大肠埃希氏菌的分离鉴定与药敏试验

大肠埃希氏菌通常被称作大肠杆菌,外文名称(学名)Escherichia coli。它属于细菌界,变形菌门,V-变形菌纲,肠杆菌目,肠杆菌科,埃希氏菌属,大肠杆菌种。大肠杆菌主要寄生于人和动物的大肠内,约占肠道菌的1%。是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。该菌常引起动物严重腹泻和败血症。     

白鹭大肠埃希菌的分离鉴定与药敏试验

对3份白鹭新鲜粪便进行细菌分离纯化、染色镜检和生化鉴定,并用Kirby-Bauer法对分离细菌用30种抗菌药进行了耐药性试验。结果表明,分离到3株革兰阴性小杆菌为大肠埃希菌,分别编号为E1、E2和E3。3株白鹭大肠埃希菌都对青霉素G、阿莫西林、万古霉素和洁霉素耐药,对常用广谱抗菌药物有2重以上耐药性,但对试验用的氨基苷类抗生素、喹诺酮类药物和复方新诺明高度敏感。     

雏鸡大肠埃希菌的分离鉴定及药敏试验

对长春市某鸡场送检的10只2日龄疑似患大肠埃希菌病死亡的雏鸡进行了实验室诊断。无菌采集病死鸡的心、肝、脾、肺、肾等组织,通过细菌检测、PCR鉴定、生化试验、血清型鉴定、动物回归试验等系统鉴定,确定其为大肠埃希菌。分离菌药敏试验结果表明,该菌株对复方新诺明、庆大霉素、链霉素等药物敏感,对丙氟哌酸、恩诺沙星、氨苄青霉素、左氟沙星等大多数抗菌药物高度耐药。     

猪源肠外致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定与药敏试验

为对陕西某猪场仔猪肺炎病例进行确诊,无菌采集患病仔猪肺脏,并进行细菌分离培养、生化试验、16S rRNA基因测序、小鼠致病性试验、药敏试验以及耐药基因检测。结果表明,分离到的菌株其培养特性和生化试验与大肠埃希氏菌一致,16S rRNA基因测序与大肠埃希氏菌的同源性为98%;小鼠致病性试验验证了该菌株的致病性;药敏试验显示该菌对氨苄西林、复方阿莫西林、庆大霉素、四环素、头孢噻呋钠、头孢他啶、恩诺沙星、氟苯尼考和磺胺异恶唑等9种抗菌药物表现耐药,对替加环素、美罗培南和多黏菌素B敏感;耐药基因检测结果发现该菌携带sul3、tetA和TEM等耐药基因。研究结果确定了引起某猪场仔猪肺炎的病原菌,并对其生物学特性、耐药情况进行了研究,为临床诊断治疗提供参考。     

腹泻犊牛大肠埃希菌的分离鉴定与药敏试验

试验选择2020年3月25日某养殖场内发病犊牛尸体组织为病原来源,开展流行病学调查、病料采集镜检、大肠埃希菌分离以及培养、细菌纯化、生化鉴定、药敏试验、动物试验以及溶血试验。试验结果显示:该养殖场内犊牛死亡原因为大肠杆菌感染所致,大肠杆菌菌株对于各类药物敏感性存在较大差异。其对庆大霉素以及硫酸链霉素敏感性强,对四环素以及新霉素耐药。大肠杆菌为导致犊牛腹泻的常见致病菌,其表现出了对部分抗生素耐药的现象。有必要定期轮换用药,最好是先实施药敏试验择取敏感药物开展有效治疗,同时做好疾病预防工作。     

腹泻犊牛大肠埃希菌的分离鉴定及药敏试验

对陕西省某奶牛场一起犊牛腹泻病例进行诊断和治疗。无菌采集腹泻犊牛肝脏和脾脏组织进行微生物学检测、小鼠致病性试验和药敏试验。结果显示,被检测病料中,牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛腺病毒7型(BAdV-7)、牛冠状病毒(BCoV)、牛轮状病毒(BRV)检测结果均为阴性;分别从脾脏和肝脏组织分离培养到2株细菌,其培养特性和生化试验结果与大肠埃希菌高度相似,16S rRNA基因测序结果与大肠埃希菌的同源性为100%;动物致病性试验显示,分离菌能致试验小鼠死亡;药敏试验结果显示,该菌对左氧氟沙星、庆大霉素高度敏感,对头孢呋辛、恩诺沙星不敏感;临床选择敏感药物左氧氟沙星进行治疗,犊牛腹泻很快得到控制。     

鸡源大肠埃希氏菌血清型鉴定及药敏试验

为了有效防控鸡源性大肠埃希氏菌病、指导科学用药,本站从2005年11月至2007年5月对商丘市129个发病鸡场送检的病料进行了大肠杆菌分离鉴定、药敏试验和血清型鉴定。结果发现本地区出现了大量耐药的菌株,通过药敏试验筛选出的敏感药物及其有效率如下:壮观霉素75%、阿米卡星73%、氨苄西林(舒巴坦钠)65%、头孢噻肟钠50%、磷霉素45%、庆大霉素41%、新霉素41%。血清型鉴定结果发现O78、O15两个血清型为本地区的优势血清型,另本地区还存在O1、O2、O5、O18、O35、O50、O86、O88、O111等多种血清型。本调查研究的结果,对指导本地区乃至其他地区鸡源大肠杆菌病的防治有重要的参考价值。     

动物源大肠埃希菌分离与鉴定技术研究

建立动物源大肠埃希菌分离与鉴定方法,对监测大肠埃希菌的耐药情况具有重要意义。样品拭子通过麦康凯显色培养基分离纯化,采用生化或质谱的方法鉴定。用65株已知菌进行方法验证。结果显示：确认大肠埃希菌56株,准确率100%。该方法能准确检测动物源大肠埃希菌。     

猪场源大肠埃希氏菌分离鉴定及耐药性分析

旨在分析新疆某规模化猪场大肠埃希氏菌耐药情况,为其临床治疗提供依据。采集某规模化猪场动物源和环境源样本240份,分离、纯化并鉴定大肠埃希氏菌,采用K-B法对临床常用18种抗菌药物进行药敏试验,同时对相关药物耐药基因进行检测。经分离、纯化、生化鉴定得到大肠埃希氏菌182株。分离菌株药敏试验结果显示,敏感率在头孢噻呋钠为100%、庆大霉素为71.2%、卡那霉素为69.1%、氟苯尼考为68.2%、氨苄西林为64.3%,耐药率在青霉素和四环素为100%、林可霉素为71.3%、阿莫西林为67.6%、复方新诺明为67%、链霉素为58.2%、磺胺甲恶唑为57.3%。分离菌株耐药基因检出率显示,tetB为96.2%、floR为95.5%、tetA为84.1%、aadA为80.8%、aac(6′)-Ib为72.0%、strA为70.9%、qnrS为68.1%、ermC为59.0%、sul3为57.1%、qnrB为53.3%、qnrA为51.6%。结果表明,该猪场大肠埃希氏菌耐药情况严重,并携带多种耐药基因。     

宁夏部分地区腹泻羔羊源大肠埃希菌的分离鉴定与药敏试验

为掌握宁夏地区羔羊腹泻源大肠埃希菌的耐药性,采集腹泻羔羊肛拭子90份,开展大肠埃希菌的分离鉴定及药敏试验。结果分离到78株大肠埃希菌,对头孢类、氨基糖苷类、喹诺酮类、氟苯尼考、青霉素类、四环素等抗菌药物有较高的敏感性,对万古霉素、复方新诺明、克林霉素耐药(耐药率78.21%~94.87%)。结果表明,宁夏地区羔羊腹泻源大肠埃希菌对抗菌药物保持较高的敏感率,耐药现象并不严重。     

猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

从湖北省襄樊地区7家猪场采集病料进行大肠杆菌分离培养,获得36株菌株。通过菌落和细菌形态学观察、生化试验和动物试验确定分离细菌为致病性大肠杆菌。应用纸片扩散法对分离的大肠杆菌进行药物敏感试验,结果表明,对丁胺卡那霉素敏感的菌株有81％,氟苯尼考42％,庆大霉素39％,痢菌净33％,新霉素31％。对阿莫西林耐药的菌株为86％,氯霉素72％,土霉素56％,卡那霉素47％、庆大霉素47％。通过本次试验可知丁胺卡那霉素可作为襄樊地区防治致病性大肠杆菌的首选药物,氟苯尼考作为备选药物。     

辽宁地区猪源大肠埃希菌整合子携带情况调查与分析

查明辽宁地区整合子在猪源大肠埃希菌中的分布及整合子携带耐药基因盒的种类,可为该病的综合防控提供科学依据。本研究利用整合酶基因PCR扩增法检测整合子,并对整合子可变区进行扩增测序。结果表明,71.43%(40/56)的菌株为Ⅰ类整合子阳性,1.79%(1/56)的菌株同时为Ⅰ类和Ⅱ类整合子阳性,未检测到Ⅲ类整合子;87.8%(36/41)的菌株表现为Ⅰ类整合子可变区扩增阳性,扩增产物大小在116bp~2 307bp之间,100%(1/1)菌株表现为Ⅱ类整合子可变区扩增阳性,大小为2 106bp;整合子可变区含有编码对氨基糖苷类抗生素耐药的基因(aadA1、aadA2、aadA5、aadA22、aadB、aacA4和sat2),编码对磺胺类抗生素耐药的基因(dfrA1、dfrA12、dfrA17),编码对氯霉素抗生素耐药的基因(cmlA1、cmlA6)。因此,整合子在大肠埃希菌中广泛存在,辽宁地区大肠埃希菌中整合子主要携带编码对氨基糖苷类、磺胺类和氯霉素耐药基因盒。     

腹泻仔猪肠道致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌的分离鉴定与耐药性研究

为探明仔猪细菌性腹泻肠道致病性大肠埃希氏菌和沙门氏菌流行的血清型、耐药表型及耐药基因型,本试验采集了贵州省5个地（州）市7个规模化养猪场的128份腹泻仔猪肠道样本,并对采集的样本进行了大肠埃希氏菌和沙门氏菌分离与鉴定,通过动物试验鉴定菌株的致病性,利用血清学方法鉴定其血清型,并通过药敏纸片法对主要致病菌进行耐药性研究,采用PCR技术检测各致病菌株耐药相关基因,分析细菌耐药表型和耐药基因型相关性。结果显示,本研究共分离鉴定到78株致病性大肠埃希氏菌与21株沙门氏菌,致病性大肠埃希氏菌血清型以O138、O87为主,沙门氏菌血清型以鼠伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌居多;药敏试验结果表明,本试验分离到的78株致病性大肠埃希氏菌对β-内酰胺类药物耐药率达80%以上,对其他种类的抗菌药耐药率均超过40%,分离鉴定的21株沙门氏菌对氨基糖苷类药物耐药率达50%以上,对其他种类的抗菌药耐药率均达20%以上;本试验分离鉴定的致病性大肠埃希氏菌共检出12种耐药相关基因,沙门氏菌共检出10种耐药相关基因,两种细菌耐药基因型与耐药表型符合率均达60%以上,且均为多重耐药。本研究为仔猪腹泻的综合防控提供了理论依据。     

Isolation,Identification and Drug Resistance Analysis of Interstinal Pathogenic Escherichia coli and Salmonella Isolated from Diarrhea Piglets

In order to find out the serotype, resistant phenotype and genotype of Escherichia coli (E. coli) and Salmonella in piglets, this study collected 128 samples of diarrhea piglets from seven large-scale pig farms in five cities in Guizhou province, and the E. coli and Salmonella were isolated and identified. The pathogenicity of the strain was identified by animal test. The drug resistance of the main pathogen was tested by drug susceptibility paper. The resistance gene of each pathogen was detected by PCR. The drug resistance and genotype correlation of the bacterial were analyzed. The results showed that 78 strains of pathogenic E. coli and 21 strains of Salmonella were isolated and identified in this study. The serotypes of pathogenic E. coli were predominantly O138 and O87. Salmonella Typhimurium and Salmonella Enteritidis were predominant serotypes. The susceptibility test showed that the resistant strains of 78 strains of E. coli were more than 80% resistant to β-lactams and more than 40% for other antibacterials. The resistance rate of 21 strains of Salmonella to aminoglycosides was more than 50% and more than 20% to other types of antibacterials; 12 and 10 kinds of drug resistance-related genes of E. coli and Salmonella were detected, respectively; The coincidence rate of resistant genotype and phenotype of two kinds of bacteria were above 60%, and both were multiple drug resistance. This study provided a theoretical basis for comprehensive prevention and control of piglets diarrhea.     

豪猪源肠侵袭型大肠杆菌的分离鉴定及致病性研究

【目的】 查明引起福建省龙岩市某豪猪养殖场致豪猪腹泻死亡的病原菌及其特征,为该病的科学防控及合理用药提供参考依据。【方法】 分离腹泻死亡豪猪的病原,并结合形态特征、生理生化试验、16S rRNA基因扩增、种系发育分群鉴定分离菌株;通过毒力基因检测、动物致病性试验及药敏试验对分离菌株的致病性和耐药性进行研究。【结果】 从发病死亡豪猪肝脏组织中分离到1株大肠杆菌,命名为Fj/Porcupine2018,该分离菌株与22株不同来源的参考菌株16S rRNA序列之间的相似度为97.4%~99.8%,其中与禽源分离株（登录号：MN022583）和人源分离株（登录号：MW881377）的序列相似度高达99.8%;种系发育分群证实该分离菌株属于B1群。毒力基因检测结果显示,该分离菌株除检出肠侵袭型大肠杆菌毒力基因EinV外,还检出papC、iroC、Afa、luxs、stx2f及ompA 6种毒力相关基因。动物致病性试验显示,该分离菌株对小鼠具有较强的致病性,小鼠在攻毒后31 h内全部死亡,且肝脏、脾脏、肺脏及肠道等器官组织均有明显的病理损伤;在对常见抗菌药物的药敏试验中,该分离菌株对大环内酯类、四环素类、喹诺酮类、磺胺类、头孢类、氨基糖苷类、青霉素类7类11种药物表现出不同程度的耐药,耐药率为25%~100%,仅对头孢曲松和头孢西叮2种药物表现敏感。【结论】 本研究分离获得了1株腹泻死亡豪猪的病原菌大肠杆菌,通过一系列生物学特性研究证实该分离菌为1株具有较强致病力且呈现多重耐药性的B1群肠侵袭型大肠杆菌,为豪猪等野生动物大肠杆菌病的防控提供了重要的参考依据。     

仓鼠致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

为探讨长春地区某仓鼠饲养场中仓鼠急性死亡的原因及应对该突发性疾病,对死亡仓鼠进行实验室检查并分离得到1株细菌,通过对该分离株进行形态学观察、培养特性观察、生化试验、小鼠致病性试验、PCR鉴定和23SrRNA基因同源性分析,判定该分离菌为1株高致病性大肠杆菌。该菌可致仓鼠突发急性致死性大肠杆菌病,死亡率达到100%,死亡小鼠出现胃肠道极度膨胀的典型症状。药敏试验结果表明,该大肠杆菌对多种抗生素敏感,但对四环素类抗生素及复方新诺明(SXT)有很强的耐药性,可用庆大霉素进行治疗。研究结果为探讨急性大肠杆菌病的发病机制及其防治提供了理论基础。     

一例鸡源致病型大肠杆菌的分离鉴定

为进行一例鸡源致病型大肠杆菌的分离鉴定,无菌采集疑似大肠杆菌患病蛋鸡肝脏、脾脏等组织,进行病原菌的分离培养。利用培养特性检查、菌落形态观察、革兰氏染色鉴定、生化特性考察、PCR鉴定、测序分析以及动物致病性试验对分离菌株进行鉴定,并同时进行药敏试验。结果显示,分离菌株为一株致病型大肠杆菌,对青霉素、氟苯尼考、阿莫西林等多种抗生素产生耐药性,对丁胺卡那敏感。建议使用丁胺卡那霉素对大肠杆菌进行防治。     

Isolation,O Serogrouping and Drug Sensitivity Test of Avian Pathogenic Escherichia coli

One hundred and ninety four avian pathogenic Escherichia.coli (APEC) isolated from different pathotypes of chickens in Hebei province,Shandong province,Henan province,Jiangsu province,Shanxi province and Liaoning province in China between May 2005 and March 2016 were investigated by determination of biochemical characters,O serogroup identification and drug sensitivity test.Out of 194 isolates, 124 strains(63.9%) could be grouped to serogroups O1(3),O2(26),O57(15),O65(47) and O78(33).The drug sensitivity test used eight antibiotics (ampicillin, neomycin, doxycycline, sulfamonomethoxine,tilmicosin,ciprofloxacin ceftiofur and florfenicol) by one strain of O1,O2,O57,O65,O78 serogroup,respectively.The results showed that all strains were sensitive to ciprofloxacin and neomycin, and resistance to other drugs at varying degrees.This study demonstrated that the high prevalence of O65,O78,O2 and O57 isolates existed and provided the basis for the development of multivalent bacterin in future.