大叶相思花粉离体萌发适宜条件及活力检测方法

【目的】对大叶相思花粉离体萌发适宜条件以及花粉活力不同检测方法进行研究,为今后进一步开展人工控制授粉、选育优良的马大杂交新品种提供基础。【方法】采回花穗的次日10:00之后,使用毛笔刷法收集大叶相思花粉;通过不同培养温度、不同蔗糖浓度和不同硼酸浓度处理后进行花粉离体萌发,筛选适宜大叶相思花粉离体萌发的条件;采用过氧化物酶法、I_2-KI法以及花粉管离体萌发法对大叶相思花粉进行活力测定,探讨大叶相思花粉有效的活力测定方法。【结果】大叶相思花粉在28℃下培养,其花粉平均萌发率为71.99%,花粉管平均长度为5.3 D(1 D=1倍的花粉粒长度),花粉管平均条数为6.2条,显著高于其他培养温度的处理。当培养基中含有200 g·L~(-1)蔗糖时,大叶相思花粉萌发率为84.96%,其花粉管平均长度为5.8 D,花粉管平均条数为6.2条,显著高于含有其他蔗糖浓度的处理。在含有300 mg·L~(-1)硼酸的培养基中培养大叶相思花粉,其平均萌发率为75.32%,花粉管平均长度可达4.8 D,平均花粉管条数为5.4条,显著高于在其他硼酸浓度下的处理。大叶相思花粉在培养温度30℃、200 g·L~(-1)蔗糖、300 mg·L~(-1)硼酸的培养基中萌发率为98.26%,花粉管长度均可达到10倍复合花粉粒的长度,最多可萌发出10条花粉管,显著高于其他处理。培养3 h的大叶相思花粉,萌发率为65.74%;培养6 h时,其萌发率为90.55%;培养24 h后,其萌发率趋于稳定,达到最高值98.26%。过氧化物酶法检测的花粉活力为99.67%,I_2-KI法检测的花粉活力为99.00%,花粉管离体培养法检测的花粉活力为98.15%,3种方法检测的花粉活力无显著差异。【结论】大叶相思花粉在不同的离体培养处理下,其萌发情况均不相同且差异显著,最佳离体萌发条件为200 g·L~(-1)蔗糖+300 mg·L~(-1)硼酸,培养温度为30℃,萌发率为98.26%。过氧化物酶法、I_2-KI法以及花粉管离体培养法检测的花粉活力无显著差异。研究结果可为今后开展大叶相思的花粉收集、贮藏及活力测定等研究,以及开展人工控制授粉选育优良马大杂种相思新品种等研究提供重要依据。     

红锥花粉离体萌发适宜条件及贮藏方法

为给红锥（Castanopsis hystirx）人工授粉和新品种培育提供基础,测定红锥花粉萌发率和花粉管长度,探讨花粉的最佳离体萌发条件和贮藏条件。结果表明,采用100 g/L蔗糖+200 mg/L硼酸培养液,培养温度为25℃,花粉萌发率最高（28.23%）,花粉管长度最长（260.45μm）;采用-20℃+干燥剂或-80℃+干燥剂贮藏花粉效果较好,贮藏365天,萌发率仍有30.54%和26.43%,花粉管长度为108.61和95.65μm。低温、干燥有利于红锥花粉贮藏。     

3种悬钩子属植物花粉离体萌发培养基成分筛选

为了探究悬钩子属植物花粉离体萌发的最适培养基成分,选择3种悬钩子属植物:山莓、蓬藟、掌叶覆盆子,采用离体培养法,研究了不同培养基组分对悬钩子属花粉萌发率、萌发优秀率与花粉管长度的影响。结果表明:山莓花粉萌发率最高的培养基组合:琼脂1%+蔗糖17%+H_3BO_3 0.03%+CaCl_2 0.001%;山莓花粉萌发优秀率最高的培养基组合:琼脂1%+蔗糖17%+H_3BO_3 0.05%+CaCl_2 0.001%;山莓花粉管长度最长的培养基组合:琼脂1%+蔗糖15%+H_3BO_3 0.03%+CaCl_2 0.001%;蓬藟花粉萌发率与萌发优秀率最高的培养基组合:琼脂1%+蔗糖5%+H_3BO_3 0.01%+CaCl_2 0.000%,此条件下花粉管亦最长。掌叶覆盆子花粉萌发率与萌发优秀率最高的培养基组合:琼脂1%+蔗糖10%+H_3BO_3 0.01%+CaCl_2 0.000%;掌叶覆盆子花粉管长度最长的培养基组合:琼脂1%+蔗糖15%+H_3BO_3 0.01%+CaCl_2 0.000%。     

西南桦花粉离体萌发的适宜条件与萌发特征

应用各种浓度蔗糖、蔗糖 硼酸培养基于系列温度下开展西南桦花粉萌发对比试验,研究了蔗糖、硼酸浓度对西南桦花粉离体萌发的影响,筛选出适合西南桦花粉萌发培养基的适宜组分和适宜培养温度,并应用4个单株的花粉对其萌发特征进行了初步研究.结果表明:蔗糖基本培养基上添加硼酸能够显著促进西南桦花粉萌发;西南桦花粉离体萌发的合适培养基为15%蔗糖 200 mg·kg-1硼酸,适宜培养温度为30℃;在此条件下培养3 h后花粉萌发率基本稳定,培养7 h后花粉管长度也趋于稳定.     

江南油杉花粉离体萌发的适宜条件与萌发特征

以江南油杉(Keteleeria fortunei var. cyclolepis)花粉为研究对象,采用液体培养法,通过单因素试验设计研究不同培养基组分、pH值和温度对花粉萌发的影响。结果表明,江南油杉花粉在无蔗糖、无H_3BO_3及无CaCl_2的培养基中均能萌发,但萌发率较低。添加蔗糖、H_3BO_3和CaCl_2均可显著促进花粉萌发和花粉管生长,但高浓度的蔗糖、H_3BO_3和CaCl_2均会抑制花粉萌发和花粉管生长。pH值和培养温度均对江南油杉花粉的萌发影响显著,培养基最适pH值为6.5,花粉萌发的最适温度为25℃,过高或过低均会抑制花粉萌发。综合萌发率和花粉管长度,江南油杉花粉萌发的最适培养基为250 g/L蔗糖+200 mg/L H_3BO_3+100 mg/L CaCl_2,pH值为6.5,置于25℃光照培养96 h,萌发率为42.4%。     

油松花粉离体萌发培养基及花粉贮藏条件研究

花粉生活力对油松杂交育种至关重要.为筛选油松花粉离体萌发培养基,探讨不同温度贮藏下花粉的生活力,采用正交试验设计,研究不同水平蔗糖、硼酸和pH值对油松花粉离体萌发的影响;测定不同温度贮藏下油松花粉萌发率随时间的动态变化.结果表明:油松新鲜花粉在蔗糖100 g·L-1、硼酸0.10 g·L-1、琼脂8 g·L-1、pH值...     

两种槭属植物花粉生活力测定

以金沙槭(Acer paxii Franch.)和三角枫(Acer buergerianum Miq.)为试验材料,蕾期采粉,并且采用TTC染色法和液体培养基离体萌发法对它们的新鲜花粉,室温条件下(25℃)和4℃冷藏条件下保存的两种花粉进行了生活力测定。结果表明:液体培养基中蔗糖浓度对花粉萌发具有明显影响,三角枫花粉的最佳萌发浓度为10%,而金沙槭花粉的最佳萌发浓度为15%;TTC染色法测定的花粉生活力比液体培养基离体萌发法测定的花粉生活力高;室温条件下(25℃)保存的金沙槭花粉4天后便失去了生活力,三角枫花粉6天后完全失去生活力;4℃低温保存条件下,金沙槭花粉的可贮藏时间较短,约40d后花粉便失去了生活力,而三角枫的花粉贮藏40d后的萌发率为31.37%。     

3种山茶属植物花粉活力测定方法的比较

采用I-IK法、过氧化物酶法和TTC法对张氏红山茶、越南抱茎、南山茶新鲜花粉的活力进行了测定。3种方法测定的结果表明:3种花粉活力都在92.00%以上,南山茶的花粉活力最高,在90.20%~100.00%,越南抱茎茶次之在80.80%~99.40%,张氏红山茶在84.80%~96.00%。3种方法所测花粉活力存在显著差异或极显著差异。I-IK染色法所测花粉活力高于过氧化物酶法和TTC法所测花粉活力,此法染色快,并且染色清晰,可用于山茶花粉活力的快速测定;过氧化物酶法次之,TTC法所测花粉活力最小,这2种方法,染色需时长,而且染色不清晰,不适于快速测定山茶花花粉活力。     

4种植物生长调节剂对板栗离体花粉活力的影响

以萘乙酸、赤霉素、吲哚丁酸和硼酸作为影响板栗花粉活力的调节剂,研究其不同浓度下板栗离体花粉萌发的效果。结果表明:适宜浓度的调节剂对花粉萌发均能起到促进作用,但效果存在差异,其中硼酸较吲哚乙酸和萘乙酸的促进效果更显著,4种调节剂适宜浓度分别为150mg·L~(-1)硼酸、15mg·L~(-1)吲哚丁酸、75mg·L~(-1)赤霉素、15mg·L~(-1)萘乙酸。     

柚木花粉离体萌发试验

柚木(Tectona grandis L.f.)是世界名贵的用材树种,天然分布于印度、缅甸、泰国和老挝[1],具有生长快、用途广、纹理美观和价格昂贵的特点,已在热带、南亚热带地区广为引种,是世界上人工林种植面积最大的4个树种之一,也是单位面积产值最高的一个造林树种[2-3]。我国引种柚木已有170多年的     

培养条件对紫丁香花粉离体萌发的影响

以紫丁香盛花期的新鲜花粉为材料,采用单因素试验,研究了培养基、pH值、培养温度、培养时间对紫丁香花粉离体萌发和花粉管生长的影响。结果表明:花粉萌发和花粉管生长的最适培养基pH值为6.0,其花粉萌发率为32.45%,花粉管长度为0.350mm,最佳培养温度为25℃,最佳培养时间为1.5～2h。     

植物生长调节剂对核桃楸离体花粉萌发的影响

以萘乙酸、赤霉素、吲哚丁酸和硼酸作为调节剂,探索不同质量浓度对离体核桃楸花粉萌发的影响。结果表明:这4种植物生长调节剂对核桃楸花粉萌发均能起到促进作用,但作用效果与浓度相关,适宜浓度分别为:150 mg·L~(-1)硼酸、75 mg·L~(-1)赤霉素、15 mg·L~(-1)萘乙酸、20 mg·L~(-1)吲哚丁酸,其中硼酸的促进效果最佳。     

牛角瓜花粉离体萌发研究

为了探讨牛角瓜花粉离体萌发的最适条件及培养基成分,以2年生牛角瓜新鲜花粉为试材,研究了不同溶液对牛角瓜花粉块壁解离效果的影响情况;还采用离体培养法,研究了不同培养温度和培养时间、不同培养基组分对牛角瓜花粉萌发率和花粉管生长的影响情况。结果显示:以10%的Na OH溶液将牛角瓜花粉块处理10 min的解离效果最好;牛角瓜花粉离体萌发的最适温度为30℃,在此温度条件下培养6 h后其花粉萌发率基本稳定,培养12 h后其花粉管生长最好;蔗糖对牛角瓜花粉萌发率及花粉管长度的影响均较大,硼酸对花粉萌发率及花粉管长度的影响均较小;牛角瓜花粉萌发和花粉管生长的最适培养基为20%蔗糖+0.1%硼酸+5 mg/L氯化钙+15 mg/L 6-BA,在此培养基上并在30℃的温度条件下培养6 h,其花粉萌发率达到94.77%,花粉管长度为11.07 mm。     

金花茶花粉离体萌发及低温处理探究

研究了硼酸及蔗糖浓度、培养时间、含水率、低温对金花茶花粉离体萌发的影响。结果表明,硼酸及蔗糖浓度对花粉萌发均有显著影响,当硼酸浓度0.1g/L和蔗糖浓度100g/L时,花粉萌发率最高;25℃培养24h后花粉充分萌发;花粉含水率为70.39%和52.67%时,低温处理导致花粉活力降低,甚至丧失,不利于花粉低温保存。含水率为39.89%和30.90%时,花粉低温处理后的萌发相对保持率均维持在86%以上;含水率39.89%的花粉出现"冷刺激"现象,低温处理后萌发率回升,新鲜花粉低温保存前进行适当干燥处理有利于萌发。研究结果将为金花茶种苗繁育提供参考。     

山核桃离体花粉活力初步研究

利用FCR方法对不同散粉期和不同贮藏条件下山核桃花粉生活力进行了测定。结果表明:在散粉周期中,花粉生活力变化平均值呈正态分布,散粉盛期花粉具最高生活力。不同贮藏条件对保持花粉生活力具有显著影响,随着贮藏时间的增长,花粉活力逐渐递减,室温贮藏条件下递减最快,30 d内仅有8%左右具有生活力,而在室温干燥条件下,花粉可保持90 d有活性;4℃贮藏条件下,180 d还有9%的花粉具有活性,而在4℃干燥贮藏条件下活力更高(23%);-40℃贮藏条件下,不管干燥与不干燥花粉均会保持较高的活性(48%和81%),完全可以用于来年的辅助授粉。     

香椿花粉离体萌发与花粉生活力研究

[目的]探究香椿花粉最佳离体培养条件,花药大小、含水率与花粉萌发率的关系及花粉生活力随低温贮藏时间的变化的规律。[方法]以3个不同基因型(XC5、XC22、ZJ26)香椿花粉为试验材料,观测不同培养温度(20、22、25、28℃)、培养时间(4、6、12、18、30、42 h)下,花粉离体培养的萌发率,获得香椿花粉最佳培养条件。对香椿的花药含水率、花药长、宽进行测量,分析其与花粉萌发率的关系。基于最佳培养条件,检测香椿花粉-20℃低温贮藏10、25、40 d的萌发情况,分析花粉生活力随低温贮藏天数的变化趋势。[结果]香椿花粉在20℃的萌发率均显著高于其余3个培养温度,花粉萌发率随培养时间的延长而增大,培养30 h后,花粉萌发率均无显著变化。低温贮藏10 d的花粉萌发率与花药长度显著正相关,与花药宽度显著负相关,相关系数分别为0.529 6、-0.739 9。随着低温贮藏时间的延长,香椿花粉萌发率显著降低,含水率高的XC22降幅最大,低温贮藏10、25 d的花粉萌发率分别为89.2%、3.3%。[结论]检测香椿花粉生活力的最佳离体培养条件为20℃培养30 h;香椿花粉萌发率与花药长度、宽度以及含水率可能作为筛选花粉高萌发率的指标;低温贮藏可能对含水率高的香椿花粉生活力影响大。     

银杏花粉离体萌发培养基的优化

为优化银杏花粉萌发培养基,采用离体萌发法,通过单因素试验和正交试验分析培养基中不同营养成分对银杏花粉萌发的影响。结果表明:在单因素试验中,蔗糖、硼酸和氯化钙在适宜质量浓度范围内促进花粉萌发,过高质量浓度反而不同程度地抑制花粉萌发;在正交试验中,蔗糖、硼酸和氯化钙对银杏花粉在培养基上离体萌发的影响表现极显著,适宜质量浓度分别为100 g·L-1、10 mg·L~(-1)、40 mg·L~(-1)。     

普通油茶无性系花粉离体萌发特性

以6个普通油茶无性系花粉为试验材料,采用正交试验研究了不同温度、硼元素用量、蔗糖浓度、琼脂用量对花粉萌发的影响,以揭示普通油茶花粉在离体条件下的萌发特性。结果表明:4个影响花粉萌发率的试验因素中,温度是极显著影响因素,以25 ℃最优;蔗糖浓度也能显著影响多数无性系,以10%最优;硼元素用量和琼脂用量仅对个别无性系有显著影响,分别以100 mg·kg^-1和0.5%最优。结合多重比较,处理T9为试验优选组合;花粉管的生长从开始到停止略呈"慢—快—慢"的抛物线趋势;稍高的钙离子浓度显著抑制花粉萌发,低浓度锌、钼离子对花粉萌发略有促进,高浓度则效应为负。     

赤皮青冈离体花枝培养及花粉活力研究

赤皮青冈是重要的乡土珍贵树种,通过离体花枝培养获取花粉对其良种培育、储备林建设意义重大。以0.5%的蔗糖溶液、多元素营养液和自来水为培养液,在室内培养不同发育阶段的赤皮青冈离体花枝获得的花粉和野外自然散粉收集的花粉进行花粉活力测定。结果表明:用蔗糖溶液培养比野外自然散粉早15天采集的离体花枝,可收集到花粉;用多元素营养液和蔗糖溶液培养比野外自然散粉早10天采集的离体花枝,均可收集到花粉;用蔗糖溶液、多元素营养液和自来水培养比野外自然散粉早5天采集的离体花枝,均可获得花粉。室内培养收集的花粉与野外自然散粉收集的花粉活力无显著差异。室内离体花枝培养获得的花粉较野外自然散粉收集的花粉耐储藏,自然散粉花粉储藏10天萌发率为37.0%,离体花枝收集的花粉储藏10天萌发率为45.3%;两种花粉储藏2周萌发率均为0%。温度25℃、培养基中蔗糖浓度100 g/L和硼酸浓度300 mg/L是赤皮青冈花粉培养的适宜条件。提前采集赤皮青冈待散粉花枝,通过离体培养获得的花粉与自然散粉花粉的萌发率和花粉活力无显著差异,但离体花枝培养获得的花粉较耐贮藏。