独蒜兰种子快速萌发培养研究

[目的]以独蒜兰种子为试验材料,探索其种子萌发的最佳培养条件。[方法]通过用不同浓度的次氯酸钙进行浸种处理,采用NAA、6-BA和活性炭3因素3水平的正交试验探讨其对独蒜兰种子萌发的影响,并观察独蒜兰种子萌发生长过程。[结果]采用0.05 mol/L的次氯酸钙浸种处理独蒜兰种子10 min后,将其接入B₅+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.3 mg/L+活性炭1.0 g/L+20.0 g/L蔗糖培养基中,培养50 d后统计种子萌发率为100%。[结论]该研究为独蒜兰植物大规模栽种生产提供科学依据。     

云南独蒜兰原球茎诱导与增殖的研究

为组织培养快速繁殖云南独蒜兰,对其进行了种子无菌萌发的基本培养基、添加物与激素以及原球茎增殖激素配比的优化筛选.结果表明:在KC、1/2MS、B5这3种基本培养基中,B5较适于种子萌发;添加蛋白胨5g/L、马铃薯泥50g/L或活性炭粉1 g/L均有利于种子萌发形成原球茎;生长激素NAA、2,4-D对种子无菌萌发具有促进作用,而细胞分裂素6-BA则抑制了种子萌发.在以B5附加AC(活性炭)1g/L的基础培养基中,激素组合6-Bal.5mg/L+NAA0.5mg/L更有利于原球茎的增殖与生长.     

云南独蒜兰组培快繁技术研究

目的:通过研究云南独蒜兰种子萌发、小苗增殖和生根的适宜培养基,建立一套独蒜兰组织培养的快速繁殖体系。方法:以独蒜兰种子为外植体,研究激素(6-benzylaminopurine和1-naphthlcetic acid)不同质量浓度配比对云南独蒜兰小苗增殖和壮苗生根的影响。结果:云南独蒜兰小苗增殖最适培养基为1/2MS+NAA1.5mg/L+6-BA0.5mg/L,壮苗与生根最适培养基为1/2MS+NAA2.0mg/L+6-BA0.3mg/L。结论:建立了一套云南独蒜兰组培快繁体系,可用于大规模生产云南独蒜兰组培苗。     

濒危兰科植物独蒜兰的快繁技术研究

对独蒜兰的离体快速繁殖技术进行了研究。以独蒜兰种子及种子萌发的无菌苗的原球茎、叶片为外植体,诱导产生无菌苗。结果表明：独蒜兰种胚萌发最适培养基为1/2MS+6- BA（0.1 mg/l）+ NAA（1.0 mg/l）+活性炭2 g/l,6- BA、KT有抑制衰老的作用,能促进独蒜兰原球茎直接分化成苗。组培苗的原球茎经切割后在诱导培养基上培养,可产生增殖分化,形成丛芽。原球茎诱导的最适培养基为1/2MS+6-BA （5.0 mg/l）+ NAA（0.2 mg/l）,增值倍数为2.71。以叶片为外植体,未获得组培苗。在独蒜兰组培快繁研究中,以种子为外植体生产组培苗是最好的方法。     

三褶虾脊兰无菌播种快繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplicata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0.5 mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA 和 1.0 g/L AC）、附加物［椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥］及基本培养基（花宝1号、1/2花宝1号、MS和1/2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1/2花宝1号+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+200 mL/L CM+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基中培养150 d左右可形成原球茎,萌发率超过80%以上;诱导原球茎在1/2MS+100 mL/L CM+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4.5;原球茎接种于花宝1号+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上分化培养40 d后,再转入花宝1号+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+2.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上培养40 d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100.0%,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的三褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

虾脊兰原球茎诱导及植株高效再生体系研究

以野生虾脊兰(Calanthe discolor)未成熟蒴果为材料,MS为基本培养基,探讨不同光照度、热激和不同培养基配方对虾脊兰种子萌发、原球茎发生及植株再生的影响。结果表明,未完全成熟的种子在1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯+1.0 g/L活性炭培养基中萌芽率最佳;在1 500 lx光照度条件下培养时种子萌发速率较快。通过黑暗条件下35℃热激5 d有利于已萌动种子脱分化形成原球茎。使用MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖培养基诱导原球茎形成胚性愈伤组织效果最好。MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯培养基分化形成植株分化率最高,1/2MS+0.2 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+0.1 g/L活性炭培养基则为最佳生根培养基,生根率100%,植株根系发达,长势健壮。该研究建立了虾脊兰无菌快繁体系,为保护野生虾脊兰资源和种苗人工繁育提供了有效技术途径,也为其遗传转化研究奠定基础。     

白及种子贮藏方法及假鳞茎诱导的研究

采用试验方法,对白及种子不同贮藏方法以及白及苗培育进行了研究,结果表明:在相同的贮藏时间,含水率为5%、温度为4℃时白及种子的活力和萌发率最高;在3/4MS培养基中添加0.7 mg/L NAA、0.2 mg/L 6-BA,白及种子萌发率最高,种胚变成绿色的时间最短。在3/4 MS培养基中,添加0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,假鳞茎诱导率最高,其直径、根数、根长均达到了差异显著水平。基于以上结果,生产上白及种子贮藏最适宜的条件为含水率5%,贮藏温度4℃;白及种子萌发的最佳培养基为3/4 MS+0.7 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA+土豆粒70 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L+活性炭0.3 g/L;适宜白及假鳞茎诱导、植株生长发育的最佳培养基为3/4 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+香蕉50 g/L+土豆70 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+活性炭0.3 g/L。     

春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术研究

为探索春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术提供参考,以♀大花蕙兰‘冰瀑’×♂春兰‘新春梅’杂交所结果荚为试验材料,分别进行基本培养基、GA₃、琼脂、AC 4因素3水平的杂交种子无菌萌发试验,基本培养基、6-BA、NAA 3因素3水平的杂交种原球茎增殖试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的杂交种原球茎分化试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的壮苗生根培养试验,筛选适宜的培养基。结果表明：1)适宜杂交种子无菌萌发的培养基为MS+GA₃0.50 mg/L+琼脂4.5 g/L+蔗糖20 g/L+AC0.50 g/L+蛋白胨1 g/L,平均萌发启动时间为50 d,平均萌发率为88.7%。2)适宜杂交种原球茎增殖的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂4.0 g/L+蛋白胨1.0 g/L,增殖系数达12.5。3)适宜杂交种原球茎分化的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/...     

独蒜兰快繁技术的研究

研究结果表明,独蒜兰组织培养最好选用种子萌发的幼芽体进行.激素的种类和浓度影响愈伤组织的形成,在2,4-D 2 mg*L-1 6-BA 0.25 mg*L-1和2,4-D 2 mg*L-1 KT 0.25 mg*L-1的MS培养基中,外植体的死亡率较低;高浓度的2,4-D有利于快速形成大量的愈伤组织,但愈伤组织褐变死亡率较高;无论是种子萌发的芽还是从假鳞茎上剥下的芽,在6-BA 2 mg*L-1的MS上其长势都是最好;6-BA 2 mg*L-1最适合外植体为种子萌发的芽的增殖,当6-BA浓度为4 mg*L-1时,则抑制了外植体的芽的增殖与生长;NAA对外植体的芽的增殖和生长都有抑制作用;MS 6-BA 3.0 mg*L-1 NAA 0.5 mg*L-1培养基对不同外植体芽的增殖倍数有显著性差异;添加了IBA的培养基有利于根系的诱导.     

金线兰组织培养技术研究

为比较不同的外植体灭菌时间、培养基质等对金线兰离体组织丛生芽诱导、壮苗生根的影响,寻求最适合的培养方法,达到快速获得大量幼苗的目的,特进行了金线兰组织培养技术试验。结果表明,外植体的灭菌时间对诱导成功率有较大影响;QZ(MS+6-BA 10 mg/L+蔗糖30 g/L+椰子汁30 m L/L+琼脂7 g/L,p H值5.5~5.8)培养基较适合金线兰外植体的诱导;SG(添加花宝1号3 g/L+花宝2号0.5 g/L+蛋白胨2 g/L+活性炭0.8 g/L+土豆泥50 g/L+蔗糖20 g/L+琼脂5.5 g/L,p H值5.5~5.8)培养基较适合金线兰的生根培养。     

鸢尾蒜种子无菌萌发及鳞茎形成

以采自新疆的野生鸢尾蒜[Ixiolirion tataricum (Pall.) Herb.]种子为材料,比较研究了消毒方式、培养条件、种子预处理、贮藏条件对鸢尾蒜种子无菌萌发及离体鳞茎形成的影响。无菌播种结果表明:75%乙醇涡旋30 s,结合2%NaClO 5 min是种子的最佳消毒方式,污染率为0;鸢尾蒜种子在4℃条件下的萌发率在94.0%以上,而在25℃条件下则几乎不萌发。贮藏条件对种子萌发影响很大,4℃贮藏6个月后种子依旧能够正常萌发,而室温(25℃)贮藏6个月后种子完全丧失发芽力。筛选出的最有利于鸢尾蒜离体鳞茎形成的种子萌发培养基为MS+6-苄基腺嘌呤(6-benzylaminopurine, 6-BA)1.0 mg/L+萘乙酸(1-naphthylacetic acid, NAA)0.2 mg/L+蔗糖30 g/L,在该培养基上播种30 d后出芽整齐,然后转入25℃光照条件下,再转接至含60 g/L蔗糖的MS培养基上,可形成膨大的鳞茎。总之,该研究建立的鸢尾蒜无菌播种和鳞茎形成体系,为野生鸢尾蒜的离体资源保存与进一步开发利用提供了理论依据。     

大花蕙兰胚培养技术研究

研究了不同培养基对大花蕙兰种子原球体的诱导及生长状况的影响。结果表明:花宝(Hyponex N-P-K=6.5-6-19)3.00 g/L+蛋白胨2.00 g/L+活性炭2.00 g/L+蔗糖20.00 g/L+琼脂7.50 g/L+10%椰乳最适宜对大花蕙兰种子进行原球体的诱导,而花宝(Hyponex N-P-K=6.5-6-19)3.00 g/L+蛋白胨2.00 g/L+蔗糖50.00 g/L+10%椰乳+NAA 1.00 mg/L最适宜大花蕙兰的壮苗与生根;椰乳对大花蕙兰的生长有明显的促进作用。     

三褶虾脊兰无菌播种陕繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplieata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0．5mg／L6-BA、0．1mg／LNAA和1．0g／LAC）、附加物[椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥]及基本培养基（花宝1号、1／2花宝1号、MS和1／2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1／2花宝1号＋0．5mg／L 6-BA＋0．1mg／L NAA＋200ml/L CM＋1．0g／L AC＋20．0g／L蔗糖培养基中培养150d左右可形成原球茎,萌发率超过80％以上;诱导原球茎在1／2MS＋100mL／LCM＋2．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4．5;原球茎接种于花宝1号＋0．1mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上分化培养40d后,再转入花宝1号＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋2．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上培养40d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100．0％,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的王褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

滇独蒜兰的组织培养研究*

 以滇独蒜兰的不同部位为外植体进行组织培养方法的研究，结果表明：以种子为外植体最佳，种子在MS+NAA0.2 mg/L 的培养基在上经过2～3个月的培养，有一部分的种子开始形成极小的愈伤组织或原球茎；再转接到MS+BA5.0～10.0 mg/L+NAA0.2 mg/L 的培养基上，其中少部分会进一步分化成胚状体，并形成小植株，经过多次继代转接可形成丛芽，丛芽的增殖系数高达6倍。通过进一步优化培养基及培养条件，可使种子培养的效率提高。以叶片和鳞茎为外植体，均未获得组培苗。     

纹瓣兰无菌播种快繁技术研究

以纹瓣兰[Cymbidium aloifolium (L. ) Sw]的种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株的途径进行繁殖.结果表明:种子在MS+6-BA 0. 2 mg/L+AC 1.0 g/L+蔗糖30 g/L培养基培养30 d左右,可形成原球茎;原球茎在1/2MS+6-BA 4 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L的培养基上增殖效果最好;原球茎接种于1/2MS+6-BA 0.1 mg/L +NAA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L培养基上培养4周后,再转入1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 2.0 g/L+香蕉泥80 g/L的培养基上培养30 d,可诱导形成完整的植株.     

大花蕙兰与朱砂兰杂种根状茎增殖和分化的研究

以大花蕙兰与朱砂兰杂交种子萌发后形成的根状茎为试验材料,采用KT、6-BA和NAA三种外源激素对杂交兰根状茎进行实验,比较不同激素对根状茎增殖和分化的影响。单因素实验中,随着激素KT、6-BA浓度的增加,杂交兰根状茎的增殖率和分化率逐渐增加,但不成正比例关系。NAA浓度一定时,6-BA浓度为3 mg/L时,杂交兰根状茎的平均增殖率最高达到290%,6-BA浓度为4 mg/L时,根状茎的平均分化率最高达到85.64%;KT浓度为2.5 mg/L时,平均增殖率最高为300%;KT浓度为3.0 mg/L时,根状茎的平均分化率最高为87.89%。三种激素复合添加对杂交兰根状茎增殖和分化效果最佳。增殖效果最佳的培养基为1/2 MS+6-BA 3.0 mg/L+KT 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂粉7.0 g/L+香蕉80 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭1 g/L,根状茎粗壮且长,增殖率高。分化效果最佳培养基为1/2 MS+6-BA 4.0 mg/L+KT 2.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂粉7.0 g/L+香蕉80 g/L+蔗糖30 g/L+活性炭1 g/L,分化苗生长良好,叶色深绿。本研究为杂交优株实现工厂化育苗奠定了一定的理论基础。     

铁皮石斛高效快速繁殖体系研究

为了建立铁皮石斛(Dendrobium officinale)种子高效快速繁殖体系,以铁皮石斛种子为外植体,在萌发培养基上萌发为原球茎,原球茎经悬浮培养增殖,再接种于分化培养基分化、生根长成完整植株。结果显示,原球茎增殖最佳培养基为1/2 MS培养基+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+0.33 g/L(NH4)2SO4+0.525 g/L KNO3+30 g/L蔗糖;原球茎分化最佳培养基为N6+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+100 g/L土豆汁+25 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;幼苗生根最佳培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA+50 g/L土豆汁+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;悬浮培养与固体培养相结合的技术优于固体组织培养技术,其具有生长周期短、节省空间、节约成本,促进原球茎增殖、提高分化率,促进生根的特点,可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供基础。     

墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种组培快繁技术

以墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种原球茎为试材,探索不同培养基配方对其增殖、分化及生根的影响。结果表明,原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)1.0 mg/L+萘乙酸(NAA)1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L,增殖率可达317.77%;原球茎使用培养基1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L培养时的分化率为54.96%,分化效果相对最好;培养基1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L有利于不定芽的增殖,增殖率为227.5%;1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L+活性炭1.0 g/L为最适生根培养基,生根率达81.00%,且苗体生长健壮。     

百合试管小鳞茎高效再生体系的研究

以百合试管鳞茎诱导丛生芽,适宜诱导的培养基为MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA+ 30 g/L蔗糖+5500 mg/L琼脂,光照强度1 500 ～2 000 lx.芽长至1～2 cm时,转入鳞茎分化培养基,适宜的鳞茎分化培养基为MS+1.0 mg/L NAA+ 90 g/L蔗糖+300 mg/L活性炭+5500mg/L琼脂,黑暗条件.提高培养基中的糖浓度可以提高百合再生小鳞茎的重量;在培养基中添加活性炭可提高再生小鳞茎形态的正常率.     

中国兰原球茎诱导及组培快繁技术研究

本研究以中国兰为试验材料建立中国兰组培快繁体系，对无菌体系建立、原球茎诱导、原球茎增殖、形成完整植株、驯化移栽等进行了系统研究。结果表明，最佳的消毒处理组合为10%漂白粉上清液浸泡15 min、70%乙醇浸泡30 s、0.1%氯化汞溶液浸泡3 min；原球茎最佳诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖25.0 g/L+琼脂7.0 g/L，其诱导率为100%；原球茎最佳增殖培养基为1/2MS+6-BA 0.25 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖15.0 g/L，其增殖系数为15.3；最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖15.0 g/L+琼脂10.0 g/L+活性炭5.0 g/L，生根率达100%，生根数5.42；采用移栽驯化基质体积配比为沙子∶草碳土（或腐殖土）是1∶1，组培苗移栽成活率达93.33%。