猴头菌不同生长发育期粗蛋白、粗多糖含量及水溶性粗多糖体外免疫活性

测定猴头菌(Hericium erinaceus)华中猴头菌株不同生长发育期子实体中的粗蛋白、粗多糖和水溶性粗多糖中β-葡聚糖含量,并研究不同生长发育期子实体粗多糖体外刺激巨噬细胞产生NO的活性变化规律.结果表明,供试菌株不同生长发育期子实体的粗蛋白、粗多糖和β-葡聚糖含量以及粗多糖体外刺激巨噬细胞产生NO的活性均存在显著或极显著差异,随着生长发育的进行,猴头菌子实体中粗蛋白含量总体上呈下降的趋势(小菌剌期比前一时期有所增加),而多糖含量则总体呈上升趋势(小菌刺期比后一时期高),β-葡聚糖含量呈先快速上升后平稳的趋势;分裂期粗多糖在浓度500 μg/mL时对RAW264.7释放NO的促进作用较强.     

β-葡聚糖酶降解茯苓多糖的效应

以资源丰富且多糖含量高的茯苓为原料,以茯苓多糖的提取得率为指标,通过酶促降解的单因子试验、正交实验及验证试验,研究了β-葡聚糖酶对茯苓多糖的降解效应,优化筛选了β-葡聚糖酶降解茯苓多糖的技术参数.结果表明:反应温度55℃、时间90 min、pH 5.5、酶浓度6.5％是β-葡聚糖酶降解茯苓多糖的最优技术参数,在该参数条件下,应用β-葡聚糖酶提取茯苓多糖的得率为13.31％,对茯苓多糖的高值化利用具有较好的参考指导价值.     

药用、食用菌β-葡聚糖的研究进展

越来越多的研究表明,药用、食用菌β-葡聚糖具有抗肿瘤、抗病毒以及提高免疫力等多种药用价值,对药用、食用菌的研究日益深入。β-葡聚糖的快速、准确测定,是进一步深入研究的基础：对β-葡聚糖的构效关系和测定方法,荧光法、酶法、蛋白特异识别法（鲎因子G、Dectin-1）等做相关介绍。     

猴头菌β-葡聚糖-壳聚糖纳米颗粒制备及其体外生物活性

采用自组装的方法通过静电相互作用制备硫酸化猴头菌β-葡聚糖-壳聚糖纳米颗粒(sulfated Hericiumerinaceusβ-glucan-chitosan nanoparticles,DS-CSNPs),以粒径为指标,通过单因素实验和响应面分析,优化DS-CS NPs的制备工艺,并评价最佳工艺条件下纳米颗粒的粒径、形态以及体外生物活性。结果表明,纳米颗粒最佳制备工艺参数：硫酸化猴头菌β-葡聚糖(sulfated H. erinaceus β-glucan, DS)质量浓度为1mg·mL^-1,搅拌速度为800 r·min^-1,壳聚糖(chitosan, CS)初始pH为4,DS-CS NPs的粒径为128.41 nm,且分布较窄。与DS相比,DS-CS NPs体外抗氧化活性显著提高,同时,DS-CS NPs对LPS诱导的巨噬细胞RAW 264.7产生NO以及促炎因子TNF-α分泌有显著抑制作用,并呈浓度依赖性。硫酸化猴头菌β-葡聚糖-壳聚糖纳米颗粒具有体外抗氧化和抗炎活性。     

高温高压水提取灵芝β-葡聚糖工艺优化

目的:优化高温高压水提取灵芝β-葡聚糖的工艺条件。方法:采用单因素试验筛选关键因素,正交试验探索最佳提取因素水平。结果:高温高压水提取灵芝β-葡聚糖的最佳工艺条件为料(g)液(mL)比1∶15,提取温度为135℃,时间为60 min,次数为3次,β-葡聚糖的提取率为3.824%,提取物中β-葡聚糖的质量分数为27.03%。结论:高温高压水提取灵芝β-葡聚糖的提取率和β-葡聚糖质量分数均高于热水浸提法、超声辅助提取法、微波辅助提取法和酶法辅助提取法,并且高温高压水提技术适用工业化生产。     

羊肚菌胞外多糖免疫活性研究

从羊肚菌发酵液中提取多糖并分析其基本生化特征,研究羊肚茼胞外多糖对小鼠免疫功能的影响.结果表明,羊肚菌多糖为蛋白多糖,其总糖含量为85.3%、蛋白含量为8.5%、酸性多糖含量为25%.该多糖可促进小鼠胸腺指数和脾指数提升,增加血清溶菌酶含量,提高巨噬细胞吞噬能力,并能在体外促进T淋巴细胞增殖及巨噬细胞NO量增加,作为一种蛋白多糖,羊肚菌多糖可以显著增强小鼠的非特异性免疫及细胞免疫.     

猴头菌活性多糖高产菌株的筛选

对10株猴头菌(Hericium erinaceus)菌株的菌丝多糖产量和体外免疫活性进行比较。结果表明:不同的猴头菌菌株发酵所产生的菌丝多糖量及其多糖对刺激巨噬细胞产生NO的产量不同;其中华中猴头(H10)不仅菌丝多糖量高且对巨噬细胞的刺激作用也较强,可作为深层发酵生产猴头菌菌丝多糖的优良菌株。     

樟树叶片水溶性粗多糖提取及抗氧化活性研究

以樟树叶片为试材,通过L9(34)正交实验,研究了水溶性多糖的最佳提取工艺和抗氧化活性。结果表明:以水为提取溶剂,料液比1∶110(g/mL),温度80℃,提取2 h的条件下提取2次,多糖提取效果较好。在此组合条件下四季干叶片多糖含量分别为:93.8、77.00、83.35、116.55 mg/g。樟树叶片水溶性粗多糖在一定浓度范围内具有较强的清除过氧化氢能力,清除羟自由基、DPPH自由基和还原能力较弱;抗氧化能力不如同浓度的VC。     

白菜β-1,3 - 葡聚糖酶基因cDNA的克隆及序列分析

 以白菜抗霜霉病品种‘雪克青’cDNA 为模板, 采用RT2PCR 技术, 获得了1032 bp 的β- 1,3- 葡聚糖酶基因的cDNA 序列。序列分析表明, 克隆的β- 1,3 - 葡聚糖酶基因cDNA 序列编码343 个氨基酸, 与芜菁bg1 基因具有98 %的同源性, 与拟南芥bg2 基因具有84%的同源性。在GenBank 中登录号为AY395720 。     

绣球菌水溶性多糖的硫酸化修饰及其对鼠脾淋巴细胞体外刺激活性

采用氯磺酸-吡啶法(Wolfrom)对绣球菌(Sparassis latifolia)水溶性多糖组份SCG-A和SCG-N进行硫酸化修饰,获得硫酸化多糖产物SCG-AS和SCG-NS。通过硫酸基取代度测定和红外光谱分析,发现SCG-A为α型酸性多糖,其硫酸化修饰后的SCG-AS的硫酸基含量为20.03%,取代度为2.81;中性糖组份SCG-N同时含有α多糖和β多糖,硫酸化修饰后SCG-NS其硫酸基含量为22.57%,取代度为4.07。大鼠脾淋巴细胞体外刺激试验结果显示,在低浓度处理下SCG-AS和SCG-NS的促进脾淋巴细胞增殖活性较硫酸化修饰前都有显著的提高,SCG-NS活性的提升幅度较SCG-AS大,在50μg·mL-1浓度下SCG-NS处理组的细胞增殖率可由硫酸化修饰前的未检出提升为50.22%。     

农杆菌介导的几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因转化辣椒研究

以苗龄7～10 d的辣椒组培苗为被侵染的外植体,通过农杆菌介导几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因,研究基因型、外植体类型、抗生素浓度对辣椒遗传转化的影响,以期获得抗真菌病的转基因辣椒植株.结果表明:不同基因型间、外植体类型、抗生素种类和浓度对辣椒的遗传转化影响存在较大差异.以几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶为目的基因,应用根癌农杆菌介导法对辣椒进行了遗传转化,获得了3株抗性植株.     

西藏地区几种野生食用菌粗多糖的提取与测定

采用水提醇沉法提取12种野生食用菌粗多糖，粗多糖得率为2．01％～7．12％，粗多糖纯度为11．80％～82．99％。     

三种食用菌粗多糖体外抗菌活性研究

目的：对3种食用菌粗多糖体外抑菌活性进行初步研究。方法：采用K-B法对褐蘑菇、香菇和滑子菇粗多糖进行体外抑菌试验。结论：3种食用菌粗多糖对革兰氏阴性菌的大肠杆菌、沙门氏菌及革兰氏阳性菌的金黄色葡萄球菌都有抑制性,但都不如抗生索药物抑菌性强。在同等条件下,3种食用菌粗多糖的抑菌活性都随着浓度的升高而增强,其中香菇粗多糖抑制性最强,所以3种食用菌粗多糖作为天然的抗菌组分可以有选择地应用到相关的药品、食品中,作为消臭及抑菌防腐添加剂、保鲜剂,但其本身的结构及添加量还有待进一步研究。     

灰树花多糖GFP75-2-2B的分离及其对刺激巨噬细胞释放NO的影响

利用DEAE-Sepharose Fast Flow离子柱层析和Sephacryl凝胶柱层析对灰树花(Grifola frondosa)子实体水提醇沉粗多糖进行分离纯化,对分离纯化到的一种多糖GFP75-2-2B进行了分析.紫外光谱鉴定结果表明,GFP75-2-2B不含蛋白质、核酸和酚类成分;离子色谱分析表明其单糖组成为岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、葡萄糖和甘露糖,摩尔比为1.0∶1.3∶3.6∶4.0∶4.5.GFP75-2-2B对巨噬细胞株RAW264.7进行体外免疫活性的研究结果表明,GFP75-2-2B有明显刺激巨噬细胞分泌NO的活性.     

食用菌复合多糖的抗氧化活性研究

摘要：通过采用化学法,分别测定了猴头菇多糖、香菇多糖、银耳多糖、鸡腿菇多糖、灰树花多糖及香菇复合多糖、灰树花复合多糖体外抗氧化活性。结果表明,0．5mg·mL-1的猴头菇多糖、香菇多糖、银耳多糖、鸡腿菇多糖、灰树花多糖与复合多糖能够不同程度地清除DPPH·自由基、羟自由基（·OH）和超氧阴离子自由基．（02-·）能力,具有较好的抗氧化活性,而香菇复合多糖和灰树花复合多糖的总体抗氧化活性优于其组成单糖,其中以灰树花复合多糖对自由基的清除能力最强,其清除率分别为（89．5±1-3）％、（62．4±0．6）％、（47．9±1．0）％。     

桑黄多糖的分离纯化及体外免疫活性的研究

利用层析技术对桑黄子实体水提醇沉粗多糖进行了分离纯化,获得不同的组份.采用体外刺激小鼠脾淋巴细胞增殖试验对各组份进行了体外免疫活性的检测,结果表明,水提醇沉的各级粗多糖均有不同程度的体外刺激淋巴细胞增殖的作用;经过离子柱层析分离后,P30得到的各组份均是有活性的,P60得到的各组份中,0W和P60S2活性较好,0S1无活性;分别将P60W和P60S1进行了凝胶柱层析得到均一多糖P60W1-1和P60S1-1,免疫活性比较结果表明P60W1-1有活性,0S1-1无活性,说明有活性的均一多糖必须要从有活性的粗多糖中去分离纯化获得.     

香蕉穿孔线虫β-1，4-内切葡聚糖酶基因的克隆与特征分析

 植物寄生线虫的分泌物在线虫的侵染过程中具有重要的作用,其中纤维素水解酶是研究的较多的主要分泌物之一。采用RT-PCR和RACE方法,从香蕉穿孔线虫（Radopholus similis）中获得编码β-1,4-内切葡聚糖酶基因的cDNA序列,命名为RS-eng-1 （GenBank登录号为EU414839）。该cDNA序列全长为1 630 bp,包含一个1 404 bp的开放阅读框（ORF）,编码含467个氨基酸的蛋白,理论分子量与等电点分别为48.22 kD和6.04。序列分析表明该酶含有糖基水解酶家族5（GHF5）的保守结构域,N端具有22个氨基酸残基组成的信号肽,C端含有细菌式样的纤维素结合域（CBDⅡ）。原位杂交结果显示此基因在相似穿孔线虫的食道腺部位表达,并且Southern结果显示其为多拷贝基因。cDNA与基因组DNA重叠分析表明,此基因包含6个内含子,切割点符合5'-GT...AG-3'的规律。进化分析显示该酶与细菌Bacillus subtilis和Erwina carotovora 分泌的纤维素酶属于同一支,推测其来源于细菌的水平基因转移。     

不同产地毛头鬼伞子实体多糖特征及其刺激巨噬细胞产生NO的活性

用水提醇沉法从6个不同产地毛头鬼伞(Coprinus comatus)子实体中获得6种粗多糖,6种粗多糖得率及多糖含量差异较大,以湖北(HB)的最高,其次为云南(YN)的;各粗多糖分子量分布相似,单糖组成均以葡萄糖为主,并含有少量半乳糖;除福建(FJ)外,其余5种粗多糖均能增强小鼠巨噬细胞RAW264.7释放NO的产量,以YN和HN的活性较好,总体来说,YN的多糖产量及活性较好.     

六种食用菌中药渣固体发酵及其粗多糖对NK细胞活性的影响

对花脸香蘑(Lepista sordida)、杏鲍菇(Pleurotus eryngii)、金针菇(Flammulina velutipes)、香菇(Lentinula edodes)、白灵菇(Pleurotus nebrodensis)、杨树菇(Agrocybe cylindracea) 6种食用菌进行中药渣固体发酵,采用热水浸提法取得不同食用菌菌质中的粗提物,比较不同部分提取物中多糖含量,并采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定样品处理后NK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性的影响.试验表明,水提醇沉物中香菇多糖含量最高(25.56%),白灵菇多糖含量最低;水提醇溶物中花脸香蘑多糖含量最高(22.55%).各种食用菌的提取物在一定浓度下对小鼠NK细胞活性均有显著增强作用,其中香菇、杨树菇的水提醇沉物表现明显的剂量正相关关系.     

墨兰炭疽菌侵染过程与几丁质酶、β - 1,3 - 葡聚糖酶活性的变化

 研究了墨兰炭疽菌的侵染过程以及墨兰叶片中几丁质酶和β- 1,3 - 葡聚糖酶活性的变化。结果显示, 炭疽菌接种12 h后开始产生侵染丝侵入墨兰叶片的气孔腔, 60 h之前炭疽菌菌丝在叶肉细胞的胞间隙蔓延, 从84 h开始, 炭疽菌次生菌丝侵入叶肉细胞内, 部分叶肉细胞解体。几丁质酶、β- 1,3 - 葡聚糖酶活性在接种炭疽菌后缓慢上升, 到84 h达到最大。表明炭疽菌侵入墨兰叶肉细胞的胞间隙和胞质中对几丁质酶和β- 103 - 葡聚糖酶活性高峰的出现有重要影响。