和不授粉处理 ,P 116 8在不授粉的情况下 ,仍具有较好的结实性能 ,其单果质量、果长和果实体积均接近于授粉后生长的果实 ,非单性结实品系UP 3315在不授粉的情况下幼果在花后 3d(天 )就停止发育 ,不能形成产量。随着果实的生长发育 ,果实内碳、氮含量迅速增加 ,花后单果可溶性总糖和蛋白质含量与单果质量呈正相关关系     

两个新发现的黄瓜性别决定基因遗传规律的研究

 选取黄瓜两个雌雄同株型的强雌性高代自交系材料与普通雌雄同株、两性花株、纯雌株高代自交系材料杂交, 通过对F₁、F₂、BC₁ -1 和BC₁ -2 代性型观察, 统计分析表明: 雌雄同株型的强雌性由1对不完全显性和1对隐性基因控制, 暂定名为Mod-F₁和mod-F₂, 它们是新发现的黄瓜性别表达的两个基因, 能增强黄瓜植株雌性的表达, 与F和M 基因独立遗传。     

两种熏蒸剂对土传病害的防控效果及黄瓜产量的影响

在北京顺义黄瓜大棚中采用注射法施用二甲基二硫、混土法施用棉隆,对土壤进行熏蒸处理,施药后土壤表面覆盖完全不透膜,比较二甲基二硫与棉隆对黄瓜主要土传病害的防治情况及对黄瓜生长和产量的影响。结果表明,两种熏蒸剂对黄瓜根结线虫(Meloidogynespp.)、疫霉菌(Phytophthora spp.)和镰刀菌(Fusariumspp.)均有较好的防效,二甲基二硫40g·m~()-2)处理时对3种病原物的防效分别为84.29%、75.99%、79.94%,棉隆30.0g·m~()-2)处理的防效分别为80.30%、92.36%、92.27%,而且二甲基二硫、棉隆处理与空白对照相比,黄瓜净收入分别增加66%~85%和65%~71%。     

葡聚六糖诱导黄瓜体内水杨酸的积累及其与抗霜霉病关系的初步研究

 通过盆栽试验表明, 葡聚六糖连续处理黄瓜幼苗3次后, 可以诱导黄瓜抗霜霉病, 防效可达65.40%。通过反相HPLC法测定不同时间水杨酸含量表明, 葡聚六糖连续诱导处理黄瓜幼苗3次后水杨酸含量在诱导后1 d出现高峰, 且水杨酸含量在8 d内一直比对照略高。葡聚六糖仅处理1次时, 诱导叶(第1片真叶) 水杨酸含量显著提高, 在诱导后6 h出现1个高峰, 而非诱导叶(第2片真叶) 在12 h出现1个高峰。     

两种诱雄剂对黄瓜植株保护酶类活性的影响

通过测定AgNO_3和Ag_2S_2O_3两种诱雄剂对黄瓜雌性系h154,151和普通系h002植株保护酶类活性的影响,结果表明,茎尖中的POD,CAT活性较对照都有所升高,处理48 h时酶活性达到最高,POD活性增幅分别为164-4%,133.5%,241.5%和23.1%,16.5%,57.2%;CAT活性增幅分别为91.3%,95.7%,113.5%和69.6%,64.3%,82.4%。AgNO_3处理黄瓜幼苗后SOD活性先下降,后升高,处理120 h时,SOD活性达到最高,增幅分别为75.3%,65.2%,30.7%和27.2%,36.9%,16.2%。