不同金银花枝叶发酵产物的抑菌及抗氧化活性研究

该研究分别利用酵母菌、乳酸菌、双歧杆菌及枯草芽孢杆菌发酵金银花枝叶,对比了发酵产物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌的抑菌效果,并测定了发酵产物清除ABTS⁺自由基、DPPH自由基的能力及对FRAP亚铁离子的还原能力。结果表明,4种发酵产物对3种病原菌均表现出一定的抑制作用,乳酸菌发酵产物对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌抑制能力最强,酵母菌发酵产物对枯草芽孢杆菌的抑制能力最强。乳酸菌发酵产物清除DPPH能力最强(IC₅₀0.07 mg/mL);酵母菌发酵产物清除ABTS⁺自由基能力(IC₅₀0.06 mg/mL)及还原亚铁离子能力最强(IC₅₀0.44 mg/mL)。研究结果可为金银花枝叶的综合利用提供一定的理论基础。     

桦褐孔菌发酵产物的抑菌活性

测定了桦褐孔菌(Inonotus obliguus(Pers.:Fr.)Pilát)发酵产物对植物病原菌的抑菌活性.结果表明:桦褐孔菌发酵产物对7种病原菌均有抑制作用;发酵时间为23d的桦褐孔菌发酵产物对落叶松枯梢病(Botryosphaeria laricina)、杨树烂皮病(Cytospora chrysosperma)的抑制率最高;桦褐孔菌发酵产物的主要抑菌活性物质存在于发酵上清液醇提物中;醇沉级别为70％的醇提物中50 g·L-1的多糖对病原菌的抑制率最高,当质量浓度为55g·L-1时能抑制50％以上落叶松枯稍病原菌孢子的萌发.     

鲍氏层孔菌发酵产物抑菌活性的研究

 为研究鲍氏层孔菌发酵产物对植物病原菌的抑菌活性,采用菌丝生长速率法以鲍氏层 孔菌发酵产物的不同溶剂萃取物为研究对象,测定其对7种植物病原菌的抑制作用。将鲍氏层 孔菌的发酵产物进行不同的处理,分级纯化抑菌活性多糖,比较其抑菌活性。结果表明:鲍氏 层孔菌发酵产物对7种病原菌均有抑制作用;鲍氏层孔菌发酵时间为20 d时,发酵产物对杨树 烂皮病菌的抑制率最高;鲍氏层孔菌发酵产物的主要抑菌活性物质存在于发酵上清液醇提物 中;醇沉体积分数为50％醇提物中的多糖对病原菌的抑制率为供试醇沉级别中最高。鲍氏层 孔菌含有抑制病原菌的有效成分,具有成为新型生物农药的潜力。     

核桃叶部内生真菌发酵产物抑菌活性及GC-MS分析

以核桃叶部分离获得的20株内生真菌为研究对象,采用抑制菌丝生长速率法测定发酵产物对8种常见植物病原真菌的抑菌效果,并对活性菌株发酵产物的乙酸乙酯萃取相进行气质联用分析(GC-MS)鉴定主要化学成分,用面积归一化法计算各成分相对含量。结果表明:15株核桃叶部内生真菌的发酵滤液对8种供试病原菌均有一定抑制作用,占内生真菌总数的75.0%。其中黑孢霉属(Nigrospora)Y4菌株对8种病原菌的抑制作用最强,抑制率均大于60%,抑菌谱广泛。Y4菌株对番茄灰霉病菌的抑制作用最大,抑制率达95.95%,其次是苹果果腐病菌(84.81%)。Y4菌株发酵产物乙酸乙酯萃取相Fr4组分经GC-MS分析共鉴定出14种化合物,占出峰物质总量的89.58%。其中哌草丹相对含量最高,达到50.46%,其他物质主要是有机酸类化合物。由此可知,核桃内生真菌具有广泛的抑菌谱,活性菌株Y4发酵产物可望研发出新型微生物源除草剂。     

红景天内生放线菌Hj3发酵条件及其发酵产物抑菌活性初探

【目的】探究红景天内生放线菌——变异链霉菌Hj3(Streptomyces variabilis)的发酵条件、抑菌机制及对采后番茄早疫病的防治效果,为该潜在生防菌的开发利用奠定重要的理论与实践基础。【方法】采用菌丝生长速率法筛选Hj3抑菌物质产生的最佳培养液、接种量,利用正交试验设计探讨培养温度、培养转速、培养液初始p H值等条件,测定Hj3的生长曲线、抑菌物质产生曲线、Hj3抑菌物质对番茄早疫病菌产孢和孢子萌发的影响及对采后番茄早疫病的防治效果。【结果】在4号培养液(乳糖15 g、玉米粉4 g、K_2HPO_4 0.8 g、KCl 0.2 g、CaCO_4 1.6 g、水1 000 m L、p H 7)中接入8%Hj3种子液,28℃150 r/min震荡培养,在第4天时培养液中的活菌数最大,在第5天时Hj3发酵液的抑菌率达到最高;Hj3抑菌物质可明显抑制番茄早疫病菌孢子的产生和萌发,对采后番茄早疫病的防治也有一定效果。【结论】探讨出的发酵条件有利于Hj3抑菌物质的后续研究及应用,进一步明确其抑菌机制为Hj3的实际应用提供了更加充分的理论支持。     

榆耳特征及野外栽培管理技术

榆耳学名(Gleoestereum incarnatum S．1toellma),也称榆蘑、胶韧革菌,为担子菌亚门层菌纲韧革菌科韧革菌属,野生于小叶榆(家榆)和春榆的枯枝、树洞上,常生于温度高、光线较暗的阴坡的枯朽树木上,8～9月产生子实体。菇品味道鲜美、口感柔中脆嫩、营养丰富,对高血压、动脉硬化和赤白痢疾病有治疗作用,是一种食、药兼用真菌。国内外市场销路看好,现已进入商业性栽培。生物转化率100%～150%。生产周期100～120天。     

乳酸菌发酵骨泥后上清液免疫增强作用的研究

本试验通过迟发型变态反应试验(足跖增厚法)、抗体生成细胞的检测(jeme改良玻片法)、小鼠碳廓清试验，观察灌服不同剂量乳酸菌发酵骨泥的上清液后小鼠的反应。结果证明：经乳酸菌发酵鲜骨泥后的上清液可以增强小鼠的迟发型变态反应，增加小鼠的抗体细胞生成数，加强其巨噬细胞吞噬能力。因此，说明此上清液具有增强机体细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫功能的作用。     

榆耳菌丝原生质体制备及再生的研究

对珍稀食药用菌榆耳的原生质体制备与再生的条件进行优化,明确了原生质体制备的最佳条件:采用培养时间为7 d的菌丝,使用0.6 mol/L的甘露醇溶液作为稳渗剂配制的浓度为2%的溶壁酶溶液,在30℃的恒温摇床中70 r/min酶解3 h,原生质体产率最高。用RM4配方,28℃条件下的再生率最高,最高再生率可达1.83%。     

乳链菌肽产生菌的筛选及其发酵产物的抑菌性质研究

根据乳链菌肽编码基因、乳链菌肽抗性基因和蔗糖发酵基因紧密连锁的原理,筛选乳链菌肽产生菌.将新鲜牛奶样品涂布在添加乳链菌肽、蔗糖及溴甲酚紫的选择培养基上,定向筛选乳链菌肽产生菌.对筛选到的乳酸链球菌肽菌株进行了生理生化指标鉴定以及发酵产物的抑菌性质研究.结果表明:该菌株属于乳酸乳球菌乳酸亚种,其发酵产物对多种革兰氏阳性菌有抑制作用,对革兰氏阴性菌、酵母菌和霉菌无抑制作用,并且在低pH值条件下对热稳定,在高盐浓度下抑菌效果稳定.     

鳞柄小奥德蘑发酵产物抑菌活性初步研究

采用抑制菌丝生长速率法、活体组织法及盆栽法对鳞柄小奥德蘑发酵产物的抑菌活性进行了研究。结果表明，鳞柄小奥德蘑发酵产物具有较强的抑菌活性，且抑菌活性成分主要分布于菌丝体提取物中。在供试浓度为0.5 mg/mL（菌丝干重）时，其菌丝体丙酮提取物对苹果腐烂病菌（Cytospora sp.）、烟草赤星病菌（Alternaria alternata （Fries） Keissler）、苹果炭疽病菌（Golletotrichum gloeosporioides （Penz.） Penz.et Sacc.）、玉米小斑病菌（Bipolaris maydis（Nisikado.et Miyake）Shoem.）和番茄灰霉病菌（Botrytis cirerea Pers.et Tris.）等5种病原真菌菌丝生长抑制率均高于80%；在活体组织法测定中，菌丝体丙酮提取物对番茄灰霉病具有较好的防治效果，3 d的治疗效果和保护效果分别为71.2%和76.2%；在盆栽试验中对玉米大斑病菌（Exserohilum turcicum（Pass.）Leonard＆Suggs）和小麦白粉病（Blumeria graminis（DC.）Speer.f.sp.tritici Marchal）的治疗效果和保护效果均在60%以上。     

放线菌19G-317菌株发酵产物抑菌活性初步研究

【目的】明确放线菌19G-317菌株发酵产物对植物病原菌的抑制活性,为该菌株在农业病害防治中的开发应用及后续研究奠定基础。【方法】采用生长速率法、孢子萌发法、活体组织法和盆栽试验,测定放线菌19G-317菌株发酵产物的抑菌效果。【结果】生长速率法试验表明,放线菌19G-317菌株发酵产物对供试22种植物病原菌菌丝生长均有不同程度的抑制作用,发酵液对其中11种植物病原菌的抑制率大于60%,菌丝提取物对其中8种植物病原菌的抑制率大于90%;发酵液和菌丝提取物对油菜菌核病菌菌丝生长的EC50分别为84.30和18.80 mg/L。孢子萌发试验表明,发酵液和菌丝提取物对番茄灰霉病菌孢子的萌发均有较强的抑制作用,在0.5 mg/mL质量浓度下,其抑制率分别为94.26%和96.20%;组织法试验表明,在10 mg/mL质量浓度下,发酵液和菌丝提取物对番茄灰霉病的药效分别为72.17%和76.95%;盆栽试验表明,19G-317菌株发酵液和菌丝提取物对辣椒疫霉病均有一定的保护和治疗作用。【结论】放线菌19G-317菌株抑菌谱较广,对植物病菌的防治有很大的研究开发潜力。     

榆耳低聚肽的制备及抗氧化活性研究

以榆耳为原料,经提取、纯化、酶解,获得2.0~10.6μm超滤膜截留范围的低聚肽,通过邻苯三酚法测其抗氧化活性,对氨基苯磺酸法测定对亚硝酸盐的清除率。结果表明,榆耳蛋白及低聚肽对超氧自由基和亚硝酸盐都有较强清除效果,但缓冲溶液提取的榆耳蛋白最强,而对于2种提取方法得到的榆耳蛋白水解的低聚肽的对超氧自由基和亚硝酸盐都有较强清除效果比榆耳蛋白的清除效果要差很多,其中缓冲溶液提取的低聚肽清除效果最低。说明榆耳蛋白具有很强的抗氧化活性,是天然的抗氧化剂,在食品领域及化妆品产业均有很高的开发利用价值。     

榆耳胶原蛋白分离纯化及食品功能特性研究

通过CO2超临界萃取对榆耳进行脱脂处理后,用酸法、碱法、热水法三种常用方法提取榆耳胶原蛋白,经减压浓缩后,CaCl2脱糖,NH4Cl沉淀,盐溶,除杂,冻干等步骤获得榆耳胶原蛋白。通过测定其乳化能力指数、乳化稳定指数、吸水性、保水性、吸油性等研究其食品功能特性。结果标明酸法、碱法、热水法胶原蛋白提取率分别为59.6ug/mL、124.8ug/mL、87.0ug/mL;榆耳乳化能力指数EAI为0.041,乳化稳定指数ESI为24.4,吸水能力为0.224g/g,吸油能力为2.83mL/g。     

葡萄糖酸钠发酵中底物-产物作用对氧传递的影响及发酵过程优化

[目的]探讨葡萄糖酸钠发酵中底物-产物作用对氧传递的影响,以期为黑曲霉发酵生产葡萄糖酸钠的生物工艺优化提供理论依据。[方法]通过小型反应器试验,分别确定了葡萄糖酸钠和葡萄糖两种物质对溶液体积传氧系数的影响,进而又考察了两种物质交互作用的影响,在该基础上对发酵工艺进行改进,将原先的代放工艺改成葡萄糖流加工艺,通过流加葡萄糖维持较低的糖浓度,利用OUR为参照指标,在维持相同OUR水平下,比较了两种发酵工艺。[结果]研究中发现葡萄糖酸钠浓度的升高会显著降低kLa,而葡萄糖对其影响则较小;在葡萄糖酸钠溶液中逐渐升高葡萄糖的浓度,会造成kLa的下降,低浓度的葡萄糖有利于体系的氧传递。葡萄糖的消耗及葡萄糖酸钠的积累对体积氧传质速率有明显的影响,在实现相同菌体的氧气摄取速率情况下,优化后新工艺所需的搅伴转速和通气流量等设备供氧条件明显优于原工艺,新工艺在降低发酵能耗的同时,还避免了原工艺中代放操作造成的未利用底物的浪费。[结论]该研究探明了葡萄糖酸钠发酵中底物-产物作用对氧传递的影响,优化了黑曲霉发酵生产葡萄糖酸钠的生物工艺。     

瘤胃体外发酵产物中的甲烷和有机酸含量的快速测定

建立了毛细管气相色谱快速测定瘤胃发酵产物中甲烷和乙、丙、丁酸含量的方法.用HP-INNOWAX(19091N-133)毛细管柱,以高纯氮作为载气,用氢火焰离子化检测器对甲烷和乙、丙、丁酸含量进行测定.通过对总压力、总流量、柱流量、柱温、气化室和检测室温度等检测条件的对比,建立测定甲烷的理想检测条件为:总压力130 kPa、总流量30.2 mL·min,柱流量1.7 mL·min-1,线速度39.8 cm·s-1,柱温80℃,气化室温度100℃,检测室温度120℃;测定乙、丙、丁酸的理想检测条件为:总压力90 kPa、总流量37.2 mL·min-1,柱流量0.67 mL·min-1,线速度23.4 cm·s-1,柱温180℃,气化室温度200℃,检测室温度220℃.     

艾蒿挥发油的提取及体外抑菌活性

确定艾蒿挥发油的CO2超临界流体提取工艺和挥发油的抑菌效果。采用CO2超临界流体提取技术、滤纸片扩散法测定抑菌效果。结果表明CO2超临界萃取的优化工艺为：使用新鲜材料不加夹带剂,压力在35Mpa、温度在45℃、提取时间为90min。艾蒿挥发油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抑制效果,且抑菌效果随浓度的提高而加强。说明优化的CO2超临界流体技术提取的艾蒿挥发油具有抑菌效果。     

石榴皮鞣质的提取及体外抑菌活性

中药石榴皮具有抗菌、抗病毒和抗肿瘤的作用,其抗菌作用的主要活性成分是鞣质.本研究采用水煎煮法提取石榴皮中的鞣质,通过正交试验确定其最佳提取工艺条件为:抽提比1:40、温度90℃、时间40 min;采用络合滴定法测得提取的石榴皮鞣质含量,为17.3%.对石榴皮鞣质提取物的抗菌活性测定结果表明,该鞣质提取物对金黄色葡萄球菌(革兰氏阳性菌)有较强的抑制作用,对革兰氏阴性菌(大肠杆菌、绿脓杆菌)有一定的抑制效果,而对霉菌(白色念珠菌、黑曲霉、青霉)抑制作用不明显.     

白屈菜生物碱的提取及体外抑菌试验

采用离子交换树脂法提取白届菜生物碱,得到其相对含量为51．61％,并对提取的白屈菜生物碱进行了体外抑菌试验,结果表明：该试验提取白屈菜生物碱对链球菌的抗菌活性较强,其次是大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,对巴氏杆菌和沙门氏菌抑制作用较弱。     

壳聚糖的体外抑菌试验

本试验对自制壳聚糖进行了抑菌试验。将壳聚糖配成2％的醋酸溶液，然后用无菌蒸馏水稀释至1％、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%，同时以相应浓度的醋酸溶液作为对照，用琼脂扩散纸片法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌做抑菌试验。结果表明，壳聚糖对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均具有抑制作用，不同浓度的壳聚糖的抑制作用不同。壳聚糖浓度为0.0625%时即可起到一定的抑菌作用。