雌二醇及其受体在北方山溪鲵精巢中的周期性分布

用免疫组织化学方法检测雌二醇(estradiol)及其受体(estrogen receptor)在北方山溪鲵(Batrachuperus tibetanus)精巢发育周期中的表达变化。结果表明,在4~5月,雌二醇及受体在精原细胞的胞质中强表达;6月,雌二醇在精母细胞的胞质中表达较弱,其受体在精母细胞的核质中有较强表达;7月,雌二醇及受体在精子细胞的胞质中表达;8月,雌二醇及受体在精原细胞的胞质中和变态后的精子头部有弱表达;9-11月,两者均在精原细胞的胞质中及精子头部有较强表达。说明雌二醇及其受体存在于整个精巢周期中,二者在生精细胞中的强弱变化基本一致,其变化规律与精子发育周期密切相关;雌激素受体多存在于生精细胞的胞质中,雌激素可能以非基因组效应调控细胞的增殖,并与精子的发育成熟密切相关。     

睾酮在北方山溪鲵精巢发育周期中的分布

用免疫组织化学方法检测了睾酮(testosterone,T)在北方山溪鲵(Batrachuperustibetanus)精巢发育周期中的变化。结果表明,在北方山溪鲵的精巢中,4月份T定位在次级精原细胞的胞质中;5月份T定位在次级精原细胞的胞核中;6~7月,精母细胞和精子细胞核中呈T阳性反应;8月份,精巢的非成熟区和成熟区散在地出现T的弱阳性位点;9~10月,精巢非成熟区的精原细胞胞质及成熟区精子中有较强的T阳性反应;11月,精原细胞的胞质及精子中的阳性反应减弱。在山溪鲵的生殖周期中,4~11月精巢中始终呈现T阳性反应,而且T的分布呈现出一定的规律性。在4~5月和9~10月,精巢间质细胞和支持细胞中也有T阳性反应。上述结果说明,在山溪鲵精巢中,T对生殖细胞增殖及精子形成起调控作用。     

北方山溪鲵精巢间质细胞的超微结构研究

通过电镜观察研究了北方山溪鲵精巢内间质细胞的超微结构。结果显示,在精子排空后,间质细胞具有发达的滑面内质网、管状嵴线粒体和大量的脂滴。说明北方山溪鲵在繁殖期排精后,生精小叶周围的间质细胞具有类固醇激素分泌能力。     

北方山溪鲵精巢中性类固醇激素的免疫细胞化学研究

探讨3种性类固醇激素在北方山溪鲵精子发育过程中的调控作用.用免疫细胞化学方法对3种激素在山溪鲵精子发生周期不同时期在精巢中的细胞定位进行检测.结果表明雄激素分布在精原细胞的胞质中,尔后转移到精母细胞及精子细胞的核中;雌激素一直存在于生精细胞的胞质及核膜周围;孕激素分布在精原细胞及精母细胞的胞质中,随后在精子细胞的核质中有表达.雄激素在早期的精子发生和转型中起作用,而雌激素主要以非基因组效应参与生精细胞的增殖,孕激素在精子发育后期精子细胞的变态中起作用.3种激素以不同的方式调控精子的发生.     

北方山溪鲵嗅觉感受器的组织结构

用光镜观察了北方山溪鲵(Batrachuperus tibetanus)幼体和成体鼻腔的组织结构。结果显示,北方山溪鲵幼体和成体的嗅上皮中均存在Bowman′s腺,鼻腔外侧存在犁鼻器。山溪鲵属于有尾目中最原始的类群,为终生水栖型。说明在四足动物从水生到陆生的演化过程中,嗅黏膜中Bowman′s腺的出现与陆生环境没有直接关系。山溪鲵具有犁鼻器,说明在水生型的原始有尾两栖动物已经具有犁鼻器,犁鼻器在种系发生上是从水生的四足动物出现的。     

c-myc和c-fos在隆肛蛙与北方山溪鲵卵巢中的表达

用免疫细胞化学方法,对隆肛蛙与北方山溪鲵不同发育时期卵泡c- myc和c- fos的表达产物进行了定位检测。结果表明,Myc在2种动物 - 期卵母细胞和滤泡细胞中表达较强,以后逐渐减弱;Fos在2种动物卵泡发育初期表达很弱,在 - 期卵泡中表达增强。上述结果说明,c- myc在2种动物卵母细胞发育初期起重要作用,而c- fos在发育中后期起重要的调控作用,2种原癌基因可能通过调节类固醇激素的合成与分泌来调控卵母细胞的发育。     

隆肛蛙卵巢类固醇激素受体的免疫细胞化学研究

用免疫细胞化学方法,对隆肛蛙不同发育时期卵泡雌激素受体、孕激素受体和雄激素受体进行了定位检测。结果表明,雌激素受体和孕激素受体主要在卵黄合成和卵黄合成后期的滤泡细胞中表达;3种激素受体在各期卵母细胞胞质中均有表达,雌激素受体和孕激素受体在卵黄合成和卵黄合成后期表达强烈;3种类固醇激素受体在卵母细胞核膜中都有表达。这些结果说明,在隆肛蛙卵母细胞生长发育和成熟中,雌激素受体和孕激素受体主要调控卵黄合成及合成后期雌二醇和孕酮的合成与分泌,其受体可能通过基因组和非基因组两种机制发挥作用。     

泰山螭霖鱼卵巢年周期中卵母细胞发育及其性腺类固醇激素作用

【目的】研究泰山螭霖鱼(Varicorhinus macrolepis)卵巢和卵母细胞在年周期中的发育变化规律，以及性激素在卵母细胞发育中的调控作用；【方法】利用解剖学、组织学、组织化学以及放射免疫的方法对泰山螭霖鱼卵巢和卵母细胞的解剖学、组织学、组织化学以及性激素水平在年周期中的变化规律进行了研究。【结果】2～4月份，卵巢由Ⅳ期发育至第v期，4月份进入繁殖期；4～6月份，为第v期；6月下旬～7月份为第vi期，是排卵后退化阶段；8月份，为Ⅱ期卵巢（休整期）；9月份～翌年的1月份为第Ⅲ期，以Ⅲ期卵巢过冬。泰山螭霖鱼血清17β-雌二醇(E2)自1月份开始升高，排卵前即3月份达到高峰（53.6 pg·ml-1左右），4月份排卵时降为20.22 pg·ml-1，一直持续到9月份，降至最低点，1.6667 pg·ml-1左右，之后维持在低水平，到1月份又开始上升。血清17α，20β－双羟孕酮（17α，20β-DHP）在4月份（接近排卵时）达到高峰，56.333 pg·ml-1，然后维持高水平（56.333～50.667 pg·ml-1）至排卵结束（6月份），11月份～翌年3月份均维持低水平（35～15 pg·ml-1）；【结论】泰山螭霖鱼为短期分批产卵类型，一年一个产卵期，E2和17α，20β-DHP对卵母细胞发育有重要的调控作用。     

内源激素及其受体在板栗雌花分化过程中的变化

[目的]板栗雌花分化期是花芽性别分化调控的关键时期,通过对板栗花芽性别分化的调控增加雌花数,降低雄花数是解决板栗低产问题的重要途径.通过比较完全混合芽和雄花芽发育过程中重要激素含量变化及受体表达,研究重要内源激素在雌花发育时期的作用.[方法]采用石蜡切片法观察花芽分化形态,采用酶联免疫法和GPC-HPLC-MS/MS法测定花芽中的内源激素含量,采用荧光定量PCR测定不同时期板栗内源激素受体基因TIR1、CRE1、GID1的表达量.[结果]研究结果表明:板栗完全混合芽可划分为:休眠后花序原基分化期、休眠后花序原基分化中期、花序原基分化后期、花簇苞片原基形成期、花簇原基分化期和花簇原基形成期6个发育时期.板栗雌花发育过程中花芽中内源IAA的启动时间早于ABA,且在以后的发育时期IAA都高于ABA,混合芽与雄花芽的IAA/ABA的变化趋势基本相似,但混合芽中IAA/ABA的峰值出现较早,所处的时期与IAA在混合芽中的启动时间一致.在雌花分化末期,IAA含量明显高于GA3和ZR,且在混合芽与雄花芽中IAA含量差异较大.板栗内源激素受体基因TIR1、CRE1、GID1在板栗雌雄花分化的前3个时期表达量变化较大,分化前期的表达量明显高于后期,且CRE1、GID1在混合芽内的表达水平高于雄花芽.[结论]说明内源激素作用板栗雌雄花分化的关键时期可能在前三个分化时期,且IAA可能在雌花发育过程中起重要作用.     

α6/α3β4乙酰胆碱受体在非洲爪蟾卵母细胞中的表达

α6/α3β4烟碱型乙酰胆碱受体（α6β4* nAChRs,*代表其他亚基）主要分布于大脑海马区、外周神经节和人源肾上腺嗜铬细胞等,与神经性疼痛和炎症反应、情绪等生理疾病密切相关。本研究拟对大鼠α6/α3β4 nAChR在非洲爪蟾（Xenopus laevis）卵母细胞膜上进行重组表达,并利用双电极电压钳电生理学技术检测该重组受体的功能。在不同浓度的激动剂乙酰胆碱的刺激下,比较了α6/α3和β4亚基的不同配比形成的受体通道开放而产生的电流大小,并用其拮抗剂α?芋螺毒素TxID验证了该受体的敏感性。结果表明,亚基不同配比的α6/α3β4 nAChR均可在非洲爪蟾卵母细胞膜上成功表达,并具有较好的配体门控敏感性。     

鱼体内性类固醇激素水平与催产药物相关性研究

研究怀卵大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)用药后亲鱼血清、卵液性激素含量变化,探讨了药物组合和变化间的相关性。结果表明,GnRH-A及其配伍注射后,泥鳅血清中雌雄激素、卵液中孕激素含量在排卵前增加,呈明显的组合—效应关系;表明催产药物可引起血清、卵液性激素含量变化,并且这一变化有一定的规律性,可能会成为繁殖药物筛选的重要指标。     

人工泪液联合性激素对围绝经期白内障患者超声乳化术后泪膜功能恢复的影响

目的 观察人工泪液联合性激素对围绝经期白内障患者超声乳化术后泪膜功能恢复的影响.方法 64例接受白内障超声乳化联合人工晶状体植入术的围绝经期白内障患者随机分为对照组和实验组2组.对照组术后采用妥布霉素地塞米松点眼,实验组在此基础上联用人工泪液和性激素,观察两组患者术前及术后3、7、30、90d的干眼症状评分、基础泪液分...     

青海藏雪鸡和高山雪鸡血清淀粉酶同工酶酶谱研究

[目的]研究青海藏雪鸡和高山雪鸡血清淀粉酶同工酶酶谱。[方法]采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法对10只藏雪鸡和10只高山雪鸡及20只家鸡的血清淀粉酶同工酶酶谱进行了研究。[结果]藏雪鸡和家鸡血清淀粉酶均有AMY1、AMY2、AMY33种同工酶,且藏雪鸡的AMY1同工酶为单态,家鸡存在AMY1AB和AMY1BB表型呈现多态性,而高山雪鸡的AMY1同工酶不显现酶活性;3种鸡的AMY2同工酶均存在多态性;AMY3同工酶均表现为单态。藏雪鸡和家鸡血清淀粉酶AMY1同工酶的A和B区带相对迁移率分别为25.42%和18.33%;AMY2同工酶的A、B和C区带的相对迁移率分别为16.44%、13.70%和10.96%。[结论]该研究结果补充和丰富了藏雪鸡和高山雪鸡血液基因储备,并为其资源保护和利用及繁殖育种等提供了理论依据。     

高山雪鸡和藏雪鸡血清酯酶多态性的研究

[目的]为高山雪鸡和藏雪鸡的选育、保护和利用提供科学依据。[方法]应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对10只高山雪鸡和10只藏雪鸡血清酯酶同工酶多态性进行研究,与20只家鸡进行了比较。[结果]高山雪鸡、藏雪鸡和家鸡血清酯酶均存在ES1、ES2和ES3 3种同工酶,且ES3均为单态。高山雪鸡ES1同工酶以ES1 ABC为优势表型(70.00%),藏雪鸡和家鸡ES1同工酶均以ES1B为优势表型(80%和75%)。高山雪鸡ES2同工酶只有1条浓染的酶活性区带。藏雪鸡ES2同工酶则表现为有带(+)和无带(-)2种区带,而家鸡ES2同工酶无显现酶活性区带。[结论]高山雪鸡和藏雪鸡ES同工酶多态性存在较大差异,也表明ES同工酶的区带数、着染强度、迁移率、基因表型等可作为区分禽类亲缘关系的生化遗传标记。     

成熟培养基对猪卵母细胞的影响

评估NCSU23和TCM199两种培养基对猪卵母细胞体外成熟、孤雌激活以及核移植重构胚发育的影响.分别以NCSU23和TCM199为基础培养基,向其中添加相同浓度的半胱氨酸、激素和生长因子,作为猪卵母细胞体外成熟培养液,培养44h(5％CO2、39℃、饱和湿度),挑选第一极体;成熟后的卵母细胞进行孤雌激活和核移植重构胚操作,144h后观察囊胚数.结果表明,NCSU23组与TCM199组对卵母细胞体外成熟(68.18％和67.55％)、孤雌囊胚率(38.40％和37.60％)与核移植囊胚率(23.79％和21.38％)无显著影响(P＞0.05),但是两者对孤雌囊胚细胞数的影响差异显著(分别为38.4和37.6个细胞)(P＜0.05).NCSU23成熟培养基能够使胞质成熟完全,提高囊胚细胞数,有利于妊娠的发生.可见,以NCSU23为基础培养基的体外成熟液有利于猪卵母细胞体外发育.     

红笛鲷血清性类固醇激素周年变化的初步研究

应用放射免疫分析法测定红笛鲷雌、雄鱼血清性类固醇激素雌二醇、睾酮和孕酮的周年变化水平。结果表明,雌、雄鱼血清雌二醇、孕酮的变化趋势相似,3～10月雌二醇水平较低,11月以后不断升高,至次年2月雌鱼达到1257．46±447．20pg／mL,雄鱼达到1179．14±322．50pg／mL;4、5月孕酮水平较高,雌鱼在5月达到高峰118．49＋18．45ng／mL,雄鱼4月达到高峰109．98±60．97ng／mL,之后一直在比较低水平波动;雄鱼睾酮水平有一定规律性,3～9月一直处于比较高水平,8月达到高峰0．27±0．24ng／mL,而雌鱼睾酮水平周年变化没有规律性,最高水平在6月,达到0．28±0．13ng／mL。