ELISA操作要求及质量控制

酶联免疫吸附试验（ELISA）是医学检验的免疫学检验方法之一,已广泛应用于对病原微生物的免疫学检查试验中。用ELISA法检测是目前最常用的实验室检验方法之一。与任何实验室检查方法一样,ELISA存在少量的假性结果（假阳性、假阴性）,对临床诊断和治疗会有一定影响。目前,ELISA已经普遍使用洗板机、全自动酶标分析仪,使试验数据的准确性和真实性都有明显提高。但试验设备的自动化并不代表试验数据100％可靠,还要求试验人员具备扎实的专业知识和熟练的试验操作技术,并且要对实验室的内外环境进行适时监控,从试验软件、仪器设备、操作程序、人员素质及环境监控等方面确保试验结果的准确性和可靠性。     

规模化种禽场禽白血病检测方法的比较及初步应用

在规模化种鸡场禽白血病净化工作中,选择合适的检测方法至关重要。本研究从规模化种鸡场采集疑似禽白血病发病鸡群20份样本和正常鸡群10份样本,分别用ELISA、RT-PCR以及IFA进行平行比较试验。结果表明ELISA、RT-PCR和IFA的符合率均达到96.7%,RT-PCR和IFA灵敏度相对较高,但对实验室条件和人员要求相对严格,不适用在种鸡场推广。ELISA操作简便、快速、成本低,对实验室条件和人员要求相对较低,适合作为规模化鸡场种鸡群禽白血病净化时批量检测的工具。     

3种猪瘟抗体检测试剂盒的比较与分析

为掌握3种猪瘟病毒抗体检测试剂盒的优缺点,本研究应用IHA、间接ELISA、阻断ELISA试剂盒分别对67份猪血清样品进行检测,结果显示IHA、间接ELISA、阻断ELISA分别检测出阳性样品48份、56份、59份,阳性率分别为71.64%、83.58%、88.06%,与中和试验的符合率分别为89.55%、92.53%、94.03%。结果表明IHA灵敏度稍低,对血清质量要求高,但检测快速、操作简单及无需特殊仪器设备,适合个体检测和基层实验室使用;间接ELISA和阻断ELISA敏感性高、通量高,但对操作人员有专业水平要求、需要酶标仪,适合对畜群检测和一般实验室使用。     

使用ELISA试剂盒应该注意的问题

酶联免疫试剂盒是较普遍常用的药物残留检测方法,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等特点,但对实验操作条件的要求比较严格.实验条件主要由实验室的操作环境和操作人员的操作熟练程度两方面组成.但EIJSA试剂盒对实验室操作环境的要求是儿种药物残留检测方法中相对较低的.由于大部分的试验操作步骤都是由实验人员来完成的,人为的误差相对严重一些.本人结合几年的工作实践介绍一下进行ELISA操作的时候应该注意的问题.     

用ELISA方法检测猪瘟病毒抗体水平的操作步骤及注意事项

当前规模化猪场对猪病的诊断越来越依赖于实验室诊断数据,对基层畜牧兽医实验室技术而言,运用ELISA(酶联免疫吸附试验)进行检测疾病的技术推广势在必行。本文以检测猪瘟抗体水平为例,详细讲解实验操作流程及北方冬季操作的注意事项,旨在对猪场基层实验人员有指导意义。     

应用葡萄球菌蛋白A的酶联免疫吸附试验用作检测病毒抗体

研制了一种用辣根过氧化物酶标记葡萄球菌蛋白A的改良间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法。用辣根过氧化物酶标记蛋白A结合物取代抗球蛋白酶结合物作间接酶联免疫吸附试验,检测马、牛、猪、猫、狗、兔和人血清中的病毒抗体。该试验结果与血清—病毒中和试验作比较。并讨论了在实验室中应用该试验对各种动物血清作血清学试验的可能性。自从在1971年Engvall和Perlmann与Van Weemen和Schunrs研制了酶联免疫吸附试验(ELISA)以来,该方法已广泛用于抗体或抗原的检测。因为ELISA和放射免疫测定法同样敏感,且所用试剂稳定,又不需要复杂设备,故当今已于许多诊断实验室中应用。与大多数其它常用方法比较,ELISA方法价廉、快速、简单。各种改良ELISA试验证明是有用的,特别间接方法适用于传染病研究。然而,因为许多实验室工作用各种动物血清,故需要各种抗球蛋白酶结合物,而商业上制备的结合物种类是有限的。显然,如果有一种能够检测各种动物免疫球蛋白的结合了酶的试剂,将大大促进了间接ELISA试验的多种用途。虽然早已知道葡萄球菌蛋白A与大多数动物种类的IgG结合,但这种现象得到广泛应用仅仅是近年的事。在放射免疫电泳,免疫铁蛋白技术和免疫荧光试验中,这种蛋白已用作代替抗IgG血清。本报告的目的是叙述在间接ELISA方法中,酶标记蛋白A的应用。这种改良方法用单一种试剂可以检测多种动物的抗体。强调了此种方法便于对多种动物病进行实验室诊断。     

动物疫情快递

2008年4月2日,芬兰Riitta Heinonen先生向oIE报告了牛白血病疫情。疫情始于2008年1月3日,于1月17日得到确诊。本次疫情不属于临床发病,依靠实验室检测作出诊断。VLA Weybridge（OIE参考实验室）的western blotting和间接ELISA结果为阳性,琼脂扩散试验结果为阴性;丹麦哥本哈根兽医研究所（地区参考实验室）的间接ELISA结果为阳性,琼脂扩散试验结果为阴性;芬兰国家食品安全局（国家实验室）的间接ELISA结果为阳性。     

2019—2021年北京市兽医系统实验室检测能力比对

为了解兽医系统实验室检测能力,2019—2021年北京市动物疫病预防控制中心对12个区级动物疫病预防控制中心开展了检测能力比对。结果显示,各年度实验室符合率分别为75.00%、83.33%、100%,各年度样品符合率分别为98.02%、99.21%、100%。比对结果表明,北京市大部分兽医实验室的检测能力较强,个别实验室还需提高ELISA、F-PCR的试验能力。建议北京市各级畜牧兽医主管部门持续重视兽医系统检测能力比对工作,加强实验室管理体系建设,提高检测人员业务能力,保证检测结果的准确度,提高动物疫病监测预警水平。     

ELISA检测孔雀石绿的体会

作者简述了孔雀石绿的ELISA检测方法、经验及关键环节的注意事项,为实验室检测人员提供参考。     

浅析实验室常规ELISA检测

ELISA即酶联免疫吸附试验,ELISA是一种敏感性高、重复性好的固相酶联免疫测定广泛用于各种抗原抗体的检测,本文介绍了实验室常规ELISA试验的基本原理、操作要领及注意事项,供基层畜牧兽医站工作人员参考.     

兽医器械检测实验室人员比对实例分析

为评价兽医器械检测实验室人员的检测水平,通过标准硬度块硬度测量进行了实验室人员比对试验,应用格鲁布斯检验、F检验、t检验对试验数据进行处理与分析。结果显示,兽医器械检测实验室A、B人员在硬度测量方面的精密度及准确度均较好,符合实验室人员能力要求。     

IHA法和间接ELISA法检测猪附红细胞体抗体结果对比分析

为了寻求适用于基层实验室对猪附红细胞体抗体的检测方法,文章试验用间接血凝试验(IHA)和间接ELISA两种方法分别检测了402份临床送检猪血清,并对这两种方法的敏感性和符合率进行比较研究。结果表明,IHA和ELISA法结果符合率为80.1%,且ELISA方法比IHA敏感性更高,更适合批量检测和群体普查。     

采用不同的血清学检测法对羊布病检测的对比

本文采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验和竞争ELISA试验对羊布病进行了对比检测,筛选出适合县级实验室对布病检测的最佳方法,为布病防控提供科学依据。     

禽类疾病常规血清学检测结果判断的十项基本原则

基层动物疫病预防控制中心、个体诊疗机构和规模化的养禽场对禽类疾病的血清学检测通常采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、凝集反应(如HA、HI试验)、沉淀试验(如AGP、IEP)和补体结合反应。目前,在临床快速诊断技术中最常用的实验方法是ELISA试验和凝集反应。本文通过笔者多年的实验室和临床经验总结,提供禽类疾病血清学检测结果判断的10项基本原则以供基层兽医工作者参考。     

兽药检测实验室人员比对试验实例应用分析

实验室人员比对试验是评价检测人员检测水平及检测结果质量控制的重要措施之一。本文通过具体实例来探讨如何通过实验室比对试验提高检测人员的操作技能,保证检测结果的准确性和可靠性。     

猪瘟、伪狂犬、蓝耳病抗体效价快速检测试纸的临床应用

目前，国内对猪瘟抗体水平检测方法有：ELISA检测法、DOT-ELISA检测法和液体猪瘟正向间接血凝法；伪狂犬病的抗体水平检测主要有：琼脂免疫扩散试验、病毒血凝(HA)与血凝抑制(HI)试验等。这些方法虽然都具有微量、特异的优点，但需要条件较好、设备齐全的实验室和经过专门训练的兽医微生物专业技术水平较高的人员操作，一次检测至少需要4个小时。虽然近年来也有一些快速检测技术问世如：     

ELISA在动物病毒病检测中的应用现状

前言酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked Immunosorbent assay,ELISA)是一种敏感、快速、简便、不需要特殊仪器及实验室易于掌握的新技术;试验仅需小量标本,成本低,便于发展至自动化操作。ELISA在兽医病毒病方面主要     

应用LSDV-ELISA抗体检测试剂盒检测羊痘疫苗免疫牛血清抗体水平

目前国内尚无商品化的牛结节性皮肤病疫苗，对于该病的防控，我国采用羊痘疫苗进行紧急免疫。为了验证牛结节性皮肤病病毒ELISA抗体检测试剂盒对羊痘疫苗免疫血清抗体水平检测的适用性，本研究采用实验室试制的牛结节性皮肤病病毒ELISA抗体检测试剂盒和病毒中和试验对羊痘病毒活疫苗免疫血清、在研牛结节性皮肤病灭活疫苗（山羊痘AV41株）免疫血清进行抗体水平评价。结果显示，对于羊痘活疫苗免疫血清，ELISA方法和病毒中和试验方法对免疫15d抗体阳性率分别为84.4%和75.6%，免疫30d抗体阳性率分别为100%和95.6%，免疫60d抗体阳性率分别为97.8%和91.1%；与病毒中和试验符合率为86.1%。对于牛结节性皮肤病灭活疫苗（山羊痘AV41株）免疫血清，ELISA方法和病毒中和试验方法对一免28d抗体阳性率分别为64%和56%，二免28d抗体阳性率分别为94%和88%，二免42d阳性率均为100%；与病毒中和试验符合率为86.5%。试验证明，实验室试制的牛结节性皮肤病病毒ELISA抗体检测试剂盒与病毒中和试验符合率较高，检测结果较为一致，且本试剂盒敏感性高于病毒中和试验。因此本试剂盒可用于...     

山羊痘病毒检测方法研究进展

就山羊痘病毒分离鉴定、电镜观察、ELISA试验、琼脂扩散试验、免疫荧光抗体试验、PCR试验等检测方法进行了综述,以期为山羊痘病毒的实验室诊断提供参考。     

浅谈基层畜牧兽医站实验室常规ELISA检测操作注意事项

介绍了实验室常规ELISA试验的基本原理、操作要领及注意事项,供基层畜牧兽医站工作人员参考.