芜菁高频率再生体系的建立及优化

以3个品种芜菁的带柄子叶和胚轴为外植体,采用苯基噻二唑基脲（thidiazuron,TDZ）配合NAA以及BA配合NAA两种组合研究了适于芜菁离体再生的外植体类型和激素组合。发现带柄子叶为外植体,TDZ 7.0 mg·L^-1 + NAA 1.0 mg·L^-1的组合对不定芽分化最为有利。以此离体再生体系为基础,针对AgNO3浓度、苗龄、2,4-D预培养时间3个因素进行优化,得到了芜菁高频率离体再生体系。结果表明：采用5 d苗龄的带柄子叶作为外植体,在含有2,4-D 1.0 mg·L^-1的MS培养基上预培养2 d,添加TDZ 7.0 mg·L^-1 + NAA 1.0 mg·L^-1 + AgNO3 5.0 mg·L^-1的MS培养基为分化培养基对芜菁离体再生最为有利。依品种不同,最高分化率可以达到90%左右。分化后得到的不定芽在IBA 0.1 mg·L^-1的MS培养基上可以100%生根,移植成活率达95%。     

光叶子花茎段愈伤组织的诱导及其植株再生的研究

 研究了光叶子花(Bougainvillea glabra Choisy) 茎段愈伤组织的诱导及植株再生。结果表明:愈伤组织诱导以MS +BA 3.0 mg·L ^-1 + 2,4-D 0.2 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基最好, 茎段愈伤组织的诱导率和分化率分别达78.2%和25.6%。不定芽的产生有两种类型: 直接从茎段基部诱导产生不定芽和茎段基部形成大块愈伤组织后再从愈伤组织上分化出不定芽。丛生苗诱导以MS +BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1为培养基, 增殖倍数可达5.4, 当培养基中BA 3.0 mg·L^-1和2,4-D 0.5～1.0 mg·L^-1时再生植株会出现叶片变异现象。MS+ BA 0.2 mg·L^-1 + GA₃ 0.5 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1培养基对有效苗培养具有较好的效果; 生根诱导以MS +NAA 3.0 mg·L^-1培养基诱导率最高, 为88.3%。     

辣椒离体植株再生及其变异的SSR检测

采用6个不同基因型辣椒（Capsicum annuum L.）的子叶、下胚轴、去除生长点并带下胚轴和各切去一半的两片子叶、去除生长点并带下胚轴和半片子叶为外植体,分别培养在附加不同激素和 AgNO₃ 的MB₅和MS培养基上,研究不同基因型、外植体、激素配比和AgNO₃等对外植体不定芽诱导和芽伸长的影响。结果表明,不定芽诱导以MB₅+2.0 mg·L^-1 TDZ+1.0 mg·L^-1 IAA+4 mg·L^-1 AgNO₃培养基最佳,诱导率最高可达100 %。而芽伸长的最佳培养基为MB₅+3.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 IAA+5.0 mg·L^-1 AgNO₃+2.0 mg·L^-1 GA₃,最高伸长率可达87.5 %。生根培养基为MS+0.2 mg·L^-1 IAA+0.1 mg·L^-1 NAA,生根率均达100 %。不同的外植体类型具有不同的不定芽诱导和芽伸长的能力,以去除生长点并带下胚轴和各切除一半的两片子叶作外植体时的诱导效果最好。用50对SSR引物检测再生植株,其中86株伏地尖的再生植株和对照植株间均没有扩增出差异条带,而茄门再生植株的SSR检测结果有12对引物表现多样性。     

车轮梅茎段高效再生体系的建立

 以车轮梅 (Rhaphiolepis indica L.)茎段为外植体。探讨基本培养基种类、植物生长调节剂组合、蔗糖浓度和AgNO3等因素对茎段器官发生和植株再生的影响。结果表明：MS+6-BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.5 mg·L^-1 + AgNO3 1.0 mg·L^-1+蔗糖40 g·L^-1培养基最适合不定芽的分化和增殖,不定芽分化率达90%以上,平均每外植体分化不定芽数达5.38个。不定芽可在1/2MS培养基中有效伸长,适宜生根培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg·L^-1,生根率达到100%。     

蝴蝶兰花葶的离体培养

 蝴蝶兰花梗腋芽培养在含VW无机盐+肌醇100 mg·L^-1+VB₁10 mg·L^-1+VB₆ mg·L^-1+烟酸1 mg·L^-1+蔗糖20g·L^-1+BA 5.0 mg·L^-1的培养基上22°C培养，可分化出花葶。花葶切片在含Ms无机盐+肌醇100mg·L^-1 +VB₁10 mg·L^-1+VB₆1 mg·L^-1+烟酸1 mg·L^-1+蔗糖15 g·L^-1+BA 5.0 mg·L^-1+NAA0．5 mg·L^-1 的培养基上诱导分化不定芽。不定芽在同一培养基上继代增殖，在附加香蕉汁100 g·L 的Hyponex 1号生根培养基上壮苗生根。     

同源四倍体青花菜离体再生及其倍性鉴定

以同源四倍体青花菜带柄子叶为外植体,研究其离体再生体系。结果表明： 10 d苗龄外植体在MS + 0.05 mg·L^-1 NAA + 3.0 mg·L^-1 6-BA+0.8% 琼脂 + 3% 蔗糖培养基上不定芽的再生频率最高为63.3％;继代培养(MS + 0.04 mg·L^-1 NAA + 4.0 mg·L^-1 6-BA + 0.8% 琼脂 + 3% 蔗糖)增殖系数为6,诱导(1/2MS + 0.1 mg·L^-1 NAA + 0.7% 琼脂 + 3% 蔗糖)生根率100％,移栽成活率90％。流式细胞技术分析及染色体计数鉴定结果表明,再生植株的DNA相对含量为二倍体的2 倍,染色体数为2n=4x=36。     

珍稀濒危植物珙桐离体快繁技术初步研究

 研究了我国一级珍稀濒危树种珙桐(Davidia involucrata Baill.) 带芽茎段的离体培养。筛选出最佳培养基: ( 1) 冬芽诱导培养基: WPM+BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1; (2) 丛生芽诱导培养基: WPM + BA 2.0 mg·L^-1; (3) 丛生芽增殖培养基: WPM+ BA 2.0 mg·L^-1+ ZT 0.1 mg·L^-1; (4) 生根培养基: WPM + NAA 0.5 mg·L^-1。     

葡萄器官离体再生和遗传转化体系的建立

以‘森田尼无核’为试材,研究了生长调节物质、外植体类型、抑菌素等主要因素对葡萄离体不定芽再生和转化效率的影响,建立和优化了葡萄的再生和转化体系。结果表明：相对于BA和KT,细胞分裂素TDZ无论单独使用还是与生长素配合使用均可使葡萄不定芽再生频率达到最高;在MS + TDZ 2.0 mg·L^-1 、MS + TDZ 4.0 mg·L^-1 或MS + TDZ 4.0 mg·L^-1 + IAA0.1 mg·L^-1培养基上均可以较好地诱导森田尼无核葡萄再生不定芽,再生频率分别为37.4%,40.2%和50.0%;叶盘、茎段和叶柄都可以诱导再生不定芽,在同一种培养上再生频率有差异,但差异不大;采用根癌农杆菌介导的叶盘法转化葡萄时,卡那霉素抗性筛选浓度为20 mg·L^-1;抑菌抗生素使用头胞霉素适宜浓度为400 mg·L^-1,而使用羧苄青霉素时以300 mg·L^-1最佳;获得转化芽45个,部分株系用PCR和Southern 杂交证实,外源基因已整合在葡萄基因组DNA上。     

细胞分裂素对辣椒子叶再生的影响

 不同浓度的BA、ZT、KT 等细胞分裂素对辣椒子叶再生频率的影响进行了分析。结果表明, BA、ZT 的最佳浓度分别为4. 0 mg。L^-1、3. 0 mg。L^-1, 再生频率都达到了100%, 平均每个叶片分化芽数分别为9. 7、9. 4; BA 浓度为4. 0 mg。L^-1时, 与其它各处理差异显著或极显著; KT 基本上不能诱导不定芽。     

滇润楠的组织培养及快速繁殖研究

 用滇润楠成年树带芽嫩茎、嫩叶和根部萌蘖枝条上带芽嫩茎为材料进行组织培养，在Ms+BA 4 mg·L^-1‘+NAA 0.5 mg·L^-1 的培养基上，树冠越冬芽褐化较轻，腋芽萌发率高，小苗生长良好，同时也有利于后期增殖；在MS+BA 8mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1 +KT 1.0 mg·L^-1的培养基上能分化出丛生芽，但增殖率低；在1/2 MS +NAA 0.1 mg·L^-1的培养基上诱导出白色健壮根。外植体取材部位、取材时间、激素等因素是引起滇润楠组培褐变及影响快速繁殖的主要原因。     

山杜英离体培养植株再生的研究

 研究了山杜英[Elaeocarpus sylvestris(Lour．)Poir．]带芽茎段的离体培养及植株再生。筛选出最佳培养基：(1)启动培养：Ms+BA 1.0～2.0 mg·L^-1 (单位下同)+NAA 0.05+蔗糖3%；(2)愈伤组织发生型丛生苗增殖培养：MS+BA 1.0+NAA 0.5+蔗糖3%；腋芽发生型丛生苗增殖培养：MS+BA2.0+IBA 0.1+蔗糖3%；(3)有效苗诱导培养：MS+BA 0.5+IBA 0.1+GA 1.0+蔗糖3%；(4)生根培养：1/2 MS+IBA 3.0+蔗糖2%。用透气膜封FI比用聚乙烯菌膜生根率明显提高，生根明显提前。     

云南野生早花象牙参叶片再生体系的建立

 以云南野生的早花象牙参叶片为外植体, 探讨了叶片的不同部位、植物生长调节剂组合、暗培养、水解酪蛋白和椰子汁对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明: 叶片基部, 暗培养, 水解酪蛋白和椰子汁均有利于愈伤组织的诱导; 暗培养促进了不定芽的再生。适宜早花象牙参叶片愈伤组织形成的诱导培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} +水解酪蛋白800 mg·L ^{- 1} +椰子汁50 mL ·L ^{- 1} , 再生培养基为MS + 6-BA 1.5 mg·L ^{- 1} +NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 增殖培养基为MS + 6-BA 0.6 mg·L ^{- 1} + NAA 0.1 mg·L ^{- 1} , 生根培养基为1/2MS +NAA 0.8 mg·L ^{- 1}。     

菜用羽衣甘蓝的小孢子胚诱导和植株再生

 以引自日本村田种苗公司的菜用羽衣甘蓝杂交种‘绿叶多汁’为试材, 对小孢子胚诱导条件、胚状体转接时间、生芽培养基和生根培养基进行了优化筛选。在NLN-13 + 0.1 mg·L^{- 1} 6-BA + 0.1mg·L^-1 NAA和NLN-13 + 0.2 mg·L^-1 6-BA + 0.2 mg·L^-1 NAA两种培养基上获得了胚状体, 其发生率分别为1.38胚·蕾^-1和0.98胚·蕾^-1; 转胚时间以接种培养后25 d为宜; 适宜的胚状体生芽培养基为MS +2.0 mg·L^-1 6-BA + 0.1 mg·L^-1NAA + 3%蔗糖+ 0.7%琼脂, 丛生芽诱导率为56138%; 生根培养基以1/2MS + 0.1 mg·L^-1 NAA + 3%蔗糖+ 0.7%琼脂为宜, 生根率100%。     

余甘子下胚轴离体再生体系的优化

 以余甘子( Phyllanthus emblica L. ) 下胚轴为外植体, 通过器官发生途径诱导形成不定芽, 探讨影响下胚轴器官发生和植株再生的因素, 建立了下胚轴高效再生体系。结果表明: 附加AgNO₃ 1 mg·L^-1和蔗糖40 g·L^-1的1 /2MS培养基最适合不定芽的分化; 下胚轴不同部位不定芽再生能力由强到弱表现为:形态学上部>中部>下部; 前期暗培养有利于下胚轴不定芽的形成, 暗处理14 d效果最好。通过以上优化措施可以使不定芽再生率达100% , 平均每外植体不定芽数11.7 个。不定芽较适生根培养基为胺鲜酯(DA26) 3 mg·L^-1 +复硝酚钠(CSN) 3 mg·L^-1 , 生根率达到62.8%。     

杂交兰‘韩国桃花’×蕙兰种间杂交种子无菌萌发特征研究

 以大花蕙兰和墨兰杂交育成的品种‘韩国桃花’为母本, 再与蕙兰进行种间远缘杂交, 取其不同成熟度的种子进行无菌播种, 研究了杂交种子萌发、原球茎和根状茎的增殖与分化特征。结果表明: 授粉后240 d的种胚具有较好的萌发能力, 在所试的4种培养基中, 以1/2MS添加6-BA 0.5 mg·L^-1和NAA 2.0 mg·L^-1的处理萌发效果较好; 萌发的种子可以通过原球茎和根状茎两条途径增殖; 1/2MS培养基添加6-BA 0.5 mg·L^-1和NAA 2.0 mg·L^-1适于原球茎增殖, 培养30 d后增殖系数可达4.25; 而NAA 0.5、1.0 mg·L^-1适宜原球茎的发育和植株再生; 根状茎的增殖以NAA:6-BA = 2:1较适宜, 培养40 d后增殖系数可达6. 0以上; 当NAA浓度为1.0 mg·L^-1时, 根状茎发育及植株再生效果佳, 培养70 d后超过80%的根状茎茎端分化成苗。杂交后代通过原球茎和根状茎均可获得再生植株, 且形态无明显差别。