肌肉生成抑制素（MSTN）基因研究进展

肌肉生成抑制素(myostatin,MSTN),又称GDF-8（growth differentiation factor 8),是控制肌肉生长的负调控因子,也是近些年研究发现的又一影响畜禽瘦肉率、改善肉质性状的重要营养基因。它通过抑制MyoD家族成员转录活性负向调控肌细胞的生长发育,它的表达量与肌肉重量的变化呈负相关。本研究就MSTN的发现、基础研究及其在各种动物中的研究进展进行了综述,并讨论了该基因的应用前景。     

日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中FAS基因表达的影响

选择年龄、体质量相近的杂交母羊(萨福克♂×小尾寒羊♀)24只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白水平的日粮:中蛋白日粮(150 g.d-1)、低蛋白日粮(112.5 g.d-1)和高蛋白日粮(187.5 g.d-1)。采用半定量RT-PCR的方法,检测日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中FAS基因表达的影响。结果表明:日粮的蛋白质水平影响绵羊腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪和半腱肌组织中FAS基因的表达,随着日粮蛋白质水平的升高FAS表达量降低。FAS基因表达量在各组织间有差异,腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪中,中蛋白组和低蛋白组间表达差异不显著(P0.05),高蛋白组显著低于中蛋白组和低蛋白组(P0.05);在半腱肌组织中,中蛋白组与高蛋白组和低蛋白组间均差异显著(P0.05),高蛋白组极显著低于低蛋白组(P0.01)。     

肌肉生成抑制素基因的研究进展

肌肉生成抑制素(MSTN)属TGF-β超家族成员之一,主要分布在骨骼肌,对肌肉生长起负调控作用,MSTN的研究在畜牧业及医学领域具有重要意义.作者就MSTN的发现、分布、结构、生物学功能、作用机制及影响MSTN的因子如生长激素、生长分化因子11、T-cap蛋白、卵泡发育素、类胰岛素高亲和性结合蛋白、生肌决定因子等进行了综述,并展望了MSTN研究的发展趋势和应用前景.     

牛肌肉生成抑制素基因功能区的克隆与原核表达

根据GenBank中牛肌肉生成抑制素（MSTN）基因序列设计了1对引物，在引物两端分别加EcoRⅠ和XhoⅠ识别位点。利用RT—PCR技术扩增出了牛MSTN功能区序列。分别构建克隆和原核表达载体，酶切、PCR鉴定及测序分析表明，该基因功能区序列的克隆载体和原核表达载体已成功构建。筛选阳性菌，经IPTG诱导，牛MSTN基因功能区在大肠埃希氏菌中成功表达。     

滩羊肌肉抑制素(MSTN)基因的多态性研究

为了分析宁夏滩羊肌肉抑制素(MSTN)基因的遗传多样性及其与生长性状的相关性,试验对滩羊群体的98个个体的MSTN基因进行PCR-RFLP分析。结果表明:MSTN基因引物1在所选群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态,多态信息含量为0.301 5,属于中度多态,2个等位基因分别为:A、a,3种基因型分别为:AA、Aa、aa,有效等位基因数为1.586 9,杂合度为0.369 8。MSTN基因引物2也处于Hardy-Weinberg平衡状态,多态信息含量为0.366 4,属于中度多态,2个等位基因分别为:A、B,3种基因型分别为:AA、AB、BB,有效等位基因数为1.934 7,杂合度为0.483 1。     

日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中IGF-Ⅰ基因表达的影响

选择年龄、体质量相近的杂交母羊(萨福克♂×小尾寒羊♀)24只,随机分为3组,分别饲喂不同蛋白水平的日粮(中蛋白日粮,低蛋白日粮和高蛋白日粮).采用半定量RT-PCR方法,检测日粮不同蛋白水平对绵羊脂肪和肌肉中IGF-Ⅰ基因表达的影响.结果表明:日粮的蛋白质水平影响绵羊腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪和半腱肌组织IGF-Ⅰ基因的表达,随着口粮蛋白质水平的升高IGF-Ⅰ表达量增加.但表达具有组织特异性,在腹部皮下脂肪、肠系膜脂肪中,中蛋白组和高蛋白组均显著高于低蛋白组(P<0.05),在半腱肌组织中,高蛋白组极显著高于低蛋白组(P<0.01),而中蛋白组与高蛋白组和低蛋白组间均无显著差异(P>0.05).     

日粮蛋白水平对肉用鹧鸪胸肌肉品质的影响

鹧鸪肉厚、骨细、内脏小、脂肪少 ,是一种优质的营养滋补品和野味珍品。特别是近几年来 ,随着人们生活水平的提高 ,鹧鸪作为高档营养保健品已愈来愈受到青睐 ,市场需求也越来越大 ,故饲养规模也越来越大 ,但对肉鸪的一些基础研究工作做得并不多。本研究在饲养试验的基础上做了一些测定工作 ,现把方法与结果等列出如下 ,以供同行参考。1　材料与方法1.1　饲养动物 :选用成新农场的 1日龄肉用鹧鸪 15 0羽 ,逐羽称重后随机分成 3组 ,每组 5 0羽。1.2　试验设计与日粮组成 :饲养分三阶段 ,即 1～ 30日龄为雏鸪阶段 (前期 ) ,31～ 70日龄为中鸪阶…     

饲粮不同蛋白水平对麒麟母鸡肠道发育的影响

试验旨在研究饲粮不同蛋白水平对麒麟母鸡肠道发育的影响,确定肠道发育的适宜粗蛋白质水平.选取200只1日龄体重相近且健康的麒麟母鸡,随机分为5组,每组4个重复,每个重复10只鸡.配制5个蛋白水平(15％、17％、19％、21％、23％)饲粮进行饲喂试验,能量水平均为12.40 MJ/kg.饲养期12 w.结果 显示,日粮...     

肌肉生成抑制素基因的研究

动物肌肉生成抑制素(Myostatin,MSTN)是Mcpherron等研究小鼠转化生长因子-β(TGF-β)超家族时发现的一种新的生长因子。当时命名为生长分化因子-β(GDF-β),后经研究发现,其对骨骼肌的生长具有负调控作用,因此改名为肌肉生成抑制素[1-3]。该基因编码的蛋白质对骨骼肌有负调控作用,动物缺乏MSTN时出现肌肉增大,骨骼肌肌群分布广,而且不增生脂肪等现象。MSTN主要在胚胎期的骨骼肌中表达,它的缺失使一些动物表现双肌性状[4-7]。1MSTN基因的发现及组织分布Mcpherron等(1997)根据TGF-β超家族的保守区设计一对简并引物,通过PCR扩增…     

高铜日粮对肉鸡肝脏Trx2蛋白表达的影响

将200羽1日龄Cobb商品代肉鸡随机分为4组,各组日粮中铜含量分别为:对照组(Ⅰ组)11 mg/kg、试验Ⅱ组110 mg/kg、试验Ⅲ组330 mg/kg、试验Ⅳ组550 mg/kg。饲养至10、30、50 d时每组各取5只鸡用于采集肝脏样品,提取肝脏总RNA用RT-PCR法测定Trx2基因m RNA在肝脏中的表达量,用蛋白质印迹法检测Trx2蛋白表达量。结果显示:日粮铜含量为11 mg/kg、110 mg/kg和330 mg/kg时,随着试验时间的延长,肝脏Trx2基因表达升高,但差异不显著(P0.05),而铜含量为550 mg/kg时,Trx2基因表达量降低且50 d时差异显著(P0.05);随着试验时间的延长,各试验组的Trx2蛋白表达量均升高,且330 mg/kg和550 mg/kg组在50 d时差异显著(P0.05)。试验表明,饲喂高铜日粮可导致线粒体型硫氧还蛋白2(Trx2)mRNA在肝脏中的表达量先升高后降低,蛋白表达量升高。     

不同小麦日粮对肉仔鸡肉质、脂肪酸合成酶mRNA与脂蛋白脂肪酶mRNA表达的影响

本文旨在研究不同小麦日粮对肉仔鸡生长、肉质及脂肪酸合成酶(FAS)mRNA与脂蛋白脂肪酶(LPL)mRNA表达的影响。选用300只艾维因肉仔鸡公雏,随机分为5组,每组4个重复,每个重复15只鸡,5组分别饲喂玉米日粮和4种水溶性阿拉伯木聚糖(WSAX)含量不同的小麦日粮,试验期为6周。结果表明:①随着小麦日粮中WSAX含量的增加,肉仔鸡的生长明显降低;②小麦日粮显著增加了肌肉持水力,并随小麦WSAX含量增加而升高的趋势显著(P<0.01),剪切力也随之增加(P<0.05)。饲喂小麦日粮的肉仔鸡其肉色显著低于玉米日粮组(P<0.01),各小麦日粮组间差异不显著。当小麦WSAX含量较高时,小麦日粮可以显著降低肉仔鸡肌肉脂肪和胆固醇含量(P<0.05)。各处理间胸肌、腿肌含水量无差异(P>0.05);③小麦日粮显著降低FASmRNA在肉仔鸡肝中的表达量(P<0.01),并且随日粮WSAX含量增加而表达水平降低的趋势明显。各处理间LPLmRNA表达量的差异不显著(P>0.05)。本研究表明:①当小麦中WSAX含量较低时,对肉仔鸡增重和肉质的影响较小,是玉米理想的替代品;②当小麦中WASX含量较高,则会严重影响肉仔鸡的增重、肉质及FASmRNA在肝脏中的表达,不宜在肉仔鸡日粮中大量添加。     

秦川牛生长抑制素基因克隆及原核表达研究

 试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。提取秦川牛的骨骼肌总RNA,根据基因库中海福特牛肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上Bam HⅠ和Xho Ⅰ酶切位点及保护碱基,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后经Bam HⅠ和Xho Ⅰ双酶切,将目的片段插入到PGEX-4T-1中,构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,将重组表达质粒转化至Rosetta(DE3)中诱导表达。结果表明,扩增的秦川牛肌肉生长抑制素全长基因1 128 bp,克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与GenBank上发表的一致;成功构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,经IPTG诱导,表达出了GST-M融合蛋白,用GST标签抗体做Western blotting印记证明产物大约69 ku,与预期大小相符,并在Rosetta（DE3）菌中成功的进行融合蛋白表达。     

猪肌肉生长抑制素基因的克隆及原核表达

本试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。根据基因库肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点及保护碱基,提取汉普夏猪的骨骼肌总RNA,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后EcoRⅠ和SalⅠ双酶切,克隆到pET-30a( )中,构建原核表达载体pET-30a-M,将重组表达质粒转化至E.coliBL21(DE3)中,诱导表达。结果表明,成功扩增出肌肉生长抑制素全长基因;克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与国外报道的完全一致;成功构建原核表达载体pET-30a-M;经IPTG诱导,表达出了6×His-M融合蛋白,用组氨酸标签抗体做Western印记证明产物大约48 ku,与预期大小相符,肌肉生长抑制素蛋白在大肠杆菌中成功的进行了表达。     

不同品种肉鸡肌肉的组织学特性研究

采用冰冻切片法、借助TIGER细胞图像分析仪对南海麻黄鸡、江西鸡、黄鸡M系、黄鸡N系、黄鸡K系的胸部肌肉的肌纤维直径和肌纤维密度进行了测定。结果表明:①肌纤维直径由小到大依次为江西鸡(30.1±3.1)μm、南海麻黄鸡(35.3±7.8)μm、黄鸡N系(36.7±1.9)μm、黄鸡K系(37.2±0.7)μm、黄鸡M系(38.1±3.1)μm,江西鸡与黄鸡N系、黄鸡K系之间的差异均达到极显著水平(P<0.01)。②肌纤维密度由小到大依次为黄鸡K系(424.5±39.3)根/mm2、M系(465.5±91.9)根/mm2、N系(471.5±63.0)根/mm2、南海麻黄鸡(568.1±59.7)根/mm2和江西鸡(655.5±182.6)根/mm2。③优质肉鸡的肌纤维直径和密度与肌肉品质之间有密切关系。     

肉种鸡饲养方式对子代胚肝蛋白表达谱的影响

挑选40周龄体况良好的产蛋三黄肉种鸡200只,随机分为对照组(笼养)和试验组(平养),饲喂相同的肉种鸡日粮.收集受精种蛋各300枚并孵化,分别取9、14、19胚龄和出壳时的肝脏,经2D-PAGE分离后,对经胶体考马斯亮蓝G-250染色的图像用PDquest7.3软件进行差异表达分析,取差异表达的蛋白质斑点进行胶内酶切和MALDI-TOF-MS分析.结果表明,试验组和对照组在9、14和19胚龄时,胚质量和肝质量均无显著差异;出壳时,试验组胚质量、肝质量均显著小于对照组(P<0.05).蛋白表达谱分析发现29个在试验组和对照组间表达量存在两倍以上差异的蛋白斑点,其中22个得到鉴定.在这些被鉴定的蛋白中,大多涉及到机体内基础代谢的酶、能量产生及信号传导等.     

抑肌素基因mRNA在猪肌肉组织表达差异的研究

抑肌素基因(Myostatin，MSTN)是肌肉生长抑制素基因的简称，又称GDF-8(Growth and Differential Factor-8)基因，具有抑制骨骼肌生长的作用，是骨骼肌生长的负调控因子。该基因在动物分子水平定向育种、提高产肉性能上具有极大的应用前景。研究发现，在牛和绵羊的心肌、猪的乳腺及鱼类的多种组织中均发现有其表达。在调节脂肪积累、参与骨折愈合、调节排卵、心脏发育及心肌的组织修复、以及乳腺的发生和泌乳等过程中可能也具有重要作用。     

全脂大豆对肉仔鸡粗蛋白代谢率影响的研究

采用生、熟全脂大豆和对照日粮分7组饲喂出壳1日龄艾维茵(Arian)肉仔鸡,研究生、熟全脂大豆对肉仔鸡粗蛋白代谢率的影响.结果表明饲粮粗蛋白(CP)代谢率在试验前、后期饲喂生大豆饲粮的肉仔鸡显著低于饲喂熟大豆和后期饲喂对照饲粮的肉仔鸡(P＜0.01).