牛瘤胃酸中毒发病机制与防治的研究进展

随着牛集约化养殖的发展,高精饲料的使用越来越广泛,这在不断提高牛生产性能的同时也引起了一些营养代谢病,特别是瘤胃酸中毒的发生,给养殖业造成了巨大的经济损失。作者就牛瘤胃酸中毒的发病机制与防治进行了较为系统地论述,以期为临床生产中更有效地预防和控制该病的发生和流行提供一定的理论参考。     

Is Lamina Muscularis Mucosae Present in the Ruminal Mucosa of Cattle?

The cells in the condensed fibrous layer in the lamina propria of the ruminal mucosa of the calves and cows were studied at the light microscopic level. Abundant actin-immunoreactive cells were detected both in the calves and cows, while desmin-immunoreactive cells were moderate in frequency in the cows and low or absent in the calves. Vimentin-immunoreactive cells were abundant in the cows but moderate to low in frequency in the calves. These cells were distributed to form a condensed layer being more abundant in the ruminal papillae than the interpapillar mucosae in the cows and equal in the papillae and interpapillar mucosae in the calves. At the ultrastructural level, smooth muscle cells and fibroblasts were abundant in the deep core of the ruminal papilla of the cows. The present results suggest that the condensed fibrous layer revealed in the ruminal mucosae contains smooth muscle cell population which could be regarded as the specialized lamina muscularis mucosae.     

幼龄反刍动物瘤胃上皮细胞β-羟基丁酸代谢与调控机制

β-羟基丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHBA)是酮体的主要成分之一,在反刍动物瘤胃中由微生物发酵产生的丁酸在瘤胃上皮细胞中氧化生成,BHBA对反刍动物瘤胃上皮细胞的代谢与增殖具有重要调控作用。近年来,有关BHBA研究多集中在肝脏生酮、奶牛酮病及泌乳等方面,关于BHBA与幼龄反刍动物瘤胃上皮细胞生长发育之间的关系及内在机制研究很少。本文重点针对BHBA在瘤胃上皮的生成、转运,以及BHBA作为信号分子调控瘤胃上皮细胞代谢与增殖的分子机制进行综述,这对于丰富瘤胃发育及调控理论与幼龄反刍动物培育营养策略具有重要意义。     

浏阳黑山羊瘤胃上皮细胞周期分布、增殖和凋亡特点

本研究旨在建立浏阳黑山羊瘤胃上皮细胞的体外培养模型,并对其周期分布、增殖和凋亡特点进行研究。试验采集60日龄浏阳黑山羊的瘤胃上皮组织,应用0.25%胰蛋白酶+0.02%乙二胺四乙酸(EDTA)消化法对山羊瘤胃上皮组织进行消化,得到单个的山羊瘤胃上皮原代细胞进行体外培养。通过倒置显微镜对原代和传代培养阶段细胞形态进行观察,采用细胞计数法检测细胞的生长活性,应用细胞免疫组化学方法对传代细胞进行鉴定,并用流式细胞术检测山羊瘤胃上皮传代细胞周期分布情况和凋亡比率。结果显示:1)经0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化获得的山羊瘤胃上皮原代细胞,培养1 d开始贴壁生长,2 d开始生长较快(对数期),呈典型的"波峰"状生长,3~4 d生长最为迅速,7 d生长速度平稳(平台期)。2)经细胞免疫组化学方法的鉴定,细胞胞浆为黄褐色,即细胞角蛋白19呈阳性表达。3)膜联蛋白-V/碘化丙啶联合染色显示,随着培养时间的延长,细胞凋亡比率显著增加(P0.01)。结果表明,通过0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA的消化方法成功得到了浏阳黑山羊瘤胃上皮细胞,可为今后研究反刍动物瘤胃相关机制与功能提供模型。     

复合营养舔砖对瘤胃酶活性及消化代谢的影响

为了研究复合营养舔砖对瘤胃酶活性及消化代谢的影响,选用4头装有永久瘤胃瘘管的公牛(丹麦红牛公与闽南黄牛母的杂种一代),采用反转试验设计,对瘤胃内pH值、氨态氮(NH3-N)和瘤胃液中纤维素酶、蛋白水解酶的活性进行测定。研究表明:(1)饲喂舔砖后,瘤胃液pH值在短时间内下降,随后又缓慢升高。pH值波动幅度较大,这与复合营养舔砖的蛋白降解率较高有关。(2)舔砖对瘤胃内NH3-N浓度有较大影响,舔砖的粗蛋白含量高达38.7%,产生的NH3-N浓度比对照组高且差异显著。(3)舔砖对瘤胃液蛋白水解酶和纤维素酶的活性没有显著影响,这表明每头饲喂500g/d舔砖对牛的消化代谢功能不会产生不良影响。     

维吉尼亚霉素对于奶牛乳酸中毒及瘤胃发酵的调控综述

维吉尼亚霉素作为常用饲用抗生素能够抑制瘤胃乳酸发酵菌,改善瘤胃内不良发酵,提高饲料利用率,在高精日粮条件下可对奶牛乳酸中毒起到一定预防作用。本文总结了国内外关于维吉尼亚霉素的相关试验与文献;从奶牛酸中毒机制着手,综述其对于酸中毒的调控;并总结与分析了维吉尼亚霉素对奶牛瘤胃发酵的影响。为今后在奶牛日粮中的合理使用,实现奶牛安全饲养提供理论依据。     

不同RDP/RUP比例日粮对鲁西黄牛瘤胃发酵的影响

试验选用3头体况健康,体重350 kg左右,并安装有瘤胃瘘管的鲁西黄牛,采用3×3拉丁方试验设计,饲喂3种RDP/RUP比例分别为1.00∶1.00(A组)、1.22∶1.00(B组)、1.50∶1.00(C组)的等能等氮日粮,研究其对瘤胃内环境参数的昼夜动态变化规律的影响。结果表明:瘤胃pH受日粮RDP/RUP比值差异的影响不显著(P>0.05),A、B和C组pH变化范围分别为6.53~6.94、6.44~6.84和6.45~7.03。各组瘤胃pH均在饲喂后2~4 h达到最低值,随后逐渐上升;瘤胃液尿素氮以C组最高,A、B 2组差异不显著(P>0.05)。各组瘤胃液尿素氮在08:00饲喂后2 h达到最高值,但20:00饲喂后各组变化趋势不一致。A、B 2组瘤胃液尿素氮浓度白天较低,夜晚较高,而C组正好相反;各组瘤胃液氨氮平均浓度差异不显著(P>0.05),动态变化趋势基本相同,均在饲喂后2 h达到最高值;瘤胃微生物蛋白(MCP)平均浓度随RDP/RUP比值升高而显著提高,C组显著高于A、B 2组(P<0.05)。各组瘤胃液MCP浓度均在饲喂后2 h达到最低值。结果显示,以瘤胃液MCP浓度为衡量指标,日粮适宜的RDP/RUP比例为1.50∶1.00。     

不同培养方法对山羊瘤胃上皮细胞生长及角蛋白18表达量的影响

本试验旨在研究不同培养方法对山羊瘤胃上皮细胞生长及角蛋白18(CK18)表达量的影响。采集42日龄山羊的瘤胃上皮组织,分别采用酶消化法和组织块法对其进行体外培养。通过光学显微镜观察原代培养和传代培养阶段的细胞形态,检测第5代山羊瘤胃上皮细胞的生长曲线,并采用细胞免疫荧光法对山羊瘤胃上皮细胞进行鉴定。结果显示:1)经0.25%胰蛋白酶+0.02%乙二胺四乙酸消化获得的原代培养山羊瘤胃上皮细胞于2 d开始贴壁生长,5 d细胞开始明显增多,10 d细胞数量达到最大。2)经组织块法获得的原代培养山羊瘤胃上皮细胞于4 d开始爬出组织块,8 d细胞开始明显增多,14 d细胞数量达到最大。3)经免疫荧光染色显示2种方法获得的细胞胞浆内CK18均呈阳性表达且细胞纯度后者明显高于前者。4)组织块法获得的细胞CK18表达量显著高于酶消化法(P0.05)。综合得出,与酶消化法相比,应用组织块法可成功获得纯度更高的山羊瘤胃上皮细胞。     

添加不同水平莫能霉素对奶牛瘤胃内日粮营养物质发酵及血液生化指标的影响

[目的]该试验旨在探讨日粮中添加不同水平莫能霉素,对奶牛瘤胃内发酵、日粮营养物质降解率及奶牛血液生化指标影响。[方法]试验选取3头安装永久性瘤胃瘘管奶牛,设计采用3×3拉丁方试验设计。试验分为三组,MⅠ组为基础日粮;MⅡ组为基础日粮添加31.5mg/kg DM莫能霉素;MⅢ组基础日粮添加46.5 mg/kg DM莫能霉素。[结果]莫能霉素添加组pH值均高于对照组（P〉0.05）;添加46.5 mg/kg DM的莫能霉素后氨态氮浓度显著低于对照组（P〈0.05）;日粮中添加46.5 mg/kg DM的莫能霉素后瘤胃内乙酸发酵量显著低于对照组（P〈0.05）;日粮中添加31.5 mg/kg DM莫能霉素后丙酸发酵量高于对照组（P〉0.05）,且丙酸摩尔比例显著高于对照组（P〈0.05）;日粮DM、CP和NDF在瘤胃内有效降解率随莫能霉素添加量的增加而降低,添加组奶牛血液中的尿素氮,血浆中血糖及乳酸浓度,各组间差异不显著（P〉0.05）。[结论]日粮中添加莫能霉素可以提高牛瘤胃中的pH值,降低氨态氮浓度,显著提高丙酸摩尔比例,降低丙酸、乙酸比值,但减缓了粗蛋白的降解速度,一定程度上提高血液中尿素氮和血糖浓度。     

可降解蛋白及非蛋白氮对模拟瘤胃体外发酵、营养物质降解率的影响

以11.85%和8.38%两个水平的可降解蛋白(RDP)及非蛋白氮(NRN)作为试验因子,进行2×2试验设计。应用体外短期发酵技术,研究了RDP及RDP与非蛋白氮组合对模拟瘤胃发酵及营养物质降解率的影响。结果表明:添加NPN处理组的pH、NH3-N浓度显著(P<0.05)高于未添加NPN处理组。高RDP水平pH值、NH3-N浓度、细菌N与低RDP水平的相比,高RDP处理组显著(P<0.05)高于低RDP处理组,说明日粮中RDP水平显著提高瘤胃内pH值、NH3-N浓度和细菌N的产量。同时发现,RDP与NPN互作对瘤胃发酵影响不显著。对瘤胃发酵营养物质降解率的研究发现,反刍动物日粮中添加适量的NPN,有利于优化瘤胃内环境,提高物质成分在瘤胃中的降解率。RDP水平对模拟瘤胃发酵时干物质(DM)、酸性洗涤纤维(ADF)降解没有显著影响,但显著提高了中性洗涤纤维(NDF)的降解率。     

亚急性瘤胃酸中毒奶山羊瘤胃上皮形态结构和通透性的变化

本试验旨在研究亚急性瘤胃酸中毒(SARA)对瘤胃上皮形态结构和通透性的影响。选用体况良好、体重相近的泌乳期萨能奶山羊9只,随机分为3组(对照组、SARA组、恢复组,n=3),对照组饲喂基础饲粮[非纤维性碳水化合物与中性洗涤纤维比(NFC/NDF)=1.40],SARA组和恢复组先后饲喂NFC/NDF为1.40、1.79、2.31、3.23的4种试验饲粮诱导SARA发生,每种饲喂15 d,恢复组奶山羊待SARA诱导成功后自由采食青干草30 d。对照组奶山羊分别在饲养30、60(与SARA组3只同时)和90 d(与恢复组3只同时)各屠宰1只。采集瘤胃腹囊部上皮组织用于石蜡切片、透射电子显微镜观察及尤斯灌流系统(Ussing chamber)研究。结果表明:1)组织切片结果显示,瘤胃上皮角质层厚度SARA组显著高于对照组和恢复组(P0.05),恢复组显著低于对照组(P0.05);颗粒层厚度对照组显著高于SARA组和恢复组(P0.05),但SARA组和恢复组之间无显著差异(P0.05);棘突层厚度3组之间无显著差异(P0.05);上皮总厚度恢复组显著低于对照组和SARA组(P0.05),但对照组与SARA组之间无显著差异(P0.05)。透射电子显微镜结果显示,SARA组瘤胃上皮紧密连接被破坏,细胞间隙增大,棘状层细胞线粒体出现降解并出现空泡。2)与对照组相比,SARA组和恢复组瘤胃上皮短路电流(Isc)、组织导电性(Gt)和辣根过氧化物酶(HRP)流速显著升高(P0.05),跨膜电位差(PD)显著降低(P0.05)。综合得出,SARA破坏了奶山羊瘤胃上皮形态结构的完整性,使瘤胃上皮通透性增加,导致瘤胃上皮屏障功能长期受损。     

瘤胃甲烷生成过程中微生物之间的相互关系

反刍动物瘤胃含有甲烷菌,是主要的甲烷(methane,CH4)排放源,甲烷菌利用饲料发酵过程中生成的氢和CO2作为主要的电子受体和供体通过还原反应生成甲烷,在瘤胃功能性生态生境(niche)中发挥重要作用.除甲烷菌以外,其他瘤胃微生物也影响甲烷产量.瘤胃微生物总体来说可分为产氢微生物(hydrogenogens)和耗氢...     

奶牛亚急性瘤胃酸中毒研究进展

亚急性瘤胃酸中毒（SARA）作为一种普遍存在于大多数牛场的奶牛健康问题,目前已经得到人们充分认识。大量的研究结果表明,患SARA的奶牛产奶量会普遍降低,损害母牛健康,强制性淘汰率增加,最终影响生产者的经济利益。作者就目前与奶牛亚急性瘤胃酸中毒有关的饲养管理及其预防措施进行综述,希望对奶牛生产者如何正确的预防亚急性瘤胃酸中毒有所帮助。     

Morphometrical Features of the Corneal Epithelium in Mammals

The study has been conducted on 40 species of mammals included in different taxonomic orders: 10 carnivores (felines and canides), 13 primates and 17 herbivores (artiodactyles, perisodactyles and proboscideans). Domestic, experimental and wild animals have been included in the sample. The purpose of the study is to offer new data regarding morphometric aspects of the epithelium of the cornea of mammals. We also aim to establish the relationships and differences between the different epithelia studied and to determine the morphometric characteristics which best define the epithelium of the different species under study. The results obtained have demonstrated the existence of correlations between thicknesses, number of cellular layers and number of the epithelial cells in the different groups. It has also been established that the variants in thickness and number of layers define and characterize the epithelia. Finally, the study reveals that morphometric characteristics of the epithelium of primates and carnivores have more similarities than those of herbivores.     

瘤胃灌注不同来源淀粉对牦牛瘤胃发酵及血清生化指标的影响

本试验旨在探讨瘤胃灌注不同来源淀粉对牦牛瘤胃发酵及血清生化指标的影响.选用3头装有永久性瘤胃瘘管、体况良好、体重相近[( 244±15) kg]的去势牦牛,采用3×3拉丁方试验设计,对照组按照1.2倍维持能量水平饲喂单一燕麦草(未灌注淀粉),玉米淀粉组和抗性淀粉组分别在对照组的饲喂基础上瘤胃灌注玉米淀粉和抗性淀粉900 g/d.试验分为3期,每期试验18 d(15 d预试期和3d采样期).结果表明:与对照组相比,灌注玉米淀粉和抗性淀粉显著降低瘤胃pH(P ＜0.05),极显著降低瘤胃氨态氮含量(P＜0.01),灌注4h后显著提高瘤胃微生物蛋白质和挥发性脂肪酸含量(P＜0.05).在灌注后4和6h,玉米淀粉组和抗性淀粉组血糖含量显著高于对照组(P＜0.05),血清胰岛素、胰高血糖素和甘油三酯含量与对照组相比差异不显著(P＞0.05),血清尿素氮含量显著低于对照组(P＜0.05).结果提示,瘤胃灌注玉米淀粉和抗性淀粉,降低了牦牛瘤胃氨态氮含量,提高了微生物蛋白质和挥发性脂肪酸含量,提高了血糖含量,降低了血清尿素氮含量,说明牦牛能有效利用不同来源的淀粉.     

瘤胃代谢的神经内分泌调节

反刍动物试验证明,瘤胃液含有17β-雌二醇（E2）、孕酮（P4）和睾酮（T）。E2抑制瘤胃代谢,而P4和T则提高瘤胃代谢水平。这些甾体类激素通过与瘤胃微生物细胞的相应受体结合而直接影响瘤胃内代谢变化。瘤胃液中只发现甲状腺激素的T3,而未检出T4,T3可促进瘤胃微生物代谢活动增强。豆科牧草和大豆含有植物雌激素异黄酮,可提高瘤胃内容物的菌体蛋白、TVFA和氨氮水平。瘤胃液及唾液内发现肽类激素如胃泌素。饲料蛋白在瘤胃内降解可产生一些活性肽,如外啡肽可能起肽类激素的生理作用。半胱胺可耗竭下丘脑和肠道的生长抑素,从而提高生长激素等水平,使瘤胃内代谢及蛋白质合成显著加强。因此,初步认为,瘤胃代谢受神经内分泌的调节,但尚有若干问题有待进一步试验阐明。     

不同牧草在肉羊瘤胃中的降解特性研究

为研究不同牧草干物质(DM)及蛋白质(CP)在肉羊瘤胃中的降解规律,以3头安装有永久性瘤胃瘘管的杜×寒肉用绵公羊为试验动物,采用半体内法对13种牧草的DM和CP的降解率和降解参数进行测定。结果表明:苜蓿DM和CP在瘤胃内各个时间点的降解率最高(P<0.05);沙打旺、狗尾草、燕麦草、草地早熟禾72 h降解率显著高于其他牧草(P<0.05)。13种牧草DM的可降解部分和有效降解率的高低顺序与DM在不同时间点的降解高低顺序类似。豆科苜蓿和沙打旺CP的有效降解率最高(P<0.05);禾本科燕麦草、象草、草地早熟禾和狗尾草CP的有效降解率显著高于其他禾本科牧草(P<0.05)。苜蓿慢速降解部分的降解速率显著高于其他牧草(P<0.05)。由此得出,豆科牧草苜蓿、沙打旺DM和CP的降解率高于禾本科牧草。燕麦草、草地早熟禾、象草、狗尾草的降解率较高;冷地早熟禾、多叶老芒麦、羊草、披碱草的降解率居中;芨芨草、中华羊茅和芦苇的降解率偏低。