牛大力种子发芽研究

［目的］为牛大力种子检验和种子质量标准的制定提供参考。［方法］分别进行不同种子处理在同一光照培养箱中的发芽试验和不同基质种子发芽试验,研究不同种子处理及河沙、赤红壤和石灰土等不同萌发基质对牛大力种子萌发的影响。［结果］清水浸种为较好的牛大力种子处理,种子平均发芽率达61.25％;其次为40℃水浸种,种子平均发芽率为59.75％;而磨伤后清水浸种,种子平均发芽率仅42.50％;不磨皮、不浸种的对照组种子平均发芽率仅35.50％。河沙为较好的牛大力种子萌发基质,播种后35d就开始发芽,种子平均发芽率达55.00％;其次为石灰土,播种后38d开始发芽,种子平均发芽率达43.50％;而赤红壤播种后40d陆续发芽,种子平均发芽率仅37.00％。［结论］牛大力种子直接用清水浸种处理后发芽效果较佳;用河沙作萌发基质可以得到较好的发芽效果。     

花榈木胚轴愈伤组织的诱导及植株再生

［目的］通过愈伤组织诱导途径,建立快速高效的花榈木再生体系。［方法］花榈木成熟种子在MS培养基中萌发获得无菌苗,以幼苗的胚轴为外植体诱导愈伤组织,经继代后进一步诱导不定芽和生根。［结果］诱导花榈木愈伤组织的最适培养基为MS＋ 1.0 mg/L 2,4 D＋0.5 mg/L KT,诱导率达96.7％;诱导愈伤组织分化不定芽的培养基为MS＋0.5 mg/L NAA＋0.1 mg/L TDZ,其不定芽诱导率为85.0％;平均每块愈伤产生不定芽6.2个;生根的最适培养基为1/2WPM＋0.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L IBA,生根率为88.9％。炼苗移栽后,成活率可达85.0％。［结论］花榈木胚轴愈伤组织诱导途径的植株再生是一套快速高效的离体再生体系,可为花榈木种质资源保存、转基因、遗传育种等研究提供重要参考。     

金花葵籽油中脂肪酸组成的GC-MS分析

［目的］对金花葵籽油中脂肪酸的组成成分进行分析。［方法］以石油醚为提取剂,采用索氏提取法提取油脂,经KOH-甲醇甲酯化处理后,以气相色谱-质谱（GCMS）联用技术进行分析。［结果］金花葵籽油中共检测出6种脂肪酸,其中不饱和脂肪酸量占68.91%。［结论］金花葵籽油中脂肪酸的主要组成是不饱和脂肪酸。     

冷冻保存对家蚕精液乳酸脱氢酶活性的影响

对家蚕冷冻精液乳酸脱氢酶活性进行了研究,结果表明：家蚕精液LDH测定过程中的最适底物浓度在0．5—0．8mmol／L之间;LDH抽提液在4℃存放随时间延长其酶活性下降,应在抽提后的15h内测定其活性;家蚕精液经过冷冻后精子受损严重,精子中的LDH向精清中溢出,导致精子中LDH活性下降及精清中LDH活性上升;-80℃保存的精液在90d后其精子中的酶活性仅为冷冻前的23％,而液氮保存的精液虽然在冷冻1d后酶活性下降为冷冻前的43％,但是在其后的90d中酶活性下降很少,可作为家蚕精液长期保存的冷存方式。     

均匀设计法优化短果杜鹃高效快繁体系

［目的］建立短果杜鹃高效快繁体系,实现短果杜鹃的高效离体快繁。［方法］以短果杜鹃嫩茎段为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基。［结果］最适合嫩茎段的腋芽萌发及生根的最佳培养基为MS（改良）＋IAA 0.15 mg/L ＋IBA 0.30 mg/L ＋GA3 3.00 mg/L,再生率达92%以上。以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在35 d的1个培养周期内增殖倍数平均达45以上。［结论］该研究建立了短果杜鹃的高效快繁体系,为长白山高山杜鹃的开发利用和工厂化育苗提供了依据。     

枯草杆菌重组水蛭素的分离纯化工艺研究

［目的］优化枯草杆菌重组水蛭素的分离纯化工艺。［方法］采用系列预处理、初步层析和精细纯化试验。［结果］优化的分离纯化工艺为：发酵液经离心、三氯乙酸处理、超滤浓缩脱盐,再上阴离子交换柱,或用乙醇处理后贮存,为离子交换备用。初步层析介质用阴离子交换QSepharoseF.F.,缓冲体系为TrisHCl（pH值8.0）,体系电导率为6.0mS/cm,上样量为240.0ATU/ml介质,产品纯度为70.2％,回收率达90.0％。用SephacrylSi100凝胶过滤柱精细纯化水蛭素,在一定流速范围内,流速对纯化效果影响不大,上样量可为10.0ml,得到的纯品纯度可达95.1％,得率为93.0％,SDSPAGE电泳为单一条带。［结论］可为进一步工业化分离纯化水蛭素研究提供借鉴。     

水蜡果实天然红色素的提取工艺研究

［目的］探索水蜡果实天然红色素的最佳提取工艺条件。［方法］以水蜡果实为原料,通过色素提取条件的单因素试验,考察乙醇浓度、提取温度、提取时间与液料比等因素对色素提取效果的影响,研究从水蜡果实中提取天然红色素的最佳工艺条件,探讨超声辅助对色素提取效果的影响。［结果］水蜡果实天然红色素的最大吸收波长为224 nm;该色素的最佳提取工艺条件：以40％乙醇为提取液,提取温度为60 ℃,提取时间为1.5 h,液料比为35∶1。天然红色素的提取率并不随着超声辅助提取时间的改变而有明显变化,说明超声辅助提取对色素提取率无明显影响。［结论］该研究为水蜡果实的综合利用提供新的途径及参考。     

冷冻保存对家蚕精液乳酸脱氢酶活性的影响

时家蚕冷冻精液乳酸脱氢酶活性进行了研究,结果表明:家蚕精液LDH测定过程中的最适底物浓度在0.5～0.8 mmol/L之间;LDH抽提液在4℃存放随时间延长其酶活性下降,应在抽提后的15 h内测定其活性;家蚕精液经过冷冻后精子受损严重,精子中的LDH向精清中溢出,导致精子中LDH活性下降及精清中LDH活性上升;-80℃保存的精液在90d后其精子中的酶活性仅为冷冻前的23%,而液氮保存的精液虽然在冷冻1 d后酶活性下降为冷冻前的43%,但是在其后的90d中酶活性下降很少,可作为家蚕精液长期保存的冷存方式.     

外源DNA诱导家蚕遗传变异的研究

以１５个经济性状较好的家蚕品种为受体、４个蓖麻蚕品种的丝腺体ＤＮＡ及含抗菌肽的质粒ＤＮＡ为供体，采用注射处女蛾交尾囊的方法，以及取腹卵浸泡ＤＮＡ后再孤雌生殖的方法进行导入。     

黔产竹节参总黄酮苷的提取与测定方法研究

［目的］探讨黔产竹节参黄酮苷的提取与检测方法。［方法］以80%乙醇为溶剂,研究了黔竹节参黄酮苷的提取方法,并建立了竹节参黄酮苷的测定方法。［结果］黔产竹节参黄酮苷的提取率为0.981 8%,精制黄酮苷的含量为96.2%;采用分光光度法检测黔产竹节参黄酮苷浓度,对照样品回归方程y=-0.003 00＋0.011 01x,r=0.999 30,对照样品的加标回收率为100.36%。［结论］该方法操作简便快速准确,能满足黔产竹节参中总黄酮苷的提取和检测的要求。     

家蚕人工授精关键技术的研究

1材料与方法 1．1材料家蚕品种为菁松、皓月,由该研究室提供;解剖镜为OLYMPUS SZ51;精子细胞采集所用器材均为自制。Penicillin—Streptomycin和胰蛋白酶购自Invitrogen公司。TC-100培养基购自Sigma公司。     

种公牛感染温氏枝原体后的生殖健康检测研究（英文）

[目的]研究种公牛感染温氏枝原体后的生殖健康。[方法]通过血常规和生殖健康检测等方法对药物治疗前后种公牛的血液和精液品质进行试验研究。[结果]在未给予磷酸伯氨喹治疗前,病牛有轻度的贫血,血液涂片中可见大量的温氏枝原体;病牛阴囊壁肿大,睾丸变软,精液品质下降,精子活力降低,初级和次级畸形的精子比例增大;药物治疗后,温氏枝原体很快从血液中消失,临床症状逐渐缓解,顺利通过了1个月后生殖健康检测。[结论]该研究为进一步研究温氏枝原体与公牛生殖机能下降之间的关系奠定了基础。     

天蛾科雌性生殖系统形态解剖研究

本文描述了山东省常见的13种天蛾雌性生殖系统的形态构造。天蛾科雌性生殖系统具有鳞翅目雌性生殖系统的一般构造。其特点是:1.侧输卵管长或等于中输卵管;2.附腺着生于生殖腔中部;3.导精管从交配囊基部生出,连在生殖腔端部,开口与受精囊导管口相对;4.交配囊形状与精珠形态相一致。天蛾授精以精珠形式进行。同时,本文还对交配囊中精珠形态进行了描述。     

废弃桑蚕种卵中卵磷脂的提取·鉴定与检测

[目的]为进一步研究桑蚕种卵磷脂的实用化提取工艺提供理论依据。[方法]采用丙酮脱脂和含水乙醇超声辅助提取的方法从废弃桑蚕种卵中提取卵磷脂粗提物,经进一步纯化后进行结构鉴定和含量检测。[结果]经定性鉴定和定量检测可知粗提物中含有34%左右的磷脂酰胆碱。该提取方法简便可行,所用试剂毒性低,价廉且易获得。[结论]从废弃的桑蚕种中提取到具有较高利用价值的卵磷脂,为废弃蚕种卵资源的再利用开辟了一条途径。     

珍贵绢丝昆虫天蚕雌性内生殖器官的结构及其发育

报道了天蚕幼虫、蛹和成虫雌性内生殖器官结构及其发育的系统观察结果．幼虫卵巢大小随虫龄增长而增大．其中以５龄取食期增长最快，老熟结茧后增长明显减缓．蛹（化蛹第４天开始）和成虫内生殖系统由卵巢、侧输卵管、中输卵管、导精管、交配囊、受精囊和附腺等组成．蛹期各内生殖器官大小一般随日龄增长而增大；卵巢鲜重随日龄增长的趋势及同一卵巢管中卵室体积自顶端至基端增长的趋势，均可用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ曲线较好地加以描述     

“防僵灵Ⅱ号”对家蚕真菌病的防治效果研究

[目的]有效控制家蚕真菌病的发生与蔓延。[方法]研究蚕药"防僵灵Ⅱ号"对家蚕真菌病的防治效果和对家蚕的生长发育、全茧量、茧层量的影响。[结果"]防僵灵Ⅱ号"在稀释500倍以上时对家蚕常见真菌病的防治效果达100%,对家蚕无明显毒副作用。[结论]"防僵灵Ⅱ号"对于家蚕真菌病具有良好的防治效果,同时是一种对家蚕安全的药剂。     

南美白对虾精子超低温冷冻保存技术研究

【目的】建立一种南美白对虾精子超低温冷冻保存方法,为南美白对虾优良种质的长期保存奠定基础。【方法】利用胰蛋白酶消化法获得游离的南美白对虾精子,分别使用灭菌天然海水、无钙人工海水、3％等渗NaCl溶液和0．9％生理盐水作为基础液,并以不同浓度的二甲基亚砜（DMSO）、甘油、甲醇及其与海藻糖的混合溶液作为抗冻剂,在4种不同降温程序下超低温冷冻保存南美白对虾精子,然后在不同的温度下复苏冷冻精子,以伊红-苯胺黑染色法检测精子存活率。【结果】使用1．00g／L胰蛋白酶消化精荚5min能获得大量游离的南美白对虾精子,以灭菌天然海水为基础液,以10％DMSO和0．25mol／L海藻糖为抗冻剂,在P．1降温程序（4℃平衡30min,以．5℃／min的速率降至-20℃;-20℃平衡5min,以-10℃／min的速率降至-80℃;-80℃平衡5min,然后置于液氮中保存）下超低温冷冻保存南美白对虾精子,经37℃水浴复苏后精子存活率最高。【结论】建立的南美白对虾精子超低温冷冻保存方法具有可行性,为南美白对虾精子冷冻保存库的建立提供了技术支撑。     

Sry基因探针FISH检测奶牛XY精子纯度

为探讨荧光原位杂交技术（FISH）在评价奶牛精子纯度方面的应用价值，制备地高辛标记Sry基因探针，对分选X、Y精子及常规精子标本进行RNA水平的精子荧光原位杂交分析。结果显示，荧光原位杂交测定分选X、Y精子及常规精子纯度分别为94.6%、93.3%、50.3%，与对应精子纯度比较差异不显著（P>0.05），杂交信号多出现在精子尾部中段。可见：建立的Sry基因探针FISH方法评价奶牛精子纯度鉴定结果准确可靠，为其他精子纯度评价方法提供可靠的技术支持。     

野桑蚕中肠组织cDNA文库的构建及丝氨酸蛋白酶基因片段的克隆与序列分析(英文)

[Objective] The aim of the study is to construct cDNA library of midgut tissue of wild silkworm and isolate the serine protease gene. [Method] The midgut tissue-specific cDNA library of wild silkworm was constructed via cDNA Library Construction Kit (TaKaRa), then the serine protease gene was cloned via sequencing of the yielded cDNA library. [Result] The titer of cDNA library reached 6.2×105 pfu/ml, average insert size was about 1.2 kb. The serine protease gene cDNA fragment was obtained from colony sequencing (Accession No: EU672968). The nucleotide sequence of the cloned 854 bp fragment encodes 284 amino acid residues. Homology analyses showed some homology between putative amino acid sequence of the cloned fragment and amino acid sequences of serine proteases from other ten insects. [Conclusion] The results may avail to reveal the resistance of silkworm and wild silkworm to exotic intrusion.     

宿主湿度环境对球孢白僵菌致病力的影响

【目的】研究宿主湿度环境对球孢白僵菌致病力的影响,为采取适当防治措施以减少白僵病对蚕茧生产的危害提供参考依据。【方法】以广西象州蚕区球孢白僵菌感染家蚕获得的白僵病蚕尸体,观察不同湿度环境中白僵病蚕尸体形态的变化情况,并每隔15d进行一次分生孢子致病力测试。【结果】在25℃下的3种湿度环境（60%RH、75%RH和90%RH）中,白僵病蚕尸体在同一宿存时间内,球孢白僵菌活力与宿存湿度关系密切,在60%RH中宿存的蚕体保存较完好,60d后仍然可见淡黄白色的分生孢子,尸体质硬;随湿度增加,宿存病原活力逐渐降低。3种湿度条件下球孢白僵菌在2龄病蚕尸体中宿存30d内,对家蚕仍有很强的致病性,其半致死时间（LT50）分别为2.915、3.071和5.222d;在60%~75%RH条件下,宿存45~60d的球孢白僵菌对家蚕仍具有一定的致病力;而在90%RH条件下,宿存45d后球孢白僵菌分生孢子数量急剧下降,无法测定其致病力。【结论】球孢白僵菌在病蚕体中宿存60d内对家蚕的致死率仍然很高,因此及时清除病蚕尸体并使尸体病原性灭活,可降低白僵菌的二次感染。