中国水牛乳蛋白基因多态性与乳蛋白组成的关联研究

本研究的目的是分析中国水牛乳蛋白基因多态性与乳蛋白组成的关联。通过高效液相色谱法对260头尼里、摩拉和杂交水牛奶样的乳蛋白基因多态性及蛋白组成进行分析测定。结果表明:κ-酪蛋白有BB、AB和AC3种基因型,αs2-酪蛋白和αs1-酪蛋白基因型分别为AA、AB型和AB、BB型,β-酪蛋白有AA和AB 2种基因型,β-乳球蛋白和α-乳白蛋白均仅发现BB型。运用SAS 9.0统计分析多态性与乳蛋白组成的关联后,发现在筛选出的5种κ-αs1-β复合基因型中,BB-AB-AA型与κ-酪蛋白相对含量极显著相关;AB-AB-AA型与αs2-酪蛋白相对含量极显著相关。研究结果表明,水牛乳蛋白存在基因多态性,κ-αs1-β-复合酪蛋白多态性与κ-酪蛋白和αs2-酪蛋白相对含量显著相关。     

κ-酪蛋白遗传多样性对血管紧张素Ⅰ转换酶抑制肽活性的影响

牛奶中蛋白质是生物活性肽的来源之一，这些肽在酪蛋白和乳清蛋白的消化过程中产生。因此，本试验主要研究牛奶中不同的κ-酪蛋白基因型A、B、C、E、F1、F2、G1、G2、H、I和J中活性肽对血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）抑制活性的影响。通过分析肛酪蛋白基因型的氨基酸序列来测定ACE抑制肽的活性。测定了已知的生物活性肽活力和其它一些κ-酪蛋白基因型巾其它肽的活性。结果表明，κ-酪蛋白基因型B和基因型C中的ASP（ACE抑制肽）的IC50（半数抑制浓度）值为242．3，     

α-乳白蛋白与β-酪蛋白预防炎症的协同作用研究

牛乳中酪蛋白比例高,而母乳中乳清蛋白含量高,α-乳白蛋白、β-酪蛋白作为母乳中主要的乳清蛋白和酪蛋白,以α-乳白蛋白和β-酪蛋白为研究对象,利用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞炎症反应,探究不同比例的组合蛋白对细胞炎症的预防作用,探索乳清蛋白和酪蛋白的最佳配比,使婴配粉更贴合母乳。结果表明,添加α-乳白蛋白和β-酪蛋白单体能改变炎症因子mRNA和蛋白水平的表达,然而当混合比例为1:0.17时效果最佳,能显著降低白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、髓样分化基因88(MyD88)、Toll样受体4(TLR4)在mRNA水平的表达,在蛋白水平降低IL-6 1.99倍、白介素1β(IL-1β)3.91倍、肿瘤坏死因子α(TNF-α)2.72倍。通过抑制非TLR4介导炎症信号通路关键蛋白NF-κB p65的磷酸化抑制炎症的发生。本研究明确了α-乳白蛋白和β-酪蛋白预防炎症发生的最佳比例,初步阐明了两者协同抗炎的作用机理,为其在婴幼儿配方奶粉中的精准添加提供理论支持和技术指导。     

中国水牛乳蛋白基因型与酪蛋白胶束粒度的关联研究

本研究旨在分析中国水牛乳蛋白各亚型与乳蛋白粒径的关联。采用反向高效液相色谱法对160头泌乳中期的水牛进行多态性测定,并利用激光粒度仪分析水牛乳蛋白的粒径。结果显示:αs1-酪蛋白(αs1-CN)、β-酪蛋白(β-CN)和α-乳白蛋白(α-LA)存在A型和B型2种基因型,κ-酪蛋白(κ-CN)有A型、B型、C型和D型4种基因型,αs2-酪蛋白(αs2-CN)和β-乳球蛋白(β-LG)没有发现多态性。κ-CN和αs1-CN各亚型在乳蛋白面积平均径(D[3,2])上有显著差异,筛选出的6种αs1-β-κ-CN复合基因型在乳蛋白面积平均径(D[3,2])以及中位径(D50)上差异显著。综上,水牛αs1-β-κ-CN复合基因为AB-BB-AB型以及κ-CN的C等位基因均与乳蛋白粒度存在显著关联。     

奶牛乳蛋白基因多态性研究进展

乳中蛋白质由酪蛋白和乳蛋白组成。酪蛋白包括αs1-酪蛋白(αs1-Casein,αs1-CN)、αs2-酪蛋白(αs2-Casein,αs2-CN)、κ-酪蛋白(κ-Casein,κ-CN)和β-酪蛋白(β-Casein,β-CN)).     

颈静脉灌注精氨酸对泌乳中期奶牛泌乳性能和牛乳酪蛋白合成的影响

本文旨在研究颈静脉灌注精氨酸对泌乳中期奶牛泌乳性能和牛乳酪蛋白合成的影响。将6头体重、胎次、泌乳期、泌乳量和体况基本一致的荷斯坦奶牛随机分为3组(每组2头):酪蛋白模式组(对照组)、精氨酸灌注组、丙氨酸等氮组(与精氨酸灌注组等氮),采用3×3复拉丁方试验设计,每期22 d(7 d灌注期+15 d间隔期),测定其泌乳性能、酪蛋白含量以及酪蛋白基因的表达情况。结果表明:1)灌注的第5天精氨酸灌注组的乳蛋白及乳中非脂固形物含量均显著高于酪蛋白模式组(P0.05);第6天精氨酸灌注组的乳脂率显著高于丙氨酸等氮组(P0.05)。2)酪蛋白模式组的α-酪蛋白含量显著低于其他2组(P0.05);β-酪蛋白含量在3组间没有显著的差异(P0.05);κ-酪蛋白含量则以精氨酸灌注组为最高,显著高于其他2组(P0.05)。3)精氨酸灌注组αs1-酪蛋白基因(CSN1S1)、αs2-酪蛋白基因(CSN1S2)的表达量显著高于其他2组(P0.05)。综上,灌注精氨酸提高了乳蛋白中α-酪蛋白和κ-酪蛋白含量,以及CSN1S1、CSN1S2在奶牛乳腺组织的表达量,有利于牛乳中乳蛋白率和乳品质的提高。     

四川各地黑山羊品种(群体)乳的生化组成与酪蛋白多态性研究

采用常规方法测定四川9个黑山羊品种(群体)乳常规营养组分含量.采用碱性尿素电泳方法分析酪蛋白多态性.结果表明,四川9个黑山羊乳蛋白含量范围为41.36～46.37 g/L,以营山黑山羊最低(41.36 g/L),金堂黑山羊最高(46.37g/L),差异极显著(P＜0.01);乳糖含量范围为44.00～47.30 g/L,以建昌黑山羊最低(44.00 g/L),金堂黑山羊最高(47.30g/L),差异不显著(P＜0.05);乳脂率范围为55.45～60.52 g/L,其中以白玉黑山羊最低(55.45 g/L),自贡黑山羊最高(60.52 g/L),差异极显著(P＜0.01).乳蛋白组分:CN(68.42%～71.01%),β-Lg(14.46%～15.87%),IgG(7.04%～7.34%),α-La(5.35%～5.96%),SA(2.02%～2.40%).各蛋白组分经显著性检验,营山黑山羊和嘉陵黑山羊的CN相对含量显著低于其他黑山羊品种(群体)(P＜0.01).在9个山羊品种(群体)中α-酪蛋白基因型存在多态性,多态型对乳脂率影响显著,其中α-酪蛋白DD型乳脂率显著低于CC型、CD型(P＜0.05).     

乳中酪蛋白生物活性多肽的潜在应用价值

酪蛋白作为乳中含量最高的蛋白质,具有较高营养价值。其主要由αs1-酪蛋白、αs2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白组成,四种构型的特点不同。酪蛋白经酶解或消化后能产生较多活性多肽,对调节氧化应激、降低血压、促进矿物质吸收、降低血糖和血脂、提高抗菌性和调节神经系统均有良好作用。活性多肽目前制备方法主要分为化学降解法、酶解法、微生物发酵法、基因工程法和化学合成法,各方法均有优缺点。为促进乳中酪蛋白的生物活性多肽开发,本文从酪蛋白组成特点、活性多肽类型和制备方法等方面综合概述,促进酪蛋白制备活性多肽工业化,增强乳的附加值。     

三维模式下培养时间对奶牛乳腺上皮细胞酪蛋白基因表达的影响

本试验旨在研究三维模式下培养时间对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)酪蛋白基因表达的影响。采用3头健康的3～5岁泌乳黑白花奶牛的乳腺组织,将BMECs经1代纯化后进行三维培养,在三维模式下分别培养3、5、7、9 d,测定BMECs中αs1-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白的基因表达量。结果表明,利用三维模式培养5 d的BMECsαs1-酪蛋白和κ-酪蛋白基因表达量极显著高于培养3、7、9 d(P<0.01);利用三维模式培养5 d的BMECsβ-酪蛋白的基因表达量极显著高于培养3、7 d(P<0.01),高于培养9 d,但差异不显著(P>0.05)。结果显示,三维模式下培养时间影响BMECs中αs1-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白的基因表达量,本试验条件下最佳培养时间为5 d。     

羊乳蛋白质组成及消化特性

应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和体外模拟消化研究羊乳蛋白质组成和消化特性。结果表明：羊乳蛋白质主要由酪蛋白和乳清蛋白组成,酪蛋白主要由αs1-酪蛋白、αs2-酪蛋白、β-酪蛋白和κ-酪蛋白组成,在酪蛋白中的相对含量分别为23.10%、30.39%、38.09%和8.42%;乳清蛋白主要由α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白、血清白蛋白和免疫球蛋白组成,在乳清蛋白中的相对含量分别为24.59%、57.50%、4.35%、8.69%和4.88%;羊乳酪蛋白主要在肠液中消化,在胃液中消化120 min时     

液相色谱法测定超高温灭菌乳中蛋白含量

建立一种超高温(ultra high temperature,UHT)灭菌乳中α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-乳白蛋白及β-乳球蛋白含量的液相色谱检测方法.采用含双[三(羟甲基)氨基甲烷]、盐酸胍、柠檬酸钠、二硫苏糖醇等的缓冲液及试剂使蛋白溶解变性,运用液相色谱仪紫外检测器进行检测,外标法定量.结果表明:各蛋白...     

奶牛乳腺上皮细胞的二维和三维培养及培养后酪蛋白基因的表达

本试验研究了二维和三维培养对奶牛乳腺上皮细胞(BMEC)形态与β-酪蛋白、κ-酪蛋白、αs1-酪蛋白基因表达的影响.试验采用内蒙古地区3头5岁泌乳期健康荷斯坦奶牛的乳腺组织,将BMEC经3代培养纯化后分别进行二维和三维培养,观察不同培养模式下细胞的生长形态,测定β-酪蛋白、A-酪蛋白、αs1-酪蛋白基因的表达量.结果表明:2种培养模式下的BMEC呈现不同的细胞形态,二维培养的BMEC呈典型铺路石样细胞形态,三维培养的BMEC则形成了类腺泡的聚集物和管腔结构.利用三维培养的BMEC的αs1-酪蛋白基因的表达量显著地高于二维培养(P＜0.05),三维培养的BMEC的β-酪蛋白和κ-酪蛋白基因的表达量极显著地高于二维培养(P＜0.01).结果提示,三维培养的BMEC3种酪蛋白基因的表达量均高于二维培养,三维培养的BMEC在形态上呈现的特点与在体内更加接近.     

热加工方式对牛乳过敏原αs1-酪蛋白二级结构和抗原性的影响

为探究热加工方式对牛乳过敏原αs1-酪蛋白构象和抗原性的影响,利用间接竞争酶联免疫吸附测定方法、 免疫印迹方法分析不同加热条件下αs1-酪蛋白免疫原性的变化,进而通过8-苯胺-1-萘磺酸荧光探针和圆二色谱分 析其二级结构变化,初步揭示热处理调控过敏原αs1-酪蛋白抗原性的机制。结果表明：在80 ℃、60 min,90 ℃、 10 min,90 ℃、60 min条件下热处理后,αs1-酪蛋白中α-螺旋结构含量显著低于未加热αs1-酪蛋白,在70 ℃、 20 min,80 ℃、20 min,90 ℃、20 min条件下热处理后,αs1-酪蛋白中无规卷曲含量显著增加,70～100 ℃加热 20 min条件下表面荧光强度最强,其他温度-时间条件下二级结构含量变化不显著;αs1-酪蛋白构象的变化导致αs1-酪 蛋白的抗原性显著降低,间接竞争酶联免疫吸附测定显示,在70～100 ℃加热20 min条件下,αs1-酪蛋白的抗原残留 量均较高,而免疫印迹方法显示不同温度-时间条件下αs1-酪蛋白仍具有免疫反应特性,建议进一步通过动物实验揭 示热处理调控αs1-酪蛋白抗原性的机制。     

奶牛乳蛋白基因的研究进展

奶牛被称为“人类的保姆”,牛奶是能为人类提供最优质、最完善的营养物质之一。而乳中蛋白质直接决定着乳制品的品质和风味。研究发现乳中蛋白质主要有两类：酪蛋白和乳清蛋白,两者占乳中蛋白质总量的95％,酪蛋白包括αS1,酪蛋白（αS1-CN）、αS2-酪蛋白（αS2-CN）、β-酪蛋白（β-CN）、 κ-酪蛋白（κ-CN）;乳清蛋白包括α-乳清蛋白（α-La）、     

通过转基因改善家畜奶的品质

通过大量的研究报道，综述了转基因技术在改善家畜奶品质方面的研究概况，如提高奶中κ-、αs1-、αs2-和β－酪蛋白含量，增加溶菌酶含量，生产人乳铁蛋白和乳白蛋白，降低乳糖含量，使其品质更接近人奶。     

基于反相高效液相色谱技术测定市售羊乳粉中蛋白

为鉴别及检测不同地区市售羊乳粉的品质，基于反相高效液相色谱（reversed-phase high performance liquid chromatography，RP-HPLC）技术，将35 种市售羊乳粉根据陕西地区和非陕西地区、纯羊乳粉和配方羊乳粉进行分 类与检测，研究不同产地、不同种类羊乳粉的差异，对羊乳粉品质进行分析判别。结果表明：对市售羊乳粉乳蛋 白进行RP-HPLC测定发现，配方羊乳粉αs2-酪蛋白（αs2-casein，αs2-CN）和β-CN相对含量分别低于纯羊乳粉20%和 24%，κ-CN和乳清蛋白相对含量分别高于纯羊乳粉30%和50%；不同地区纯羊乳粉乳蛋白组成及含量相似。因此， 通过RP-HPLC可以实现对市售羊乳粉中乳蛋白的测定和质量评价。     

κ-酪蛋白基因及其功能研究进展

κ-酪蛋白(kappa-casein,-κCN)是牛乳中的一种重要的蛋白质。作者简要介绍了κ-酪蛋白基因的结构、遗传多态性与产奶性状的关系及其编码蛋白质的生物学功能等方面的研究进展。     

黑白花奶牛乳蛋白质的遗传多态性及其与生产性能的关系

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对分布在昆明和贵阳四个奶牛场的264头奶牛进行分型。测得的基因频率是:α_(s1)-酪蛋白A是2.65±0.488,α_(s1)酪蛋白B是92.61±1.296,α_(s1)酪蛋白C是4.74±0.855;β-酪蛋白A是97.35±0.49,β-酪蛋白B是2.65±0.49;κ-酪蛋白A是74.10±3.63,κ-酪蛋白B是25.90±3.63;β-乳球蛋白A是39.40±4.52,β-孔球蛋白B是60.60±4.52;α-乳清蛋白B是1.00。用最小二乘法对奶牛的产奶性能进行校正后,对各种乳蛋白质基因型间的生产性能进行t-检验。检验结果表明较高的产奶量与αs_1-酪蛋白BB型相关(P<0.05)。β-酪蛋白AA型,κ-酪蛋白AA型和β-乳球蛋白BB型的乳脂率较高,κ-酪蛋白BB型与较高的乳蛋白率相关。     

茶多酚对牛乳过敏原αs1-酪蛋白构象和抗原性的影响

为探明茶多酚对αs1-酪蛋白构象和抗原性的影响，选用茶多酚中活性较强的表没食子儿茶素没食子酸酯 （epigallocatechin gallate，EGCG）和表没食子儿茶素（epigallocatechin，EGC）接枝αs1-酪蛋白。通过荧光光谱、 同步荧光光谱和圆二色谱研究αs1-酪蛋白构象变化，通过间接竞争酶联免疫方法、免疫印迹实验分析αs1-酪蛋白抗原 性变化。结果表明：EGC、EGCG均对αs1-酪蛋白内部荧光有猝灭作用，对αs1-酪蛋白的酪氨酸（tyrosine，Tyr）和 色氨酸（tryptophan，Trp）残基均有影响，αs1-酪蛋白的α-螺旋和β-折叠含量略有增加，无规卷曲含量略有降低； αs1-酪蛋白构象的变化导致其抗原性显著降低，EGCG对αs1-酪蛋白构象和抗原性的影响显著强于EGC。     

A2型β-酪蛋白牛奶及A2乳制品开发现状

酪蛋白占牛奶总蛋白80%,具有很高的营养价值和重要的生理功能。A1和A2型β-酪蛋白是牛奶中两种主要的β-酪蛋白遗传变异体。牛奶A2型β-酪蛋白和人乳中的β-酪蛋白结构和消化特点相似,对人体更亲和,也更容易被消化吸收。开发A2型牛奶对增加乳制品品种、细分乳制品市场、提高乳制品档次具有积极意义。本文介绍了牛奶β-酪蛋白基因多态性、中国荷斯坦牛群β-酪蛋白基因型频率和等位基因频率、A2奶牛和A2牛奶的检测、以及A2乳制品开发现状,并对新疆开发A2牛奶及乳制品提出意见和建议。