牡丹愈伤组织的诱导及愈伤褐化抑制的研究

以凤丹为试验材料,比较不同外植体,不同基本培养基,不同激素组合对愈伤诱导率的影响;结果表明,以子叶和胚轴为外植体,在培养基1/2改良WPM+2,4-D1.0 mg·L-1+6-BA1.0 mg·L-1+水解酪蛋白500mg·L-1+L-谷氨酰胺150 mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1的培养基中诱导率最高,可达100%。同时研究了愈伤褐化抑制,结果表明,以1/2改良WPM为最佳基本培养基;PVP和植物凝胶的效果最好,褐化指数分别为31.11%与30.00%;黑暗、低温、较短的继代周期都能不同程度的减缓愈伤褐化。     

滇牡丹愈伤组织继代培养中的褐化防治

以滇牡丹Paeonia delavayi Franch成熟种胚诱导出的愈伤组织为试验材料,研究了PVP、VC、结冷胶、AgNO3、水解乳蛋白(LH)5种抗褐化剂在牡丹愈伤组织继代培养过程中的褐化控制作用和对愈伤组织生长量的影响。结果表明:愈伤组织褐化主要发生在第一次继代转接后的10 d内;在愈伤组织两次继代培养过程中,3.5g/L的结冷胶处理抗褐化效果最好,LH和AgNO3在整个继代过程中也表现了一定的抗褐化性,PVP和VC抗褐化性能相对较差。AgNO3对愈伤组织生长具有明显的促进作用。     

宣木瓜疏松愈伤组织的诱导

为了获得疏松、生长旺盛的细胞,以建立宣木瓜细胞的悬浮培养体系,取宣木瓜的不同部位作为外植体接种于MS培养基,就不同的培养条件对其诱导和生长状况的影响情况进行了试验与比较分析。结果表明:黑暗中2,4-D(1 mg.mL-1)+KT(0.1 mg.mL-1)对茎段的诱导效果较好,其次是嫩叶。在继代培养过程中,就不同培养基组分及培养条件对其生长状况的影响情况进行了试验与比较分析。结果发现:在弱光照、3%的蔗糖条件下及pH为5.8～6.0的范围内,宣木瓜细胞生物量的增长率达到最大值;合适的继代培养周期为15～20 d,合适的接种量为每瓶1～3 g。     

刺五加愈伤组织诱导及褐化抑制

分别以刺五加1年生茎、叶柄和嫩叶为外植体,在附加不同浓度NAA和6-BA组合的WPM培养基上进行愈伤组织初代培养,并对继代培养中出现的褐化进行抑制。结果表明:嫩叶为最佳外植体,在各激素配比中的诱导率均达到最高,其中添加0.5 mg/L 6-BA和0.1 mg/L NAA的诱导率最高98.2%。在继代培养时,向培养基中添加500 mg/L活性炭,5 d暗培养继代10 d,能有效降低刺五加愈伤组织的褐化。     

石榴疏松愈伤组织诱导条件的优化

为给石榴细胞的液体悬浮培养,工厂化生产次生代谢产物提供理论基础,研究了不同外植体、不同灭菌条件、不同激素水平对石榴愈伤组织诱导率、疏松程度及褐化率的影响。结果表明：成熟叶片更容易诱导出疏松愈伤组织,体积分数为75%酒精和质量分数为0.1%的升汞组合的消毒效果更好。石榴愈伤组织的最佳诱导培养基为：MS＋1.0 mg.L-16-BA＋1.0 mg.L-1NAA。石榴最佳继代培养基为：MS＋1.0 mg.L-16-BA＋1.0 mg.L-1NAA＋1.0 mg.L-12,4-D。     

牡丹愈伤组织扫描电镜观察

为揭示牡丹愈伤组织分化过程中的细胞变化规律,以牡丹品种“凤丹”花瓣诱导的愈伤组织为材料,利用电镜扫描的方法,观察了不同培养时间愈伤组织表面结构的变化过程。结果表明：牡丹花瓣愈伤组织类型不同,表面结构有较大差异,同一块愈伤组织上存在不同的发育时期,继代的时间不同,愈伤组织的表面结构也会随之发生变化,继代后15[XC~.TIF]20 d为愈伤组织结构变化最大的时期。初步了解了愈伤组织分化植株的过程,为建立牡丹高效再生体系奠定理论基础。     

银杏愈伤组织诱导与继代培养的研究

以银杏种子子叶、幼叶片、茎段为外植体,对银杏进行愈伤组织诱导及继代培育．结果表明：不同外植体的愈伤组织的诱导能力有差异,其诱导率高低顺序依次是子叶、叶片、茎段;愈伤组织质地、颜色、生长速度与基本培养基、外源激素及培养条件有很大关系,基本培养基以高含量无机盐的Ｍ Ｓ培养基为最好;最佳诱导培养基不适合继代保存,褐变极为严重;在培养基中附加抗氧化剂并调整激素种类,可以消除褐变现象,使细胞保持旺盛生长     

‘凤丹’子叶愈伤组织诱导及分化研究

研究了层积时间对‘凤丹’胚萌发的影响,并探讨了基本培养基、植物激素等因素对子叶愈伤组织的诱导及不定芽分化的影响。结果表明:40d层积时间对胚萌发的效果最好,MS+Ca2++2mg/L2,4-D+30g/L蔗糖是胚诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率85%;MS+Ca2++1.5mg/L6-BA+0.5mg/LNAA+20g/L蔗糖是诱导不定芽发生的最佳培养基;不定芽高约1.5cm转入生根培养基,生根率可达80.7%。     

油茶12个物种花药愈伤组织诱导及继代培养

选择12个油茶物种进行花药愈伤组织的诱导,以小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶诱导率较高,在40％～70％之间,其中小果油茶、普通油茶的愈伤组织诱导率高达70％。红皮糙果油茶、广西糙果油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶、攸县油茶花药褐化较严重。继代培养中6-BA和KT均有较好的促进作用,小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶的愈伤组织均增殖较好。油茶花药培养应以小果油茶、普通油茶、短柱油茶、浙江红花油茶、茶陵红花油茶、多齿红花油茶作为进一步试验的基本材料,开展下一步的愈伤组织增殖和脱分化试验。     

橡胶树花药愈伤组织继代培养与胚状体发生能力研究

利用橡胶树花药愈伤组织进行继代培养与胚状体诱导,结果表明,在诱导愈伤组织、继代培养和分化胚状体中MS培养基稍优于改良MS培养基;以继代1代的愈伤组织胚状体的诱导率最高,分别达到70.8%和67.5%;在继代0代、2代和3代之间差异达到极显著,在继代4代时差异达到显著,其他继代次数之间差异不显著。在继代8代后,两种培养基的诱导率逐渐升高,分别达到44.6%和35.3%。     

大叶榉愈伤组织诱导与继代培养的影响因素

以大叶榉种子的子叶、胚轴、顶芽、嫩枝叶片和茎段等为外植体 ,对大叶榉进行愈伤组织诱导及继代培养研究 .结果表明 :不同外植体的愈伤组织诱导能力有差异 ,其诱导率按高低顺序排列依次为子叶、胚轴、叶片、茎段和顶芽 ;愈伤组织质地、颜色、生长速度与基本培养基、外源激素有很大的关系 ,基本培养基以 WPM培养基最好 ;最佳诱导培养基不适合继代保存 ;在培养基中附加抗氧化剂并调整激素种类 ,可较好地防止褐变现象     

龙脑樟愈伤组织诱导及增殖研究

以龙脑樟的茎段作为外植体,进行腋芽的诱导获得无菌苗,继而腋芽小叶被用于愈伤组织的诱导并进行增殖培养。结果表明外植体适宜的灭菌方法为：0.1%升汞灭菌10 min,污染率为21.6%;腋芽小叶愈伤组织诱导最佳培养基配方为：MS＋BA 4.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L,诱导率可达72.7%,较佳增殖培养基组合为：MS＋BA 5.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L。     

牡丹‘乌龙捧盛’组培苗生根及生根解剖学研究

The tissue-cultured seedlings of tree peony ‘Wulong Pengsheng’ were used to study the effects of different plant growth regulators, culture methods, and holdfast on rooting. The morphological structure change during rooting was also observed using the method of paraffin section. The result showed that the best combination of plant growth regulators for rooting was IBA 3.0 mg·L^-1 + NAA 0.6 mg·L^-1. The treatment under the temperature of 4℃ for ten days was benefit to rooting, and the rate could reach 75.67%. It was identified that the adventitious root primordia of shoot in vitro originated from the vascular cambium cells, especially, the cross areas of cambium and pith ray and they started to differentiate at the 5th day and lasted to the 12th day. If the shoots were cultured in the root inducing medium for 12 days, it would lead to not only descend of rooting rate, but also showing callus of stem base, and leaf senescent. However, if they were transferred into the medium without hormone in time, the root primordial protruded the epidermis and developed normally after 5 days’ culture.     

孝顺竹愈伤组织诱导及植株再生

利用孝顺竹小穗和种胚为外植体,诱导出胚性愈伤组织并成功实现植株再生.对影响愈伤组织诱导和分化的基本培养基、激素种类及质量浓度等进行筛选,结果表明:愈伤组织诱导以NB,N6基本培养基附加4 mg·L-1 2,4-D较好;外植体在NB+500 mg·L-1脯氨酸+500 mg·L-1谷氨酰胺+300 mg·L-1水解酪蛋白+30 g·L-1蔗塘+8 g·L-1卡拉胶(Carrageenan)+4 mg·L-1 2,4-D的诱导培养基上经20 d培养,小穗愈伤组织诱导率达87.30%,种胚愈伤组织诱导率为76.27%.愈伤组织预分化及分化的基本培养基以MS较适宜,经MS+30 g·L-1蔗糖+10 g·L-1卡拉胶+4 mg·L-1 KT培养基预分化7 d后,转入无激素的MS培养基上分化14 d,小穗愈伤组织仅个别长出绿色芽头;但种胚愈伤组织芽分化率可达80.0%.分化芽中有8%左右的白化苗,并伴有花叶苗出现.优化后的种胚愈伤组织预分化最佳培养基是MS+3 mg·L-1 6-BA+3 mg·L-1 KT.分化芽苗在添加2mg·L-1 NAA的MS培养基上生根良好,移栽成活率可达70%以上.     

不同激素配比对油茶花药愈伤组织形成的影响

为了加快油茶品种改良,提高油茶花药愈伤组织的诱导效率,在低温预处理（4℃）的基础上,以MS为基本培养基,研究了不同浓度的2,4-D、NAA及2,4-D、6-BA配比对普通油茶花药愈伤组织诱导效率的影响。结果表明：2,4-D、NAA诱导普通油茶愈伤组织的较优组合为2,4-D0．6mg／L,NAA0．05或0．5mg／L,愈伤组织诱导率分别达到35．56％和24．65％,在油茶花药愈伤组织诱导过程中。2,4-D有利于愈伤组织的形成,是最重要的因素;2,4-D、6-BA的混合使用更有利于愈伤组织的发生,并且两种激素适当的配比是提高愈伤组织诱导率的重要因素,0．5mg／L的2,4-D与0．2mg／L6-BA组合是实验得出的较优水平,愈伤组织诱导率达到42．74％。     

篦子三尖杉愈伤组织的诱导

为给今后大规模地细胞培养生产三尖杉"双酯碱"或利用愈伤组织进行悬浮培养提供理论与技术依据,以篦子三尖杉的嫩叶为外植体,应用正交设计法对其愈伤组织进行了诱导实验,结果表明:叶片用酒精浸泡30～40 s.经升汞溶液灭菌12 min,诱导效果最好;诱导叶片愈伤组织的最佳培养基配方为MS+2,4-D1.0 mg·L-1+NAA 2.0 mg·L-1+6-BA 0.5 mg·L-1+KT0.5 nag·L-1.还就叶片的取材部位和取材时间进行了比较实验.结果表明:叶片的叶基部分愈伤组织的诱导率较高;适宜的采样时间为8～10月.     

广藿香愈伤组织的诱导和增殖

以广藿香的幼叶、茎段为外植体,接种于附加不同浓度的2,4-D、NAA、6-BA、KT、TDZ及其组合的MS固体培养基上进行愈伤组织的诱导,结果表明:单独使用5种激素在一定范围内均能诱导出愈伤组织;最佳组合培养基为MS+6-BA 1.0 mg.L-1+2,4-D 0.1 mg.L-1。进一步研究发现,茎段和叶片诱导的愈伤组织的生长曲线都呈“S”型,且生长周期均为18 d。     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的研究

以红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)成熟合子胚为基准试验材料,对红松愈伤组织诱导的影响因素进行了初步研究。结果表明,不同的培养基对有效愈伤组织的诱导效果不同,初始诱导应选用LM培养基使外植体完全脱分化,反复继代后可以产生有效愈伤组织,供试的其他培养基继代后则极少产生有效愈伤组织;不同的激素组合和浓度配比对有效愈伤组织的诱导率影响不同,2,4-D是愈伤组织启动的不可或缺的植物生长调节剂,其作用远远大于NAA。在LM+2mg.L-1 2,4-D+0.5mg.L-16-BA的诱导培养基中加入0.5mg.L-1 KT或0.5mg.L-1 TDZ,可明显提高有效愈伤组织的诱导率(可达75.7%)。