哈瓦那辣椒悬浮培养的体细胞胚发生

本文对不同培养基、不同外植体类型(节点、节间、下胚轴、半粒种子、果段)诱导哈瓦那辣椒产生体细胞胚胎的情况进行了评估。在添加9.05μM 2,4-D、3%蔗糖和0.8%植物凝胶的MS基本培养基中,25±2℃,连续30 d光照(40~50μmol·m2/s)条件下,诱导胚性愈伤组织。形成的愈伤组织将被转移到组成相同的液体培养基中。仅当以下胚轴外植体,用含3.4μM噻苯隆的MS培养基对其进行诱导时,才能产生体细胞胚。本研究建立了辣椒"细胞悬浮培养的体细胞胚发生"的一种实验方案。     

利用未成熟种子建立野生阿宽蕉胚性细胞悬浮系和植株再生的研究

以纵切的野生阿宽蕉60d龄未成熟种子为外植体,在MI1愈伤组织诱导培养基(MS大量和微量元素及铁盐+MorelandWetmore维生素+0.1mmol/LKH2PO4+87mmol/L蔗糖+4.5μmol/L2,4-D+1g/LGelrite)中培养60d后开始出现浅黄色松散的胚性愈伤组织,150d后愈伤组织诱导率为(15.11±1.95)%。该类愈伤组织被转移到含18μmol/L2,4-D的MI2培养基中继代60d后,可获得状态均一的理想的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织悬浮培养后,通过2个月的筛选和继代培养,可得到均质的胚性细胞悬浮系。理想的胚性愈伤组织在体细胞胚诱导培养基中培养10d后可见到白色半透明体细胞胚的发生,体细胞胚诱导率为7.70×105个/gFW。成熟体细胞胚的萌发率为(33.33±3.37)%,植株再生率为(20.83±1.68)%。     

山杏愈伤组织诱导及植株再生

以山杏成熟胚和胚乳为外植体,以MS为基本培养基进行组织培养,研究了基于山杏经愈伤组织途径建立的再生植株技术。结果表明:以胚乳为外植体诱导愈伤组织的适宜培养基为MS+6-苄基腺嘌呤(6-BA)1.0mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;愈伤组织的继代及分化培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+萘乙酸(NAA)0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;以成熟胚诱导愈伤组织和丛生芽增殖分化培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L;生根培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂3g/L。     

结缕草愈伤组织诱导及植株再生

 以日本结缕草种子为外植体，2份材料在附加2,4-D 2.0 mg/L水平的Ms培养基上愈伤组织诱导率较高；在含不同水平2,4-D的培养基中添加6-BA对非胚性愈伤组织转变成胚性愈伤组织起重要作用，其中2,4-D 2.0 mg/L配合6-BA 0.1mg/L的Ms培养基诱导出的胚性愈伤组织比例较高；胚性愈伤组织在2,4-D为0.1mg/L的分化培养基上分化率和生根率最高，为46.8％~ 48.1％。     

红薯茎尖愈伤组织胚状体的诱导研究

以"栗子香"红薯块根所生幼茎的茎尖为试材,探索了通过诱导形成愈伤组织获得胚状体的技术方法。将红薯块根置于人工气候培养箱中,在温度为30℃、12L/12D光照条件下1周后发芽,待长出幼茎,在无菌条件下,取红薯茎尖接种到含有5μmol/L2,4-D的MS’培养基中,在27℃、黑暗条件下诱导得到胚性愈伤组织,将胚性愈伤组织接种于不含2,4-D的MS’培养基中,在27℃、16L/8D光照条件下培养得到胚状体。试验结果表明,从红薯茎尖经由愈伤组织可形成胚状体,2,4-D在红薯茎尖愈伤组织形成过程中发挥着重要作用。     

结缕草种子愈伤组织诱导及植株再生研究

以结缕草成熟种子为外植体,研究了不同的种子处理方法和基本培养基、生长调节剂与壳聚糖的添加量对愈伤组织诱导的影响,以及愈伤组织的继代次数对植株分化的影响。结果表明:剥去外壳、划破种皮的结缕草种子在N6培养基中,2,4-D浓度为4 mg/L,添加4 g/L壳聚糖时,出愈率最高,达到100%,胚性愈伤的发生率也达到最高,为84.4%;用含0.1 mg/L 2,4-D的1/2MS分化培养基,经1次继代的浅黄色稍致密愈伤组织分化率最高,达到81.7%。     

文冠果体细胞胚胎发生体系建立

以文冠果果实的幼果期、中期和成熟期种胚为外植体,利用组织培养技术,对影响文冠果体细胞胚胎发生多种培养因子进行筛选,建立稳定的文冠果体细胞胚胎发生的培养体系。结果表明:文冠果果实发育中期的种胚诱导体细胞胚效果较好,种胚在MS+BA 1.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L+2%蔗糖的固体培养基上暗培养形成愈伤组织,在MS+BA 2.0 mg/L+NAA0.05 mg/L+2%蔗糖的固体培养基上暗培养产生体细胞胚。     

草地早熟禾高频再生体系建立

研究了草地早熟禾愈伤组织的诱导和分化的最适培养基,建立了早熟禾高频率的再生体系.结果表明:品种优异的胚性愈伤诱导率最高,其中含2.0 mg/L 2,4-D和0.2 mg/L6-BA的培养基处理胚性愈伤组织的诱导频率最大,可以达到65.26%.早熟禾品种肯塔基、午夜、优异与新哥莱德最适分化激素浓度与配比分别为6-BA 1.0 KT 0.2、6-BA 2.0 2,4-D 0.1、6-BA1.0 2,4-D 0.2、KT 2.0,愈伤组织分化率分别达到27.93%、52.38%、66.67%和60%.早熟禾再生芽在1/2 MS 0.2 NAA培养基上生根率可达到100%.     

芹菜胚性愈伤的诱导及高频植株再生体系的建立

通过对芹菜离体培养过程中激素配比、基因型、不定芽产生等条件的研究,建立了芹菜高频植株再生体系。研究表明,芹菜苗期的下胚轴最适于诱导愈伤组织,其愈伤组织诱导和继代培养的最佳培养基是MS+2,4-D1.0mg·L-1+KT1.0mg·L-1和MS+2,4-D0.5mg·L-1+BA0.2mg·L-1+CH500mg·L-1+4%甘露醇;基因型对愈伤组织和胚状体的诱导影响很大;60%以上的愈伤组织在继代培养基上可以从非胚性状态向半胚性和胚性状态转化。愈伤组织在1/2MS+1.5%蔗糖+CH500mg·L-1+KT0.25mg·L-1上获得不定芽或小试管苗;在无激素的MS或1/2MS固体培养基上继续培养不定芽或小试管苗,即可生根或长大,获得芹菜的完整再生植株。     

白姜花胚性愈伤组织的诱导与植株再生体系的建立

将白姜花（Hedychium coronarium）未成熟花丝接种在MS + 4 mg ? L^-1 2,4-D + 4 mg ? L^-1 NAA + 1 mg ? L^-1 6-BA的培养基上,经过180 d的培养,诱导出3种愈伤组织：Ⅰ,浅黄色松散易碎;Ⅱ,白色疏松半透明水渍状;Ⅲ,黄色致密颗粒状。对愈伤组织继代培养基中的2,4-D、NAA和6-BA浓度进行优化,结果表明培养基中含有1 mg ? L^-1 2,4-D、0.25 mg ? L^-1 NAA、0.25 mg ? L^-1 6-BA时可获得胚性状态良好的愈伤组织。胚性愈伤组织在MS无机盐 + 0.25 mg ? L^-1 NAA + 0.5 mg ? L^-1 TDZ + 维生素B₅ + 100 mg ? L^-1谷氨酰胺 + 230 mg ? L^-1脯氨酸 + 100 mg ? L^-1麦芽提取物 + 45 g ? L^-1蔗糖的体胚诱导培养基中培养20 d后,转移到MS基本培养基上培养30 d,1 g胚性愈伤组织可获得50 ~ 60个体胚。成熟体胚在MS + 0.2 mg ? L^-1 IAA + 0. 5 mg ? L^-1 6-BA的萌发培养基上培养20 d时,体胚萌发率为85%。萌发的体胚转移到1/2 MS + 1 g ? L^-1活性炭的成苗培养基中可发育成正常植株,植株室外栽培成活率达90%。对100株再生植株的染色体数进行分析,发现3株三倍体（2n = 3x = 51）、6株四倍体（2n = 4x = 68）和2株六倍体（2n = 6x = 102）。     

龙芽楤木体细胞胚状体发生及成苗的调控研究

利用龙芽楤木叶片、叶柄、嫩茎及根为试材,研究了2,4-D、6-BA、NAA、糖种类对胚性愈伤组织及胚状体的诱导、芽分化和成苗的影响。以2,4-D1.0 mg/L,确定诱导胚性愈伤组织及胚状体的最适外植体为嫩茎,诱导的胚性愈伤组织及胚状体质量、数量均高于叶片、叶柄和根;经直观分析、方差分析和多重比较,结合对比试验,结果表明:6-BA是龙芽楤木芽分化及成苗的主要因素。以蔗糖30 g/L作碳源,芽分化最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.02 mg/L;成苗最适培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.04 mg/L,芽分化率和成苗率达88.02%和79.62%。     

普通狗牙根种子组培技术优化及植株再生

以普通狗牙根的成熟种子作外植体,通过胚性愈伤组织的发生进行植株再生。结果表明:诱导狗牙根种子产生愈伤组织的最佳培养基为:MS+2,4-D 3 mg/L+壳聚糖4 g/L;暗培养优于光培养,最高出愈率为87.0%;所诱导愈伤组织在1/2原激素浓度下继代,以MS+6-BA0.1 mg/L为分化培养基,获得了再生植株;半透明粘稠状愈伤组织的分化率最高,为63.1%。     

白象牙杧幼胚愈伤组织诱导研究初报

以白象牙杧幼胚为外植体,研究不同植物生长调节剂配比培养基对其胚性愈伤组织的诱导。结果表明,2,4-D对白象牙杧幼胚愈伤组织诱导作用显著。诱导愈伤组织的最佳培养基为B5+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,出愈率达到75.00%。     

正交试验法在荔枝体胚诱导过程中的应用

应用正交试验方法,研究MS培养基中附加的BA、KT、NAA、2,4-D以及琼脂和蔗糖浓度对荔枝胚性愈伤组织体胚诱导的影响。结果表明,BA 0.5 mg.L-1 KT 0.5 mg.L-1组合有利于荔枝胚性愈伤组织诱导体胚,NAA及2,4-D对体胚诱导效果不明显;在高浓度蔗糖(60 g.L-1)和琼脂(10 g.L-1)作用下,荔枝体胚诱导率较高,其中琼脂的作用效果明显高于蔗糖。通过正交试验方法选用MS BA 0.5 mg.L-1 KT 0.5 mg.L-1 LH 500 mg.L-1 蔗糖60 g.L-1 琼脂10 g.L-1组合,荔枝胚性愈伤组织诱导的体胚达9.05百个.g-1,是MS基本培养基的4.6倍,减少了试验次数,提高了荔枝体胚诱导的工作效率与准确性。     

沟叶结缕草胚性愈伤组织继代培养基对其生长和再生的影响

以沟叶结缕草匍匐茎诱导的胚性愈伤组织为材料,通过连续3代的培养,比较了MS、N6和N6AA 3种基本培养基与不同浓度（0.5、1.0、1.5、2.0 mg · L-1）2,4-D组合对愈伤组织生长速度、胚性保持、再生能力、再生植株的抗氧化酶活性、脯氨酸含量和染色体倍性的影响。结果表明：MS培养基添加2.0 mg · L-1 2,4-D对愈伤组织的生长和胚性保持效果最好,胚性愈伤组织比率达85.00%。但不同基本培养基对再生植株的SOD、POD、CAT活性和脯氨酸含量没有显著影响,流式细胞仪测定结果表明其染色体倍性也没有发生变化,植株个体间没有形态差异。     

菠萝叶基愈伤组织诱导体细胞胚

以菠萝[Ananascomosus(L.)Merr.]吸芽上的叶基部组织为材料,研究了2,4-D、NAA、BA、TDZ在菠萝愈伤组织诱导体细胞胚过程中的影响。结果表明,2,4-D在体细胞胚诱导过程中起着极为重要的作用,其适宜浓度为5mg/L,适当浓度(1mg/L)的BA在降低畸形胚比例和增加体细胞胚发生率方面有重要作用,但BA也会促进愈伤组织分化不定芽;低浓度的TDZ与BA效果相似,在不同生长调节物质处理组合中,MS+0.01mg/LTDZ+5mg/L2,4-D培养基的体细胞胚发生率最高(97%)。低浓度NAA(2￣5mg/L)利于非胚性愈伤组织的增殖,而高浓度的NAA虽能促进体细胞胚发生,但这种体细胞胚很难继续增殖,在萌发时只生根不发芽。成熟体细胞胚在MS+0.2%活性炭上30d时的转株率为22.7%。     

“爱神玫瑰”葡萄杂交胚胚性愈伤组织诱导与保持的研究

以无核葡萄“爱神玫瑰”的杂交胚为试材,通过试验筛选出了胚性愈伤诱导基本培养基:NN69;胚性愈伤组织诱导培养基:NN69 +TDZ 0.05 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L;胚性愈伤组织长期保持与增殖培养基:NN69 +6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L和NN69+2,4-D 0.2 mg/L+TDZ 0.1 mg/L为“爱神玫瑰”较适宜的培养基.     

正交实验法优选橡胶树花药愈伤组织诱导的研究

以橡胶树品种RRII105花药为外植体,研究了不同浓度2,4-D、KT、NAA及TDZ组合对橡胶树花药愈伤组织诱导的影响。结果表明:最适合诱导橡胶树花药愈伤组织的培养基配方为MS+0.8mg/L 2,4-D+0.8mg/L KT+1.2mg/L NAA+0.0mg/L TDZ+60g/L蔗糖+5g/L琼脂,诱导率达94.00%,出胚率为14.25%。     

红姜花体细胞胚胎发生及植株再生的研究

以红姜花（Hedychium coccineum）的花丝和花药为外植体,通过体细胞胚胎发生途径建立了植株再生体系。结果表明：外植体在MS + 4 mg ? L-1 2,4-D + 4 mg ? L-1 NAA + 1 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1 蔗糖 + 7 g ? L-1 琼脂的培养基上经过120 d诱导出愈伤组织,愈伤组织在MS + 1 mg ? L-1 2,4-D + 0.25 mg ? L-1 NAA + 0.25 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1 蔗糖 + 7 g ? L-1琼脂的培养基上经过继代筛选,获得浅黄色松散易碎的胚性愈伤组织。胚性愈伤组织在MS无机盐 + B5维生素+ 100 mg ? L-1谷氨酰胺 + 230 mg ? L-1 脯氨酸 + 100 mg ? L-1麦芽提取物 + 0.02 mg ? L-1 NAA + 0.02 mg ? L-1 TDZ + 0.5 ~ 1.0 mg ? L-1 2,4-D + 45 g ? L-1蔗糖的培养基中通过3个月的悬浮培养,可得到均质稳定的胚性细胞悬浮系（ECS）。胚性悬浮细胞在SH无机盐 + B5维生素 + 100 mg ? L-1谷氨酰胺 + 230 mg ? L-1脯氨酸 + 100 mg ? L-1麦芽提取物 + 0.25 mg ? L-1 NAA + 0 ~ 0.20 mg ? L-1 TDZ + 45 g ? L-1蔗糖 + 7 g ? L-1琼脂的体胚诱导培养基中培养10 d,可见到白色半透明体胚发生,20 d后体胚发育成熟。当TDZ浓度为0.15 mg ? L-1时,体胚诱导率高达4 500个 ? mL-1 PCV ECS（PCV：细胞密实体积）。在SH无机盐 + B5维生素 + 0.20 mg ? L-1 IAA + 0.25 ~ 1.0 mg ? L-1 6-BA + 30 g ? L-1蔗糖 + 7 g ? L-1琼脂的体胚萌发培养基上,体胚萌发率高达100%。将萌发的体胚转移到1/2MS + 1 g ? L-1活性炭成苗培养基中,进一步发育成正常的再生植株,植株室外栽培成活率达90%。     

麦草畏、水杨酸对西洋参成熟种胚体细胞胚发生的影响

以西洋参成熟种胚为试材,以不加激素和添加0.5mg/L 2,4-D的MS培养基为对照,研究了不同浓度(0.05~2.00mg/L)麦草畏、水杨酸对西洋参体胚发生的影响。结果表明:未添加激素的空白培养基没有愈伤和体胚发生;在附加2,4-D的培养基中愈伤和体胚发生率为100%;5个浓度的麦草畏和水杨酸均能诱导出体胚,其中1.00mg/L麦草畏的效果最佳,体胚发生率为56.60%,水杨酸处理下体胚发生率最高为7.50%;在各种浓度的水杨酸中种胚生长量比对照小且褐化严重。说明麦草畏、水杨酸均可诱导西洋参成熟种胚体细胞胚发生,诱导能力2,4-D麦草畏水杨酸;水杨酸对种胚生长有抑制作用。