桦褐孔菌多糖的提取工艺、结构及功能活性研究进展

桦褐孔菌(Inonotus obliquus)是主要生长在白桦树、榆树等树皮上的木腐真菌。桦褐孔菌多糖是重要的活性成分,具有抗糖尿病、调节肠道菌群、治疗炎症、抗氧化、抗疲劳、抗肿瘤等多种功能活性,在近年的研究中备受关注。综述目前桦褐孔菌多糖提取工艺、结构及功能活性的研究现状,讨论了桦褐孔菌多糖在今后可能的发展趋势及研究方向,旨在为桦褐孔菌多糖的进一步研究、工业化生产及相关产品的开发提供一定的理论基础。     

桦褐孔菌多糖的体外抗氧化作用研究

Inonotus obliquusis placed in theBasidiomycotina, Hymenomycetes , Aphyllophoralesand Polyporaceae[1]. The mushroomis a wood-decaying fungus that grows under the bark oflive standing trees such as birch, el m andJapanese alder , or on the dry trunks of thesetrees after felling . In Russian folklore ,I .obliquusis considered a medicinal fungus andhas been widely used to prevent and treatdiseases and tumors affecting the digestivesystem ( e . g . gastric , intestinal and livercancers ) , cardio…     

桦褐孔菌菌丝体水溶性多糖提取条件试验

采用正交试验法，对影响桦褐孔菌菌丝体粗多糖提取的浸提时间、浸提温度、乙醇沉淀浓度等因素进行了试验。结果表明桦褐孔菌菌丝体多糖的最佳提取条件为：80℃浸提温度，2．5h浸提时间，85％乙醇沉淀浓度。     

桦褐孔菌袋料栽培初探

采用不同培养基对桦褐孔菌进行人工驯化栽培,其中3种配方可得到其菌核,并以桦木屑培养基产量最高,平均干重为17.24g,生物学效率为3.83%,同时对人工菌核和野生菌核的体外抗肺癌细胞NCI-H460的活性进行了测定。     

桦褐孔菌发酵菌粉成分分析

对桦褐孔菌(lnonotus obliquus)发酵菌粉中的各种成分进行了较全面的分析.结果表明发酵菌粉中营养成分较丰富,其中粗蛋白、总氨基酸含量分别为25.73％和15.18％.菌粉中不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,以亚油酸和油酸为主,还含有丰富的甾醇、酚类物质和多种矿质元素.用桦褐孔菌发酵菌粉提取粗多糖,得率为28.55％、多糖的分子量主要集中在2～40 kDa,单糖组成为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,摩尔比为:1.3:1.0:20.4:2.1,多糖产品中含有酸性多糖,糖苷键主要是a型.     

紫外线诱变筛选桦褐孔菌多糖高产菌株初报

试验采用不同时间、不同次数对桦褐孔菌菌丝进行紫外线照射处理。结果表明紫外线照射3次、照射时间20min处理的桦褐孔菌菌丝多糖含量显著高于出发菌株;并显著高于其它处理,菌丝多糖含量达5.17%。     

桦褐孔菌菌丝营养特性研究

通过不同的碳源、氮源、微量元素和维生素对桦褐孔菌菌丝生长影响的试验研究，表明桦褐孔菌菌丝生长的最适碳源为麦芽糖和葡萄糖，氮源的不同处理对菌丝生长的影响差异不显著，最适微量元素为ZnSO4与MnSO4，维生素对菌丝生长的影响差异性不显著。     

桦褐孔菌菌核提取物对细菌抑菌活性研究

采用纸片法研究了桦褐孔菌的水、甲醇、丙酮、氯仿、石油醚提取物对大肠杆菌ERcat、EnR￡、ATCC25923和金黄色葡萄球菌ATCC25923、O41ermc的抑制作用。结果表明:桦褐孔菌各提取物对大肠杆菌ERcat、ATCC25923和金黄色葡萄球菌O41ermc均有不同程度的抑制作用。其中甲醇提取物在10mg·mL-1浓度下对大肠杆菌ERcat的抑菌效果最好,抑制率高达84.1%;石油醚提取物对除大肠杆菌EnR￡以外的其它供试菌株均表现出显著的抑菌活性。另外,浓度为10mg·mL-1的丙酮提取物对大肠杆菌EnR￡的生长有一定的抑制作用;浓度2.5mg·mL-1的甲醇提取物和浓度10mg·mL-1的石油醚提取物对金黄色葡萄球菌ATCC25923的抑菌作用较为明显。     

桦褐孔菌多糖诱导人卵巢癌细胞凋亡的研究

探讨Bcl-xl、p53基因在桦褐孔菌多糖诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡中的作用。不同浓度桦褐孔菌多糖作用于人卵巢癌SKOV3细胞,荧光显微镜观察人卵巢癌SKOV3细胞凋亡作用,RT-PCR法检测Bcl-xl、p53基因表达量的变化。桦褐孔菌多糖能诱导人卵巢癌细胞凋亡,并且上调p53和降低Bcl-xl表达。桦褐孔菌多糖促进SKOV3凋亡,其机制可能与激活p53、抑制Bcl-xl表达有关。     

灵芝多糖化学结构及药理活性研究进展

灵芝作为一味珍贵的中药材,具有广泛的药理作用.灵芝之所以可以展现出多方面的功效,主要是因为灵芝中含有重要的活性物质灵芝多糖.由于灵芝多糖结构复杂、活性功能广泛而备受关注,研究其结构和药理活性的关系有助于灵芝多糖今后在食品、药品和保健品方面的研发、应用.通过分析近年灵芝多糖的化学结构和药理活性的研究,对现有研究的局限提出...     

桦褐孔菌多糖的提取及对肝癌细胞SMMC7721的抗增殖的研究

探讨用超声提取法提取桦褐孔菌中桦褐孔菌多糖的工艺条件及桦褐孔菌多糖时肝癌SMMC7721细胞株的抗增殖作用。设计正变实验．时桦褐孔菌的超声提取工艺进行研究．并用MTT比色法研究桦褐孔菌多糖时肝癌SMMC7721细胞株的抗增殖作用。桦褐孔菌多糖超声提取的最佳工艺条件为95℃、15倍水、20kHz、超声60min，桦褐孔菌多糖在1．0-16．0wg／mL范围内时肝癌SMMC7721细胞株的增殖均有抑制作用．且表现出浓度相关性。     

桦褐孔菌菌丝体与子实体蛋白质营养价值评价

采用国际上通用的营养价值评价方法,对桦褐孔菌菌丝体与子实体蛋白质的营养价值进行全面评价。结果表明,桦褐孔菌子实体中蛋白质的氨基酸含量分别比菌丝体和鸡蛋模式高45．9％和49．1％,其菌丝体的氨基酸评分、化学评分、必需氨基酸指数、生物价、营养指数和氨基酸比值系数分分别为75．0,44．5,92．2,88．8,24．7和52．0,营养价值比子实体高。     

桦褐孔菌纤维素酶基因的克隆与原核表达

成功获得了桦褐孔菌(Inonotus obliquus)JL 01菌株的内切葡聚糖酶(IO-EG)和β-葡萄糖苷酶(IO-BGL)的cDNA全长序列.eg2基因cDNA序列全长(ORF)为1149 bp,编码382个氨基酸,bgl2基因cDNA序列全长(ORF)为2583 bp,编码860个氨基酸;成功构建了30a-eg2和30a-bgl2大肠杆菌表达菌株,诱导培养后,SDS-PAGE电泳分析表明两个菌株均表达蛋白,且蛋白以包涵体形式存在,为桦褐孔菌高效外源基因表达系统的建立提供了基础.     

桦褐孔菌ISSR-PCR反应体系优化与建立

采用改良CTAB法提取了桦褐孔菌总DNA,确定ISSR最适25 μL反应体系为模板DNA浓度15 ng·μL-1,dNTPs 浓度150 μmol· L-1,引物浓度25 μmol·L-1,Taq DNA聚合酶浓度2.0 U,Mg2+浓度1.4 mmol· L-1,10×buffer 2.5 μL,其余用ddH2O补足;确定ISSR扩增程序为:94℃预变性5 min,35个循环:94℃变性1 min、45℃～51℃退火1 min(退火温度因不同引物而定)、72℃延伸1 min,最后72℃延伸5 min,4℃保存.筛选出16条ISSR引物,并成功应用引物UBC842完成了21株桦褐孔菌的ISSR-PCR反应.     

桦褐孔菌对肺癌细胞抗增殖和诱导凋亡观察

用MTT法测定桦褐孔菌抗突变活性成分Inotodiol,对人肺癌A549细胞株的增殖抑制作用,20mg.L-1～80mg·L^-1桦褐孔菌的抗突变活性成分Inotodiol对人肺癌A549细胞株有抑制增殖作用,且表现出浓度和时间依赖关系。在倒置显微镜下、HE染色光学显微镜下、AO/EB双染色荧光显微镜下、透射电子显微镜下观察,肿瘤细胞均有体积变小、有凋亡小体。桦褐孔菌的抗突变活性成分Inotodiol可抑制人肺癌A549细胞株的增殖和诱导肿瘤细胞凋亡。     

超声提取桦褐孔菌子实体多糖及多糖对癌细胞作用的研究

采用正交试验优化桦褐孔菌子实体多糖的超声提取工艺条件,并对提取多糖的抗肿瘤活性进行研究。结果表明,桦褐孔菌多糖超声提取的最佳工艺条件为超声时间70min,温度80℃,频率20kHz,加水量12倍水,其多糖在体外对肝癌HEPG2细胞株具有明显的抑制作用,并可诱导肿瘤细胞凋亡,体内实验发现多糖可显著抑制小鼠S180肉瘤的生长,并具有增强免疫作用。     

桦褐孔菌实时荧光定量PCR内参基因的筛选

笔者采用软件GeNorm分析7个内参基因在桦褐孔菌(Inonotus obliquus)中表达的稳定性.结果表明,在不同pH培养基处理下,最适内参基因数为2,act和gapdh为最适内参基因;高温刺激下,最适内参基因数为2,act和gapdh为适宜内参基因;在菌核发育阶段,最适内参基因数为2,gapdh和cyp为最适内参基因;在菌丝体发育阶段,最适内参基因数为3,act,tub和ubq为适宜内参基因;在整体试验样本中,最适内参基因数为2,act和gapdh为最稳定的内参基因.