济宁青山羊高繁殖力基因研究进展

济宁青山羊具有较高的繁殖力,国内外学者采用分子生物学技术对其进行了大量研究,旨在弄清多胎的机制。在总结前人研究成果的基础上,着重介绍了BMP15、FSHβ、GDF9、PRLR、INH、MTNR1A6种基因与济宁青山羊多胎性能的关系,并提出了研究前景及以后的研究方向。     

济宁青山羊生长率与繁殖力的相关研究

对19只怀孕20天和35只有产羔记录的济宁青山羊的资料分析表明，妊娠母羊的卵巢黄体数每只平均3．16±0．23个，怀胎数为2．63±0．22个，两者相关显著（P＜0．05），但没有统计学差异。作为小型山羊品种，成年羊体尺体重有很大提高（P＜0．01），但净肉重没有显著增加，这与其多服性有关。选择母羊的体高、体长、胸围、尻长和民宽，将有利于其繁殖力的提高。青山羊多胎高产的基础是其完善而发达的消化吸收功能。     

济宁青山羊不同季节血浆内褪黑素分泌规律的研究

为了探讨济宁青山羊季节性发情的内分泌机理,本试验分别用放射性免疫法和免疫组织化学方法研究了济宁青山羊在春分、夏至、秋分和冬至时血浆内褪黑素的变化规律以及松果体细胞内5-羟色胺（5-HT）的含量变化。结果显示,血浆内褪黑素含量在午夜达到最大值,而在白天日中附近降到最小值,在夜间显著高于白天（P〈0．01）。褪黑素含量也存在明显的季节性变化,夏至时夜间的平均含量极显著高于其它3个季节（P〈0．01）,春分和秋分时差异不明显（P〉0．05）,但它们显著高于冬至时的夜间平均水平（P〈0．05）。白天血浆褪黑素含量在各个季节差异不显著（P〉0．05）。夏季5-羟色胺阳性细胞面积和占总面积比值都显著小于其它3个季节,冬季最大,春季和秋季差异不显著（P〉0．05）。     

济宁青山羊繁殖力研究现状

本文主要从济宁青山羊形成历史、特性、育种手段等方面,特别是对控制繁殖性状的(主)基因的研究和利用现状进行综述.在此基础上,提出了对济宁青山羊研究和利用的建议.     

济宁青山羊GH基因多态性及其与生产性能的关联分析

试验运用PCR-RFLP技术对济宁青山羊GH基因的多态性进行了检测,并分析了其与生产性能的相关性。结果发现,济宁青山羊群体中GH基因存在Hae Ⅲ内切酶酶切位点多态性,经χ²适合性检验结果表明,山羊群体在GH基因位点上处于Hardy-Weinberg非平衡状态。AA基因型对3、12月龄体高及出生重、断奶重、胴体重、后躯肉重均有显著影响(P<0.05),且基本上呈AA>AB>BB型趋势,说明等位基因A是济宁青山羊生长发育的有利基因。     

不同生长阶段猪抗菌肽PR-39基因的表达差异

根据已报道的猪抗菌肽PR-39基因和看家基因β-actin的序列,设计了针对这两种基因的引物,构建了以MgCl2浓度为1.5 mmol/L,循环次数为29的优化半定量RT-PCR法.以β-actin为内标,研究了不同生长阶段猪抗菌肽PR-39基因的表达差异.结果表明,从1日龄到7周龄,PR-39基因表达呈上升的趋势;在7周龄到14周龄,PR-39基因表达略有下降;14周龄到21周龄,PR-39基因表达又有上升的趋势;21周龄到28周龄基因表达再次下降.     

济宁青山羊kiss-1基因多态性及与主要繁殖性状关系分析

本试验采取PCR-RFLP的方法,对26个济宁青山羊样本的kiss-1基因进行酶切。酶结果显示,kiss-1基因在此样本中存在三种基因型:一条带的GG型(1101bp)、三条带CG型(1101+805+296bp)、两条带的CC型(805+296bp)。kiss-1基因296位点对窝平均产羔数有显著影响(P<0.05):GG型比CC型多0.85只(P<0.05),GG型与CG型(P>0.05)、CG型与CC型之间(P>0.05)的差异不明显。该位点对初配时间有显著影响(P<0.05),GG型母羊从出生后到第一次配种的相隔时间比CG型母羊早58.49天(P<0.05),GG型比CC型母早77.40d(P<0.05),CG型与CC型从出生后到第一次配种相隔时间之间的差异不显著(P>0.05)。研究表明,kiss-1基因的表达产物能够促进FSH和LH的释放,从而影响山羊的发情期,进而影响其繁殖性能。kiss-1基因296位点G等位基因,无论是在窝平均产羔数,还是在初配时间都占有优势,对其进行研究可为济宁青山羊高繁殖力品系的培育提供一定的基础。     

济宁青山羊松果体细胞超微结构的季节性变化

本试验旨在探讨松果体细胞与季节性繁殖的关系,为进一步揭示山羊季节性繁殖的内分泌机理提供参考。通过透射电镜观察济宁青山羊松果体细胞超微结构的季节性变化。结果表明:①松果体细胞可分为明细胞和暗细胞,在明细胞内滑面内质网(SER)的含量较粗面内质网(RER)丰富,而暗细胞内RER含量较丰富。另外明细胞内高尔基复合体和线粒体都较暗细胞内的复杂,但暗细胞内有较多的糖元颗粒。②夏季松果体细胞以暗细胞为主,明细胞较少,而春季明、暗细胞都较多。济宁青山羊松果体细胞的功能活动呈现季节性变化。     

沂蒙黑山羊与济宁青山羊板皮组织结构的研究

对沂蒙黑山羊和济宁青山羊板皮的皮肤组织结构进行了系统的研究。结果表明 :两种羊同部位的表皮层厚相差并不显著 (P>0 0 5 )。就真皮层而言 ,济宁青山羊的真皮要明显比沂蒙黑山羊厚 (P <0 0 1) ,同种羊不同部位之间也存在差异。真皮层可分为乳头层和网状层 ,二者的变化与真皮层大致相似。两种羊的毛囊群均以 3毛囊群为主 ,均占 80 %左右。沂蒙黑山羊与济宁青山羊的S/P分别为 7 2 3和 5 97。胶原纤维在乳头层中呈网状较紧密 ,在网状层中呈水平走向较疏松。弹性纤维一般仅分布于乳头层。     

济宁青山羊生后发育阶段GnRH与GnRHR阳性细胞在下丘脑分布规律的研究

为研究济宁青山羊生后发育阶段GnRH及GnRHR在下丘脑内的形态学分布和变化规律,采用链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(Strept Avidin Biotin-Peroxidase Complex,SABC)免疫组织化学方法,对0、2、4和6月龄雌性济宁青山羊下丘脑中GnRH及GnRHR的分布进行了同步研究。结果显示,GnRH和GnRHR免疫阳性细胞在下丘脑内广泛存在,主要分布于视前内侧区、乳头体、视上核和视交叉上核。随月龄增长,GnRH和GnRHR阳性细胞不断增大,数量不断增多,其中0～2月龄是最快的时期。结果提示,下丘脑分泌的GnRH及GnRHR对生后发育阶段青山羊性成熟的启动及维持有重要作用。     

发情周期不同阶段牦牛子宫中黄体生成素受体的表达变化

为研究发情周期不同阶段牦牛子宫中黄体生成索受体(LHR)的定位及表达变化,笔者利用免疫组织化学SP法分别检测发情期、发情后期、间情期和发情前期牦牛子宫中LHR的表达,并进行光密度值分析.结果表明,LHR免疫阳性产物在牦牛子宫腺上皮细胞、基质细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞和肌层平滑肌细胞中均有表达;腺上皮细胞、基质细胞和肌层平滑肌细胞中LHR在发情前期和发情期表达最弱,发情后期表达增加,间情期表达最强(P＜0.05);子宫内膜血管平滑肌细胞中LHR的表达在发情期最强,间情期最弱(P＜0.05);血管内皮中LHR在发情期和发情前期表达很强,发情后期和间情期显著下降(P＜0.05).结果表明LHR参与了发情周期不同阶段牦牛子宫功能变化的调控.     

发情周期中山羊子宫和输卵管内肥大细胞及组织胺含量的变化

应用改良甲苯胺蓝染色法和透射电镜技术观察了山羊发情周期4个阶段肥大细胞（MC）在子宫和输卵管内的分布、形态及数量变化规律,用荧光测定改良法检测了子宫和输卵管组织中组织胺（HA）含量。结果显示：MC呈圆形、椭圆形或梭形,在子宫内主要分布在肌层,子宫外膜中零星散在,内膜中散在分布于固有层的子宫腺和血管周围,子宫阜和内膜上皮中未发现。输卵管内MC在黏膜皱襞、肌层和外膜中均有分布。MC在发情后期有明显的脱颗粒现象。发情周期中子宫及输卵管MC数量变化为：MC（发情后期）〉MC（发情前期）〉MC（间情期）〉MC（发情期）,子宫肌层MC数量各组间差异极显著（P〈0．01）,子宫固有层和输卵管内无显著变化。子宫角内HA含量在发情后期与其它时期有显著变化（P〈0．05）,子宫体、子宫颈和输卵管的变化不明显（P〉0．05）。     

添加不同发情时期山羊血清对牛胚胎体外发育的影响

为了提高牛体外胚胎囊胚发育率,添加不同发情时期山羊血清对牛胚胎进行体外培养。分别采集发情周期D0、D2、D4和D7山羊血清（发情当天为D0）,灭活除菌备用。结果表明不同发情时期羊血清对孤紫激活胚胎孵裂率影响差异不显著,囊胚发育率分别为29.5%、32.4%、33.9%和41.3%,D7血清能显著提高囊胚发育率（P＜0.05）,且扩张和孵化胚出现较早。添加D0血清体外受精胚胎卵裂率较高,但对囊胚发育率影响差异不显著。说明孤紫激活和体外受精胚胎发育有差异,D7血清对胚胎后期发育有利。受精胚无血清培养3d后添加D7血清,囊胚发育率为42.9%,是较为理想的培养方法。     

不同小麦日粮对肉仔鸡肉质、脂肪酸合成酶mRNA与脂蛋白脂肪酶mRNA表达的影响

本文旨在研究不同小麦日粮对肉仔鸡生长、肉质及脂肪酸合成酶(FAS)mRNA与脂蛋白脂肪酶(LPL)mRNA表达的影响。选用300只艾维因肉仔鸡公雏,随机分为5组,每组4个重复,每个重复15只鸡,5组分别饲喂玉米日粮和4种水溶性阿拉伯木聚糖(WSAX)含量不同的小麦日粮,试验期为6周。结果表明:①随着小麦日粮中WSAX含量的增加,肉仔鸡的生长明显降低;②小麦日粮显著增加了肌肉持水力,并随小麦WSAX含量增加而升高的趋势显著(P<0.01),剪切力也随之增加(P<0.05)。饲喂小麦日粮的肉仔鸡其肉色显著低于玉米日粮组(P<0.01),各小麦日粮组间差异不显著。当小麦WSAX含量较高时,小麦日粮可以显著降低肉仔鸡肌肉脂肪和胆固醇含量(P<0.05)。各处理间胸肌、腿肌含水量无差异(P>0.05);③小麦日粮显著降低FASmRNA在肉仔鸡肝中的表达量(P<0.01),并且随日粮WSAX含量增加而表达水平降低的趋势明显。各处理间LPLmRNA表达量的差异不显著(P>0.05)。本研究表明:①当小麦中WSAX含量较低时,对肉仔鸡增重和肉质的影响较小,是玉米理想的替代品;②当小麦中WASX含量较高,则会严重影响肉仔鸡的增重、肉质及FASmRNA在肝脏中的表达,不宜在肉仔鸡日粮中大量添加。     

不同来源木聚糖酶对黄羽肉鸡小肠绒毛形态结构和黏膜生长抑素mRNA表达的影响

本文旨在比较研究小麦型饲粮中添加不同来源木聚糖酶对黄羽肉鸡小肠绒毛形态结构和黏膜生长抑素(SS)mRNA表达的影响.选择22日龄、体重相近的健康黄羽肉鸡375羽,随机分成3个组,每组5个重复,每重复25羽.对照组饲喂小麦型基础饲粮,试验Ⅰ和Ⅱ组分别饲喂在基础日粮中添加250 mL/t真菌性和细菌性木聚糖酶的试验饲粮,试...     

小尾寒羊LHR基因组织表达、多态性及其与产羔性状的关联分析

为了揭示LHR基因在小尾寒羊下丘脑-垂体-卵巢轴(hypothalamic-pituitary-ovarian axis,HPOA)中的表达规律、多态性及其与产羔数的关系,深入了解其对小尾寒羊产羔性状的作用。本研究采用实时荧光定量PCR技术对6只小尾寒羊(FecB++型单、多羔母羊各3只)的生殖及脑组织中LHR基因的表达谱进行分析,同时采用Sequenom MassARRAY~?SNP技术对380只小尾寒羊和380只其他品种绵羊(小尾寒羊、滩羊、苏尼特羊、策勒黑羊、湖羊和草原型藏羊)LHR基因7个单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphisms, SNPs)的多态性进行检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果显示,LHR基因在小尾寒羊大脑、下丘脑和卵巢中均有表达,其中在卵巢高表达。LHR基因在小尾寒羊多羔群体卵巢、大脑和下丘脑的表达均极显著高于单羔群体(P<0.01)。分型发现LHR基因中,4个SNPs位点的等位基因频率和基因型频率在多羔和单羔品种间差异均达到极显著水平(P<0.01);7个SNPs在大多数绵羊品种中均表现为中度多态(0.250.05);关联分析表明,LHR基因有1个SNP多态性与小尾寒羊各胎产羔数显著相关(P<0.05),2个SNPs多态性与小尾寒羊各胎产羔数呈极显著相关(P<0.01)。本研究发现,LHR基因的3个SNPs位点的多态性与小尾寒羊产羔性状存在一定程度相关,暗示其可能参与小尾寒羊多羔性状调控。     

羊体内发育与体外培养特定阶段胚胎基因差异表达的研究

用单胚构建的mRNA差异显示技术,对来源于体内发育和体外培养获得的山羊早期8～16 C期胚胎的基因表达进行了研究.获得了在体内发育胚胎特异表达的一些片段,并对其中的一个片段进行了分析.研究结果表明,该片段与人核糖体蛋白L31基因具有91%的同源性.该基因编码的蛋白是核糖体的组成成分.核糖体结构的完整影响细胞内蛋白质的合成,同时核糖体蛋白也具有调控基因表达的功能.     

山羊IGFBP-1基因的克隆及其mRNA丰度在多种组织中的发育性变化

本研究旨在探讨胰岛素样生长因子结合蛋白1(Insulin-like growth factor-binding protein 1,IGFBP-1)基因在山羊出生后不同组织的发育性表达模式.在出生后0、15、30、60、90和120 d共屠宰36只南江黄羊羔羊(公、母羔羊各18只),取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、背最长肌、半膜肌、臂三头肌和股二头肌样品以抽提RNA,进行克隆及荧光定量PCR分析.山羊IGFBP-1基因的ORF(Open reading frame)长792 bp,共编码263个氨基酸,其核苷酸和氨基酸序列相似性在反刍动物(牛、绵羊)之间远大于其它物种.羔羊肝脏IGFBP-1 mRNA表达量最高(P＜0.01);肺脏、脾脏、心脏表达水平中等;肌肉中最低且在4种肌肉间表达差异不显著(P＞0.05).出生后尤其是60 d内羔羊IGFBP-1mRNA丰度变化很大,且明显呈现持续下降(肝脏)、先升后降(心脏)以及下降-上升-下降(脾脏、肺脏和肌肉)3种模式的变化.结果提示,IGFBP-1基因CDS区在物种间保守性较强,肝脏是山羊合成IGFBP-1 mRNA的主要部位,IGFBP-1基因在出生后羔羊的早期生长中发挥着重要的作用且其mRNA发育性表达模式具有组织器官特异性.     

Differential Expression of VEGF Isoforms in Pig Corpora Lutea Throughout the Estrous Cycle

Veterinary Research Communications -