猪源盖塔病毒的分子生物学研究进展

盖塔病毒(GETV)属于披膜病毒科甲病毒属.GETV属于虫媒病毒,可以通过蚊虫感染低等脊椎动物.猪群感染GETV后可发生轻微症状,主要导致怀孕母猪繁殖障碍.目前,GETV在世界范围内流行较为广泛,近年来逐步在猪群中暴发,导致部分猪场经济损失严重.因此,加强对猪源GETV的病原、致病机制和疫苗的研究,对于该病的防控具有更...     

盖塔病毒E2蛋白的单氨基酸多态性影响病毒毒力新发现

盖塔病毒(Getah virus,GETV)是一种由蚊媒传播的单股正链RNA病毒,属于披膜病毒科甲病毒属.该病毒自1955年在马来西亚分离至今,已遍布欧亚大陆和东南亚,1964年在中国南部的海南省首次发现GETV,迅速蔓延,近年来我国报道已有超过15个省份出现动物盖塔病毒疫情,造成一定的经济损失.该病毒宿主范围广,在猪...     

TGE病毒原液制备工艺的探讨

<正>猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的急性、高度接触性肠道传染病,对仔猪危害较大~([1])。在不同年龄、不同品种的猪群中均有TGEV感染的发生,发病猪和带毒猪在TGE的传播过程中是主要的传染源~([2])。本病主要通过消化道和呼吸道传播~([3])。TGE感染的患猪在临床上的主要症状为呕吐、腹泻,严重者会因脱水而引发死亡。TGE目前尚无特效治疗药物~([4]),但接种疫苗可切实     

猪源盖塔病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

猪盖塔病毒感染是由盖塔病毒(GETV)引起母猪妊娠初期胎儿死亡、初生仔猪发病的一种繁殖障碍性疾病。猪是自然界中GETV的主要扩增宿主,可以产生足够高的病毒血症滴度来感染叮咬的蚊子并维持GETV的传播周期,所以定期对猪群进行GETV监测对于预防潜在的GETV暴发具有重要意义。本研究通过分析GETV E2蛋白基因特征,设计特异性引物和探针,条件优化后建立检测GETV感染的Taq Man实时荧光定量PCR方法。结果表明：以阳性质粒为标准品建立的标准曲线在1×10²～1×10⁷ copies/μL内呈现良好的线性关系,扩增效率为1.61;该检测方法的最低检出限低至3.16 TCID₅₀/mL,远远低于普通PCR的检测限3.16×10³ TCID₅₀/m L;组内、组间重复性试验的变异系数均小于2%,具有良好的重复性和稳定性。本研究建立的方法能够快速有效的检测和定量GETV,为猪群中GETV监测提供可靠的检测方法。     

规模化猪场暴发PED后的快速稳定策略

正0前言1971年英国首次报道猪流行性腹泻(PED),在架子猪和育肥猪群中暴发了急性腹泻,仔猪不发病,其临床症状类似猪传染性胃肠炎(TGE),被暂时命名为流行性病毒腹泻(Epidemic?viral?diarrhea,EVD)~([1])。直到1977年,在比利时第一次分离到一株冠状病毒被认为是病原,命名为猪流行性腹泻病毒(PEDV)-CV777毒株~([2-3])。PEDV在临床上与猪传染性胃肠炎     

免疫过氧化物酶单层细胞试验检测猪圆环病毒Ⅱ型抗体方法的建立

正猪圆环病毒病(PCVD)是由猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)引起的猪传染性疫病,是继猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)之后新发现的又一重要疫病,临床主要表现为生长迟缓、进行性消瘦、呼吸困难、黄疸、腹泻、皮炎、繁殖障碍、震颤等~([1])。自1997年Clark等人首次分离到PCV-2以来,该病已给全世界养猪业造成巨大的经济损失,我国为养猪大国,PCV-2感染也相当严重,全国各大小猪场均存在PCV-2感染的报道~([2])。急需采取防治措施控制该病毒的传播,     

PRRSV与PCV2双重感染引发副猪嗜血杆菌感染病例的诊断

<正>猪圆环病毒病是指以圆环病毒2型(PCV2)为主要病原引起的断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、母猪繁殖障碍、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、猪皮炎和肾病(PDNS)的一系列疾病的总称~([1])。其临床症状主要为体质下降、消瘦、生长缓慢、腹泻、呼吸困难、母猪繁殖障碍~([2])。该病可导致猪群的免疫抑制,从而继发细菌性感染~([3])。猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)俗称猪蓝耳病,     

猪流行性腹泻病毒的分子结构和遗传特性

<正>猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种高度接触性肠道传染病,以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征~([1])。PED于1971年在英国的养殖场首次出现,随后传遍整个欧洲大陆,以冬季零星爆发为主要特征。PEDV粒子具有与冠状病毒科冠状病毒属其他成员同样的形态特征。病毒的抵抗力不强,对乙醚、氯仿等敏     

猪圆环病毒病并发非典型性猪瘟病例的诊断

<正>猪圆环病毒病(PCVD)是由2型猪圆环病毒(PCV-2)感染引起的,主要造成猪只免疫功能低下,生长速度下降,常见的临床类型有种猪繁殖障碍、哺乳仔猪腹泻、断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、生长肥育猪皮炎肾病综合征(PDNS)等~([1])。近年来,猪群圆环病毒感染愈演愈烈,且常与细菌或其他病毒混合感染,在重症临床病例中,圆环病毒往往是"罪魁祸首"或为主要"帮凶",在临床病例     

猪圆环病毒2型灭活疫苗生产关键技术

<正>猪圆环病毒2型(PCV-2)在我国乃至全世界猪群中广泛传播,是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征的主要病原,PCV-2能造成仔猪生长缓慢,饲料报酬降低,同时侵害猪的免疫系统,导致机体免疫力下降,引起其他疫病的暴发,是近年来危害养猪业的主要免疫抑制病之一~([1])。我国自     

猪流行性腹泻病毒RT-LAMP方法的建立及应用

<正>猪流行性腹泻病毒(PEDV)属于冠状病毒成员,为有囊膜的单股正链RNA病毒,以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征的一种高度接触性肠道传染病。我国从1976年开始陆续有PED的报道,20世纪80年代后该病在中国流行面逐渐扩大,并多与猪传染性胃肠炎、轮状病毒等其他肠道病原混合感染,给养猪业造成严重经济损失~([1])。环介导等温核酸扩增(Loop-mediated isother-     

断奶仔猪圆环病毒2型与多杀性巴氏杆菌混合感染的诊断

<正>仔猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)主要是由猪圆环病毒2型(PCV2)感染6⁸周龄仔猪所引起的一种以渐进性消瘦、黄疽、间质性肺炎及淋巴系统退化为主要症状的传染病8周龄仔猪所引起的一种以渐进性消瘦、黄疽、间质性肺炎及淋巴系统退化为主要症状的传染病^([1-3])。该病毒主要感染猪的免疫器官,造成免疫系统功能降低,该病发病症状与猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)等病毒感染相似,且也易混合感染,此外,PMWS也常引起细菌继发混合     

上海市2株蚊源盖塔病毒的分离鉴定及分子特性分析

为了解上海市蚊源盖塔病毒(GETV)的分子特征,2018年7月从上海市浦东新区和奉贤区马场采集蚊媒6 000余只,接种BHK-21和C6/36细胞进行病毒分离,疑似阳性分离物采用RT-PCR和IFA技术对分离株进行鉴定。结果表明,分离到2株盖塔病毒,命名为SH201801、SH201802,分别源自中华按蚊、三带喙库蚊。对2株GETV的E2基因进行克隆测序及进化分析,结果表明,本次分离的2株GETV均属于GroupⅢ型,与M1、SH05-6、SH05-16等国内分离株同源性较高,但与马来西亚原始毒株MM2021亲缘关系较远。本研究为GETV感染的流行病学调查提供了科学依据,对上海市蚊虫及蚊媒病的防治具有重要意义。     

有效控制猪流行性腹泻变异株暴发疫情典型案例分析

正猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种急性高度接触性肠道性传染病~([1])。PEDV主要是通过破坏猪肠道上皮绒毛细胞而导致感染猪出现呕吐、水样腹泻、脱水等特征症状,主要造成7日龄以内的哺乳仔猪高     

非洲猪瘟病毒实验室诊断方法的研究进展

正非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASF virus,ASFV)感染引起的猪的一种急性、烈性、高度传染性疾病,以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征~([1])。世界动物卫生组织(OIE)将ASF列为法定报告疫病,我国将其列为一类动物疫病~([2])。ASFV是非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae)非洲猪瘟病毒属(Asfivirus)的唯一成员,     

猪流行性腹泻病毒与链球菌混合感染的诊断

正随着我国养殖业的规模化、集约化发展,猪病毒性腹泻已成为威胁我国养猪业发展的主要原因之一。猪病毒性腹泻的病因十分复杂,主要的病原有猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪嵴病毒(PKV)。这4种病毒均能引起猪的肠道传染病,感染后主要表现为严重腹泻、呕吐、脱水和仔猪的高死亡率,各种年龄的猪均易感染,其中对哺乳仔猪的危害最为严重,发病率可达100%~([1])。这4种病原所致腹泻其临床症状和病理     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验

正猪圆环病毒病(Porcine circovirus diseases,PCVDs)是由猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)引发的一种猪传染性疾病。一旦PCV2感染猪后具有免疫抑制特性,能够干扰其它疫苗的免疫效果~([1])。近几年我国猪场的PCV2感染     

夏季慎防猪盖他病毒病

猪盖他病毒病是由盖他病毒(Getah virus,GETV)引起的一种虫媒性传染病[1]。夏秋蚊虫出没季节多发。各日龄猪均可感染,母猪和仔猪受到的危害较严重,母猪感染后主要表现为繁殖障碍,如流产、产死胎和弱仔,仔猪表现为发热、浮肿、震颤、肋部血疹等。可垂直传播,也能水平传播。GETV能在各种脊椎动物和节肢动物体内增殖[2],表面健康猪也能隐性带毒。1955年,马来西亚学者首次从雪背库蚊体内分离到盖他病毒[3],随后日本、澳大利亚、泰国、蒙古、菲律宾、韩国、印度尼西亚等均有相关报道,目前为止已分离到的病毒株型约为30余种。我国专家首次于1964年在海南省捕捉的库蚊中分离到GETV[4],目前,我国已经分离到的盖他病毒有10株。本文从猪盖他病毒病的病原学、流行病学、临床症状、诊断及防控等几个方面进行阐述,以期为该病的防控提供参考。     

猪源盖塔病毒Cap蛋白与E2蛋白多克隆抗体的制备及其免疫特性分析

采用RT-PCR技术扩增猪源盖塔病毒(Getah virus, GETV)的衣壳蛋白(Cap)与糖蛋白(E2)基因,构建了Cap与E2蛋白的原核表达载体pET-Cap和pET-E2,转化至BL21(DE3)诱导大量表达。纯化并复性原核表达的目的蛋白,免疫BALB/c小鼠,制备了Cap蛋白和E2蛋白的多克隆抗体,间接ELISA效价达1∶10~5以上。Western blot和免疫荧光(IFA)结果显示,Cap蛋白和E2蛋白多抗与GETV均有良好的反应性。本研究制备的Cap蛋白与E2蛋白多克隆抗体,为建立ELISA等检测方法以及GETV致病机制的研究提供了参考。     

猪痢疾的综合防控措施

猪痢疾是由猪痢疾密螺旋体(Treponema hyodysenterisa)引起的一种以黏液性、出血性下痢为特征的猪肠道传染病。猪痢疾最早于1921年被报道,直到1971年才确定为猪痢疾短螺旋体(Brachyspira hyodysenterisa)感染所致~([1])。猪痢疾一旦侵入猪群,不易根除。在流行初期,以急性出血性下痢为主,流行中后期,以亚急性和慢性黏液性下痢为主~([2])。7～12周龄仔猪易感,发病率可高达70%,病死率为30%～60%,发病率和死亡率高于成年猪~([3])。由于猪痢疾的存在,导致猪只生长缓慢,料重比升高甚至出现死亡,增加养殖成本,给养猪业带来巨大经济损失~([4])。