中国专利集锦（九）

一种用于治疗AIDS及相关疾病的组合物；冬凌草及其提取物在制备抗艾滋病药物上的应用；牛膝多糖硫酸酯的抗艾滋病和免疫调节新用途；繁缕总黄酮、制备方法、用途以及含有它的制剂；繁缕多糖及制备方法和用途及其组合物和制剂。     

灵芝多糖结构分析方法研究进展

综述了目前用于多糖结构分析的主要方法及其在灵芝多糖结构研究中的应用,以及灵芝多糖结构方面的研究进展。     

灵芝多糖制备及药理研究进展

综述了灵芝多糖的制备及药理作用方面的主要研究成果,并展望了其发展前景。指出灵芝多糖是灵芝属灵芝中的主要活性成分之一,具有免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、抗氧化、降血脂等药理作用,是具有广泛开发前景的药品资源。     

灵芝多糖有效成分提取工艺与生物药效分析

灵芝多糖是多孔菌种灵芝属真菌菌丝体的次生代谢产物,存在于灵芝属真菌的菌丝体和子实体中。灵芝多糖是灵芝的最有效成分之一,因此受到科技工作者的特别重视。基于此,列举分析灵芝多糖有效成分提取方法和灵芝多糖的生物作用研究综述。     

不同灵芝主要活性成分差异性分析

[目的]为灵芝分类鉴定及其药用成分的合理利用提供科学依据。[方法]比较不同灵芝菌株（德昌1号、德昌3号、德昌4号、黑芝、血芝、灵芝）的多糖及三萜化合物含量,并采用HPLC法分析不同灵芝菌丝体和子实体中三萜化合物的组分。[结果]子实体多糖含量由高到低依次为：灵芝、德昌3号、黑芝、血芝、德昌1号,三萜含量由高到低依次为：血芝、德昌1号、德昌3号、黑芝、灵芝;不同灵芝菌丝体所含三萜化合物的种类存在差异,同一灵芝菌丝体和子实体所含三萜化合物的种类存在一定的相似性。[结论]灵芝多糖含量与三萜化合物含量之间不存在必然联系。     

超声波辅助提取灵芝水溶性多糖的工艺研究

[目的]为灵芝多糖的工业化生产提供理论指导。[方法]以赤灵芝子实体为材料,采用超声波法提取其中的灵芝多糖,并通过单因素和正交试验研究超声功率、超声时间、提取温度、料液比对灵芝多糖得率的影响,确定灵芝多糖的最佳提取工艺。[结果]单因素试验结果表明,提取温度为50℃,超声时间为40min时灵芝多糖得率最高,当超声功率小于500W时,灵芝多糖得率随超声功率的增大快速增加。各因素对灵芝多糖得率的影响由大到小依次为：超声功率〉料液比〉提取温度〉超声时间;灵芝多糖的最佳提取工艺为：超声功率500W、提取温度45℃、超声时间35min、料液比1：25。[结论]在最佳工艺条件下,灵芝多糖的得率为2．75％。     

一氧化氮对灵芝木质素与多糖含量的影响研究

采用硝普钠(Sodium nitroprusride,SNP)作为外源一氧化氮(nitric oxide,NO)供体,研究一氧化氮对灵芝产量、木质素和灵芝多糖含量的影响。结果表明,5mmol/L SNP处理促进灵芝子实体生长,并显著提高灵芝多糖含量,降低木质素含量;当SNP处理浓度达到20mmol/L时,将抑制灵芝多糖的积累。     

组蛋白乙酰化对灵芝生长、灵芝多糖和灵芝酸生物合成的影响

【目的】组蛋白乙酰化修饰对真菌生长发育和次级代谢合成具有重要的调控作用。研究组蛋白乙酰化对静置培养的灵芝生长发育和主要代谢物合成的影响,为表观遗传手段提高灵芝多糖和灵芝酸生物合成提供理论依据。【方法】采用液体振荡-静置两阶段法培养灵芝。在静置培养阶段添加不同浓度（0、0.6、60、120和180 μmol·L ^-1）辛二酰苯胺异羟肟酸（SAHA）,采用常规方法测定或观察灵芝生物量、糖消耗、上层菌丝膜形成、菌丝体形态、灵芝孢子生成以及灵芝酸和灵芝多糖生物合成,利用蛋白免疫印迹技术测定灵芝组蛋白乙酰化水平;利用qRT-PCR技术对灵芝多糖（ugp、gls和pgm）、灵芝酸（hmgr、sqs、se和ls）生物合成关键基因以及灵芝全局调控因子相关基因（vet和LaeA）进行表达分析。【结果】SAHA处理使灵芝组蛋白H4乙酰化水平提高,最高为对照组的1.6倍;抑制了灵芝菌丝体生长和色素产生,改变了菌丝体的形态。灵芝孢子的形成也受到抑制,且SAHA浓度越大,抑制程度越明显。SAHA处理显著增加了灵芝多糖的产量,最高增加50%;灵芝酸生物合成受到抑制,与对照相比降低13%—27%;qRT-PCR分析结果表明SAHA处理下灵芝多糖与灵芝酸合成关键酶基因表达均有不同程度上调,其中灵芝多糖合成关键酶基因提升1.5—3.5倍,灵芝酸合成关键酶基因提升1.8—12.1倍;灵芝全局性调控因子vet和LaeA的表达被抑制,仅为对照组的11.30%—62.4%。【结论】组蛋白乙酰化可通过灵芝全局调控因子调控灵芝生长发育进而影响灵芝酸生物合成,同时组蛋白乙酰化对灵芝多糖生物合也有影响。     

外源茉莉酸甲酯对灵芝多糖及灵芝酸含量的影响

[目的]探寻外源茉莉酸甲酯对灵芝多糖及灵芝酸含量的影响。[方法]用含有不同浓度的茉莉酸甲酯在不同的发酵时间对液体培养基中的灵芝进行诱导培养。[结果]在发酵培养的第4天,添加外源茉莉酸甲酯浓度为50μmol·L~(-1)时,灵芝菌丝体和菌液中灵芝多糖含量最高,菌丝体中灵芝多糖含量为398.98mg·g~(-1),是对照的1.83倍;菌液中的灵芝多糖含量为4.20g·L~(-1),是对照的1.56倍。添加外源茉莉酸甲酯浓度为100μmol·L~(-1)时,灵芝菌丝体及菌液中灵芝酸含量最多,灵芝菌丝体中灵芝酸为50.02 mg·g~(-1),是对照的1.93倍;菌液中灵芝酸含量为7.10mg·L~(-1),是对照的2.21倍。[结论]说明外源茉莉酸甲酯能够有效的促进灵芝多糖和灵芝酸的合成。     

不同地区、品种灵芝的多糖提取工艺优化

为确定灵芝多糖的提取工艺及不同地区不同品种的灵芝多糖的提取率,对水浸提过程中的温度,时间及固液比3个因素进行正交试验,用苯酚-硫酸法测定灵芝多糖的含量。结果表明,灵芝多糖的最佳提取条件为浸提温度100℃,浸提时间为2 h,料液比为1∶15;浸提温度对多糖提取的影响最大,其次为浸提时间和浸提固液比。灵芝多糖提取率最高的品种为信州种。灵芝多糖提取率最高的地区为吉林长白山。     

灵芝多糖药理作用研究进展

灵芝多糖是从灵芝中提取出的活性成分。近年来,国内外学者大量研究并报道了灵芝多糖的相关内容。本文主要针对灵芝多糖免疫功能调节、抗衰老、抗癌、保护肝脏、抗病毒等药理作用进行综述,旨在为灵芝多糖的开发利用提供参考。     

铁皮石斛对灵芝多糖深层发酵的影响

[目的]研究铁皮石斛对灵芝生长及胞外多糖分泌的影响,并分析灵芝多糖组分的变化。[方法]在发酵培养基中添加不同量的铁皮石斛,分析灵芝生物量和胞外多糖含量的变化,并采用KTA explorer柱层析分析多糖组分。[结果]铁皮石斛可促进灵芝胞外多糖的合成,添加量以10 g/L效果最佳;添加铁皮石斛发酵未改变灵芝多糖的组分。[结论]在灵芝深层发酵培养基中添加适量铁皮石斛有助于灵芝多糖的高效生产。     

灵芝多糖提取方式比较及多糖应用研究进展

多糖是灵芝的主要活性物质,具有抗氧化、降血脂、降血糖、抗肿瘤、抗病毒和提高免疫力等功效。随着灵芝多糖已渗入到药品、保健品、化装品和食品等领域,多糖的提取逐渐成为人们研究的主要问题。同时,人们对多糖的重要活性物质有了新的认识。随着多糖的提取、结构、药理学及临床学研究的不断深入,灵芝及灵芝多糖将具有更广阔的前景。     

灵芝发酵液发酵生产灵芝多糖醇工艺的初探

以灵芝菌丝体液为主要基质,添加蔗糖以酵索酵母菌进行厌气发酵生产灵芝多糖醇.对蔗糖的添加量、酵母菌液的接种量、发酵温度和发酵时间分别进行单因素和四因素三水平L9(34)正交试验,检测发酵液中的酒精含量和残糖含量,初步获得灵芝菌丝液发酵生产灵芝多糖醇工芝:在灵芝菌丝体液中添加6%蔗糖,接种2%酵母菌菌液、35℃厌气发醇36 h,产物中酒精和残糖含量分别为7.6%和0.11%.灵芝菌丝体液添加蔗糖接种酵母进行厌气发酵生产灵芝多糖醇是可行的.     

灵芝主要有效成分超声提取工艺的优化

目的研究灵芝三萜和灵芝多糖的超声提取工艺．方法采用超声波辅助法,探讨了提取剂的pH（碱醇）、提取剂用量、提取温度、超声时间4个因素对灵芝三萜提取效果的影响,并用无水乙醇做对照实验．探讨超声时间、提取温度、提取剂用量3个因素对灵芝多糖提取效果的影响．结果醇的pH和超声时间对灵芝三萜的提取效果有明显影响,其他两因素影响效果不大;提取时间和提取温度两个因素对灵芝多糖提取效果达到极显著水平．结论灵芝三萜最佳提取条件为：乙醇用量30倍＋提取温度60℃＋提取时间60min＋碱醇pH8．5,对无水乙醇调pH可以明显提高乙醇提取灵芝三萜的能力;灵芝多糖提取最佳条件为：超声提取时间55min＋提取温度55℃＋提取剂用量50倍．     

灵芝多糖的遗传毒理学研究

本文用整体微核试验对灵芝多糖进行遗传性研究。观察成年小鼠，孕鼠及其胎鼠在不同生理状态下微核率的变化。实验结果表明，用５％灵芝多糖处理的成年小麦，孕鼠及其胎鼠，其微核率与正常组相比，无显著性差异，说明灵芝多糖对小鼠无诱变活性。     

灵芝液体发酵及产多糖的初步研究

从7个灵芝菌种中筛选产灵芝多糖较多且生长较快的菌株紫灵芝,并以紫灵芝为菌种,研究了不同氮源、碳源及金属离子对产灵芝多糖的影响。结果表明,最佳碳源为2%的蔗糖,最佳氮源为0.2%的玉米粉,0.2%的Fe2+的存在有利于多糖产量的明显提高。发酵罐放大试验表明,每100 ml发酵液胞外粗多糖含量最多达181.7 mg,菌丝体含量最多达到151.0 mg,pH值的变化较缓和,发酵罐发酵更适合于灵芝多糖的分泌。     

微波与水煎取灵芝多糖的比较研究

研究灵芝子实体微波煎取对多糖煎取量的影响。结果表明:微波炉煎取灵芝多糖量在相同条件下比水煎取多糖量大;微波解冻档灵芝多糖煎取量比低火档煎取量大,即微波功率增大,灵芝多糖煎取量大,但微波功率不宜过高;将灵芝子实体粉碎至80目,采用1:20水提比,控制微波炉为低火档(800w×18%),煎取多糖量比同条件下水煎取多约10%。     

灵芝液体发酵的研究

从7个灵芝菌种中筛选产灵芝多糖较多且生长较快的菌株紫灵芝,并以紫灵芝为菌种,研究了不同氮源、碳源及金属离子对产灵芝多糖的影响。结果表明,最佳碳源为2%的蔗糖,最佳氮源为0．2%的玉米粉,0．2%的Fe~(2 )有利于粗多糖产量的明显提高。发酵罐放大实验表明,每100 mL发酵液胞外粗多糖含量最多达1460．7 mg,菌丝体含量最多达到571 mg,pH值的变化比较缓和,发酵罐发酵更适合于灵芝多糖的分泌。     

紫外照射对灵芝菌丝体多糖的影响

采用紫外照射诱导菌种的方法可使灵芝菌丝体多糖含量增加。首先考察了不同紫外照射时间和功率对灵芝菌丝体形态、生长速度及多糖含量的影响,发现小功率、短时间的照射有利于菌丝体的生长,并可提高菌丝体多糖的含量,而大功率、长时间的照射则会对灵芝菌丝体产生相反的影响。然后通过正交试验,确定了紫外照射提高灵芝菌丝体多糖含量的最优条件,即用20 W的紫外灯照射灵芝菌种10 min,灵芝菌丝体多糖含量可达9.57%,比未经紫外照射的灵芝菌丝体多糖含量提高了3.45%。另外,将未紫外照射和在最优条件下紫外照射的灵芝的菌丝体多糖进行抗氧化能力比较,发现二者清除·OH和O_2~-·自由基能力无明显差异。