褐飞虱抗有机磷品系的交互抗性及适合度研究

测定了褐飞虱敏感品系和两个实验室选育的抗有机品系的交互抗性。结果表明：有机磷杀虫剂和氨基甲酸酯杀虫剂之间存在交互抗性；两个抗性品系对拟除虫菊酯类和吡虫啉均无明显的交互抗性。通过建立两个抗性品系和敏感品系的生命表，发现抗性品系适合度显著下降，低龄若虫存活率和羽化率低，成虫寿命缩短，卵历期延长；在繁殖上均表现为交配率、产卵量和孵化率下降；马拉硫磷抗性品系还表现为若虫历期延长。用种群数量趋势指数（I）来确定两个抗性品系的相对生物适合度，发现与敏感品系相比，甲胺磷抗性品系和马拉硫磷抗性品系的相对适合度仅分别为0．49和0．19。认为：抗性品系生物适合度的下降可能造成褐飞虱对这些杀虫剂抗性发展的不稳定性。     

灰飞虱对毒死蜱的抗性风险评估、抗性遗传及交互抗性

采用群体筛选法对2001年采自云南楚雄对毒死蜱敏感的灰飞虱(SS)进行连续筛选,筛选13代后,获得抗性为107.86倍的抗性(RR)品系.估计其抗性现实遗传力为0.33,在室内同等选择条件下,致死率为50%～90%时,抗性上升10.00倍需4～9代.利用RR品系与敏感品系SS进行遗传杂交分析灰飞虱对毒死蜱的抗性遗传规律,结果表明正、反交后代对毒死蜱的抗性分别为12.96倍和12.78倍,显性度D值分别为0.095和0.089,说明灰飞虱对毒死蜱的抗性为常染色体遗传,主效基因为不完全显性.通过分析杂交F1代和敏感品系SS回交后代对毒死蜱的LD-P线,表明灰飞虱对毒死蜱的抗性为单基因性状.交互抗性谱测定结果表明,RR品系对有机磷杀虫剂敌敌畏有5.82倍的交互抗性,对烟碱类噻虫嗪、苯基吡唑类氟虫腈和大环内酯类阿维菌素没有交互抗性.     

抗药性灰飞虱稳定内参基因的筛选

[目的]本文旨在筛选抗药性灰飞虱稳定的内参基因,使目标基因的定量更加准确。[方法]在利用抗性灰飞虱雌成虫转录组数据挖掘新候选内参基因[26S蛋白酶体非ATP酶的调节亚基3(PMSD3)、泛素结合酶E2D2类基因(UBE2D2)、蛋白磷酸酶1B类基因(PP1B-like)和真核翻译起始因子3亚基(e IF-3)]的基础上,结合传统持家基因[3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、延伸因子(EF-1)、肌动蛋白1(β-ACT1)、核糖基化因子(ARF)、60S核糖体蛋白L9基因(RPL9)、40S核糖体蛋白S15e(RPS15e)和精氨酸激酶(AK)],采用以ΔC_T值法、Best Keeper、Norm Finder、ge Norm软件法和在线工具Ref Finder分析上述候选内参基因在不同抗性灰飞虱雌成虫和若虫中表达量的稳定性。[结果]在3种不同抗性的灰飞虱雌成虫中EF-1和e IF-3基因表达最为稳定;在抗吡虫啉的灰飞虱若虫中EF-1和ARF基因表达稳定;在抗溴氰菊酯的灰飞虱若虫中EF-1和β-ACT1基因表达稳定;在抗毒死蜱的灰飞虱若虫中RPL9和EF-1基因表达稳定。[结论]研究明确了3种不同抗药性灰飞虱雌成虫和若虫中稳定表达的内参基因,为实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术提供了有力的技术支撑,对后续灰飞虱抗药性研究中关键目标基因的准确定量具有重要的意义。     

低温对褐飞虱发育、生殖的影响

在13、16、19、22、25 ℃下,测定了褐飞虱各虫态的发育历期.结果表明,褐飞虱若虫各虫态在不同温度下的发育历期有明显的差异,在同一龄期的发育历期随温度的降低而延长.13 ℃卵不能孵化.褐飞虱若虫的平均发育历期与温度呈线性相关.在同一温度下,以1、5龄若虫历期较长,2、3、4龄若虫历期较短.不同温度下雌成虫寿命都要比雄成虫寿命长.采用直接最优法计算发育起点温度和有效积温,结果表明为:1、2、3、4、5龄和若虫期发育起点温度分别为:10.06、11.89、10.10、10.91、10.02、9.99℃;有效积温分别为:101.01、35.07、48.64、43.07、80.65、323.58 d·℃雌虫产卵量随温度降低而减少.25℃和22 ℃产卵量无显著差异,但都显著高于19℃和16 ℃、13 ℃成虫不能产卵.     

温度对黑肩绿盲蝽生长发育和繁殖的持续影响

黑肩绿盲蝽（Cyrtorhinus lividipennis Reuter）是稻田重要害虫褐飞虱的主要天敌,人工饲养和大田释放黑肩绿盲蝽,能有效控制褐飞虱。在实验室研究了不同温度（19,23,27和31℃）对黑肩绿盲蝽生长发育和繁殖的连续3个世代的持续影响。结果表明,19℃条件下随着世代发展,雌若虫历期缩短,子代数量降低;31℃条件下随着世代发展,雌成虫寿命缩短,子代数量降低;其他温度对若虫存活率、雄若虫历期、雌虫体重、成虫寿命和子代数量持续影响不显著。试验结果说明在相对低温19℃和相对高温31℃下,黑肩绿盲蝽的生长发育和繁殖受到抑制。     

灰飞虱生物学特性研究

灰飞虱Laodelphax striatellus (Fallen)卵、若虫、成虫(产卵前期)的发育起点温度分别为10．9488℃、1.1709℃、9、4433℃,有效积温（日度)分别为120．0635、437．226l、76．5710,灰飞虱以3龄、4龄若虫越冬,平均过冷却点分别为-7．22℃和-7．8℃。雌成虫产卵大多处于水稻中下部的叶鞘内, 卵有很强的耐浸水能力,而不同的温度条件能影响雌成虫的产卵量。     

灰飞虱发育起点温度及有效积温的研究

利用培养箱，在恒温条件下饲养灰飞虱（Laodelphax striatellus Fallen）。测定卵、若虫、成虫繁殖前和全世代发育历期，用直线回归法计算灰飞虱各虫态和全世代的发育起点温度和有效积温：分别为10．06、6．43、10．29、8．03℃和102．3、365．2、87．5、52．1日度；根据有效积温法则预测该虫在济宁市1年完成的代数为5．2代。     

田间灰飞虱抗药性相关细胞色素P450基因和酯酶基因的筛选

利用毒死蜱、吡虫啉和溴氰菊酯等3类不同药剂,通过毒力生测首先确定了田间灰飞虱对杀虫剂的低水平多重抗性特性;其次通过解毒酶活力测定,发现抗性品系的细胞色素P450氧化酶和酯酶明显升高;进而根据灰飞虱转录组数据进行引物设计,通过PCR克隆对转录组中的细胞色素P450及酯酶基因进行验证,在得到53条细胞色素P450基因序列及72条酯酶基因序列的基础上,利用半定量PCR比较这些基因在灰飞虱田间抗性品系和敏感品系间的表达差异。结果发现:细胞色素P450的CYP6家族中有10条,CYP4家族中有6条,这16条基因序列在抗性品系中的表达量明显高于敏感品系;酯酶中也有12条基因系列在抗性品系中的表达量明显高于敏感品系,它们中3条来自羧酸酯酶家族,8条来自磷酸酯酶家族,1条来自其他酯酶家族。提示:解毒酶基因的过量表达是灰飞虱田间低水平多重抗性的主要机制,也是抗药性发展初期的关键因素,利用分子生物学技术进行田间监测,有利于了解田间灰飞虱的抗药性发展。     

灰飞虱共生真菌P450过量表达介导的吡虫啉抗药性

昆虫共生菌广泛参与寄主昆虫抗药性的形成,但对其抗性产生的分子机制的研究相对较少.本研究首先在室内敏感品系基础上建立了灰飞虱抗、感吡虫啉品系,利用现有灰飞虱转录组数据库,序列验证并定量分析了15条灰飞虱共生真菌P450基因,与敏感品系相比,发现其中10条P450基因在吡虫啉抗性品系中显著过量表达(LsSFP450-2、LsSFP450-8、LsSFP450-14、LsSFP450-12、LsSFP450-4、LsSFP450-5、LsSFP450-10、LsSFP450-7、LsSFP450-15、LsSFP450-9),由此推断灰飞虱共生真菌P450解毒代谢途径同样是介导吡虫啉抗药性的潜在因子,此结果为宿主共生菌介导杀虫剂抗性研究及田间害虫有效化学防控提供了新理论视角.     

灰飞虱对氟虫腈的抗性及其机制研究

通过室内抗性品系筛选、现实遗传力分析、离体酶活力测定,对灰飞虱对氟虫腈抗性及其机制进行了研究.结果 发现:灰飞虱对氟虫腈的抗性发展较慢,利用田间低抗种群(RR 6.9倍)进行室内筛选,24代后抗性仅增加到21.2倍,其抗性现实遗传力较小,仅为0.041.利用室内筛选的氟虫腈抗性和敏感性品系进行解毒酶活力的对比研究发现:抗性灰飞虱体内的酯酶和谷胱甘肽转移酶活力与敏感品系没有显著差异,但P450单加氧酶活力是敏感品系的1.58倍.增效试验表明:在敏感品系中3种增效剂对氟虫腈均没有明显增效,但在抗性品系中,PBO对氟虫腈的增效比达到13.68,TPP和DEM的增效比仅分别为1.39和1.35.表明:灰飞虱对氟虫腈的抗性主要是由多功能氧化酶活力升高所致.     

灰飞虱生物学特性研究

灰飞虱Ｌａｏｄｅｌｐｈａｘ ｓｔｒｉａｔｅｌｌｕｓ（Ｆａｌｌｅｎ）卵、若虫、成虫（产卵前期）的发育起点温度分别为１０．９４８８℃、１．７０９℃、９．４４３４℃,有效积温（日度）分别为１２０．０６３５、４３７．２２６１、７６．５７１０,杰飞虱以３龄、４龄若虫越冬,平均过冷却点分别为－７．２２℃和－７．８℃。雌成虫产卵大多处于水稻中下中的叶鞘内,卵有很强的耐浸水能力,而不同的温度条件能影响雌成虫的产卵     

稻田用杀虫剂对灰飞虱种群数量的影响

为理清稻田常用农药对灰飞虱的毒力和对灰飞虱种群的中长期影响,进而为科学防治灰飞虱提供依据,采用稻茎浸渍法测定了14种农药单剂对褐飞虱和灰飞虱的毒力以及10种混剂对2种飞虱的联合作用效果。通过观察灰飞虱种群数量变化和灰飞虱的繁殖能力,测定了三唑磷、高效氯氟氰菊酯、毒死蜱和噻嗪酮+毒死蜱对灰飞虱种群的中长期影响。结果表明,吡蚜酮、噻嗪酮、啶虫脒和速灭威等对褐飞虱的毒力显著高于对灰飞虱的毒力;吡虫啉+异丙威、吡虫啉+仲丁威、噻嗪酮+毒死蜱、噻嗪酮+甲萘威、噻嗪酮+混灭威和噻嗪酮+速灭威等杀虫剂混配组合对褐飞虱有增效作用,对灰飞虱有拮抗作用;除吡虫啉+毒死蜱组合对2种飞虱的毒力没有显著差异外,其他混配组合对褐飞虱的毒力显著高于对灰飞虱的毒力。三唑磷、毒死蜱和高效氯氟氰菊酯对灰飞虱若虫的毒力远大于对成虫的毒力。毒死蜱、三唑磷和高效氯氟氰菊酯不同程度地促进了灰飞虱成虫的繁殖能力,水稻后期使用毒死蜱、三唑磷、高效氯氟氰菊酯和噻嗪酮+毒死蜱后,增加了灰飞虱的越冬基数,增加了来年迁入水稻秧田的灰飞虱数量。可见,在稻田使用吡蚜酮、噻嗪酮、啶虫脒、速灭威等杀虫剂单剂和吡虫啉+辛硫磷、吡虫啉+速灭威、吡虫啉+异丙威、吡虫啉+仲丁威、噻嗪酮+吡虫啉、噻嗪酮+甲萘威、噻嗪酮+混灭威、噻嗪酮+速灭威等杀虫剂混剂时,用能够控剂褐飞虱的农药剂量难以有效控制灰飞虱的种群数量;在稻田使用三唑磷、毒死蜱、高效氯氟氰菊酯和噻嗪酮+毒死蜱,将增加灰飞虱的种群数量;在秧田期使用三唑磷、毒死蜱和高效氯氟氰菊酯防治灰飞虱成虫,不仅不能控制灰飞虱的种群数量,还将促进灰飞虱的繁殖能力。     

气候条件对水稻褐飞虱消长的影响与分析

室内与田间温度在30℃以上,对褐稻虱成虫的寿命、雌虫产卵量、卵的孵化率和若虫存活率都有显著影响。短期内气温骤降,对胚胎发育后期的卵和低龄若虫有极大影响,致使若虫发育历期变长,死亡率大大增加。当飞虱迁入期早,迁入量中等或以上,遇到盛夏不热、晚秋不凉、雨水充沛等持续的适宜气候条件下,极易导致三、四代飞虱暴发流行、危害成灾。盛夏高温季节,可在褐飞虱生命链中最薄弱环节,突击用药提高防效;秋季大幅度降温飞虱初孵若虫死亡率高,可暂缓用药,当温度低于17℃时不用药防治。     

毒死蜱对褐飞虱的亚致死效应研究

为探讨毒死蜱(Chlorpyrifos)对褐飞虱Nilaparvata lugens(Stl)的亚致死效应,本文采用稻茎浸渍法,分别以LC10和LC25浓度的毒死蜱胁迫褐飞虱3龄若虫,观察受胁迫后试虫发育历期、存活数、产卵量和雌虫寿命的变化情况,并组建经LC10、LC25浓度处理后F1代种群生命表,为褐飞虱的综合防治提供数据参考。结果表明:以毒死蜱LC10和LC25浓度分别处理褐飞虱3龄若虫,其F0代的孵化率与对照相比明显下降;处理组褐飞虱的种群相对适合度分别仅为0. 86和0. 74,表明亚致死浓度毒死蜱可有效抑制褐飞虱种群的增长;通过组建F1代生命表发现,亚致死浓度处理褐飞虱后,能够显著抑制孵化率。另外,处理后褐飞虱的存活率、羽化率、孵化率与对照组相比均有所降低,对褐飞虱的发育历期有轻度延长。根据研究结果推测,将毒死蜱用于防治水稻害虫时,毒死蜱不但对褐飞虱有致死作用,其亚致死浓度胁迫能进一步抑制下一代褐飞虱的种群增长。     

不同温度和密度下黑肩绿盲蝽对褐飞虱的功能反应

在实验室条件下,开展不同温度和密度下黑肩绿盲蝽对褐飞虱的功能反应试验,用该方法定量评价黑肩绿盲蝽对褐飞虱的捕食作用。结果表明,黑肩绿盲蝽对褐飞虱若虫的功能反应为HollingⅡ型反应,在温度为24-35℃时,24-30℃黑肩绿盲蝽的捕食量随温度的升高而增加,在30℃时捕食量达到最大值,30-35℃捕食量随温度的升高而降低。在不同密度下,黑肩绿盲蝽的捕食量随密度的增大而增加,捕食量在一定范围内随着猎物密度的增加而增加,若虫的捕食能力大于成虫;4龄若虫理论捕食量最大,为104.2粒卵/d。数值反应研究结果表明,不同褐飞虱卵密度对黑肩绿盲蝽的生长、发育、繁殖有着显著影响。随着猎物密度增大,黑肩绿盲蝽若虫发育迅速、雌虫产卵量、孵化率及雌性比增大,成虫寿命减小,最后趋于稳定。     

农田杂草灰飞虱的空间格局与抽样技术

通过聚集度指标法测定和*m--X回归法分析,研究了浙江地区农田杂草越冬代灰飞虱成若虫的田间分布格局与抽样技术。结果表明,灰飞虱成虫、若虫和成若虫混合种群趋向于聚集分布,聚集强度随虫口密度增加而增强,抽样数量随虫口密度增加而递减,最适理论抽样模型为n2=105.95/-X 31.2,当灰飞虱虫口密度每样方2,5,10和20头以上时,分别抽查80,50,40和30样方。以棋盘式、五点式或Z字型等取样方法较宜。     

温度和寄主对柚喀木虱生长发育的影响

【目的】研究温度和寄主对柚喀木虱Cacopsylla citrisuga生长发育的影响。【方法】模拟柚喀木虱的自然生存环境,用人工气候箱研究其在柠檬Citrus limon上繁殖时各虫态的发育历期、存活率、成虫产卵前期和产卵量,同时比较其在黄龙病柠檬苗上饲养时上述生物学指标的变化;研究15、20和25℃条件下柠檬、九里香Murraya exotica和酸橘Citrus sunki对柚喀木虱成虫存活率的影响。【结果】在15℃、相对湿度70%条件下柚喀木虱在健康柠檬上平均卵历期为9.38 d,1~5龄若虫历期分别为8.80、6.66、6.00、6.76和5.94 d,产卵前期为16.2 d,世代历期为59.74 d,世代存活率为28.34%;而在带病柠檬上2龄、4龄和总若虫历期显著缩短,产卵前期显著延长,4龄、总若虫期存活率和世代存活率显著下降。来源相同的成虫在健康和黄龙病柠檬苗上的产卵量无显著差异,但在病苗和健苗上分别饲养1代后,从健苗上羽化的成虫产卵量显著高于病苗。在相同的温度条件下,用柠檬饲养柚喀木虱成虫存活率最高;而在相同的寄主条件下,温度为15℃时存活率最高;成虫在柠檬上15℃条件下饲养20 d后存活率仍达81.67%。寄主感染黄龙病使柚喀木虱若虫的发育历期缩短,但对其存活率和繁殖造成不良影响。【结论】该饲养条件下的柚喀木虱能顺利完成整个世代且能获得较高存活率,该饲养条件可用于室内大量繁殖柚喀木虱,并进一步应用到柚喀木虱的生活习性和黄龙病病理研究中。     

温度对长绿飞虱蜜露分泌量及体质量的影响

为研究长绿飞虱的为害规律,制定合适的防治策略。对不同温度下长绿飞虱成若虫蜜露分泌量和体质量变化进行研究,建立了若虫蜜露排放量与体质量的回归方程。结果表明,长绿飞虱低龄若虫及不同体色成虫在不同温度下蜜露排放量无显著变化,但其高龄若虫在高温条件下平均蜜露排放量显著升高;雌成虫体质量为雄虫体质量的2倍,雌虫体质量在26 ℃最高;除5龄若虫外,温度未对若虫体质量产生显著影响。各温度条件下长绿飞虱若虫日均蜜露排放量与其体质量呈显著正相关。长绿飞虱为害最严重时期为4~5龄若虫期,故田间防治长绿飞虱时期应选择在3龄及3龄以前,当田间温度较低时,可以考虑适当放宽长绿飞虱的防治指标。     

登记用于防治水稻条纹叶枯病的药剂

水稻条纹叶枯病是由灰飞虱传播的病毒病，生产上应采取“治虫防病”的防治策略，重点在水稻秧田期和移栽前期（各地大致在5月下旬至7月上旬）防治从麦田迁入的一代灰飞虱成虫和二代灰飞虱若虫，适用药剂有锐劲特、毒死蜱、敌敌畏、丁硫克百威、异丙威、扑虱灵、吡虫啉等，注意交替或混合使用不同药剂。     

温度对空心莲子草叶甲生长发育及繁殖的影响

研究了不同恒温条件下空心莲子草叶甲的发育历期和繁殖力。在15～30℃范围内,空心莲子草叶甲各虫态的发育历期随着温度的升高而缩短,33℃时各龄历期均延长。卵、幼虫、蛹和世代的发育起点温度分别为7.13、4.89、6.77和6.82℃,世代有效积温为488.60日度,世代最大发育速率温度为30.56℃,27℃时叶甲孵化率、存活率、繁殖力和种群趋势指数均为最大;24～27℃为其最适温区。