丙磺舒在阿维菌素作用棉铃虫细胞中的增效机制研究

丙磺舒是ABCC转运蛋白抑制剂,用系列浓度阿维菌素和200μmol/L丙磺舒的食物饲喂棉铃虫,检测中肠组织中阿维菌素的含量。结果表明:与单独使用阿维菌素相比,混合使用丙磺舒后阿维菌素在中肠中的平均驻留时间(MRT)增加了13%,消除半衰期(t1/2z)增加了27%,药物峰值提高了2.8倍。细胞活力测定发现,亚致死剂量阿维菌素与400μmol/L丙磺舒混用后,棉铃虫细胞的活力降低了67.1%。表明抑制ABCC转运蛋白可以提高阿维菌素在棉铃虫中肠的驻留能力,提高药物对棉铃虫细胞的毒力。     

硒对钒和镉胁迫下水稻种子萌发和幼苗活力的影响

种子萌发是植物生长周期中最关键的阶段之一。高浓度的重金属影响植物种子的萌发和生长,而硒可以缓解重金属的毒性作用。基于此,本文采用水培试验,将硒(10μmol/L)处理和不处理的水稻种子暴露于不同浓度的钒溶液(0、300、600、1 200μmol/L)和镉溶液(0、100、250、500μmol/L)中,测定不同时间水稻种子萌发、幼苗生长等不同参数。结果表明,钒和镉胁迫降低了发芽率、芽和根长、芽长活力指数、电解质渗漏量、芽重活力指数、发芽指数、出芽率和日平均萌芽率,延长了50%种子发芽所需的时间,且钒、镉浓度越高,抑制效果越明显。试验还表明,稻种进行硒处理,能明显降低钒和镉对种子萌发和生长的影响。     

IAA和ABA对黄瓜根切段质膜ATPase活性和质子分泌的影响

IAA(5×10~(-7)～5×10~(-4)mol/L)可明显活化黄瓜根质膜ATP酶,其最适浓度为5×10~(-5)mol/L,用这种浓度可使黄瓜根切段的质子分泌速率比对照增加110.4％。ABA(5×10~(-7)～5×10~(-3)3mol/L)对IAA预处理或同时处理的黄瓜根质膜ATP酶活性均有显著的抑制效应,并且,其抑制程度随ABA浓度的增加而变大。用5×10~(-5)mol/L ABA可使根切段的质子分泌速率比对照减少56.3％,显示IAA/ABA,质子泵ATPase的活性与质子的分泌速率三者之间存在着某种函数关系。 vanadate(100～500μmol/L)或cobalt(5×10~(-7)～5×10~(-3)mol/L)对IAA预处理和未经IAA预处理的黄瓜根质膜ATPase的活性均有较强的抑制作用。用5×10~(-5)mol/L的vanadate或cobalt分别使质子分泌减少73.3％与44.5％。从抑制剂的角度反映黄瓜根的质子分泌速率与质膜ATPase活性的强弱有关。     

斑蝥素、斑蝥素酸钾及斑蝥素酸钠作用胃癌细胞的研究

采用MTT法,研究芫菁体内斑蝥素、斑蝥素酸钾及斑蝥素酸钠对胃癌SGC7901细胞的抑制作用。抑制试验斑蝥素的浓度分别为10.20、20.41、30.61、40.82、51.02μmol/L,斑蝥素酸钾浓度分别为7.75、15.50、23.26、31.01、38.76μmol/L,斑蝥素酸钠浓度分别为8.85、17.70、26.55、35.40、44.25μmol/L。结果表明:斑蝥素浓度为10.20μmol/L时,对SGC7901细胞有显著抑制作用,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系,抑制中浓度为16.17μmol/L;斑蝥素酸钾浓度为15.50μmol/L时,对SGC7901细胞有显著抑制作用,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系,抑制中浓度为20.41μmol/L;斑蝥素酸钠浓度为17.70μmol/L时,对SGC7901细胞有显著抑制作用,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系,抑制中浓度为27.83μmol/L。斑蝥素酸钾和斑蝥素酸钠对胃癌SGC7901细胞的作用比斑蝥素差,提示它们对胃癌的治疗效果可能不如斑蝥素。     

胞外ATP、H2O2、Ca2+与NO调控木榄根系离子平衡机理研究

运用非损伤微测技术(NMT),研究了短期盐胁迫下胞外ATP(eATP)、H2 O2 、Ca2 + 与NO 对非泌盐红树木榄根 系K+/Na+ 平衡的调控作用。NaCl(100 mmol/L,24 h)与等渗甘露醇处理的实验表明,木榄根尖对盐胁迫的响应具 有高度的离子特异性。盐胁迫增强了木榄根尖的Na+ 外流,但Na+ 外流被Na+ /H+ 逆向转运蛋白抑制剂Amiloride 和质膜H+ -ATPase 抑制剂Vanadate 抑制,表明Na+ 外流源于根尖表皮细胞质膜Na+ /H+ 逆向转运系统驱动的Na+ 外排。短期盐胁迫处理能诱导木榄根尖K+ 外流,但被氯化四乙胺(TEA,外向K+ 通道抑制剂)明显抑制,证明K+ 外流是由激活的去极化外向型离子通道KORCs 介导。胞外ATP(300 mol/L)、H2 O2 (10 mmol/L)、Ca2 + (10 mmol/ L)与SNP(NO 供体,100 mol/L)均能增加短期盐胁迫下的Na+ 外流,同时抑制K+ 外流。其中,促进Na+ 外流效果 较强的是H2 O2 和Ca2 + ,而Ca2 + 和NO 抑制K+ 外流的效果突出。这些实验结果表明,胞外ATP、H2 O2 、Ca2 + 与NO 这4 种盐胁迫信使是通过上调木榄根系细胞质膜Na+ /H+ 逆向转运体系(Na+ /H+ 逆向转运体和H+ 泵)活性,在促 进Na+ 和H+ 逆向跨膜转运的同时,抑制去极化激活的K+ 离子通道来减少盐诱导的K+ 外流。      

重金属铬对体外培养猪精子活力及蛋白磷酸化水平的影响

为探究铬元素在猪精子体外获能培养过程中,对猪精子活力、蛋白磷酸化信号通路的影响,研究采取八头杜洛克猪新鲜精液,分别在体外获能培养液中添加不同浓度的6价铬离子(0、0.1、0.5、1、2、10、100μmol/mL)以及双丁酰环腺苷酸(dbcAMP)、异丁基黄嘌呤(IBMX)、PKA抑制剂(H-89)等cAMP-PKAs信号通路调节因子进行调控培养2h。利用精子活力计算机检测(CASA)、蛋白质免疫印迹(WB)技术,分析测定猪精子体外铬暴露获能培养过程中精子活力、蛋白磷酸化水平,并用相应试剂盒检测细胞中甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)活性、腺苷-3′,5′-环化一磷酸(cAMP)及ATP水平。结果表明:铬离子对猪精子活力、蛋白磷酸化水平有抑制作用,且随铬离子浓度增加抑制作用增强。当铬浓度达到2μmol/mL时精子活力MOT(58.4%)显著低于获能培养组(73.6%)(P0.05);10μmol/mL铬处理明显抑制蛋白磷酸化水平,且细胞内GAPDH活性、cAMP及ATP水平显著降低(P0.05)。而10μmol/mL铬处理中分别添加葡萄糖(5.0μmol/mL)及dbcAMP(1.0 mmol/L)和IBMX(0.1 mmol/L),能缓解铬对蛋白酪氨酸磷酸化(PTP)、蛋白丝氨酸/苏氨酸磷酸化(P-PKAs)及GAPDH活性的抑制作用。结果提示铬可能是通过干扰糖代谢及cAMP/PKA信号通路影响猪精子活力及蛋白磷酸化水平。本研究首次探究了体外培养过程中铬离子对家畜精子活力的影响,并初步探究了其作用机理,为进一步研究铬离子引起繁殖毒性的分子机制及家畜繁育提供一定的理论基础。     

养殖大菱鲆死前应激状态对肌肉代谢与品质的影响

为探索鲜活大菱鲆Scophthalmus maximus(体质量730～780 g)产品品质的调控机制,分别从致死方式、冰藏稳定性和应激恢复等方面,探索了捕后处置对大菱鲆肌肉生化特性的影响,并与市售鲜活大菱鲆(体质量为720～750 g)产品进行了分析比较,试验设无应激组(断髓速杀)、锁鲜组(无应激组冰藏7 d)、窒息组(疲劳致死)、应激恢复组(活鱼充氧运输后暂养7 d)、活品组(市售)和濒死组(市售)6组,分别进行肌肉ATP关联物、糖原、乳酸、pH值及蛋白组分分析。结果表明:死前应激状态对大菱鲆品质影响极大,无应激组大菱鲆肌肉ATP含量为2.95μmol/g,窒息组ATP则全部降解,肌肉糖原含量及pH值分别由5.28 mg/g及7.10下降至3.06 mg/g及6.61,锁鲜组大菱鲆具有良好的贮藏保鲜效果;在冰藏初期随着ATP的降解IMP迅速积累,在贮藏2 d时肌肉IMP含量达到最大值(9.81μmol/g),贮藏6 d时仍能维持较高水平(6.52μmol/g);捕后的暂养处置具有应激恢复效果,大菱鲆经采捕运输后(0 d)ATP含量仅为1.31μmol/g,暂养2 d时肌肉ATP呈现上升趋势,暂养4 d时达最大值(4.26μmol/g),暂养7 d时肌肉糖原含量由初始点(0 d)4.49 mg/g恢复至8.17 mg/g;市售鲜活大菱鲆品质具较大提升空间,活品组ATP含量仅为1.70μmol/g,而濒死组ATP几乎全部降解,且均有显著的肌球蛋白及肌动蛋白降解现象。研究表明,离水即刻速杀冰藏处置的锁鲜品相对于市售大菱鲆具有优越的肌肉品质,捕后暂养处置能有效降低大菱鲆采捕运输产生疲劳应激导致的产品品质劣变。     

ABC转运蛋白介导离子跨膜运输的研究进展

腺苷三磷酸结合盒转运蛋白（ATP-binding cassette transporter,ABC转运蛋白）是一类大量存在于原核生物及真核生物的跨膜转运蛋白,其种类繁多、家族庞大且功能多样,主要功能是利用ATP水解产生的能量将底物进行逆浓度梯度跨膜运输,同时还参与抗原传递、信号传导和细胞解毒等很多重要的生物生理过程。综述了ABC转运蛋白的结构特点、跨膜吸收机制及影响因素,为研究ABC转运蛋白跨膜吸收转运养分离子及其抵抗非生物逆境胁迫提供理论支撑和研究思路。     

硒酸钠对小麦幼苗生长及微量元素积累的影响

外界硫酸盐环境的变化会影响植物对硒酸盐的吸收转运,且营养元素之间的相互作用会影响植物营养状况、健康和产量。试验选取2个小麦品种冬黑1号和洛旱6号在硫充足(+S)和缺硫(-S)营养液中培养,研究不同浓度硒酸钠对小麦幼苗生长及硒、钼、铁、铜和锌元素含量的影响,从中筛选促进小麦幼苗生长的最适硒酸钠浓度。结果表明,小麦根部吸收的硒和钼可以向地上部转运,主要集中在地上部,叶片硒含量随硒酸钠浓度的增加而增加,且缺硫处理下小麦幼苗对硒和钼的吸收积累能力更强;铁、铜和锌多集中在根部,在植物体内迁移转化能力弱,适宜浓度硒酸钠可以提高叶片铁、铜和锌含量,而硫缺乏和硒酸钠处理均会降低根部铁、铜、锌含量;硫充足(+S)和缺硫(-S)条件下促进小麦幼苗生长的最适硒酸钠浓度分别为5、1μmol/L,此时小麦生长状况良好,微量元素积累也较高;缺硫营养液中高浓度硒酸钠(10μmol/L)处理下,小麦叶片中硒含量最高,但对小麦幼苗有毒害作用,根长、叶绿素含量及硒耐受指数均最低,而硫酸盐可以减弱硒的毒害作用。不同营养环境下只有添加适宜浓度硒酸钠才能促进小麦幼苗生长,同时增加植物中营养元素含量。     

外源硒对蒲公英生长、生理特性及其硒含量的影响

为研究叶面喷施外源硒对蒲公英（Taraxacum mongolicum Hand.-Mazz.）生长和品质的影响,采用盆栽试验,分析叶面喷施不同浓度亚硒酸钠溶液（0、100、200、300、400μmol/L）对蒲公英生长、生理特性及其硒含量的影响。结果表明,随着喷施硒浓度的增大,蒲公英根长和鲜重等生长指标呈先升高后降低的趋势;与对照相比,施加200μmol/L亚硒酸钠可显著提高蒲公英光合作用速率和光化学反应效率,提高光合色素含量;施加200μmol/L亚硒酸钠时蒲公英叶片SOD和CAT活性最高,施加300μmol/L亚硒酸钠时POD活性最高（P<0.05）。施硒可有效提高蒲公英绿原酸、总黄酮和总多酚的含量,施加200μmol/L亚硒酸钠时总黄酮和总多酚的含量较对照分别提高49.73%、31.34%。施硒后蒲公英各部位硒含量显著提高,叶片和根系的硒含量随硒浓度的变化符合一元二次方程。蒲公英叶片对外源硒浓度的变化较敏感,是富硒的主要部位。研究认为,叶面喷施200μmol/L亚硒酸钠是培养富硒蒲公英的最佳浓度。     

烟草含钾量反射仪-钾离子试纸法快速测定研究初报

比较了反射仪—K 试纸法(K ts-fl)、原子吸收光谱法、ICP-aeS法测定烟株叶脉汁液中的K 含量的三种方法,确定反射仪—K 试纸法测定烟株钾含量的可行性及其最佳测定范围;在烤烟不同生育期,应用反射仪—K 试纸法对烟株叶片不同部位含K 水平的测定,确定其最佳测定时期及部位。研究结果表明,反射仪—K 试纸法与原子吸收光谱法、ICP-aeS法测定结果差异不显著,应用反射仪—K 试纸法进行烟株钾素快速诊断可行,且具有时间短,简单快速,易操作等优点。反射仪测定K 的稳定线性范围是0.30～0.9g/L;在不同时期对烟株不同部位测定研究表明,最佳诊断部位为烟株第二平展叶叶脉基部2cm段。     

低钾条件下pH值和NH+4对作物幼苗K+吸收的影响

在低K~ 、添加K~ 通道抑制剂以及5种pH值(4．5、5．5、6．5、7．5、8．5)的条件下,采用水培法研究大豆、小麦根系对K~ 吸收及其与吸收液中H~ 浓度的关系。结果表明:溶液pH值对作物K~ 的吸收有明显的影响,高pH值有利于大豆对K~ 的吸收,不利于小麦对K~ 的吸收;作物吸收的K~ 最终会引起溶液中H~ 浓度的增加。K~ 吸收量与H~ 分泌量之比不是定值,它随溶液pH值的变化而变化,该比值大豆小于小麦;NH_4~ 可降低作物对K~ 的吸收速率,就小麦而言,pH值对NH_4~ 减少K~ 吸收的影响更为强烈。     

钾高效基因型马铃薯钾素利用效率机制研究

为探索马铃薯钾高效机制,利用营养液沙基盆栽方法,对比研究了不同钾处理下2个钾高效材料(‘HEK-1’和‘HEK-2’)和1个普通品种(‘合作88,)的单株鲜薯产量、植株各部位在不同生长时期的干物质和钾素积累量、根系分泌有机酸种类与含量以及根系分泌物对土壤中钾的活化能力等评价作物钾效率的相关指标.结果表明,与普通品种相比,低钾浓度下,‘HEK-1’保持较高的根系干物重,各生长时期地上茎中均保持较高的钾含量,成熟期植株钾利用效率高;‘HEK-2’低钾胁迫下根系分泌物中草酸含量较多,其根系分泌物活化土壤中钾的能力强.结论:不同基因型的钾高效材料耐低钾机制不同,提高植株钾利用效率或增加根系分泌物中的草酸含量以促进钾吸收都属于马铃薯应答低钾胁迫的有效方式.     

钾离子对水稻亚铁毒害的缓解作用

采用溶液培养法研究了250 mg.L-1Fe2 胁迫下,不同K 水平对粳稻Asom inori(耐亚铁毒基因型)和籼稻IR24(亚铁毒敏感基因型)以及以IR24为背景的Asom inori与IR24的染色体片段置换系L ine22(亚铁毒敏感基因型)的株高、根长、地上部鲜重、根鲜重、叶片棕色化指数和叶片叶绿素含量的影响。结果表明,与正常培养液相比,高Fe2 胁迫抑制了水稻地上部和根系的生长,降低了叶片叶绿素含量,水稻叶片出现了棕色化斑点。随着外源供K 水平的提高,水稻地上部和根系生长受Fe2 胁迫抑制程度减弱,叶片叶绿素含量增加,叶片棕色化指数有所下降。K 对Fe2 敏感品系IR24和L ine22的缓解作用比对耐性品系Asom inori强,表明K 对水稻亚铁毒害的缓解作用存在基因型的差异。K 在一定程度上对提高水稻的耐Fe2 毒害具有重要作用。     

植物钾(K~+)离子通道的研究

钾在植物生长发育过程中具有许多重要的作用,钾离子通道是植物吸收钾离子的重要途径之一,根据结构和功能的不同钾离子通道可分为Shaker家族通道、KCO通道、其他通道。对上述植物钾离子通道蛋白的生化特性以及结构功能及相关基因研究的进展进行了详细的综述。     

商陆钾离子吸收特性研究

采用K+浓度分别为50、200和800 μmol/L的Hoagland营养液培养商陆和水稻,观测商陆的形态和生理指标,比较商陆和水稻的K+吸收动力学参数米氏常数(Km)、最大吸收速率(Imax)和钾离子吸收最低临界浓度值(Cmin).结果表明,各处理的商陆能正常生长,光合速率、蒸腾速率、株高和根冠比等的差异不显著;在低...     

NMDA receptor-mediated K+ efflux and neuronal apoptosis

Neuronal death induced by activating N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptors has been linked to Ca2+ and Na+ influx through associated channels. Whole-cell recording from cultured mouse cortical neurons revealed a NMDA-evoked outward current, INMDA-K, carried by K+ efflux at membrane potentials positive to -86 millivolts. Cortical neurons exposed to NMDA in medium containing reduced Na+ and Ca2+ (as found in ischemic brain tissue) lost substantial intracellular K+ and underwent apoptosis. Both K+ loss and apoptosis were attenuated by increasing extracellular K+, even when voltage-gated Ca2+ channels were blocked. Thus NMDA receptor-mediated K+ efflux may contribute to neuronal apoptosis after brain ischemia.     

Effect of Na+ and K+ ions on ATPase of cattle erythrocytes

It is established that the maximum activating effect on ATPase activity is displayed at a concentration of potassium 15?C30 mol/l and sodium 100?C150 mmol/l. In this case, the breed characteristics of the animals have a 13.2% effect on the Na⁺-sensitive component and 9.3% on the K⁺-sensitive.     

Ca2+ and Ca2+-activated K+ currents in mammalian gastric smooth muscle cells

Inward movement of calcium through voltage-dependent channels in muscle is thought to initiate the action potential and trigger contraction. Calcium-activated potassium channels carry large outward potassium currents that may be responsible for membrane repolarization. Calcium and calcium-activated potassium currents were identified in enzymatically isolated mammalian gastric myocytes. These currents were blocked by cadmium and nifedipine but were not substantially affected by diltiazem or D600. No evidence for a tetrodotoxin-sensitive sodium current or an inwardly rectifying potassium current was found.     

BKCa-Cav channel complexes mediate rapid and localized Ca2+-activated K+ signaling

Large-conductance calcium- and voltage-activated potassium channels (BKCa) are dually activated by membrane depolarization and elevation of cytosolic calcium ions (Ca2+). Under normal cellular conditions, BKCa channel activation requires Ca2+ concentrations that typically occur in close proximity to Ca2+ sources. We show that BKCa channels affinity-purified from rat brain are assembled into macromolecular complexes with the voltage-gated calcium channels Cav1.2 (L-type), Cav2.1 (P/Q-type), and Cav2.2 (N-type). Heterologously expressed BKCa-Cav complexes reconstitute a functional "Ca2+ nanodomain" where Ca2+ influx through the Cav channel activates BKCa in the physiological voltage range with submillisecond kinetics. Complex formation with distinct Cav channels enables BKCa-mediated membrane hyperpolarization that controls neuronal firing pattern and release of hormones and transmitters in the central nervous system.